خنفساء البطاطس كولورادو هي واحدة من أخطر آفات البطاطس في المنطقة المعتدلة. يتم إجراء دراسات المناعة والتسبب في هذه الآفة بشكل رئيسي في المرحلة النشطة. ومع ذلك ، في المنطقة المعتدلة ، تقضي هذه الآفة معظم دورة حياتها في حالة سبات.
في هذه الدراسة ، نقدم طريقة لإسبات خنفساء البطاطس في كولورادو وتقنية لجمع الخنافس في الشتاء. الميزة الرئيسية لهذه الطريقة هي أنها تسمح بالحصول على أي عدد من الأفراد الذين يقضون الشتاء لتحليل الفيروسات في أي فترة من السبات. استخدم أقفاصا مصنوعة من إطار خشبي صلب بحجم 25 × 25 × 40 سم.
لبناء إطار للقفص ، استخدم شرائح خشبية لا يقل سمكها عن سنتيمترين وعرضها أربعة سنتيمترات. قم بتغطية الجزء الداخلي من القفص بشبكة من الفولاذ المقاوم للصدأ بحجم لا يزيد عن خمسة في ثلاثة ملليمترات. إصلاح شبكة مع دباسة الخشب.
قم بتبطين الجزء الداخلي من القفص بنسيج أرضي صناعي أسود بكثافة 60 جراما لكل متر مربع. نعلق بإحكام أنبوب من النسيج تنفس شفافة الاصطناعية ، حوالي 60 سم إلى أعلى القفص. اعبر وثبت حبلين قويين في قاع القفص لسحبه من التربة عند الحاجة.
حفر حفرة في التربة بعمق 40 سم. وضع العشب الجاف أو القش على الحفرة. ضع القفص بالداخل بحيث يكون القش أو العشب الجاف بين جدران القفص والتربة.
املأ الأقفاص بالتربة من نفس حقل البطاطس حيث يتم جمع الحشرات. قم بتركيب أجهزة تسجيل بيانات درجة الحرارة والرطوبة المقاومة للماء في الأقفاص على الأعماق المطلوبة. ازرع شتلات البطاطس داخل القفص قبل ثلاثة إلى أربعة أسابيع من إدخال الخنفساء وسقيها بشكل معتدل.
ثبت أنبوبا من القماش الصناعي عموديا على عصا من أي مادة مثبتة على السطح الخارجي للقفص. اجمع الخنافس البالغة يدويا في حقول البطاطس الخالية من المبيدات الحشرية في نهاية نباتات البطاطس. احتفظ بالخنافس المجمعة في دلاء بلاستيكية سعة 20 لترا تحتوي على قمم بطاطس لتغذية الحشرات قبل وضعها في الأقفاص.
تغطية الدلاء بنسيج تنفس. ضع ما لا يزيد عن 200 فرد من الخنافس على نباتات البطاطس المغطاة بشبكة النسيج الاصطناعية. عندما تستهلك قمم البطاطس ، أضيفي أخرى طازجة موضوعة في وعاء بلاستيكي يحتوي على الماء وقم بتغيير قمم البطاطس يوميا بعد ذلك.
بمجرد أن تحفر جميع الخنافس في التربة لفصل الشتاء ، قم بفك أنبوب النسيج الصناعي من العصا ووضع القماش لأسفل. إزالة الثلج فوق سطح القفص. قم بفك القفص على كل جانب بمجرفة قوية.
اسحب القفص من التربة باستخدام الحبال. أحضر القفص إلى المختبر. قم بإزالة التربة من القفص في أجزاء صغيرة ، وقم بتفتيت قطع كبيرة من التربة بعناية وعزل الخنافس باستخدام الملقط.
افصل الخنافس الحية عن الجثث. الخنافس الحية والصحية تضغط التربة من حولها وتشكل تجويف الهواء ، ما يسمى المهد ، وبالتالي يمكن فصلها بسهولة عن التربة. الخنافس التي تقتلها الفطريات محنطة أو لها أفطورة مرئية على السطح.
الحشرات المتحللة بكتريا مظلمة. نخل التربة من خلال غربال للتأكد من عزل جميع الخنافس وعدم تلفها. ضع الجثث التي تظهر عليها أعراض العدوى الفطرية أو التحلل البكتيري في أنبوب صقر معقم فردي للتعرف عليه في المستقبل.
قم بتخزين الخنافس الحية في الثلاجة عند درجة حرارة 2 درجة مئوية حتى تحليلها في حاويات مغلقة جيدة التهوية تحتوي على كرة قطنية مبللة. لجمع الدملمف ، قم بعمل ثقب في الجزء الجانبي من البطن تحت الشريان الأورطي بإبرة الأنسولين. لعزل القناة الهضمية ، وقطع كبسولة الرأس ، والضغط على جميع المحتويات في طبق بتري مع عازلة الفوسفات.
افصل القناة الهضمية وتطهيرها من الدهون والأوعية Malpighian. افصل الجزء المرغوب فيه من القناة الهضمية ، مثل الأمعاء الأمامية أو الأمعاء الوسطى أو الأمعاء الخلفية. لعزل الجسم الدهني ، افصله عن الأنسجة الأخرى بعد عزل الأمعاء.
لعزل الفطريات المسببة للأمراض الحشرية من الجثث ، ضع الجثث المحنطة في غرفة رطوبة معقمة. استخدم الكونيديا الهوائية أو التصلب من المحتويات الداخلية للخنافس للطلاء على أجار سكر العنب Sabouraud مع حمض اللبنيك 0.4٪. عزل البكتيريا من الجثث مع أعراض التسوس البكتيري.
قطع رأس خنفساء ، والضغط على المحتويات الداخلية وجمعها في أنابيب للطلاء اللاحق على وسائل الإعلام للبكتيريا. تم تسجيل درجات حرارة أقل من الصفر في الأقفاص على عمق 30 سم ، من نهاية نوفمبر إلى بداية أبريل. كان متوسط درجة الحرارة خلال هذه الفترة 3.3 0.1 درجة مئوية.
وكانت أدنى درجة حرارة مسجلة 7.9 درجة مئوية في منتصف فبراير. زاد معدل وفيات الحشرات أثناء السبات ووصل إلى الحد الأقصى في الربيع قبل ظهوره. كان العدد الأولي للخنافس 2،000 ، نجا منها 1،470 فردا.
وهكذا ، كان معدل بقاء الخنافس أثناء السبات 61 ٪أظهر تحليل 530 جثة أنه خلال فترة السبات ، تميز 53٪ منهم بأعراض التحلل البكتيري و 25٪تميزت بأعراض العدوى الفطرية. سيطرت بوفيريا بين الثقافات المعزولة للفطريات المسببة للأمراض الحشرية. كانت الميتاريزيوم والكورديسيبس والليكانسيليوم أقل شيوعا.
من بين البكتيريا المعزولة من الجثث مع أعراض التحلل البكتيري ، تم تحديد الأنواع التي تنتمي إلى أجناس Bacillus و Sphingobacterium و Peribacillus و Pseudomonas و Serratia و Rahnella و Glutamicibacter. يمكن أن يؤدي استخدام هذه الطريقة إلى حل مشكلة الحصول على خنافس البطاطس في كولورادو من الحقل في فصل الشتاء. يسمح بالحصول على أكبر عدد ممكن من الأفراد مع انخفاض معدل وفيات الحشرات.
دراسة الجوانب المختلفة لسبات الخنافس مهمة من وجهة النظر الأساسية والتطبيقية لتحسين نهج مكافحة هذه الآفة. وبالطبع ، يمكن تكييف هذه التقنية مع أنواع الحشرات الأخرى التي تقضي الشتاء في التربة.
