L'efficacia di Air Stripping in due di salmonidi, trota iridea (Oncorhynchus Mykiss) e la trota fario (Salmo Trutta Morpha fario)

Riepilogo

L'obiettivo principale di questo studio è quello di standardizzare e testare il metodo pneumatico (aria di smontaggio) di raccolta delle uova di trota iridea e fario. Questo metodo consente di efficace e semplice raccolta delle uova senza la necessità di massaggio addome pesce.

Abstract

Raccolta delle uova è una delle procedure più cruciali durante la riproduzione dei pesci in incubatoi salmonidi. Metodi classici implicano l'uso di mano massaggio su addomi pesce per espellere le uova. Un metodo alternativo utilizza la pressione del gas iniettato nella cavità del corpo, causando il rilascio successivo delle uova. Questo metodo è creduto per avere effetti meno negativi sulla qualità sia il benessere e l'uovo della broodstocks. Nel presente documento, si confrontano i risultati di aria e mano stripping metodi riguardo alla sopravvivenza di un anno e uovo quantità e qualità in due di salmonidi, trota iridea (Oncorhynchus mykiss) e la trota fario (Salmo trutta morpha fario). I nostri risultati indicano che strippaggio ha reso una migliore qualità delle uova e maggiore tasso di sopravvivenza di un anno in trota iridea. Inoltre, strippaggio ha provocato il più basso tasso di mortalità rispetto al gruppo sottoposto a mano stripping (25% vs. 35%). Il tasso di pH e schiusa del gruppo mano spogliato era inferiore rispetto a quelli del gruppo air spogliato. Nel caso di trota fario, la qualità delle uova ottenute da mano e metodi strippaggio era simile; Tuttavia, le perdite di un anno in pesce erano più alte nel gruppo aria spogliato (15% rispetto allo 0% in mano spogliato pesce). Anche se i vantaggi di air stripping metodo sopra mano stripping in termini di qualità delle uova potrebbero non essere osservati in tutte le specie di salmonidi, la procedura di strippaggio potrebbe essere un'opzione di promessa da adottare nelle avannotterie come assicura un elevato livello di riproducibilità e l'efficienza.

Introduzione

La trota iridea (Oncorhynchus mykiss) e la trota fario (Salmo trutta morpha fario) appartengono alla famiglia Salmonidae Salmoniformes¹. La produzione di queste due specie in acquacoltura globale ha guadagnato una crescita rapida, a causa della loro importanza commerciale e ricreativo. In Polonia, produzione di salmonidi è di circa 20 000 tonnellate, con trota iridea essendo la specie dominante. D'altra parte, la trota fario rappresenta un'importante fonte di risorse di pesci d'acqua dolce in Europa a causa del suo valore commerciale in acquacoltura e importanza per la pesca sportiva. In molti ecosistemi acquatici, è minacciata l'esistenza di popolazioni di trota fario. Di conseguenza, riproduzione artificiale è stata applicata per rifornire le popolazioni locali di questa specie².

Trota iridea e fario raggiungono la maturità sessuale solitamente all'età di tre, con i maschi fare maturare un anno prima rispetto a femmine¹. In condizioni artificiali, uova e sperma di trota iridea e fario è solitamente raccolti dal delicato massaggio addominale. In pratica, su piccola scala, un metodo di raccolta delle uova mano-stripping è conveniente. Tuttavia, su larga scala, il metodo mano-stripping può essere laborioso e faticoso. Di conseguenza, questa tecnica può comportare le uova rotte a causa della stanchezza dei lavoratori incubatoio. Rottura delle uova spesso conduce ad una diminuzione del pH del fluido ovarico e il rilascio di tuorlo d'uovo, entrambi i quali influenzare negativamente la fecondazione delle uova³. Inoltre, questo metodo tradizionale di raccolta delle uova (premendo ripetutamente dell'addome) può anche provocare i riproduttori mortalità causata tramite l'infezione della pelle associato con il deterioramento della barriera protettiva del muco.

Pneumatico metodo di raccolta delle uova era usata nel Regno Unito nel 1957⁴. Il metodo si basa sull'iniezione di gas (aria, azoto o ossigeno) nella cavità del corpo per espellere le uova tramite la pressione del gas. Questa tecnica facile e veloce è stata applicata con successo a salmonidi senza effetti collaterali negativi sul pesce⁴. Recentemente, questo metodo è stato utilizzato in specie selvatiche (luccio, Esox lucius) per raccogliere le uova mature in condizioni artificiali⁵. È stato dimostrato che aria spogliato uova aveva maggiore fecondazione e da cova tariffe rispetto a mano spogliato uova, indipendentemente dalla soluzione utilizzata per fertilizzazione (Woynarovich soluzione, Billard buffer o incubatoio acqua)⁵.

L'obiettivo principale di questo studio era di verificare il metodo pneumatico (aria di smontaggio) di raccolta delle uova di trota iridea e fario rispetto a mano tradizionale metodo di spogliatura. L'efficienza di entrambi i metodi (volume delle uova ottenute) e tempo di raccolta, la qualità dei gameti (pH fluido ovarico), come pure la mortalità tasso e post-deposizione delle uova da cova sono stata confrontata.

Protocollo

Procedure sono state effettuate in conformità con il comitato locale sull'etica di animale esperimenti in Olsztyn, Polonia.

1. preparazione del materiale

1. Utilizzare una siringa ed un ago per iniezione di gas nella cavità del corpo di pesce.
2. Impostare la pressione del gas a 0.5 bar e mantenere questa pressione per essere inferiore a 1 bar in tutto.
3. Controllare il flusso di aria. Per i salmonidi, 1,5 L/min è la velocità più efficiente di esaurimento del gas. Mantenere la velocità ottimale perché maggiore velocità potrebbe non ottenere tutte le uova, mentre una velocità più lenta potrebbe prolungare inutilmente la procedura.
4. Collegare la siringa con un ago avvitato (0.8-1.2 mm di diametro) per evitare la separazione dell'ago causata dalla pressione del gas.

2. aria di deposizione delle uova

1. Anestetizzare il pesce con 0,2% Propiscin. Mettere il pesce in un bagno di acqua con il 0,2% Propiscin e attendere che il pesce non risponde.
2. Asciugare con cura prima deposizione strofinando con un panno di cotone asciutto.
3. Posto il pesce il bancale inclinato circa 35-40°, il suo lato di coda verso il basso. Con una leggera spinta dell'addome del pesce, controllare il flusso delle uova dal tratto genitale. Se non sono presenti le uova, il pesce non deve essere generato.
4. Posizionare un contenitore coperto di maglia sotto la papilla di pesce per raccogliere le uova.
5. Inserire rapidamente l'ago sotto le pinne addominali.
6. Liberamente rimuovere le uova dal gas fino a quando solo singolare uova vengono rimossi dal corpo dei pesci.
7. Massaggiare delicatamente l'addome per rimuovere l'eccesso di gas dal corpo dei pesci.
8. Dopo la deposizione, trasferire delicatamente il pesce ad un serbatoio con flusso d'acqua. Pesce rilasciato al serbatoio dopo la deposizione delle uova di aria potrebbe inizialmente nuotare sulla superficie dell'acqua. Dopo alcuni minuti il pesce rilascia il gas rimanente durante il nuoto e inizia a nuotare normalmente.
   Nota: Le uova ottenute sono molto pulite e libere da contaminazioni di sangue o feci.

Risultati

Maschi maturi e femmine di trota iridea (età 2 +, 1700 ± 328 g) e trota fario (età 3 +, 1900 ± 435g) sono stati ottenuti da the Salmonid Fish Hatchery (Rutki-Żukowo, nell'entroterra della pesca Institute a Olsztyn, Polonia). I maschi e le femmine sono state collocate in serbatoi separati con un volume di circa 5 m³. La temperatura dell'acqua era 12 ± 1 ° C. Prima della modifica, i pesci sono stati anestetizzati con 0,2% Propiscin. I pesci sono stati divisi i...

Discussione

Il pneumatico metodo di raccolta delle uova di pesce, anche se richiede più tempo rispetto al metodo tradizionale (stripping mano), può garantire un'alta qualità degli ovociti stagionati (questo lavoro). Questo è legato al basso rischio di rottura meccanica delle uova durante l'applicazione di questa procedura. PH elevato del fluido dell'ovaia, come pure un aumento del tasso di fertilizzazione, attestano l'utilità del metodo pneumatico. Nel complesso, l'aria, metodo di raccolta delle uova di sbancamento nella riprod...

Materiali

Name	Company	Catalog Number	Comments
Glycine pure P.A.	AVANTOR	527560117	sperm activating buffer
Trizma base	Sigma Aldrich	T1503	sperm activating buffer
Sodium chloride Bioreagent	Sigma Aldrich	S5886	sperm activating buffer
Calcium chloride anhydrous	Sigma Aldrich	C4901	sperm activating buffer
Propiscin (0.2% etomidate solution)	IRS Olsztyn, Poland	not indicated
compressor	Thomas  Sheboigan WI USA	DT/SR 070800001882
reduction valve	Camozzi	cRJUS U7J
air hose	ZEC T.P.U.	SH.98
syrgine	EFD	7012118
Air spawning stage	Biopasz, Poland	PNEU001
Orion Ross Ultra electrode	Thermo Scientific, Waltham, MA, USA	8102BNUWP