מחקר זה נתמך על ידי תוכנית המחקר Intramural של NIH, המכון הלאומי לאלרגיה ומחלות זיהומיות. אנו מודים ללינדן ט. הו, סם ר. טלפורד השלישי, קנת דרדיק, קרלה ויליאמס, ארין צ'ונג וכריסטינה ברנדבורג על השתתפותם בפיתוח הנהלים.

חשיפת מתנדבים לעקיצות קרציות היא שיטה ניסיונית וחייבת להתבצע תחת פרוטוקול מחקר קליני המאושר על ידי הרשויות הרגולטוריות הרלוונטיות. המחקרים הקליניים (NCT01143558, NCT02446626 ו-NCT05036707) אושרו על ידי ועדות הבדיקה המוסדיות המתאימות, נערכו תחת פטור ממכשירים ניסיוניים שניתן על ידי מנהל המזון והתרופות האמריקאי, ובוצעו בהתאם להנחיות Good Clinical Practice. בנוסף, מחקרים אלה נרשמו ב-ClinicalTrials.gov, והתקבלה הסכמה מדעת בכתב מכל המשתתפים.
1. הכנת תחבושת הכלה
<ol><li>כדי ליצור תבנית מדידה, צלמו את הלבישה המכילה הידרוקולואידים בגודל 3 אינץ' x 3 אינץ' לאורך הצד של קווי המדידה (איור 1A וטבלת חומרים).</li>
	<li>גזור את התבנית המצולמת לאורך קו 1 אינץ'. לאחר מכן, חתכו לאורך קו ה-2 אינץ', וצרו עיגול בגודל 2 אינץ' עם מרכז בגודל 1 אינץ' (איור 1B).</li>
	<li>בעזרת תבנית זו, חתכו את רוטב הקצף הלא דביק ליצירת עיגול בגודל 2 אינץ' עם מרכז בגודל 1 אינץ' (איור 2A,B וטבלת חומרים).</li>
	<li>באמצעות אותה תבנית, גזרו עיגול בגודל 2 אינץ' במרכז הלבישה ההידרוקולואידית הדקה במיוחד בגודל 4 אינץ' x 4 אינץ' (איור 2C,D).</li>
	<li>חותכים את שכבת ההידרוקולואיד של הלבישה המכילה בגודל 3 אינץ' x 3 אינץ' בקו 1/2 אינץ'.</li>
	<li>משכו לאחור את ציפוי הנייר של שכבת ההידרוקולואיד של הלבישה כדי לחשוף את הדבק. הניחו את רוטב הקצף החתוך בתוך עיגול "2 של הדבק (איור 3A). זה יבטיח כי רוטב הקצף משתרע מעבר לפתח של רוטב הכלה. החליפו את תוחם הנייר על שכבת ההידרוקולואיד של החבישה (איור 3B). הערה: מדידות אלה שימשו למחקרים שכללו עד 10 קרציות I. scapularis . במחקרים שכללו עד 30 קרציות I. scapularis , התבנית של מרכז הקצף נחתכה בין הסימונים בגודל 1 אינץ' ל-11/2 אינץ' כדי לאפשר שטח גדול יותר למיקום. ניתן להתאים את מידות הלבישה בהתאם לעיצוב המחקר.</li>
</ol>2. מיקום קרציות
<ol><li>אחסון קרציות<ol><li>לאחסן את הזחל I. scapularis קרציות במקרר ברמה רפואית עם הטמפרטורה להגדיר 9-10 ° C.</li>
		<li>אחסנו את הקרציות בבקבוקון מכוסה במכסה רשת כדי לאפשר זרימת אוויר נאותה. ארזו את בקבוקון הקרציות בשקית ניילון הניתנת לאטימה עם ספוג לח קלות כדי לשמור על לחות ולמנוע התייבשות.</li>
	</ol></li>
	<li>הנחת הקרציות<ol><li>מוציאים את הקרציות מהמקרר כדי לאפשר להן להתחמם לטמפרטורת החדר. הקרציות יכולות להיות פעילות תוך 15 דקות בלבד מחוץ למקרר.</li>
		<li>מקם גיליון לבן מסביב לאזור המיקום כדי לדמיין בקלות כל סימן שנפל בשוגג.</li>
		<li>הרטיבו פד גזה בגודל 4X4 אינץ' במים נקיים או מלוחים והשתמשו בו כדי לנקות את העור של אתר המיקום. יש לייבש את האזור בטפיחות קלות או לאפשר לו להתייבש באוויר. הערה: בעת בחירת אתר הגוף למיקום הקרציות, יש לקחת בחשבון אזורים שאינם מגבילים את הפעילות היומיומית של המתנדב ושבהם ניתן לפקח בקלות על שלמות החבישה על ידי המשתתף. אין להניח קרציות באזורים שבהם הן עלולות להימעך עקב לחץ ישיר (למשל, הגב). להעריך את שיער הגוף של המשתתף, ואם יש צורך, בזהירות לקצץ שיער גוף עודף באמצעות מספריים באתר של דבק, הימנעות נזק לעור. הימנעו משימוש בסכין גילוח להסרת שיער, שכן הוא עלול להגביר את הסיכון לפגיעה בעור ולזיהום.</li>
		<li>ברגע שהעור יבש, הסירו את תוחם הדבק מהצד ההידרוקולואידי של ההלבשה המוכנה והדביקו אותו היטב לעור באתר המיקום, כדי להבטיח ששכבת הרשת תישאר פתוחה.</li>
		<li>שברו את מקלון העץ (ראו טבלת חומרים) לשניים כדי לחשוף קצוות משוננים.</li>
		<li>בזהירות לפתוח את בקבוקון הקרציות.</li>
		<li>בעזרת הקצה המשונן של מקלון העץ, העבירו קרציות פעילות מהבקבוקון והניחו אותן על העור בתוך חבישת ההכלה (איור 4A). בקש מחבר צוות נוסף לפקח על אתר מיקום הקרציות כדי לוודא שהקרציות נשארות בתוך הלבישה המבלימה. השתמשו בסרט הדבקה כדי ללכוד קרציות שבורחות מהבקבוקון בתהליך זה. הערה: שבירת מקלון עץ ושימוש בקצה המשונן יעילים למניפולציה והעברה של קרציות מבלי לגרום נזק לקרציות. מברשת קטנה עם זיפים רכים בצבע בהיר פועלת גם להעברת קרציות מהמיכל לאתר העור.</li>
		<li>לאחר הנחת מספר הקרציות שצוין למחקר, הסירו את תוחם הדבק משכבת הרשת של הלבישה וסגרו אותו מעל הפתח.</li>
		<li>לאחר שווידאתם שהדבק מחובר היטב, מרחו את ההלבשה ההידרוקולואידית הדקה במיוחד בגודל 4 אינץ' על 4 אינץ' מעל הלבישה המכילה לאבטחה נוספת (איור 4B). הערה: מידע נוסף לגבי מושבת הקרציות I. scapularis נטולת הפתוגנים ומשך הליכי החשיפה לקרציות ששימשו במחקרים המצוטטים ניתן למצוא בפרקי השיטות של המחקרים שפורסמו19,22.</li>
	</ol></li>
</ol>3. טיפול באתר
<ol><li>ספק כיסוי מחסום מים וסרט היפואלרגני בגודל 2 אינץ' (ראה טבלת חומרים) למשתתף המחקר.</li>
	<li>ספקו הוראות לטיפול באתר ההכלה של הקרציות.<ol><li>בדוק מעת לעת את החבישה ועקוב אחר הקצוות להידבקות בטוחה לעור. יש למרוח סרט נוסף לחיזוק קצוות ההלבשה לפי הצורך.</li>
		<li>אין לגרד את מקום החבישה ולהימנע מפתיחה או הסרה של החבישה במהלך תקופת הלימוד.</li>
		<li>הימנעו מרחצה או טבילה במים. כמו כן, הימנעו ממקלחות חמות והגבילו את משך המקלחת. לפני המקלחת, יש להגן על הלבישה עם כיסוי מחסום המים המסופק ולהסיר אותה לאחר סיום המקלחת. יבשו בעדינות את ההלבשה בטפיחות קלות ובדקו אותה כדי לוודא שהיא נשארת בטוחה.</li>
		<li>הימנעו מפעילויות שעלולות להוביל להזעה רבה ולפגוע בשלמות החבישה (למשל, פעילות אירובית, טיולים ממושכים).</li>
	</ol></li>
</ol>4. הרחקת קרציות
<ol><li>הכנת בקבוקוני איסוף<ol><li>תייגו את בקבוקוני איסוף הקרציות עם המזהים הרצויים (למשל, קוד מחקר, תאריך).</li>
		<li>אם יש צורך בשימור קרציות חיות, נקב חורים במכסה הבקבוקונים עם מחט 20 גרם. השתמשו בשכבה של רשת ניילון או פוליאסטר יחד עם המכסה כדי לאטום את הבקבוקון. הניחו חתיכה קטנה של ספוג לח בשקית הניתנת לאטימה עם בקבוקון הקרציות כדי לשמור על לחות.</li>
	</ol></li>
	<li>הסרת הקרציות<ol><li>הניחו סדינים לבנים סביב אתר התחבושת וודאו שאגן האיסוף נמצא בהישג יד.</li>
		<li>באמצעות מגבוני אלכוהול, בזהירות להסיר את התחבושת מן העור.</li>
		<li>לאחר ההסרה המלאה, הניחו את התחבושת באגן האיסוף ובדקו אותה לנוכחות קרציות מנותקות.</li>
		<li>הערך את אתר המיקום של קרציות מצורפות. קרציות שניזונו למילוי יתנתקו (איור 5A). עבור שאר הקרציות המצורפות, השתמשו במלקחיים עדינים להסרה (איור 5B).</li>
		<li>נקו את העור עם מגבוני אלכוהול או מים וסבון.</li>
	</ol></li>
</ol>

חשיפת בני אדם לקרציות זחלים לחקר מחלות המועברות על ידי קרציות

<ol>
	<li>Yeh, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determining+the+duration+of+Ixodes+scapularis+(Acari:+Ixodidae)+attachment+to+tick-bite+victims.">Determining the duration of Ixodes scapularis (Acari: Ixodidae) attachment to tick-bite victims.</a> J Med Entomol. 32 (6), 853-858 (1995).</li><li>Piesman, J., Mather, T. N., Sinsky, R. J., Spielman, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Duration+of+tick+attachment+and+Borrelia+burgdorferi+transmission.">Duration of tick attachment and Borrelia burgdorferi transmission.</a> J Clin Microbiol. 25 (3), 557-558 (1987).</li><li>Vora, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ticks+elicit+variable+fibrinogenolytic+activities+upon+feeding+on+hosts+with+different+immune+backgrounds.">Ticks elicit variable fibrinogenolytic activities upon feeding on hosts with different immune backgrounds.</a> Sci Rep. 7, 44593 (2017).</li><li>Narasimhan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunity+against+Ixodes+scapularis+salivary+proteins+expressed+within+24+hours+of+attachment+thwarts+tick+feeding+and+impairs+Borrelia+transmission.">Immunity against Ixodes scapularis salivary proteins expressed within 24 hours of attachment thwarts tick feeding and impairs Borrelia transmission.</a> PLoS One. 2 (5), 451 (2007).</li><li>Nazario, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+Borrelia+burgdorferi+transmission+in+guinea+pigs+by+tick+immunity.">Prevention of Borrelia burgdorferi transmission in guinea pigs by tick immunity.</a> Am J Trop Med Hyg. 58 (6), 780-785 (1998).</li><li>Krause, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dermatologic+changes+induced+by+repeated+Ixodes+scapularis+bites+and+implications+for+prevention+of+tick-borne+infection.">Dermatologic changes induced by repeated Ixodes scapularis bites and implications for prevention of tick-borne infection.</a> Vector Borne Zoonotic Dis. 9 (6), 603-610 (2009).</li><li>Anderson, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ticks,+Ixodes+scapularis,+feed+repeatedly+on+white-footed+mice+despite+strong+inflammatory+response:+an+expanding+paradigm+for+understanding+tick-host+interactions.">Ticks, Ixodes scapularis, feed repeatedly on white-footed mice despite strong inflammatory response: an expanding paradigm for understanding tick-host interactions.</a> Front Immunol. 8, 1784 (2017).</li><li>Rosenberg, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vital+signs:+trends+in+reported+vectorborne+disease+cases+-+United+States+and+Territories,+2004-2016.">Vital signs: trends in reported vectorborne disease cases - United States and Territories, 2004-2016.</a> MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 67 (17), 496-501 (2018).</li><li>Paules, C. I., Marston, H. D., Bloom, M. E., Fauci, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tickborne+diseases+-+confronting+a+growing+threat.">Tickborne diseases - confronting a growing threat.</a> N Engl J Med. 379 (8), 701-703 (2018).</li><li>Tardy, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanistic+movement+models+to+predict+geographic+range+expansions+of+ticks+and+tick-borne+pathogens:+Case+studies+with+Ixodes+scapularis+and+Amblyomma+americanum+in+eastern+North+America.">Mechanistic movement models to predict geographic range expansions of ticks and tick-borne pathogens: Case studies with Ixodes scapularis and Amblyomma americanum in eastern North America.</a> Ticks Tick Borne Dis. 14 (4), 102161 (2023).</li><li>Molaei, G., Eisen, L. M., Price, K. J., Eisen, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Range+expansion+of+native+and+invasive+ticks:+a+looming+public+health+threat.">Range expansion of native and invasive ticks: a looming public health threat.</a> J Infect Dis. 226 (3), 370-373 (2022).</li><li>Marques, A. R., Strle, F., Wormser, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+Lyme+disease+in+the+United+States+and+Europe.">Comparison of Lyme disease in the United States and Europe.</a> Emerg Infect Dis. 27 (8), 2017-2024 (2021).</li><li>Kugeler, K. J., Schwartz, A. M., Delorey, M. J., Mead, P. S., Hinckley, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimating+the+frequency+of+Lyme+disease+diagnoses,+United+States,+2010-2018.">Estimating the frequency of Lyme disease diagnoses, United States, 2010-2018.</a> Emerg Infect Dis. 27 (2), 616-619 (2021).</li><li>Schwartz, A. M., Kugeler, K. J., Nelson, C. A., Marx, G. E., Hinckley, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=use+of+commercial+claims+data+for+evaluating+trends+in+lyme+disease+diagnoses,+United+States,+2010-2018.">use of commercial claims data for evaluating trends in lyme disease diagnoses, United States, 2010-2018.</a> Emerg Infect Dis. 27 (2), 499-507 (2021).</li><li>Hook, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Economic+burden+of+reported+Lyme+disease+in+high-incidence+areas,+United+States.">Economic burden of reported Lyme disease in high-incidence areas, United States.</a> Emerg Infect Dis. 28 (6), 1170-1179 (2022).</li><li>Eisen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tick+species+infesting+humans+in+the+United+States.">Tick species infesting humans in the United States.</a> Ticks Tick Borne Dis. 13 (6), 102025 (2022).</li><li>Embers, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variable+manifestations,+diverse+seroreactivity+and+post-treatment+persistence+in+non-human+primates+exposed+to+Borrelia+burgdorferi+by+tick+feeding.">Variable manifestations, diverse seroreactivity and post-treatment persistence in non-human primates exposed to Borrelia burgdorferi by tick feeding.</a> PLoS One. 12 (12), 0189071 (2017).</li><li>Hodzic, E., Imai, D., Feng, S., Barthold, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resurgence+of+persisting+non-cultivable+Borrelia+burgdorferi+following+antibiotic+treatment+in+mice.">Resurgence of persisting non-cultivable Borrelia burgdorferi following antibiotic treatment in mice.</a> PLoS One. 9 (1), 86907 (2014).</li><li>Marques, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenodiagnosis+to+detect+Borrelia+burgdorferi+infection:+a+first-in-human+study.">Xenodiagnosis to detect Borrelia burgdorferi infection: a first-in-human study.</a> Clin Infect Dis. 58 (7), 937-945 (2014).</li><li>Hodzic, E., Imai, D. M., Escobar, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generality+of+post-antimicrobial+treatment+persistence+of+Borrelia+burgdorferi+strains+N40+and+B31+in+genetically+susceptible+and+resistant+mouse+strains.">Generality of post-antimicrobial treatment persistence of Borrelia burgdorferi strains N40 and B31 in genetically susceptible and resistant mouse strains.</a> Infect Immun. 87 (10), e00442 (2019).</li><li>Bockenstedt, L. K., Mao, J., Hodzic, E., Barthold, S. W., Fish, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+attenuated,+noninfectious+spirochetes+in+Borrelia+burgdorferi-infected+mice+after+antibiotic+treatment.">Detection of attenuated, noninfectious spirochetes in Borrelia burgdorferi-infected mice after antibiotic treatment.</a> J Infect Dis. 186 (10), 1430-1437 (2002).</li><li>Turk, S., Williams, C., Marques, A., Pal, U., Buyuktanir, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> in Borrelia burgdorferi: Methods in Molecular Biology. , 337-346 (2018).</li><li>Hodzic, E., Feng, S., Holden, K., Freet, K. J., Barthold, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Persistence+of+Borrelia+burgdorferi+following+antibiotic+treatment+in+mice.">Persistence of Borrelia burgdorferi following antibiotic treatment in mice.</a> Antimicrob Agents Chemother. 52 (5), 1728-1736 (2008).</li></ol>

לד"ר אדריאנה מרקס יש פטנט US 8,926,989 B2; והוא יועץ מדעי ללא שכר לברית ליים העולמית ולקרן האמריקאית למחלות ליים. לסיו פינג טורק ולאלה אשמן אין קשר שעלול להוות ניגוד עניינים. התוכן של פרסום זה אינו משקף בהכרח את ההשקפות או המדיניות של מחלקת הבריאות ושירותי האנוש, וגם אזכור של שמות מסחריים, מוצרים מסחריים או ארגונים אינו מרמז על תמיכה מצד ממשלת ארה"ב.

בעוד שמחקרים בבעלי חיים שכללו חשיפה לקרציות 4,5,6,7,21 היו בעלי ערך רב בהגברת ההבנה שלנו של תגובת הפונדקאי למחלות המועברות על ידי קרציות ועקיצות קרציות, למודלים אלה יש מגבלות במידת התחזית שלהם לתגובת המארח האנושי.<sup c...

קרציות קשות (Ixodidae: Acari) הן אקטופרזיטים הניזונים מדם ברחבי העולם ומסוגלות להעביר מגוון רחב של פתוגנים, כולל חיידקים, וירוסים וטפילים, בעלי חשיבות רפואית וטרינרית רבה. קרציות Ixodid חייבות להישאר מחוברות לפונדקאי במשך ימים כדי להשלים ארוחת דם, ויש להן את היכולת להישאר מחוברות לעור תוך הימנעות מזיהוי, מניעת קרישת דם מקומית והקלה על הזנה לטווח ארוך 1,2,3. מחקרים בבעלי חיים הוכיחו כי פונדקאים שאינם מתירנים רוכשים עמידות לעקיצות קרציות עם חשיפות חוזרות ונשנות לקרציות, מה שעלול להוביל לירידה ביכולת להעביר פתוגן, בעוד שקרציות יכולות שוב ושוב לטפיל פונדקאים מתירניים. עמידות נרכשת לקרציות תלויה באופי התגובה החיסונית של הפונדקאי 4,5,6,7.
מחלות המועברות על ידי קרציות הן איום הולך וגובר בארצות הברית (ארה"ב), כאשר מספר המקרים המדווחים יותר מהוכפל בין 2004 ל -2016 8,9. בשל שינויי האקלים, הטווחים הגיאוגרפיים של הקרציות השונות ממשיכים להתרחב10,11. המחלות המובילות המועברות על ידי קרציות בארה"ב כוללות מחלת ליים, אנאפלזמוזיס, ארליכיוזיס, קדחת מנומרת, ריקטסיוזיס, בבסיוזיס, טולרמיה ומחלת וירוס פווסאן8. מחלת ליים, הנגרמת על ידי זיהום עם Borrelia burgdorferi sensu lato, היא המחלה הנפוצה ביותר המועברת על ידי קרציות בארה"ב ובאירופה12. עם כ 476,000 אנשים מאובחנים עם מחלת ליים מדי שנה בארה"ב, יש הן נטל בריאותי וכלכלי על הפרט ועל החברה 13,14,15.
Ixodes scapularis (קרצית שחורת הרגל או קרצית הצבי) היא הווקטור העיקרי למחלת ליים, כמו גם אנאפלזמוזיס, בבסיוזיס, מחלת Borrelia miyamotoi ומחלת וירוס Powassan בארצות הברית. מיני קרציות אחרים בעלי חשיבות רפואית בארה"ב כוללים קרצית כוכב בודדת ( Amblyomma americanum ), קרצית כלב אמריקאית ( Dermacentor variabilis ), קרצית שחורת רגל מערבית ( Ixodes pacificus ), קרצית עץ הרי הרוקי ( Dermacentor andersoni ), קרצית חזיר קרקע ( Ixodes cookei ), קרצית חוף האוקיינוס השקט ( Dermacentor occidentalis ), קרצית כלב חומה ( Rhipicephalus sanguineus ) וקרצית חוף המפרץ ( Amblyomma maculatum )16.
פיתוח שיטה לחשיפת מתנדבי מחקר לעקיצות קרציות תומך במחקרים המשתמשים בווקטור הטבעי כדי לחפש ראיות לזיהום, הליך המכונה xenodiagnosis 17,18,19,20,21, וללמוד עוד על חסינות הנגרמת על ידי חשיפה לקרציות, אשר יכולה לתרום לגילוי חיסון נגד קרציות 5,6,7. ההליך המתואר כאן פותח ושימש במחקר האנושי הראשון באמצעות זחל Ixodes scapularis שגודל במעבדה עבור xenodiagnosis של זיהום B. burgdorferi לאחר טיפול אנטיביוטי (NCT01143558), שפורסם בשנת 201419. המערכת שימשה בהצלחה במחקר שלב 2 שבדק אם קסנודיאגנוזה חיובית קשורה להתמדה של תסמינים לאחר טיפול אנטיביוטי במחלת ליים (NCT02446626) ובמחקר שבדק את תגובת המארח לעקיצות קרציות (NCT05036707).
פרוטוקול הליך זה מתאר את תהליך יצירת חבישת ההכלה, הליך מיקום הקרציות והליך הסרת הקרציות, כמו גם את הטיפול באתר הדרוש לשמירה על חבישת ההכלה. הפרטים לגבי מושבת הקרציות I. scapularis נטולת הפתוגנים ונהלי החשיפה לקרציות המשמשים למחקרים שצוטטו לעיל תוארו בעבר19,22. מתודולוגיה זו מציעה כלי מחקר גמיש שניתן להתאים לחקר היבטים שונים של תגובת הפונדקאי האנושי לעקיצות קרציות, יעילותן של תרופות למניעת קרציות, כמו גם מחלת ליים ומחלות אחרות המועברות על ידי קרציות.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>20 G needle</td>
			<td>Any brand</td>
			<td></td>
			<td>For puncturing the vial cap.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3&#34; x 3&#34; containment dressing</td>
			<td>Monarch Labs Names</td>
			<td>LeFlap</td>
			<td>https://www.monarchlabs.com/ordering</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4&#34; x 4&#34; extra-thin hydrocolloid dressing</td>
			<td>ConvaTec</td>
			<td>DuoDerm</td>
			<td>https://www.convatec.com/products/advanced-wound-care/brand-names/pc-wound-duoderm-granluflex/duoderm-extra-thin-dressing/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4&#34; x 4&#34; gauze</td>
			<td>Monarch Labs Names</td>
			<td></td>
			<td>For cleaning skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clean water or saline</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For cleaning skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Moisture barrier (e.g. 7&#34; x 7&#34;)</td>
			<td>AquaGuard</td>
			<td>TIDI</td>
			<td>For showering, ttps://www.tidiproducts.com/product-listing/aquaguard-shower-cover-sheets&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-adhesive foam dressing</td>
			<td>Coloplast</td>
			<td>Biatain</td>
			<td>https://www.coloplast.us/biatain-non-adhesive-en-us.aspx</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Roll of 2&#34; hypoallergenic tape</td>
			<td>Monarch Labs Names</td>
			<td>Durapore</td>
			<td>For reinforcing containment dressing.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Roll of adhesive tape</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For trapping ticks</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vials for collection (e.g. cryovials)</td>
			<td>Ependorf</td>
			<td>ECC200</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a model for experimental exposure of humans to larval ixodes scapularis ticks

מחלות המועברות על ידי קרציות הן בעיה משמעותית בבריאות הציבור בארצות הברית ובעולם. קרציות מחייבות פרוקי רגליים הניזונים מדם; קרצית איקסודיד חייבת להישאר צמודה לעור הפונדקאי ולהשלים את תהליך ההזנה הרב-יומי שלה כדי לרכוש את ארוחת הדם שלה. חשיפת בעלי חיים לקרציות היא פרקטיקה נפוצה לחקר תגובות פונדקאים לעקיצות קרציות ולמחלות המועברות על ידי קרציות. פיתחנו את הנוהל, ערכנו את המחקר הראשון בבני אדם, ופרסמנו את הממצאים על חשיפת מתנדבים אנושיים לקרציות Ixodes scapularis של זחלים לא נגועים. מאמר זה מתאר את המתודולוגיה המשמשת לבניית הלבשת הבלימה, כיצד למרוח ולהצמיד את הקרציות לפונדקאי, כיצד לשמור על החבישה וכיצד להסיר את הקרציות מהפונדקאי. חשיפת מתנדבים לעקיצות קרציות היא הליך ניסיוני וחייבת להתבצע תחת פרוטוקול מחקר קליני המאושר על ידי הרשויות הרגולטוריות המתאימות. שיטה זו מאפשרת מחקר תרגומי כדי להבין טוב יותר את התגובה האנושית לעקיצות קרציות ולטפח פיתוח אבחון, מניעה וטיפולים למחלות המועברות על ידי קרציות.

Hard ticks (Ixodidae: Acari) are obligate blood-feeding ectoparasites that occur worldwide and are capable of transmitting a broad range of pathogens, including bacteria, viruses, and parasites, of major medical and veterinary importance. Ixodid ticks must remain attached to the host for days to complete a blood meal, and they have the capacity to stay attached to the skin while avoiding recognition, preventing local blood coagulation, and facilitating long-term feeding1,2,3. Animal studies have demonstrated that non-permissive hosts acquire resistance to tick bites with repeated tick exposures, which can lead to a decreased ability to transmit a pathogen, while ticks can repeatedly parasitize permissive hosts. Acquired tick resistance is dependent on the nature of the host immune response4,5,6,7.
Tickborne diseases are an increasing threat in the United States (US), with the number of reported cases more than doubling between 2004 and 20168,9. Due to climate change, the geographic ranges of different ticks continue to expand10,11. The leading tickborne diseases in the US include Lyme disease, anaplasmosis, ehrlichiosis, spotted fever rickettsiosis, babesiosis, tularemia, and Powassan virus disease8. Lyme disease, caused by infection with Borrelia burgdorferi sensu lato, is the most common tickborne disease in the US and Europe12. With approximately 476,000 individuals diagnosed with Lyme disease annually in the US, there is both a public health and economic burden to individuals and to society13,14,15.
Ixodes scapularis (the black-legged or deer tick) is the primary vector for Lyme disease, as well as anaplasmosis, babesiosis, Borrelia miyamotoi disease, and Powassan virus disease in the US. Other medically important tick species in the US include Amblyomma americanum (Lone star tick), Dermacentor variabilis (American dog tick), Ixodes pacificus (Western black-legged tick), Dermacentor andersoni (Rocky Mountain wood tick), Ixodes cookei (Groundhog tick), Dermacentor occidentalis (Pacific Coast tick), Rhipicephalus sanguineus (brown dog tick), and Amblyomma maculatum (Gulf Coast tick)16.
Developing a method to expose research volunteers to tick bites supports studies using the natural vector to search for evidence of infection, a procedure known as xenodiagnosis17,18,19,20,21, and to learn more about immunity induced by exposure to ticks, which can contribute to the discovery of an anti-tick vaccine5,6,7. The procedure described here was developed and used in the first human research study using laboratory-reared Ixodes scapularis larva for xenodiagnosis of B. burgdorferi infection after antibiotic therapy (NCT01143558), published in 201419. The system has been successfully used in a phase 2 study investigating whether a positive xenodiagnosis correlated with the persistence of symptoms after antibiotic treatment of Lyme disease (NCT02446626) and in a study exploring the host response to tick bites (NCT05036707).
This procedure protocol describes the process for creating the containment dressing, the tick placement procedure, and the tick removal procedure, as well as the site care needed to maintain the containment dressing. The details regarding the pathogen-free I. scapularis tick colony and tick exposure procedures used for the above-cited studies have been previously described19,22. This methodology offers a flexible research tool that can be adapted to studying different aspects of the human host response to tick bites, the effectiveness of tick prevention medications, as well as Lyme disease and other tickborne illnesses.

מחבר זרקור: מודל חשיפה אנושית מבוקרת לחקר קרציות ומחקרי מחלת ליים

מודל לחשיפה ניסיונית של בני אדם לקרציות זחל Ixodes scapularis

This protocol offers an effective method for a controlled exposure of humans to ticks. For research, the protocol can be used to study the human immune response tick bites, as well as the development of diagnostics and preventions against tick-borne diseases. There were no published procedures for placing ticks on human research volunteers.The challenge was to develop a system that allowed the ticks to feed for days while also being comfortable for the participants. This model contains the ticks for the duration of the feeding and allow the research participants to proceed with their daily activities with minor lifestyle adjustments.

המחקר הראה כי ההליך בטוח ונסבל היטב, כאשר תופעת הלוואי העיקרית היא גירוד קל במקום העקיצות, שנצפה ב -58% מההליכים. לא היו תופעות לוואי חמורות הקשורות להליך בעת שימוש בזחל נקי במעבדה I. scapularis קרציות19. ב-43 ההליכים שנערכו, אחוז ההחלמה הממוצע של קרציות מחוברות בהשוואה לקרציות שהו?...

Watch this Scientific Journal Video about A Model for Experimental Exposure of Humans to Larval Ixodes scapularis Ticks at JoVE.com

מאמר זה מציג את המתודולוגיה לחשיפת בני אדם לזחל Ixodes scapularis לצורך מחקר קליני. הטכניקה פשוטה יחסית, נסבלת על ידי מתנדבי המחקר, וניתנת לשינוי בהתאם לצרכי הניסוי. מחקר כזה בבני אדם חייב להתבצע תחת פרוטוקולי מחקר קליני שאושרו על ידי הרשויות הרגולטוריות המתאימות.

Tickborne diseases are a significant public health problem in the United States and worldwide. Ticks are obligate blood-feeding arthropods; an ixodid tick ...

פרוטוקול זה מציע שיטה יעילה לחשיפה מבוקרת של בני אדם לקרציות. לצורך מחקר, הפרוטוקול יכול לשמש לחקר התגובה החיסונית האנושית לעקיצות קרציות, כמו גם לפיתוח אבחון ומניעה נגד מחלות המועברות על ידי קרציות. לא פורסמו נהלים להנחת קרציות על מתנדבי מחקר בבני אדם.האתגר היה לפתח מערכת שתאפשר לקרציות להיזון במשך ימים ובה בעת תהיה נוחה למשתתפים. מודל זה מכיל את הקרציות למשך ההאכלה ומאפשר למשתתפי המחקר להמשיך בפעילותם היומיומית עם התאמות קלות באורח החיים.

a-model-for-experimental-exposure-humans-to-larval-ixodes-scapularis

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

A Model for Experimental Exposure of Humans to Larval Ixodes scapularis Ticks

345 Views.  National Institutes of Health. פרוטוקול זה מציע שיטה יעילה לחשיפה מבוקרת של בני אדם לקרציות. לצורך מחקר, הפרוטוקול יכול לשמש לחקר התגובה החיסונית האנושית לעקיצות קרציות, כמו גם לפיתוח אבחון ומניעה נגד מחלות המועברות על ידי קרציות. לא פורסמו נהלים להנחת קרציות על מתנדבי מחקר בבני אדם.האתגר היה לפתח מע...

Video: מחבר זרקור: מודל חשיפה אנושית מבוקרת לחקר קרציות ומחקרי מחלת ליים

Tickborne diseases are a significant public health problem in the United States and worldwide. Ticks are obligate blood-feeding arthropods; an ixodid tick must remain attached to the skin of the host and complete its multi-day feeding process to acquire its blood meal. Exposing animals to ticks is a common practice for studying host responses to tick bites and tickborne diseases. We developed the procedure, conducted the first human research study, and published the findings on exposing human volunteers to uninfected larval Ixodes scapularis ticks. This article describes the methodology used to construct the containment dressing, how to apply and secure the ticks to the host, how to maintain the dressing, and how to remove the ticks from the host. Exposing volunteers to tick bites is an experimental procedure and must be performed under a clinical research protocol approved by the appropriate regulatory authorities. This method allows for translational research to better understand the human response to tick bites and foster the development of diagnostics, prevention, and therapies for tickborne diseases.

This article presents the methodology for exposing humans to larval Ixodes scapularis for clinical research. The technique is relatively simple, tolerable by the research volunteers, and can be modified according to experimental needs. Such research involving human subjects must be conducted under clinical study protocols approved by the appropriate regulatory authorities.

Dressing Preparation for Tick Placement and Containment to Study Human Response to Tick Bites

To begin, photocopy the three-by-three-inch hydrocolloid containment dressing along the side of the measurement lines to create a measurement template. Cut the photocopied template along the one-inch line and then the two-inch line to create a two-inch circle with a one-inch center. Use this template to cut the non-adhesive foam dressing, creating a two-inch circle with a one-inch center.Use the same template to cut a two-inch circle in the center of the four-by-four-inch extra thin hydrocolloid dressing. Cut the hydrocolloid layer of the three-by-three-inch containment dressing at the 1 1/2-inch line. Pull back the paper liner of the hydrocolloid layer of the containment dressing to expose the adhesive.Place the cut foam dressing within the two-inch circle of the adhesive.

הכנת הלבשה להנחת קרציות והכלתן לחקר תגובת האדם לעקיצות קרציות

Exposing Humans to Larval Ixodes scapularis to Study Host Response to Tickborne Diseases and Tick Bites

To begin, create a visible field by placing a white sheet around the placement area. Use a four-by-four inch gauze pad, dampened with clean water or saline, to clean the skin of the placement site. Pat dry the site with clean gauze.Take the prepared containment dressing and remove the adhesive liner from the hydrocolloid side. Affix the dressing to the skin at the placement site. Break the wooden swab in half to expose jagged ends.Now open the vial of ticks carefully. Use the jagged end of the wooden swab to transfer active ticks from the vial to the skin within the containment dressing. Then remove the adhesive liner from the mesh layer of the containment dressing, and close the mesh layer over the opening, ensuring the adhesive is securely attached.Apply the prepared four-by-four inch extra thin hydrocolloid dressing over the containment dressing for additional security. Provide a water barrier cover and two inch hypoallergenic tape to the research participant. Periodically check the adhesion of the dressing's edges to the skin.Apply additional tape to reinforce the edges as needed. Puncture holes in the vial cap using a 20 gauge needle if preservation of live ticks is necessary. Use nylon or polyester mesh and the cap to seal the vial.Label the tick collection vials with the required identifiers. To maintain humidity, place the tick vial in a sealable bag with a moist sponge. Arrange white sheets around the bandage site.Using alcohol wipes, carefully remove the bandage from the skin. Place the removed bandage in the collection basin and examine it for the presence of detached ticks. Assess the skin at the placement site for attached ticks.Use fine tip forceps to remove the attached ticks. In the first human xenodiagnosis study, a total of 43 procedures were conducted. When compared to the number of ticks placed, the mean percentage of attached ticks recovery was approximately 45%