SN è stato sostenuto da una borsa post-dottorato dal Initiative Tissue Engineering Pittsburgh. DOZ è supportata da una sovvenzione concessa dalla Fondazione di Ginevra.

<ol>
	<li>Natesan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+bilayer+construct+controls+adipose-derived+stem+cell+differentiation+into+endothelial+cells+and+pericytes+without+growth+factor+stimulation.">A bilayer construct controls adipose-derived stem cell differentiation into endothelial cells and pericytes without growth factor stimulation.</a> Tissue Eng. Part A. 17, 941-953 (2011).</li><li>Nuttelman, C. R., Tripodi, M. C., Anseth, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthetic+hydrogel+niches+that+promote+hMSC+viability.">Synthetic hydrogel niches that promote hMSC viability.</a> Matrix Biol. 24, 208-218 (2005).</li><li>Benoit, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrin-linked+kinase+production+prevents+anoikis+in+human+mesenchymal+stem+cells.">Integrin-linked kinase production prevents anoikis in human mesenchymal stem cells.</a> J Biomed Mater Res A. 81, 259-268 (2007).</li><li>Willerth, S. M., Sakiyama-Elbert, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combining+stem+cells+and+biomaterial+scaffolds+for+constructing+tissues+and+cell+delivery.">Combining stem cells and biomaterial scaffolds for constructing tissues and cell delivery.</a> , (2008).</li><li>Natesan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose-derived+stem+cell+delivery+into+collagen+gels+using+chitosan+microspheres.">Adipose-derived stem cell delivery into collagen gels using chitosan microspheres.</a> Tissue Eng. Part A. 16, 1369-1384 (2010).</li><li>Bubnis, W. A., Ofner, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+determination+of+epsilon-amino+groups+in+soluble+and+poorly+soluble+proteinaceous+materials+by+a+spectrophotometric+method+using+trinitrobenzenesulfonic+acid.">The determination of epsilon-amino groups in soluble and poorly soluble proteinaceous materials by a spectrophotometric method using trinitrobenzenesulfonic acid.</a> Anal. Biochem. 207, 129-133 (1992).</li><li>Zhang, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+PEGylated+fibrin+patch+for+mesenchymal+stem+cell+delivery.">A PEGylated fibrin patch for mesenchymal stem cell delivery.</a> Tissue Eng. 12, 9-19 (2006).</li><li>Bornstein, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstituted+rattail+collagen+used+as+substrate+for+tissue+cultures+on+coverslips+in+Maximow+slides+and+roller+tubes.">Reconstituted rattail collagen used as substrate for tissue cultures on coverslips in Maximow slides and roller tubes.</a> Lab Invest. 7, 134-137 (1958).</li><li>Zhang, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+differentiation+of+bone+marrow+stem+cells+is+directed+by+a+tunable+three-dimensional+matrix.">Vascular differentiation of bone marrow stem cells is directed by a tunable three-dimensional matrix.</a> Acta Biomater. 6, 3395-3403 (2010).</li><li>Rochon, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normal+human+epithelial+cells+regulate+the+size+and+morphology+of+tissue-engineered+capillaries.">Normal human epithelial cells regulate the size and morphology of tissue-engineered capillaries.</a> Tissue Eng. Part A. 16, 1457-1468 (2010).</li><li>Liu, H., Collins, S. F., Suggs, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+culture+for+expansion+and+differentiation+of+mouse+embryonic+stem+cells.">Three-dimensional culture for expansion and differentiation of mouse embryonic stem cells.</a> Biomaterials. 27, 6004-6014 (2006).</li></ol>

Nessun conflitto di interessi finanziari esistono. Disclaimers I pareri o le affermazioni contenute nel presente documento sono le opinioni personali degli autori e non devono essere interpretate come ufficiale o che riflette le opinioni del Dipartimento della Difesa o il Governo degli Stati Uniti. Gli autori sono dipendenti del governo degli Stati Uniti, e questo lavoro è stato preparato come parte delle loro funzioni ufficiali. Tutto il lavoro è stato sostenuto dalla US Army Medical Research e Materiel Command. Questo studio è stato condotto nell&#39;ambito di un protocollo esaminato e approvato dalla US Army Medical Research e Materiel Command Institutional Review Board e in conformità con il protocollo approvato.

ASC sono ben noti per la loro facilità di isolamento e la capacità di differenziare verso vari tipi di cellule. Con le tecniche descritte in questa manoscritto, siamo in grado di sfruttare la plasticità del ASCs esponendo le cellule a biomatrices contemporaneamente. Come le cellule migrano lontano dalla loro base CSM e inserire il proprio ambiente circostante extracellulare, le cellule prendono spunto dal patibolo e può mantenere &quot;staminalità&quot; (collagene) o essere indotte a differenziarsi verso tipi di ce...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome del reagente / apparecchiatura </td><td> Azienda </td><td> Numero di catalogo </td><td> Comments </td></tr><tr><td> Hanks soluzione salina bilanciata (HBSS) </td><td> Gibco </td><td> 14175 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Siero fetale bovino </td><td> Hyclone </td><td> SH30071.03 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Collagenasi di tipo II </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> C6685 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> 70-micron Nylon Mesh Filter </td><td> BD Biosciences </td><td> 352350 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> 100-um Nylon Mesh Filter </td><td> BD Biosciences </td><td> 352360 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> MesenPRO crescita media del sistema </td><td> Invitrogen </td><td> 12746-012 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> L-Glutammina </td&gt; <td> Gibco </td><td> 25030 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> CaCl 2 .2 H 2 O </td><td> Sigma </td><td> C8106 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> T75 Tissue Culture Flask </td><td> BD Biosciences </td><td> 137787 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Chitosan </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 448869 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Acido acetico </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 320099 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> N-ottanolo </td><td> Acros Organics </td><td> 150630025 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Sorbitan-mono-oleato </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> S6760 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Idrossido di potassio </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P1767 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Acetone </td><td> Fisher Scientific </td><td> L-4859 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Etanolo </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 270741 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Trinitro benzensolfonico Acid </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P2297 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Acido cloridrico </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 320331 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Etere etilico </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 472-484 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> 8-micron di tessuto coltura in piastra Inserti </td><td> BD Biosciences </td><td> 353097 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Microcentrifuga da 1,5 ml Tubes </td><td> Pescatore </td><td> 05-408-129 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> MTT reagente </td><td> Invitrogen </td><td> M6494 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Dimetilsolfossido </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> D8779 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Qtracker cellulare Labeling Kit (QTracker 655) </td><td> Sonde molecolari </td><td> Q2502PMP </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Collagene di tipo 1 </td><td> Travigen </td><td> 3447-020-01 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Di sodio idrossido </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> S8045 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> 12-Well piastre di coltura dei tessuti </td><td> BD Biosciences </td><td> 353043 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Fibrinogeno </td><td> Sigma </td><td> F3879 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Trombina </td><td> Sigma </td><td> T6884 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Derivata Benztriazole di polietilene </td><td> Sunbio </td><td> DE-034GS </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Tris Buffer Tablet (pH 7,6) </td><td> Sigma </td><td> T5030 </td><td> Consumabili </td></tr><tr><td> Centrifuga </td><td> Eppendorf </td><td> 5417R </td><td> Equipment </td></tr><tr><td> Orbital Shaker </td><td> New Brunswick Scienctific </td><td> C24 </td><td> Attrezzatura </td></tr><tr><td> Incubatore umidificato con Air-5% CO 2 </td><td> Thermo Scientific </td><td> Modello 370 </td><td> Attrezzatura </td></tr><tr><td> Agitatore </td><td> IKA </td><td> Visc6000 </td><td> Attrezzatura </td></tr><tr><td> Agitatore magnetico </td><td> Corning </td><td> PC-210 </td><td> Attrezzatura </td></tr><tr><td> Vacuum Essiccatore </td><td> - </td><td> - </td><td> Attrezzatura </td></tr><tr><td> Particle Size Analyzer </td><td> Malvern </td><td> STP2000 Spraytec </td><td> Attrezzatura </td></tr><tr><td> Water Bath </td><td> Fisher Scientific </td><td> Isotemp210 </td><td> Attrezzatura </td></tr><tr><td> Spettrofotometro </td><td> Beckman </td><td> Beckman Coulter Spettrofotometro DU 800UV/Visible </td><td> Attrezzatura </td></tr><tr><td> Vortice </td><td> Diagger </td><td> 3030a </td><td> Attrezzatura </td></tr><tr><td> Microplate Reader </td><td> Molecular Devices </td><td> Spectramax M2 </td><td> Attrezzatura </td></tr><tr><td> Luce / microscopio a fluorescenza </td><td> Olimpo </td><td> IX71 </td><td> Attrezzatura </td></tr><tr><td> Microscopio confocale </td><td> Olimpo </td><td> FV-500 microscopio confocale a scansione laser </td><td> Attrezzatura </td></tr><tr><td> Microscopio Elettronico a Scansione </td><td> Carl Zeiss MicroImaging </td><td> Leo 435 VP </td><td> Attrezzatura </td></tr><tr><td> Microscopio elettronico a trasmissione </td><td> JEOL </td><td> JEOL 1230 </td><td> Attrezzatura </td></tr></tbody></table>

engineering a bilayered hydrogel to control asc differentiation

Polimeri naturali nel corso degli anni hanno acquisito maggiore importanza a causa della loro biocompatibilità di accoglienza e la capacità di interagire con le cellule in vitro e in vivo. Un&#39;area di ricerca che promette nel campo della medicina rigenerativa è l&#39;uso combinatorio di biomateriali innovativi e cellule staminali. Una strategia fondamentale nel campo dell&#39;ingegneria dei tessuti è l&#39;uso di tridimensionale ponteggio (ad esempio, decellularizzato matrice extracellulare, idrogel, micro / nano particelle) per dirigere la funzione delle cellule. Questa tecnologia si è evoluta dalla scoperta che le cellule hanno bisogno di un substrato su cui si può aderire, proliferare, ed esprimono il loro fenotipo differenziato cellulare e la funzione 2-3. Più recentemente, è stato anche determinato che le cellule non solo utilizzare questi substrati per adesione, ma anche interagire e prende spunto dal substrato di matrice (ad esempio, matrice extracellulare, ECM) 4. Pertanto, le cellule e ponteggi una connessione reciproca cheserve a controllare lo sviluppo dei tessuti, l&#39;organizzazione e la funzione finale. Derivate da tessuto adiposo cellule staminali (CSA) sono mesenchimale, non-ematopoietiche cellule staminali presenti nel tessuto adiposo, che può esibire multi-lineage differenziazione e servire come fonte immediatamente disponibile di cellule (cioè pre-endoteli vascolari e periciti). La nostra ipotesi è che derivate da tessuto adiposo cellule staminali possono essere dirette verso differenti fenotipi contemporaneamente semplicemente co-coltura in matrici doppo strato 1. Il nostro laboratorio è focalizzata sulla guarigione della ferita cutanea. A questo scopo, abbiamo creato un&#39;unica matrice composita dai biomateriali naturali, fibrina, collagene, e chitosano che possono mimare le caratteristiche e le funzioni di un dermo-specifico ambiente guarigione della ferita ECM.

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Engineering a Bilayered Hydrogel to Control ASC Differentiation

Questo protocollo si concentra sulla utilizzando la capacità intrinseca delle cellule staminali a prendere spunto dalla loro matrice extracellulare che circonda ed essere indotte a differenziarsi in fenotipi multipli. Questo manoscritto metodi estende la nostra descrizione e caratterizzazione di un modello utilizzando un idrogel doppo strato, costituito da PEG-fibrina e collagene, contemporaneamente alla co-differenziare derivate da tessuto adiposo cellule staminali<sup&gt; 1</sup&gt;.

Progettazione di un Hydrogel doppo strato di controllo differenziazione ASC

Natural polymers over the years have gained more importance because of their host biocompatibility and ability to interact with cells in vitro and in ...

engineering-a-bilayered-hydrogel-to-control-asc-differentiation

Research

JoVE Journal

Bioengineering

13.8K Views.  United States Army Institute of Surgical Research. Questo protocollo si concentra sulla utilizzando la capacità intrinseca delle cellule staminali a prendere spunto dalla loro matrice extracellulare che circonda ed essere indotte a differenziarsi in fenotipi multipli. Questo manoscritto metodi estende la nostra descrizione e caratterizzazione di un modello utilizzando un idrogel doppo strato, costituito da PEG-fibrina e collagene, contemporaneamente alla co-differenziare derivate da tessuto adiposo cellule staminali