מחקר זה נתמך על ידי מענק NIHM MH091816 R01 ו R21 MH084043 ל TDG.

1. חומרים 1. השעיה Box המבחן זנב ההשעיה (TST) כרוכה עכברים השעיית מעל פני הקרקע על ידי הזנבות שלהם. ברמה הבסיסית ביותר, ההליך רק דורש בר השעיה או מדף מדף, ועל הקלטת. עם זאת, הניסוי צריך לשקול את השימוש רקע המספק ניגודיות אופטימלית. בנוסף, זה נבון לנקוט צעדים כדי למנוע עכברים מצפייה בבעלי חיים אחרים, כי נבדקות. במעבדה שלנו, אנו משתמשים מיוצרים במיוחד ההשעיה זנב תיבות (ארבע שעות ביום, בולטימור MD), עשוי פלסטיק עם מידות (55 גובה X 60 רוחב X עומק 11.5 ס&quot;מ). כדי למנוע חיות מהתבוננות או אינטראקציה אחד את השני, כל עכבר הוא מושעה בתוך תא משלו שלושה קירות מלבני שלה (55 גובה X 15 רוחב X עומק 11.5 ס&quot;מ). העכבר הוא מושעה במרכז תא זה ואת רוחב ועומק הם בגודל מספיק, כך העכבר לא יכול לעשות שיתוף<html> ntact עם הקירות. בהגדרה זו, את המרחק המשוער בין האף של העכבר על הרצפה המנגנון הוא 20-25 ס&quot;מ. ישנם ארבעה תאים זהים כגון במנגנון שמאפשר לנו לבדוק ארבעה עכברים בכל פעם. ההשעיה אלומיניום בר (1 ס&quot;מ. X 1 ס&quot;מ גובה. רוחב x 60 ס&quot;מ. אורך), המשמש להשעות את הזנב של העכבר כל, ממוקם בחלק העליון של התיבה. מידות שבו אנו משתמשים במעבדה שלנו יש להתייחס כהערה כללית. לדוגמה, בגודל של תאים בודדים של תיבת הזנב ההשעיה ניתן להגדיל אם זן גדול עכבר outbred (למשל CD-1) נמצא בשימוש. בחלק התחתון של כל תא שאנחנו במקום מגש אלומיניום להסרה שאוסף צואה או שתן של בעלי החיים. אנו משתמשים קופסת אפור כהה לבעלי חיים לבקנים וקופסת שמנת צבעוניים עבור העכברים של צבעים מעיל אחרים. הסדר זה נותן לנו טוב יותר לעומת הניקוד התנהגותית ולכן אמין יותר של הבדיקה. 2. סרט = &quot;Jove_content&quot;&gt; Tape צריך לדבוק היטב הן את הזנב של העכבר בשורת ההשעיה, ולהיות חזק מספיק כדי לשאת את משקל העכבר נבדק (למשל מערכות תיוג TimeMed, Inc, בר רידג&#39; IL, רוחב 1.9 ס&quot;מ). עם זאת, הסרט לא אמור להיות דביק מדי שכן בסוף הפגישה הוא יוסר מן הזנב. אנחנו חותכים 17 ס&quot;מ שברים של קלטת במקום 2 ס&quot;מ מקצה אחד סימן. חלק זה 2 ס&quot;מ שימש מצרף את הקלטת הזנב, בעוד שאר 15 ס&quot;מ שימש ההשעיה של העכבר. 3. שעון עצר 4. מכשיר הקלטת וידאו מצלמת וידאו חצובה (או מבנה תמיכה אחרים) יש צורך. מאז בדיקה זו בדרך כלל בעלי חיים רבים נבדק באותו הזמן, הבקיע חיים יהיה קשה ולא מומלץ. מצלמת וידאו צריך להקליט בהייGH ברזולוציה מספיק כדי לעבד תמונה איכותי אשר ישמש מאוחר יותר הבקיע התנהגותיות. תמיד לוודא שיש מספיק זיכרון הקלטה של ​​המצלמה לפני תחילת הבדיקה. אנו משתמשים במצלמת וידאו דיגיטלית אשר רשומות ללא שימוש במדיה פיזית (כלומר קלטת וידאו), המאפשר העברת פשוטה של ​​קטעי וידאו. 5. מחולל רעש לבן מחולל רעש צריך מסכה צלילים סביבתיים לסירוגין. השימוש מחולל רעש מומלץ במיוחד בסביבות מעבדה שבה רעשים פתאומיים ניתן לשמוע כי היה פוטנציאל לזעזע עכברים. בחדר הניסוי שלנו על רמת רעש הסביבה (ללא מחולל רעש לבן מופעל) הוא סביב 60 דציבל. רמת הצליל הכולל עם מחולל רעש לבן מופעל במקום שבו מתנהל TST היא 70-72 דציבל. עם זאת, יש לציין כי נתונים אלה ניתנים כדוגמה בלבד, כל מעבדה צריך לבחור את<html> רמות רעש זכות על פי הסביבה הייחודית שלהם ואת הנסיבות. 6. ניקוי אספקה תיבת ההשעיה יש לנגב ביסודיות עם פתרון העיקור (למשל MB-10, חדוד Laboratories Inc, Wilmington, DE, או דומה) לאחר כל מפגש. 7. Climbstoppers (אופציונלי: תלוי זן בשימוש) עכברים של כמה רקעים, כגון C57BL / 6, עשויה לטפס הזנבות שלהם במהלך הבדיקה 1. נקה גלילים חלולים (4 ס&quot;מ אורך, 1.6 ס&quot;מ מחוץ בקוטר 1.3 ס&quot;מ בתוך קוטר, 1.5 גרם), כי הם לחתוך לאורך four ס&quot;מ (על ידי FourHourDay Inc, בולטימור MD) מתוך צינורות פוליקרבונט (# 8585K41, מקמאסטר-קאר, Santa Fe Springs , CA) ממוקמים סביב זנבות של עכברים כדי למנוע זנב כזה טיפוס התנהגות 2,3. התקנים אלה יכולים להתבצע במעבדה עם כל הכלים והחומרים משותף. 2. נוהלי ההתנהגות &gt; עיצוב ניסיוני הכולל צריך לשקף מאזנת כראוי בין משתנים ספציפיים הניסוי. לדוגמה, בניסויים שלנו אנחנו מנסים לייצג כל קבוצה שווה כל פגישה TST (כלומר, אם יש ארבע קבוצות הטיפול, כל אחד יהיה מיוצג בכל פגישה). בנוסף, עמדות של עכברים הם מסובבים בצורה כזאת כי עכברים מכל קבוצת טיפול ממוקמים בעמדה שונה בכל פגישה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את המצלמה במצב. המצלמה צריכה להיות קרוב ככל האפשר על מנת לקבל את הרזולוציה הגבוהה ביותר של בעלי החיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שברי Tape אשר ישמשו במהלך הפגישה יש לחתוך, מסומן, והכינה עבור הפגישה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל את מחולל רעש לבן, אם בשימוש, לפני העכברים הם הציגו לחדר הבדיקה. רמת רעש לבן צריך רק להיות מספיק כדי להסוות רעשים חיצוניים. הימנע נפח גבוה ולוודא את אותה רמת רעש לבן משמשת כל בעלי החיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הביאו אתimals לחדר הבדיקה. אם החדר שבו החיות לשכון וחדר בדיקות הם סמוכים זה לזה עם תנאי הסביבה דומים, אין תקופת הסתגלות עשוי להיות נחוץ. אחרת, במקום החיות בחדר הבדיקה לתקופה של הסתגלות (בדרך כלל לפחות שעה אחת). שימו לב כי בעלי חיים אחרים ממוקמים באותו חדר יכולים לחוש אותות הריח ואת קולי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם זן ידוע לטפס על זנבותיהם, כגון C57BL6 / J, נמצא בשימוש Climbstoppers מקום סביב זנבות לפני החלת את הקלטת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ציית את הקלטת זנבות של עכברים. השתמש סוף מסומן של הקלטת ולוודא הקלטת מקלות על הזנב לאחור על עצמה. הקלטת צריך להיות מיושם עד הסוף של הזנב עם 2-3 מילימטרים של הזנב שנותר מחוץ קלטת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר כל קטע של סרט מחובר זנב עכבר מקל את החלק האמצעי של הסרט אל הקירות הפנימיים של הכלוב. זה יעזור למנוע להסתבך חתיכות סרט זה לזה. שים לב, גonfinement באופן זה עלול לגרום ללחץ וזה חשוב כדי להשלים את התהליך של יישום הקלטת כל חיה בהקדם האפשרי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר כל סרט מוחל, להתחיל את ההקלטה ולזהות את הפגישה לפני העכברים מושעים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשעות את בעלי החיים על ידי הצבת את הקצה החופשי של הקלטת בשורת ההשעיה או מדף בצו זה מתאזן בין קבוצות הטיפול. עכברים להשעות באופן שאינו מסתיר את תצוגת המצלמה כי הפגישה TST כולו יהיה כבש שיבוש המצלמה תוביל חוסר היכולת להעריך התנהגויות בתקופה זו. בדוק כי כל הקצוות קלטת תלויות במקביל לבר השעיה או מדף באורך דומה של רפיון עבור כל עכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בסוף הפגישה (שהוא בדרך כלל שש דקות), להחזיר את בעלי החיים שלהם homecage ובזהירות להסיר את הסרט מן הזנב כל על ידי משיכתו בעדינות מעל. אין להעתיק את הקלטת מזנב מאחר שהדבר עלול לגרום לכאב אל מיקרופוןה </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר שחזר העכברים לחדר המושבה שלהם לבטל את boli שתן צואה ומן מגשי איסוף לנגב את המנגנון עם פתרון חיטוי. </li></ol> 3. ניתוח התנהגות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באופן כללי, TST היא מתחילתו ועד סופו שש דקות אורך. בניגוד ההליך נעשה שימוש נרחב אחר יעילות נגד דיכאון, הבדיקה נאלץ לשחות, הפגישה כולה הבקיע. זאת בשל הכללית נמצא כי עכברים נוטים להפגין חוסר תנועה מוקדם יותר TST. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במעבדה שלנו, אנו להעלות את קבצי וידאו ישירות מהמצלמה למחשב שבו מתבצע הניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במהלך ניתוח התנהגות בזמן כי כל עכבר מבלה כמו סלולרי נמדד. אמנם זה אפשרי למדוד את הזמן תנועה ישירות, מצאנו את זה יותר קל לזהות ולמדוד תנועות פעיל ולא חוסר תנועות כאלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ההיבט החשוב ביותר של ניתוח התנהגותי TST היא זיהוי עקבי של התנועהזה כי הם נרשמו ניידות בתום לב. עכברים, במיוחד בתחילת הפגישה, התנהגויות להתבטא בגלוי כי הם לברוח בנושא. אלה כוללים מנסה להגיע קירות של המנגנון ואת בר השעיה, רעד חזק של הגוף, התנועה של הגפיים דומה פועל. תנועות אלו מהוות בבירור ניידות. אלו התנהגויות אז לשכוך ולהפוך מעודן. ב תנועות מעבדה קטנה שלנו מוגבלים הרגליים הקדמיות אך ללא מעורבות של הרגליים האחוריות לא ייספרו ניידות. בנוסף, תנודות המטוטלת כמו נדנדות, כי הן בשל המומנטום שנצבר במהלך התקפי ניידות מוקדם גם לא ייספרו ניידות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במעבדה שלנו אנו משתמשים בתוכנה על המסך שעון עצר למדידת זמן (שעון עצר Xnote, dnSoft קבוצת המחקר). שני סטופרים נפרד משמשים על המסך. סטופר first ספירות למטה 360 שניות והתראות הצופה כאשר תקופת ניתוח התנהגותי מסתיים. השני stopwatch מבוקר על ידי הצופה אמצעים הזמן המושקע ניידים. תוכנות מסוימות סטופר יש את היכולת להקצות מקשים כדי להתחיל ולהפסיק פונקציות, כך על המסך, המקלדת יכולה לשלוט בשעון העצר. במקום מקלדת רגילה, אנו משתמשים התקן קלט הידוע בכינויו &quot;Gamepad&quot; לשלוט סטופרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם יש יותר מאחד העכבר נבדק להציג על המסך זה רעיון טוב כדי לכסות את חיים אחרים, כך התנועות שלהם לא להסיח את דעתו של הצופה. ניתן להשיג זאת באמצעות חלון נוסף בתוכנית או פיזית על ידי כיסוי עכברים אחרים על המסך עם נייר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ייתכנו כמה הטיה המתרחשים אם הסכום הכולל של הזמן שחלף ניידות עבור העכבר מסוים גלוי לפני השלמת הדיון ניתוח. אם על המסך שעון עצר משמש, אנו ממליצים לכסות את כל אבל עשרוניות אלפית שנייה של שעון העצר. על ידי כיסוי סטופר הצופה יודע אם הוא סטופראו לבטל בכל נקודה אבל לא יודע את סך כל הזמן שחלף, ולכן לא יכול להיות מושפע הטיה כלשהי. בגישה זו את הצופה, תוך עיוור מטלות קבוצה של בעלי החיים, לא יהיה לך מושג כללי על רמת הניידות כל חיה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מבחן אמינות interobserver צריכה להתנהל עבור כל משקיף חדש לפני תחילת לאסוף נתונים מבעלי חיים מבחן. במעבדה שלנו כל משקיף החדש הראשון שעונים משקיף מנוסה בזמן שהוא או היא מניה. לאחר משקיפים חדשים לרכוש את אמונו מספיק כדי לבדל את הניידות של חוסר תנועה, אז הם ציון בזמן אמת עם הצופה חווה צופים להצביע טעויות. לאחר שלב זה מסתיים בהצלחה, המשקיפים החדש יהיה לנתח סדרה ספציפית של קטעי וידאו TST לנו לשמור במעבדה שלנו למטרות אימונים. רק לאחר רמה גבוהה של התאמה interobserver מתקבל עם הצופה חווה אינו חוקר לנתח קטעי וידאו TST מ בפועלניסויים. אנחנו בארכיון נתונים אלה מנתח הכשרה מהווה תקן פנימי במעבדה. ראינו הבדלים בין זני באופן שבו הם מביעים ניידות (ו תנועה) התנהגויות אומר שהגיע הזמן תנועה בין המינים. כאשר מודל חדש זן, מין, או מהונדסים גנטית העכבר נבדק במעבדה יש ​​צורך שוב לבצע סוג זה של ניתוח אמינות. </li></ol> 4. נציג תוצאות השתמשנו TST להעריך דיכאון כמו התגובות טיפול ליתיום עכבר זנים שונים (איור 1) 3. פרטים ניסויית של ניסוי זה מתפרסמים יכול et al. 2011 3. <img src="/files/ftp_upload/3769/3769fig1.jpg" alt="איור 1" /> באיור 1. חוסר תנועה בתוך זמן לבדוק את הזנב השעיה לאחר מתן ליתיום כרונית חמישה זנים עכבר מולדת. עכברים היו קבוצת ביתד, ארבעה עכברים לכל כלוב. עכברים בקבוצת הטיפול שקיבלו ליתיום ליתיום האוכל המכיל 4 גרם / ק&quot;ג LiCl במשך שלושה שבועות. חיות בקרת קיבלו מזון זהה ללא כלוריד ליתיום. **: P &lt;0.01, ***: p &lt;0.001 לציין משמעותי, מזווג מבחן t. הנתונים מבוטאים כממוצע ± SEM. n :10-12 בעלי חיים לכל קבוצה עבור כל זן. (דמות לשכפל מ 3). בדוגמה זו, השפעה משמעותית של טיפול כרוני נמסר ליתיום במזון הוא ציין רק זנים C57BL/6J ו DBA/2J. בשלושת הזנים האחרים, ירידה לא משמעותית מבחינה סטטיסטית נצפתה תנועה בזמן. נתונים אלו מעידים כי תגובה דיכאון כמו ליתיום לטיפול כרוני הוא זן תלויים כמו גם נצפתה עם תרופות אחרות נגד דיכאון 4-8.

<ol>
	<li>Mayorga, A. J., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Limitations+on+the+use+of+the+C57BL/6+mouse+in+the+tail+suspension+test.">Limitations on the use of the C57BL/6 mouse in the tail suspension test.</a> Psychopharmacology (Berl). 155, 110-112 (2001).</li><li>Dao, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mood+Disorder+Susceptibility+Gene+CACNA1C+Modifies+Mood-Related+Behaviors+in+Mice+and+Interacts+with+Sex+to+Influence+Behavior+in+Mice+and+Diagnosis+in+Humans.">Mood Disorder Susceptibility Gene CACNA1C Modifies Mood-Related Behaviors in Mice and Interacts with Sex to Influence Behavior in Mice and Diagnosis in Humans.</a> Biological Psychiatry. 68, 801-810 (2010).</li><li>Can, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antidepressant-like+responses+to+lithium+in+genetically+diverse+mouse+strains.">Antidepressant-like responses to lithium in genetically diverse mouse strains.</a> Genes, Brain and Behavior. 10, 434-443 (2011).</li><li>Bai, F., Li, X., Clay, M., Lindstrom, T., Skolnick, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intra-+and+interstrain+differences+in+models+of+"behavioral+despair".">Intra- and interstrain differences in models of "behavioral despair".</a> Pharmacol. Biochem. Behav. 70, 187-192 (2001).</li><li>Cervo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genotype-dependent+activity+of+tryptophan+hydroxylase-2+determines+the+response+to+citalopram+in+a+mouse+model+of+depression.">Genotype-dependent activity of tryptophan hydroxylase-2 determines the response to citalopram in a mouse model of depression.</a> J. Neurosci. 25, 8165-8172 (2005).</li><li>David, D. J., Renard, C. E., Jolliet, P., Hascoet, M., Bourin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antidepressant-like+effects+in+various+mice+strains+in+the+forced+swimming+test.">Antidepressant-like effects in various mice strains in the forced swimming test.</a> Psychopharmacology (Berl). 166, 373-382 (2003).</li><li>Dulawa, S. C., Holick, K. A., Gundersen, B., Hen, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+chronic+fluoxetine+in+animal+models+of+anxiety+and+depression.">Effects of chronic fluoxetine in animal models of anxiety and depression.</a> Neuropsychopharmacology. 29, 1321-1330 (2004).</li><li>Lucki, I., Dalvi, A., Mayorga, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensitivity+to+the+effects+of+pharmacologically+selective+antidepressants+in+different+strains+of+mice.">Sensitivity to the effects of pharmacologically selective antidepressants in different strains of mice.</a> Psychopharmacology (Berl). 155, 315-322 (2001).</li><li>Steru, L., Chermat, R., Thierry, B., Simon, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tail+suspension+test:+a+new+method+for+screening+antidepressants+in+mice.">The tail suspension test: a new method for screening antidepressants in mice.</a> Psychopharmacology (Berl). 85, 367-370 (1985).</li><li>Can, A., Dao, D. T., Arad, M., Terrillion, C. E., Piantadosi, S. C., Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Mouse+Forced+Swim+Test.">The Mouse Forced Swim Test.</a> J. Vis. Exp. 58, 3791-3638 (2012).</li><li>Porsolt, R. D., Bertin, A., Jalfre, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+despair+in+mice:+a+primary+screening+test+for+antidepressants.">Behavioral despair in mice: a primary screening test for antidepressants.</a> Arch. Int. Pharmacodyn. Ther. 229, 327-336 (1977).</li><li>Porsolt, R. D., Anton, G., Blavet, N., Jalfre, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioural+despair+in+rats:+a+new+model+sensitive+to+antidepressant+treatments.">Behavioural despair in rats: a new model sensitive to antidepressant treatments.</a> Eur. J. Pharmacol. 47, 379-391 (1978).</li><li>Crowley, J. J., Blendy, J. A., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strain-dependent+antidepressant-like+effects+of+citalopram+in+the+mouse+tail+suspension+test.">Strain-dependent antidepressant-like effects of citalopram in the mouse tail suspension test.</a> Psychopharmacology (Berl). 183, 257-264 (2005).</li><li>Karolewicz, B., Paul, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Group+housing+of+mice+increases+immobility+and+antidepressant+sensitivity+in+the+forced+swim+and+tail+suspension+tests.">Group housing of mice increases immobility and antidepressant sensitivity in the forced swim and tail suspension tests.</a> European Journal of Pharmacology. 415, 197-201 (2001).</li><li>Lad, H. V., Liu, L., Paya-Cano, J. L., Fernandes, C., Schalkwyk, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+traits+for+the+tail+suspension+test:+automation,+optimization,+and+BXD+RI+mapping.">Quantitative traits for the tail suspension test: automation, optimization, and BXD RI mapping.</a> Mammalian. Genome. 18, 482-491 (2007).</li><li>Liu, X., Gershenfeld, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+differences+in+the+tail-suspension+test+and+its+relationship+to+imipramine+response+among+11+inbred+strains+of+mice.">Genetic differences in the tail-suspension test and its relationship to imipramine response among 11 inbred strains of mice.</a> Biol. Psychiatry. 49, 575-581 (2001).</li><li>Ripoll, N., David, D. J., Dailly, E., Hascoet, M., Bourin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antidepressant-like+effects+in+various+mice+strains+in+the+tail+suspension+test..">Antidepressant-like effects in various mice strains in the tail suspension test..</a> Behav. Brain. Res.. 143, 193-200 (2003).</li><li>Mineur, Y. S., Belzung, C., Crusio, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+unpredictable+chronic+mild+stress+on+anxiety+and+depression-like+behavior+in+mice.">Effects of unpredictable chronic mild stress on anxiety and depression-like behavior in mice.</a> Behav. Brain. Res. 175, 43-50 (2006).</li><li>Thierry, B., Stéru, L., Simon, P., Porsolt, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tail+suspension+test:+Ethical+considerations.">The tail suspension test: Ethical considerations.</a> Psychopharmacology. 90, 284-285 (1986).</li><li>Cryan, J. F., Mombereau, C., Vassout, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tail+suspension+test+as+a+model+for+assessing+antidepressant+activity:+review+of+pharmacological+and+genetic+studies+in+mice.">The tail suspension test as a model for assessing antidepressant activity: review of pharmacological and genetic studies in mice.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 29, 571-625 (2005).</li><li>O'Leary, O. F., Cryan, J. F., Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mood and Anxiety Related Phenotypes in Mice. 42, 119-137 (2009).</li><li>Detke, M. J., Johnson, J., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+and+Chronic+Antidepressant+Drug+Treatment+in+the+Rat+Forced+Swimming+Test+Model+of+Depression.">Acute and Chronic Antidepressant Drug Treatment in the Rat Forced Swimming Test Model of Depression.</a> Experimental and Clinical Psychopharmacology. 5, 107-112 (1997).</li><li>Rupniak, N. M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+depression:+challenges+from+a+drug+development+perspective.">Animal models of depression: challenges from a drug development perspective.</a> Behavioural Pharmacology. 14, 385-390 (2003).</li><li>Strekalova, T., Steinbusch, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mood and Anxiety related phenotypes in mice: Characterization using behavioral tests. 42, 153-176 (2009).</li><li>Bartolomucci, A., Fuchs, E., Koolhaas, J. M., Ohl, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mood and Anxiety related phenotypes in mice: Characterization using behavioral tests. 42, 261-275 (2009).</li><li>Samuels, B. A., Hen, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mood and Anxiety related phenotypes in mice: Characterization using behavioral tests. 63, 107-121 (2011).</li><li>Juszczak, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+usage+of+video+analysis+system+for+detection+of+immobility+in+the+tail+suspension+test+in+mice.">The usage of video analysis system for detection of immobility in the tail suspension test in mice.</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 85, 332-338 (2006).</li><li>Crowley, J. J., Jones, O. '. L. e. a. r. y., F, O., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+tests+for+measuring+the+effects+of+antidepressants+in+mice.">Automated tests for measuring the effects of antidepressants in mice.</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 78, 269-274 (2004).</li><li>Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+AMPA+receptors+in+the+antidepressant-like+effects+of+lithium+in+the+mouse+tail+suspension+test+and+forced+swim+test.">Involvement of AMPA receptors in the antidepressant-like effects of lithium in the mouse tail suspension test and forced swim test.</a> Neuropharmacology. 54, 577-587 (2008).</li><li>Gould, T. D., Dao, D. T., Kovacsics, C. E., Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mood and Anxiety related phenotypes in mice: Characterization using behavioral tests. 42, (2009).</li></ol>

המחברים מצהירים שום ניגוד אינטרסים.

פיתוח TST על ידי Steru et al. 9 הושפע מבחן שפותחו בעבר נאלצו לשחות 10-12. בדומה למבחן נאלץ לשחות, בעכברים TST ממוקמות במצב בלתי נמנעת אך מלחיצה למדי. היעדר התנהגות לברוח הקשורות נחשב תנועה. כמו במבחן נאלץ לשחות, TST הינה הבדיקה תוקף הטובה ביותר להערכת היעילות של תר?...

<ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סרט </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שעון עצר </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מצלמת וידיאו </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחולל רעש לבן (אופציונלי) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Climbstoppers (אופציונלי, תלוי המתח בשימוש) </li></ul>

the tail suspension test

המבחן זנב ההשעיה הוא מבחן התנהגותי העכבר שימושי ההקרנה של תרופות נוגדות דיכאון פוטנציאל, והערכת מניפולציות של אחרים, כי הם צפויים להשפיע על התנהגויות הקשורות לדיכאון. עכברים מושעים על ידי זנבותיהם עם הקלטת, במצב כזה זה לא יכול לברוח או להחזיק משטחים סמוכים. במהלך הבדיקה הזו, בדרך כלל שש דקות משך, התנהגויות בריחה כתוצאה אוריינטציה הם לכימות. המבחן זנב ההשעיה היא כלי רב ערך לגילוי סמים להקרנה תפוקה גבוהה של תרכובות נוגדות דיכאון פוטנציאליים. כאן, אנו מתארים את הפרטים הנדרשים ליישום של מבחן זה, עם דגש נוסף על בעיות פוטנציאליות שעלולות להתרחש וכיצד להימנע מהם. אנו מציעים גם פתרון התנהגות הזנב טיפוס, בעיה נפוצה כי מבחן זה הופך חסר תועלת בכמה זנים העכבר, כגון C57BL בשימוש נרחב / 6. באופן ספציפי, אנחנו למנוע התנהגויות טיפוס הזנב על ידי העברת העכבר זנבות דרך פלסטיק קטןגליל לפני ההשעיה. לבסוף, אנו בפירוט כיצד באופן ידני הציון התנהגויות באים לידי ביטוי בבדיקה זו.

Watch this Scientific Journal Video about The Tail Suspension Test at JoVE.com

The Tail Suspension Test

המבחן זנב ההשעיה הוא תוקף של הליך ניסיוני כדי להעריך את היעילות של טיפולים תרופתיים נגד דיכאון בעכברים. עכברים מושעים על ידי הזנבות שלהם במשך שש דקות להימלט הקשורות התנהגויות מוערכים. אנו מתארים הליכים המשמשים בביצוע הבדיקה ההשעיה הזנב.

השעיה זנב מבחן

The tail-suspension test is a mouse behavioral test useful in the screening of potential antidepressant drugs, and assessing of other manipulations that ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

79.0K Views.  University of Maryland School of Medicine. המבחן זנב ההשעיה הוא תוקף של הליך ניסיוני כדי להעריך את היעילות של טיפולים תרופתיים נגד דיכאון בעכברים. עכברים מושעים על ידי הזנבות שלהם במשך שש דקות להימלט הקשורות התנהגויות מוערכים. אנו מתארים הליכים המשמשים בביצוע הבדיקה ההשעיה הזנב.

Video: The Tail Suspension Test

One Dimensional Turing-Like Handshake Test for Motor Intelligence

In the Turing test, a computer model is deemed to "think intelligently" if it can generate answers that are not distinguishable from those of a human. However, this test is limited to the linguistic aspects of machine intelligence. A salient function of the brain is the control of movement, and the movement of the human hand is a sophisticated demonstration of this function. Therefore, we propose a Turing-like handshake test, for machine motor intelligence. We administer the test through a telerobotic system in which the interrogator is engaged in a task of holding a robotic stylus and interacting with another party (human or artificial). Instead of asking the interrogator whether the other party is a person or a computer program, we employ a two-alternative forced choice method and ask which of two systems is more human-like. We extract a quantitative grade for each model according to its resemblance to the human handshake motion and name it "Model Human-Likeness Grade" (MHLG). We present three methods to estimate the MHLG. (i) By calculating the proportion of subjects' answers that the model is more human-like than the human; (ii) By comparing two weighted sums of human and model handshakes we fit a psychometric curve and extract the point of subjective equality (PSE); (iii) By comparing a given model with a weighted sum of human and random signal, we fit a psychometric curve to the answers of the interrogator and extract the PSE for the weight of the human in the weighted sum. Altogether, we provide a protocol to test computational models of the human handshake. We believe that building a model is a necessary step in understanding any phenomenon and, in this case, in understanding the neural mechanisms responsible for the generation of the human handshake.

We present a Turing-like Handshake test administered through a telerobotic system in which the interrogator is holding a robotic stylus and interacting with another party (human or artificial). We use a forced choice method, and extract a measure for the similarity of the artificial model to a human handshake.

לחיצת יד אחת מימדי טיורינג, כמו מבחן אינטליגנציה מוטורי

In the Turing test, a computer model is deemed to "think intelligently" if it can generate answers that are not distinguishable from those of a human.  ...

The Mouse Forced Swim Test

The forced swim test is a rodent behavioral test used for evaluation of antidepressant drugs, antidepressant efficacy of new compounds, and experimental manipulations that are aimed at rendering or preventing depressive-like states. Mice are placed in an inescapable transparent tank that is filled with water and their escape related mobility behavior is measured. The forced swim test is straightforward to conduct reliably and it requires minimal specialized equipment. Successful implementation of the forced swim test requires adherence to certain procedural details and minimization of unwarranted stress to the mice. In the protocol description and the accompanying video, we explain how to conduct the mouse version of this test with emphasis on potential pitfalls that may be detrimental to interpretation of results and how to avoid them. Additionally, we explain how the behaviors manifested in the test are assessed.

The forced swim test is validated as an experimental approach to assess potential antidepressant efficacy in rodents. Experimental animals are placed in a tank of water and escape-related mobility behavior is quantified. The common procedures for the mouse version of this test are described.

עכבר בכפייה לשחות מבחן

The forced swim test is a rodent behavioral test used for evaluation of antidepressant drugs, antidepressant efficacy of new compounds, and experimental ...

The Fibular Nerve Injury Method: A Reliable Assay to Identify and Test Factors That Repair Neuromuscular Junctions

The neuromuscular junction (NMJ) undergoes deleterious structural and functional changes as a result of aging, injury and disease. Thus, it is imperative to understand the cellular and molecular changes involved in maintaining and repairing NMJs. For this purpose, we have developed a method to reliably and consistently examine regenerating NMJs in mice. This nerve injury method involves crushing the common fibular nerve as it passes over the lateral head of the gastrocnemius muscle tendon near the knee. Using 70 day old female mice, we demonstrate that motor axons begin to reinnervate previous postsynaptic targets within 7 days post-crush. They completely reoccupy their previous synaptic areas by 12 days. To determine the reliability of this injury method, we compared reinnervation rates between individual 70 day old female mice. We found that the number of reinnervated postsynaptic sites was similar between mice at 7, 9, and 12 days post-crush. To determine if this injury assay can also be used to compare molecular changes in muscles, we examined levels of the gamma-subunit of the muscle nicotinic receptor (gamma-AChR) and the muscle-specific kinase (MuSK). The gamma-AChR subunit and MuSK to are highly upregulated following denervation and return to normal levels following reinnervation of NMJs. We found a close relationship between transcript levels for these genes and innervation status of muscles. We believe that this method will accelerate our understanding of the cellular and molecular changes involved in repairing the NMJ and other synapses.

We have developed a nerve injury method to reliably examine muscle reinnervation, and thus regeneration of neuromuscular junctions in mice. This technique involves injuring the common fibular nerve via a simple and highly reproducible surgery. Muscle reinnervation in then assessed by whole-mounting the extensor digitorum longus muscle.

עצב שׁוֹקִיתִי השיטה פגיעה: A Assay אמין כדי לזהות מבחן הגורמים תיקון Neuromuscular הצומת

The neuromuscular junction (NMJ) undergoes deleterious structural and functional changes as a result of aging, injury and disease. Thus, it is imperative ...

Diffuse Reflectance Spectroscopy: Getting the Capillary Refill Test Under One's Thumb

The capillary refill test was introduced in 1947 to help estimate circulatory status in critically ill patients. Guidelines commonly state that refill should occur within 2 s after releasing 5 s of firm pressure (e.g., by the physician&#39;s finger) in the normal healthy supine patient. A slower refill time indicates poor skin perfusion, which can be caused by conditions including sepsis, blood loss, hypoperfusion, and hypothermia. Since its introduction, the clinical usefulness of the test has been debated. Advocates point out its feasibility and simplicity and claim that it can indicate changes in vascular status earlier than changes in vital signs such as heart rate. Critics, on the other hand, stress that the lack of standardization in how the test is performed and the highly subjective nature of the naked eye assessment, as well as the test&#39;s susceptibility to ambient factors, markedly lowers the clinical value. The aim of the present work is to describe in detail the course of the refill event and to suggest potentially more objective and exact endpoint values for the capillary refill test using diffuse polarization spectroscopy.

This protocol describes how the use of diffuse polarization spectroscopy can improve the clinical usefulness of the capillary refill test. We suggest a more detailed analysis of the course of the capillary refill in healthy volunteers using diffuse reflectance spectroscopy videos and new informatic endpoints.

ספקטרוסקופיה ' מאטום לשקוף ': מקבל את המבחן. מילוי קפילרי תחת האגודל של אחד

The capillary refill test was introduced in 1947 to help estimate circulatory status in critically ill patients. Guidelines commonly state that refill ...

Frequent Tail-tip Blood Sampling in Mice for the Assessment of Pulsatile Luteinizing Hormone Secretion

In many endocrine systems, circulating factors or hormones are not released continuously, but are secreted as a discrete pulse in response to a releasing factor. Single-point sampling measures are inadequate to fully understand the biological significance of the secretory pattern of pulsatile hormones either under normal physiologic conditions or during conditions of dysregulation. Luteinizing hormone (LH) is synthesized by the anterior pituitary gonadotrope&#160;cells and secreted in a pulsatile pattern which requires frequent collection of blood samples for pulse assessment. This has not been possible in mice until recently, due to the development of a high-sensitivity LH assay and advancement in a technique for frequent low-volume sample collection, initially described by Steyn and colleagues.1 Here we describe a protocol for the frequent peripheral blood sample collection from mice with sufficient handling acclimatization to detect pulsatile secretion of LH. The current protocol details an expanded acclimatization period that allows assessment of robust and continuous pulses of LH over multiple hours. In this protocol, the tip of the tail is clipped&#160;and blood is collected from the tail using a hand-held pipette. For assessment of pulsatile LH in gonadectomized mice, serial samples are collected every 5-6 min for 90-180 min. Importantly, the collection of blood and measurement of robust pulses of LH can be accomplished in awake, freely behaving mice, given adequate handling acclimatization and effort to minimize environmental stressors. Sufficient acclimatization can be achieved within 4-5 weeks prior to blood collection. This protocol highlights advances in the methodology to ensure collection of whole blood samples for assessment of pulsatile LH secretion patterns over multiple hours in the mouse, a powerful animal model for neuroendocrine research.

Here we present a tail-tip blood sampling protocol for frequent sample collection in unrestrained mice. This method is useful for assessing patterns of pulsatile luteinizing hormone secretion and could be adapted for analysis of other circulating factors.

תכופות לקיחת דמים קצה הזנב בעכברים להערכה של הפרשת הורמון מחלמן פועמת

In many endocrine systems, circulating factors or hormones are not released continuously, but are secreted as a discrete pulse in response to a releasing ...

A Metric Test for Assessing Spatial Working Memory in Adult Rats Following Traumatic Brain Injury

Impairments to sensory, short-term, and long-term memory are common side effects after traumatic brain injury (TBI). Due to the ethical limitations of human studies, animal models provide suitable alternatives to test treatment methods, and to study the mechanisms and related complications of the condition. Experimental rodent models have historically been the most widely used due to their accessibility, low cost, reproducibility, and validated approaches. A metric test, which tests the ability to recall the placement of two objects at various distances and angles from one another, is a technique to study impairment in spatial working memory (SWM) after TBI. The significant advantages of metric tasks include the possibility of dynamic observation, low cost, reproducibility, relative ease of implementation, and low stress environment. Here, we present a metric test protocol to measure impairment of SWM in adult rats after TBI. This test provides a feasible way to evaluate physiology and pathophysiology of brain function more effectively.

Traumatic brain injury (TBI) is commonly associated with memory impairment. Here, we present a protocol to assess spatial working memory after TBI via a metric task. A metric test is a useful tool to study spatial working memory impairment after TBI.

מבחן מטרי להערכת זיכרון עבודה מרחבי בחולדות בוגרות בעקבות פגיעה מוחית טראומטית

Impairments to sensory, short-term, and long-term memory are common side effects after traumatic brain injury (TBI). Due to the ethical limitations of ...

נוזל מוחי ונסיגת דם מחולדות עם רישום EEG במקביל

Sampling Cerebrospinal Fluid and Blood from Lateral Tail Vein in Rats During EEG Recordings

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure molecules of interest, such as hormones, growth factors, proteins, or small non-coding RNAs. A specific example is the sampling of biological liquids in the research of biomarkers for epilepsy. In these studies, it is desirable to compare the levels of molecules in cerebrospinal fluid (CSF) and in plasma, by withdrawing CSF and plasma in parallel and considering the time distance of the sampling from and to seizures. The combined CSF and plasma sampling, coupled with video-EEG monitoring in epileptic animals, is a promising approach for the validation of putative diagnostic and prognostic biomarkers. Here, a procedure of combined CSF withdrawal from cisterna magna and blood sampling from the lateral tail vein in epileptic rats that are continuously video-EEG monitored is described. This procedure offers significant advantages over other commonly used techniques. It permits rapid sampling with minimal pain or invasiveness, and reduced time of anesthesia. Additionally, it can be used to obtain CSF and plasma samples in both tethered and telemetry EEG recorded rats, and it may be used repeatedly across multiple days of experiment. By minimizing the stress due to sampling by shortening isoflurane anesthesia, measures are expected to reflect more accurately the true levels of investigated molecules in biofluids. Depending on the availability of an appropriate analytical assay, this technique may be used to measure the levels of multiple, different molecules while performing EEG recording at the same time.

מחבר זרקור: השגת CSF באיכות גבוהה ודגימות דם לגילוי סמנים ביולוגיים לאפילפסיה 

The protocol shows repeated cerebrospinal fluid and blood collections from epileptic rats performed in parallel with continuous video-electroencephalogram (EEG) monitoring. These are instrumental for exploring possible links between changes in various body fluid molecules and seizure activity.

דגימת נוזל מוחי ודם מווריד זנב לטרלי בחולדות במהלך רישומי EEG

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many ...

כימות אורך הפולי(A) של גנים ממערכת העצבים דרוזופילה

Measurement of Poly A Tail Length from Drosophila Larva Brain and Cell Line

Polyadenylation is a crucial posttranscriptional modification that adds poly(A) tails to the 3' end of mRNA molecules. The length of the poly(A) tail is tightly regulated by cellular processes. Dysregulation of mRNA polyadenylation has been associated with abnormal gene expression and various diseases, including cancer, neurological disorders, and developmental abnormalities. Therefore, comprehending the dynamics of polyadenylation is vital for unraveling the complexities of mRNA processing and posttranscriptional gene regulation. 
This paper presents a method for measuring poly(A) tail lengths in RNA samples isolated from Drosophila larval brains and Drosophila Schneider S2 cells. We employed the guanosine/inosine (G/I) tailing approach, which involves the enzymatic addition of G/I residues at the 3' end of mRNA using yeast poly(A) polymerase. This modification protects the RNA's 3' end from enzymatic degradation. The protected full-length poly(A) tails are then reverse-transcribed using a universal antisense primer. Subsequently, PCR amplification is performed using a gene-specific oligo that targets the gene of interest, along with a universal sequence oligo used for reverse transcription. 
This generates PCR products encompassing the poly(A) tails of the gene of interest. Since polyadenylation is not a uniform modification and results in tails of varying lengths, the PCR products display a range of sizes, leading to a smear pattern on agarose gel. Finally, the PCR products are subjected to high-resolution capillary gel electrophoresis, followed by quantification using the sizes of the poly(A) PCR products and the gene-specific PCR product. This technique offers a straightforward and reliable tool for analyzing poly(A) tail lengths, enabling us to gain deeper insights into the intricate mechanisms governing mRNA regulation.

מחבר זרקור: לחקור את הגבול של מחקר mRNA עם טכניקות ניתוח זנב Poly A

The protocol describes an efficient and reliable method for quantifying the poly(A) length of the gene of interest from the Drosophila nervous system, which can be easily adapted to tissues or cell types from other species.

מדידת אורך זנב Poly A מזחלי דרוזופילה מוח וקו תאים

Polyadenylation is a crucial posttranscriptional modification that adds poly(A) tails to the 3' end of mRNA molecules. The length of the poly(A) tail is ...