היעילות הטיפולית של Zadi-5 בטיפול בדיכאון יכולה להיקבע באמצעות מבחנים התנהגותיים, בעוד פרמקולוגיה רשת יכולה לחזות את המנגנונים הפוטנציאליים העומדים בבסיס עוצמתו. פרמקולוגיה רשתית יכולה לתמוך בחקר תרופות מסורתיות המציגות מנגנוני פעולה מורכבים ולמזער עוד יותר את הזמן וההוצאות הנדרשים לחקירה. מבחנים כגון מבחן שדה פתוח, מבחן צריכת סוכרוז ומבוך המים מוריס הם תקן הזהב להערכת תיאבון, רמות מוטיבציה, יכולת למידה וזיכרון, במודלים של בעלי חיים של הפרעות נוירולוגיות.
מבחנים אלה הם שיטות פשוטות, אובייקטיביות וסבירות להערכה. ביסוס מודל של בעלי חיים הוא חיוני להבנת המנגנונים וההשפעות הפתולוגיים של תרופה חדשה במחקר על הפרעות דיכאון. כדי לבסס מודל דיכאון טוב, החוקרים חייבים לרצף ולהתאים כראוי את עוצמות הגירויים.
כדי להתחיל, להחיל את גירויי דיכאון שנבחרו, בשילוב עם בידוד, במשך 28 ימים על כל החולדות, למעט הביקורת, ולגדל את החולדות בכלובים בודדים. כדי לבצע את בדיקת השדה הפתוח, חלק קופסה שחורה לתשעה אזורים מרובעים בעלי שטח שווה. צייד את התיבה במערכת ניתוח מעקב וידאו.
יום לאחר ההיתקלות האחרונה, הניחו את החולדה בריבוע המרכזי ותיעדו את פעילותה האופקית והאנכית במשך שלוש דקות. לאחר מכן ניקוד את מספר הריבועים שנחצה עם כל ההפסקה כפעילות אופקית, וציון עמידה וטיפוח כפעילות אנכית. לאחר כל בדיקה, נקו את הקופסה עם 75% אלכוהול כדי להסיר את ריח החולדה לבדיקות הבאות.
לאחר מכן, בצע את בדיקת צריכת הסוכרוז על ידי שקילת הבקבוקים המתאימים לפני ואחרי הצריכה. ולחשב את שיעורי העדפת סוכרוז של 60 דקות בימים אפס, שבע, 14, 21 ו-28 באמצעות משוואה זו. כדי לבצע את מבחן מבוך המים של מוריס, חלקו את הבריכה לארבעה רבעים.
סדרו את הרבעים מאחד עד ארבעה, והניחו את הרציף הנסתר ברביע השלישי, סנטימטר אחד מתחת לפני המים. מוסיפים חלב לבריכה לרמת אטימות מסוימת. לאחר מכן הכניסו את נושא החולדה למבוך ברבעים שונים כדי לחפש את הפלטפורמה במשך 120 שניות.
ותעד את זמן ההשהיה באמצעות מערכת ניתוח שבילי הווידאו Morris Water Maze. הניחו את נושא החולדה בתנוחה קבועה בבריכה. אם הנושא אינו יכול למצוא את הפלטפורמה המוסתרת תוך 120 שניות, רשום את ההשהיה כ- 120 שניות.
לאחר מכן, עקרו את הרציף, הניחו את החולדה במים, ותיעדו את מספר מעברי האזור במשך 120 שניות. עיין בדף הפרמקולוגיה של מערכת הרפואה הסינית המסורתית והזן זרעי זרע Myristiae, שורשי Al-Glandia-radiks ו- piperis longi fructus בסעיף שמות צמחים כדי לקבל את שמות הכימיקלים. הגדר את המדד הפרמקוקינטי של זמינות ביולוגית אוראלית, או OB, להיות גדול מ -30% ואת המדד דמוי התרופה להיות גדול מ -0.18.
חפש את המרכיבים הפעילים בפרמקופיאה של הרפואה הסינית כדי לזהות את השמות הכימיים של כל רכיב. לאחר מכן, חפש את השמות הכימיים המזוהים ב- Pub Chem כדי למצוא את החיוכים האיזומריים, או הדיו. זהה את חלבוני המטרה של המרכיבים הפעילים באמצעות SEA, Batman וחיזוי מטרה שוויצרי עם חיוכים איזומריים או דיו, ומצא את החלבונים החופפים.
העתק את הנתונים לקובץ Excel. לאחר מכן, חפש וזהה את יעדי החלבון הפוטנציאליים לדיכאון באמצעות מילות המפתח דיכאון והפרעת דיכאון ב- GeneCards, DisGeNET ו- DrugBank. העתק את הנתונים לקובץ Excel.
עיין בדיאגרמת חיתוך קבוצות (Venn) והעלה את יעדי הדיכאון ברשימה הראשונה. לאחר מכן העלה את היעדים עבור המרכיבים הפעילים של Zadi-5 ברשימה שתיים ושלח. השג את דיאגרמת חיתוך קבוצות (Venn) וסנן את מועמדי היעד החופפים.
בניית גיליון אלקטרוני, הנקרא רשת. גם לבנות גיליון אלקטרוני, שנקרא סוג. לייצא את היריעה Cytoscape כדי לבנות את הרשת, Zadi-5 עשבי תיבול מרכיבים מטרות המחלה.
הגדר את היעדים הנפוצים במסד הנתונים של המחרוזת כדי לנתח את האינטראקציות שלהם. הגדר את סוג החלבון כהומוספיאנס. הגדר את ערך סף האינטראקציה ל- 0.9 כדי לבחור רק את הסוגים שאומתו בניסוי, ואל תציג את צמתי האי הבודד.
פתח את הכלי DAVID והדבק את 86 המטרות נוגדות הדיכאון הפוטנציאליות של Zadi-5 לתוך סוגר ניתוח ההתחלה כדי ללמוד את מסלולי האיתות הקשורים. הורד את מסמך מסלול החבית. בחר את הגנים במסלול PI3k-AKT מניתוח ההעשרה והדבק אותם בגיליון האלקטרוני כדי לבנות סוג ומסמך רשת.
יצא את סוג מסמך הרשת ל-Cytoscape כדי ליצור את PI3K-AKT החזותי של מטרות מורכבות לנתיבי נתיבים. קבוצת בעלי החיים שנבדקה לא הראתה הבדלים משמעותיים לפני לחץ קל כרוני בלתי צפוי או גירוי CUMS. לאחר הקמת מודל CUMS, הציונים האנכיים והאופקיים של הקבוצה היו נמוכים יותר מהביקורת.
בהשוואה לקבוצת המודל, הציונים האנכיים והאופקיים של קבוצת הבקרה החיובית וקבוצת Zadi-5 היו גבוהים משמעותית. ביום האפס, לקבוצות שנבדקו לא היה הבדל משמעותי בצריכת הסוכרוז. קבוצות הביקורת Zadi-5 והחיוביות היו גבוהות יותר מקבוצת המודל ביום ה-28.
במבוך המים מוריס, ההשהיה של קבוצת המודל למצוא את הפלטפורמה הייתה גבוהה משמעותית בהשוואה לבקרה. החביון של קבוצת הבקרה החיובית וקבוצת Zadi-5 היה נמוך יותר מאשר בקבוצת המודל. באשר לספירת מעברי האזור, קבוצת המודל הראתה פחות מעברים מאשר קבוצת הביקורת.
קבוצת הבקרה החיובית וקבוצת Zadi-5 הראו יותר מעברים מאשר קבוצת המודל. ניתוח דיאגרמת Venn גילה 86 מטרות חופפות כמטרות קריטיות הקשורות לדיכאון של Zadi-5 מתוך 1000 יעדי חלבון הקשורים לדיכאון. בהתבסס על ממצאים אלה, נבנו מרכיבי צמחי מרפא Zadi-5, יעדי מחלה, וניתוח רשת אינטראקציה חלבון-חלבון של מועמדי היעד.
על פי ניתוח מסלול KEG, מסלול האיתות PI3K-AKT דורג במקום השביעי. זה היה קשור למסלולי איתות רבים. בהתאם לכך, מסלול PI3K-AKT נחשב חשוב יחסית למסלולי ההעשרה האחרים.
בעת ניסיון הליך זה, חשוב להימנע מלחזור על אותו סוג של גירויים במשך ימים רצופים. בעקבות ניתוח מרכיבי Zadi-5 במאגרי המידע המקוונים, ניתן להבטיח את איכות האימות על ידי ספקטרומטריית מסה של כרומטוגרפיה נוזלית וספקטרוסקופיית תהודה מגנטית גרעינית.
