חיפושית תפוחי אדמה קולורדו היא אחד המזיקים החמורים ביותר של תפוחי אדמה באזור ממוזג. מחקרים על חסינות ופתוגנזה של מזיק זה מתבצעים בעיקר בשלב הפעיל. עם זאת, באזור ממוזג, מזיק זה מבלה את רוב מחזור החיים שלו במצב של תרדמה.
במחקר זה אנו מציגים שיטה לתרדמת חורף של חיפושית תפוחי אדמה מקולורדו וטכניקה לאיסוף חיפושיות בחורף. היתרון העיקרי של שיטה זו הוא שהיא מאפשרת להשיג כל מספר של אנשים overwintering לניתוח וירוסים בכל תקופה של תרדמה. השתמשו בכלובים העשויים מסגרת עץ קשיחה בגודל של 25 על 25 על 40 סנטימטרים.
כדי לבנות מסגרת לכלוב, השתמשו בלוחות עץ בעובי של שני סנטימטרים לפחות וברוחב של ארבעה סנטימטרים. כסו את פנים הכלוב ברשת נירוסטה בגודל של לא יותר מחמישה על שלושה מילימטרים. תקן את הרשת עם מהדק עץ.
רפדו את פנים הכלוב בגיאוטקסטיל סינתטי שחור בצפיפות של 60 גרם למ"ר. חברו בחוזקה צינור בד סינתטי שקוף ונושם, בגובה של כ-60 ס"מ לראש הכלוב. חוצים ומקבעים שני חבלים חזקים לתחתית הכלוב כדי למשוך אותו מהאדמה בעת הצורך.
חופרים בור באדמה בעומק 40 סנטימטרים. הניחו דשא יבש או חציר על החור. הניחו את הכלוב בתוכו כך שהחציר או העשב היבש יהיו בין דפנות הכלוב לאדמה.
מלאו את הכלובים באדמה מאותו שדה תפוחי אדמה שבו נאספים החרקים. התקינו אוגרי נתוני טמפרטורה ולחות עמידים למים בכלובים בעומקים הנדרשים. שתול שתילי תפוחי אדמה בתוך הכלוב שלושה עד ארבעה שבועות לפני כניסת החיפושית והשקו אותם במתינות.
מקבעים צינור בד סינטטי במאונך למקל מכל חומר המותקן בצד החיצוני של הכלוב. אספו ידנית חיפושיות בוגרות בשדות תפוחי אדמה ללא חומרי הדברה לקראת סוף צמחיית תפוחי האדמה. שמרו את החיפושיות שנאספו בדליים מפלסטיק של 20 ליטר המכילים צמרות תפוחי אדמה להאכלת החרקים לפני הכנסתם לכלובים.
מכסים את הדליים בבד נושם. הניחו לא יותר מ-200 פרטים של החיפושיות על צמחי תפוחי האדמה המכוסים ברשת הבד הסינתטי. לאחר צריכת צמרות תפוחי האדמה, הוסיפו את הטריות המונחות בצנצנת פלסטיק המכילה מים והחליפו את צמרות תפוחי האדמה מדי יום לאחר מכן.
לאחר שכל החיפושיות התחפרו באדמה לחורף, שחררו את צינור הבד הסינתטי מהמקל והניחו את הבד. הסירו את השלג מעל פני הכלוב. שחררו את הכלוב מכל צד עם חפירה חזקה.
משכו את הכלוב החוצה מהאדמה באמצעות חבלים. הביאו את הכלוב למעבדה. מוציאים את האדמה מהכלוב במנות קטנות, מפרקים בזהירות חתיכות אדמה גדולות ומבודדים חיפושיות באמצעות פינצטה.
להפריד חיפושיות חיות מגופות. חיפושיות חיות ובריאות דוחסות סביבן אדמה ויוצרות חלל אוויר, מה שנקרא עריסה, ולכן הן מופרדות בקלות מהאדמה. חיפושיות שנהרגות על ידי פטריות נחנטות או שיש להן תפטיר גלוי על פני השטח.
חרקים המתפרקים חיידקים הם כהים. לנפות את הקרקע דרך מסננת כדי לוודא שכל החיפושיות מבודדות ולא ניזוקו. הניחו גופות עם תסמינים של זיהום פטרייתי או פירוק חיידקי בצינור בז סטרילי בודד לזיהוי עתידי.
אחסנו חיפושיות חיות במקרר בטמפרטורה של 2 מעלות צלזיוס עד לניתוח במיכלים סגורים ומאווררים המכילים כדור צמר גפן לח. כדי לאסוף hemolymph, לעשות נקב בחלק לרוחב של הבטן מתחת אבי העורקים עם מחט אינסולין. כדי לבודד את המעיים, לחתוך את קפסולת הראש, לסחוט את כל התוכן לתוך צלחת פטרי עם חיץ פוספט.
יש להפריד את המעי ולנקות אותו משומן ומכלי הדם המלפיגיים. יש להפריד בין החלק הרצוי של המעי, כגון המעי הקדמי, אמצע המעי או המעי האחורי. כדי לבודד את גוף השומן, להפריד אותו מן הרקמות האחרות לאחר בידוד של המעי.
כדי לבודד פטריות אנטומופתוגניות מן הגופות, לשים את הגופות חנוטות לתוך תא לחות סטרילי. השתמש קונידיה אווירית או סקלרוטיה מן התוכן הפנימי של החיפושיות עבור ציפוי על אגר דקסטרוז Sabouraud עם 0.4% חומצה לקטית. בודד חיידקים מן הגופות עם סימפטומים של ריקבון חיידקי.
חותכים את ראשה של החיפושית, סוחטים את התוכן הפנימי ואוספים לתוך צינורות לציפוי הבא על מדיה עבור חיידקים. טמפרטורות מתחת לאפס בכלובים בעומק של 30 סנטימטרים, נרשמו מסוף נובמבר עד תחילת אפריל. הטמפרטורה הממוצעת בתקופה זו הייתה 3.3 0.1 צלזיוס.
הטמפרטורה הנמוכה ביותר שנרשמה הייתה 7.9 מעלות צלזיוס באמצע פברואר. תמותת החרקים עלתה במהלך תרדמת החורף והגיעה למקסימום באביב לפני הופעתם. המספר הראשוני של חיפושיות היה 2, 000, מתוכם 1, 470 אנשים שרדו.
לפיכך, שיעור ההישרדות של החיפושיות במהלך תרדמת החורף היה 61%ניתוח של 530 גופות הראה כי במהלך תקופת תרדמת החורף 53% מהם אופיינו בסימפטומים של פירוק חיידקים ו -25% אופיינו בסימפטומים של זיהום פטרייתי. בווריה שלטה בין התרבויות המבודדות של פטריות אנטומופתוגניות. Metarhizium, Cordyceps ו Lecanicillium היו הרבה פחות נפוצים.
בין החיידקים שבודדו מהגופות עם תסמינים של פירוק חיידקים, זוהו מינים השייכים לסוגים Bacillus, Sphingobacterium, Peribacillus, Pseudomonas, Serratia, Rahnella ו- Glutamicibacter. שימוש בשיטה זו יכול לפתור את הבעיה של השגת חיפושיות תפוחי אדמה קולורדו מהשדה בחורף. זה מאפשר לקבל כמה פרטים שאתה צריך עם שיעור התמותה הנמוך של החרקים.
המחקר של היבטים שונים של תרדמת החיפושיות חשוב הן מנקודת מבט בסיסית והן יישומית לשיפור הגישה להדברת מזיק זה. וכמובן, טכניקה זו יכולה להיות מותאמת למיני חרקים אחרים החורפים בקרקע.
