1. Identificazione del punzone dell'orecchio

I codici di punzonatura auricolare sono stati sviluppati come metodo rapido ed economico per etichettare i singoli animali. Esistono tre stili di pugni all'orecchio: il pugno a forbice, il pugno al pollice e il pugno a leva. L'orecchio destro dell'animale è usato per le singole cifre, l'orecchio sinistro per decine e il centro delle orecchie per centinaia.

1. Trattenere l'animale in modo che le orecchie siano facilmente accessibili. La maggior parte dei topi sono marcati con l'orecchio per l'identificazione individuale allo svezzamento. Ciò richiede una manipolazione delicata a causa delle loro dimensioni più piccole e fragili. Alcuni topi hanno meno probabilità di lottare se gli arti posteriori possono poggiare su una superficie come una parte superiore della gabbia o un piano di lavoro.
2. Determinare i pugni all'orecchio necessari per corrispondere al numero sperimentale dell'animale o per identificarlo all'interno di una gabbia.
   1. I punzoni saranno tacche o fori a seconda del codice utilizzato.
   2. L'ultimo numero sul marchio auricolare viene spesso utilizzato come identificatore del punzone auricolare quando è il metodo secondario di identificazione.
   3. Se gli animali sono in uno studio a breve termine in gruppi di gabbie stabili, possono ricevere numeri sequenziali. Questo viene spesso fatto quando non ci sono marchi auricolari presenti.
3. Fai il pugno all'orecchio.
   1. Per fare una tacca, il pugno è posto sul bordo della pinna dell'orecchio.
   2. Per fare un foro, posizionare l'orecchio nel pugno in modo che il foro del punzone sia posizionato lontano dal margine della pinna nella posizione desiderata.
   3. Applicare una pressione sul pugno del pollice o della leva o chiudere il punzone a forbice in modo rapido e deciso per tagliare la pelle dell'orecchio.
   4. Sollevare delicatamente il pugno lontano dall'orecchio quando si usano i pugni del pollice o della leva. Apri il punzone a forbice per rimuoverlo dall'orecchio.
   5. Evitare di tirare o torcere il pugno per evitare di strappare l'orecchio.
   6. I pugni diventano noiosi dopo il tempo. Se un pugno non riesce a tagliare l'orecchio, rilascia il pugno e seleziona un nuovo pugno all'orecchio. Riposizionare il nuovo punzone nello stesso punto.
4. Pulire i punzoni dopo ogni utilizzo.
   1. Tutti i tipi di punzonatura si opacizzeranno se autoclavati. Si raccomanda di pulirli con un disinfettante e risciacquati con alcool. Asciugarli accuratamente per evitare la ruggine.
   2. I punzoni auricolari da utilizzare per la PCR vengono regolarmente immersi per 3 minuti in una soluzione per rimuovere il DNA o l'RNA residuo. Prima dell'uso vengono risciacquati in alcool e asciugati.

Figura 1. Punzonatura dell'orecchio nei topi usando il pugno a forbice.

2. Identificazione del marchio auricolare

I marchi auricolari personalizzati possono essere ordinati dai produttori con codici alfabetici e / o numerici, il che consente la differenziazione di ceppi di topo o investigatori. I marchi auricolari possono essere fatti di metallo o plastica.

1. Selezionare i marchi auricolari appropriati per gli animali da identificare. Esistono diversi stili di applier disponibili presso i produttori di marchi auricolari. Assicurati di ordinare l'applier che è per la dimensione e lo stile specifici dei marchi auricolari utilizzati.
2. Rimuovere delicatamente un tag dal supporto di cartone e orientarlo nell'applier in modo che l'estremità con il foro sia posizionata sopra l'area dentellata dell'applier. L'estremità appuntita del tag dovrebbe essere opposta alla tacca.
3. Trattenere l'animale in modo che le orecchie siano facilmente accessibili. Gli animali possono avere meno probabilità di lottare se gli arti posteriori possono poggiare su una superficie, come una parte superiore della gabbia o un piano di lavoro.
4. Posizionare correttamente il marchio auricolare per il posizionamento.
   1. Posiziona il punto del marchio auricolare il più profondamente possibile nella concha dell'orecchio, in modo che i numeri del tag siano rivolti verso la parte posteriore dell'animale.
   2. Per avere i numeri del marchio auricolare rivolti verso il naso dell'animale, posizionare la punta del tag alla base della pinna sul retro dell'orecchio.
5. Applicare il tag.
   1. Spremere saldamente l'applier chiuso. Il marchio auricolare forerà l'orecchio e si bloccherà insieme.
   2. Rilascia l'applier e l'orecchio taggato cadrà dall'applier.

Figura 2. Un mouse con un marchio auricolare posizionato correttamente sulla pinna.

6. Rimuovere i marchi auricolari in metallo.
   NOTA: A volte, i marchi auricolari in metallo possono causare irritazione e gonfiore dell'orecchio. Il gonfiore e l'irritazione spesso portano a infezioni della pinna. Il trattamento dovrebbe includere la rimozione del tag; tuttavia, in caso di grave irritazione o infezione, l'animale potrebbe aver bisogno di essere anestetizzato.
   1. Rimuovere i detriti intorno all'etichetta con un applicatore con punta di cotone inumidito con una soluzione antisettica.
   2. Tagliare la parte superiore del loop del tag da un bordo all'altro con taglierine a filo. Non tagliare la superficie piana, in quanto ciò comprimerà l'etichetta, pizzicherà l'orecchio e causerà ulteriori danni.
   3. Evitare di applicare la coppia durante il taglio per evitare di strappare l'orecchio.
7. Usa gli ermoni per stendere le estremità tagliate del marchio auricolare.
   1. Guidare delicatamente il marchio auricolare attraverso e fuori dall'orecchio usando gli omestati. Ridurre il trauma evitando l'allargamento del foro di perforazione e facendo scivolare fuori il tag in modo che l'estremità crimpata non passi attraverso l'orecchio.
   2. Una volta che il tag è sparito, pulire l'orecchio con un applicatore di cotone imbevuto di antisettico.
   3. Se c'è una scarica purulenta dall'orecchio, può essere necessario un trattamento di follow-up e si raccomanda la consultazione con il personale veterinario per la valutazione.