עותק יחיד של גן לוקוס כרומטין טיהור ב Saccharomyces cerevisiae

גרעין אאוקריוטי צפוף מאוד עם תהליכים ביולוגיים רבים המתרחשים בו זמנית. מטרת המחקר שלנו היא להבין כיצד כל התהליכים הללו מתואמים בגנום שלנו ללא תאונות משמעותיות שאחרת היו מובילות לחוסר יציבות גנומית ולמחלות אנושיות. פרוטוקול זה מאפשר לנו לטהר מוקד מסוים של הגנום במצבו הטבעי, ומאפשר הן את ההרכב והן את האפיון הפונקציונלי של החומר המבודד, כגון מדידות של אינטראקציות DNA חלבוני.

פרוטוקול זה מאפשר רמה עצומה של העשרה של לוקוס ממוקד, המתגבר על מגבלות קיימות רבות של בידוד כרומטין ספציפי ללוקה. החומר לא הוצלב. זה גם מאפשר ניתוחים פונקציונליים רבים במורד הזרם, כגון שעתוק חוץ גופי או שכפול במבחנה.

פרוטוקול זה אפשר לנו להוציא ולטהר מקורות שכפול שונים מכרומוזומי שמרים, ואפשר לנו לבצע אנליזה פרוטאומית ולזהות גורמי כרומטין חדשים המקיימים אינטראקציה, ובכך לקדם את תחום המחקר של שכפול DNA. פרוטוקול זה מאפשר מחקרי שכפול במבחנה המשתמשים בחומר המקור המטוהר כדי לבחון מצבי כרומטין, שינויים בהיסטון ולבצע ניתוח מבני על תבניות הנוקלאוזומליות המקוריות מכרומוזומים אנדוגניים, ולקדם את מחקר הכרומטין.