Inizia analizzando le cellule HEK293T trasfettate utilizzando un microscopio a fluorescenza invertita. Una volta che le cellule sono state focalizzate utilizzando la luce in campo chiaro, passare alla lunghezza d'onda di eccitazione fluorescente mCherry di 587 nanometri e alle lunghezze d'onda di emissione di 610 nanometri. Dopo aver spento la luce in campo chiaro, verificare la fluorescenza delle cellule per confermare l'espressione di ZnT1 mCherry.
Per preparare la soluzione di caricamento del colorante, prelevare quattro microlitri di soluzione colorante fluorescente specifica per lo zinco. Quindi aggiungere quattro microlitri di acido pluronico al 10%. Mescolare la soluzione pipettando su e giù e trasferirla in una provetta da 1,5 millilitri.
Aggiungere 750 microlitri di soluzione di lavaggio nella soluzione preparata e agitare vigorosamente il tubo. Anche in questo caso, aggiungere 750 microlitri di soluzione di lavaggio. Una volta vortex, aggiungere 750 microlitri di questa soluzione in due pozzetti di una nuova piastra di coltura a sei pozzetti e coprirla con un foglio di alluminio.
Usando una pinzetta, trasferisci un vetrino coprioggetto da 13 millimetri dalla piastra HEK293T cell precedentemente coltivata in una piastra a sei pozzetti. Dopo aver coperto la piastra con un foglio, agitarla delicatamente per 15-20 minuti e sostituire la soluzione di carico del colorante con la soluzione di lavaggio preparata. Una volta coperta la piastra, agitarla nuovamente per 20 minuti.
