1. Applicazione topica

1. Prima di applicare unguenti e creme, rimuovere tutta la pelliccia dalla zona attraverso l'uso di una crema depilatoria o da barba.
2. Pulire accuratamente e asciugare la pelle.
3. Applicare la sostanza direttamente sulla pelle con un applicatore con punta di cotone o tramite una goccia posizionata direttamente per evitare il contatto da parte del tecnico.
4. Per ottenere i migliori risultati, applicare diversi strati sottili di unguento o crema anziché un'applicazione una tantum di uno strato spesso.
5. Applicare il liquido separando i capelli e applicando una goccia sulla pelle esposta.
6. Quando si applica una sostanza per via topica, esiste una possibilità di assorbimento sistemico a causa dell'animale che pulisce l'area. Dovrebbero essere adottate misure preventive per evitare l'ingestione accidentale o la rimozione precoce della sostanza. Piccoli collari o scudi sono disponibili per impedire all'animale di raggiungere le parti del corpo colpite. Possono anche essere necessari alloggi individuali per prevenire l'allogrooming da parte dei compagni di gabbia.

Figura 1. Applicazione topica nei topi.

2. Dosaggio orale

1. Quando si forniscono composti agli animali tramite mangime o acqua, deve essere calcolata una dose minima giornaliera basata sul peso corporeo. Il peso medio del ceppo di topo o di ratto utilizzato nell'esperimento può essere utilizzato per effettuare i calcoli, a meno che non sia specificato che ciascun animale deve essere pesato e la dose figurata per ogni individuo.
2. Per i protocolli che richiedono che l'assunzione di cibo e / o acqua sia misurata con precisione, gli animali devono essere alloggiati individualmente.
3. Mangimi o dolcetti specializzati possono essere prodotti per soddisfare esigenze sperimentali.
   1. Sostituire la dieta standard con quella formulata, che consente agli animali di ingerire il composto durante il giorno.
   2. Potrebbe essere necessario sostituire il cibo più frequentemente rispetto al cibo standard a causa dell'instabilità del composto.
4. Le sostanze possono anche essere somministrate sciogliendole nell'acqua potabile, consentendo agli animali di ricevere un composto durante il giorno.
   1. Una piccola quantità di zucchero viene aggiunta all'acqua per renderla appetibile. La quantità esatta da aggiungere è determinata dall'accettazione dell'acqua da parte dei topi. Utilizzare l'incremento più piccolo possibile.
   2. La frequenza di cambiare l'acqua dipende dalla stabilità del composto. Alcune sostanze possono essere sensibili alla luce o precipitare nel tempo.

3. Procedura Gavage

Per i topi vengono utilizzati aghi dosature 20-25 x 1,5 in aghi di dosaggio dritti o curvi. Per i ratti, vengono utilizzati aghi dosature 18-20 x 2-3 in aghi di dosaggio dritti o curvi. Questi sono disponibili come aghi in acciaio inossidabile riutilizzabili o come aghi monouso. Gli aghi monouso possono avere un albero in metallo o plastica flessibile con una punta in silicone.

1. Attaccare l'ago dosativa a una siringa selezionata in base al volume e alla viscosità della soluzione di prova. Per il dosaggio di liquidi densi, è preferibile una siringa Luer lock. Questi sono generalmente disponibili a partire da una dimensione di 3 cc che ha graduazioni di 100 μl. Questo potrebbe non essere adatto per volumi più piccoli o quando vi è la necessità di volumi di dose esatta con incrementi più piccoli.
2. Applicare la siringa all'ago in modo che le graduazioni sulla canna possano essere lette senza girare l'ago. Una volta che l'ago è stato inserito nell'esofago, qualsiasi rotazione può rompere l'esofago, con conseguente morte dell'animale.
3. Riempire una siringa con il volume appropriato di articolo da somministrare (volume ottimale = 5 ml/kg e volume massimo = 20 ml/kg)⁴
4. La giusta moderazione è essenziale per questa procedura. ⁷
   1. Trattenere manualmente i topi afferrando la pelle alla base della testa e scruffandoli. È importante che il corpo sia tenuto in modo tale da essere sospeso in linea retta dalla testa alla coda. Qualsiasi torsione del corpo impedirà il posizionamento dell'ago gavage nell'esofago.
   2. Afferrare saldamente la collottola in modo che la testa abbia un movimento minimo da un lato all'altro. I quarti posteriori devono essere stabilizzati per impedire la rotazione del corpo.
   3. Per imbavagliare un topo, afferralo sulle spalle usando l'indice e il medio su ciascun lato del collo e il palmo sulla schiena dell'animale. Il pollice, il terzo e il quarto dito dovrebbero circondare il torace per impedire all'animale di essere in grado di muoversi avanti o indietro. La posizione delle dita su ciascun lato del collo impedisce al ratto di girare la testa.
   4. È importante che il corpo sia in linea retta e non attorcigliato per aiutare nel posizionamento dell'ago del gavage senza danni alla bocca, alla faringe, all'esofago o allo stomaco.
   5. Assicurati che la testa non abbia un movimento eccessivo da un lato all'altro.
   6. I quarti posteriori possono essere stabilizzati per impedire la rotazione del corpo. Ciò si ottiene consentendo ai piedi posteriori di appoggiarsi sul bancone o sulla parte superiore della gabbia.
5. Somministrazione della sostanza
   1. Posizionare l'ago con la curva rivolta verso il basso e in linea con la curva naturale del collo. Introdurre l'ago in bocca dal lato destro o sinistro, tra gli incisivi e i molari ad angolo verso la parte posteriore della faringe.
   2. Una volta che l'ago si trova nella cavità orale, inclinare la testa all'indietro usando l'ago gavage fino a quando il naso è puntato verso l'alto. Questo è particolarmente importante quando si usano aghi dritti. L'ago dovrebbe scivolare facilmente nell'esofago. Non forzare l'ago verso il basso. Se si avverte resistenza, eseguire l'ago e riprovare.
   3. Una volta che l'ago è in posizione nello stomaco, depositare delicatamente il composto.
   4. Rimuovere l'ago, assicurandosi che non avvenga alcuna rotazione di un ago curvo.
   5. Se l'animale inizia a lottare, rimuovere l'ago dosante e trattenere l'animale in modo più sicuro.
   6. Durante l'esecuzione della procedura, se l'animale mostra segni di cianosi o difficoltà respiratoria, o se c'è una soluzione che scorre dalla sua bocca, l'ago dosatore deve essere immediatamente rimosso e l'animale rilasciato nella sua gabbia.
   7. In generale, quando si imbavagliano ratti e topi, in particolare con una sostanza caustica, è una pratica raccomandata consegnare inizialmente una piccola quantità - per testare la tosse - prima che venga somministrato l'intero volume. In questo modo, se l'ago è posizionato in modo errato, il volume consegnato ai polmoni è piccolo e l'animale ha maggiori possibilità di recupero.

Figura 2. Gavage orale nei topi (a sinistra) e nei ratti (a destra).