Per iniziare, raccogliere i campioni e incubarli per 30-60 minuti a temperatura ambiente per liquefarli completamente. Quindi, mescolare il campione e caricare sette microlitri in una camera per il conteggio degli spermatozoi preriscaldata a 37 gradi Celsius. Posizionare la camera su un tavolino preriscaldato di un microscopio a luce diretta.
Successivamente, apri il software computerizzato di analisi dello sperma e fai clic su mot per accedere al modulo di motilità e concentrazione. Selezionare la configurazione che corrisponde alle condizioni dello sperma umano. Analizza in modo casuale 10 campi diversi per camera facendo clic sul pulsante Analizza.
Quindi fare clic su Risultati per ottenere la concentrazione e la motilità del campione. Per preparare le cellule alla respirometria ad alta risoluzione, centrifugare prima i campioni a 400-500 G per 10 minuti a temperatura ambiente. Quindi, rimuovere il plasma seminale e risospendere gli spermatozoi in due millilitri di terreno appropriato.
Ripetere la valutazione dello sperma con il software di analisi dello sperma assistito da computer per gli studi sulla concentrazione degli spermatozoi.
