Ricerca riportata in questa pubblicazione è stato sostenuto dal National Institute of Arthritis e muscoloscheletrico e malattie della pelle, parte del National Institutes of Health, sotto Premio Numero R01-AR063084. Il contenuto è di esclusiva responsabilità degli autori e non rappresentano necessariamente il punto di vista ufficiale del National Institutes of Health.

Questo protocollo animale è stato approvato da ed è in conformità con le linee guida e regolamenti stabiliti dalla cura degli animali ed uso Comitato Istituzionale (IACUC) presso la Ohio State University. Tutte le politiche sviluppate dal IACUC locale sono in conformità con la sperimentazione animale guida sviluppato da Office of Laboratory Animal Welfare presso il National Institutes of Health. 1. Anestesia e intubazione endotracheale <ol><li> Sterilizzare in autoclave tutti gli strumenti e forniture chirurgiche prima dell&#39;uso. Indossare sterili, monouso guanti chirurgici durante tutta la procedura. Mantenere un campo sterile tutta la procedura. L&#39;uso di un telino sterile è suggerita, ma non mostrata nel video per consentire una migliore visualizzazione dei punti di riferimento anatomici sul mouse. </li><li> Posizionare ciascun topo singolarmente in una camera di induzione e fornire anestesia utilizzando 5% isoflurano e ossigeno con una portata di 0,4 L / min fino alla perdita del riflesso di raddrizzamento e poi mantenere the animale con 2% isoflurano in ossigeno al 100% con un flusso di 0,4 L / min attraverso un tubo nosecone collegata all&#39;apparecchio di anestesia finché il tubo tracheale è a posto. La macchina per anestesia isoflurano utilizzato deve essere opportunamente ventilati e dotati di filtri a carbone per ridurre al minimo l&#39;esposizione del chirurgo ai fumi isoflurano durante la procedura. L&#39;ogiva è nota ma non mostrato nel video per consentire la visualizzazione delle manipolazioni intubare il mouse. </li><li> Shave petto dell&#39;animale con un tagliatore di peli in una posizione diversa rispetto alla piattaforma intervento chirurgico per evitare la contaminazione del luogo dell&#39;intervento. </li><li> Posizionare il mouse in posizione supina su piattaforma chirurgica finalizzata alla intubazione. Una semplice piattaforma piccola polistirene espanso può servire come una piattaforma operativa. Coprire la piattaforma con un telo pre-sterilizzato per fornire una superficie sterile. Posizionare una piastra elettrica tra la piattaforma e drappeggio per mantenere la temperatura corporea dei topi in surgicaprocedure l. </li><li> Attaccare una lunghezza di 2-0 sutura di seta di almeno 10 cm alla piattaforma con nastro e quindi avvolgere la sutura intorno incisivi superiori anteriori. Posizionare il cono in prossimità (2-3 cm) al bordo della piattaforma sopra il naso del mouse. Tirare la tesa del mouse e fissarlo alla piattaforma per la coda con un pezzo di nastro adesivo. </li><li> Fissare le gambe ai lati del corpo con fili di nastro. È importante che gli arti anteriori non sono eccessivamente allungati come questo può compromettere la respirazione. </li><li> Preparare i siti chirurgici rasati con Betadine e alcool prima le incisioni del collo e del torace sono fatti. </li><li> Posizionare la piattaforma con la testa del mouse che punta nella direzione dell&#39;operatore. Tagliare un 0,5 centimetri mediana incisione cutanea cervicale. Separare i lobi della tiroide a loro istmo per esporre il muscolo sternohyoideus dove la trachea può essere visto sotto il muscolo. </li><li> Rimuovere l&#39;ago interno di un trequarti 18 gauge modo che possa essere utilizzato come intubtubo zione. La punta dell&#39;ago può servire da supporto e 1 cm di tubo esterno può servire come tubo tracheale. </li><li> Tenere la lingua del mouse con pinze curve in una mano e spostarlo leggermente verso l&#39;alto. Mostra la trachea attraverso l&#39;incisione cutanea cervicale. Utilizzare l&#39;altra mano per inserire delicatamente il tubo di intubazione finché il tubo si vede all&#39;interno della trachea. </li><li> Non appena il tubo è nello tracheale, spostare le pinze curve in altra mano verso il tubo e rapidamente rimuovere l&#39;ago interno. Se il tubo non può essere inserito nella trachea, il tubo deve essere estratta per evitare di produrre problemi respiratori. È importante sottolineare la punta del tubo quando è vicino alla gola per evitare l&#39;inserimento del tubo nell&#39;esofago invece della trachea. </li></ol> 2. Ventilazione e di fissazione <ol><li> Fornire ventilazione artificiale con un respiratore animale sfiato 2% isoflurano in ossigeno con una portata di 0,4 L / min. Utilizzare un Y-sha modificatocollegamento PE per collegare il tubo di intubazione con il ventilatore. Il corretto posizionamento del tubo tracheale può essere confermata da giudicare il petto di espansione simmetrica. </li><li> Impostare il volume corrente a 260 microlitri / ictus e ventilazione tasso è di 130 colpi al minuto, che possono essere regolati per il peso corporeo di un mouse particolare se necessario. </li><li> Rimuovere il nastro sulla coda e ruotare il mouse delicatamente per metterlo in decubito laterale destro per il successivo intervento chirurgico. Utilizzare nastro adesivo per fissare la coda e gambe alla piattaforma di nuovo. </li><li> Inserire la sonda rettale per controllare la temperatura corporea e regolare il pad di riscaldamento per mantenere la temperatura intorno ai 37 ° C. </li><li> Fissare la sonda alla piattaforma utilizzando del nastro adesivo. Iniettare bupivacaina per via sottocutanea al sito di incisione per intorpidire la zona prima che l&#39;incisione viene fatta. </li></ol> 3. Thoracotomy <ol><li> Fare un&#39;incisione obliqua che è lungo circa 1 cm in un luogo 2 mm dal fiancomargine sternale nella direzione in cui la gamba anteriore sinistra incontra il corpo (circa 1-2 mm sotto dove la gamba e corpo uniscono). La vena superficiale toracica è vicino a questo sito e l&#39;incisione deve essere fatta in modo che l&#39;estremità laterale dell&#39;incisione va fino a, ma non tagliato, la vena. </li><li> Tagliare se il muscolo toracica per esporre sotto le costole. Durante questa fase evitare lesioni accidentali della nave. Se si verifica sanguinamento, utilizzare applicatori di cotone per arrestare qualsiasi sanguinamento prima di procedere alla fase successiva 7. </li><li> Visualizza le costole e gonfiaggio polmonare attraverso la parete sottile e semitrasparente torace. Aprire la cavità toracica usando forbici chirurgiche per fare una incisione 6-8 mm nel terzo spazio intercostale. Questa incisione dovrebbe essere un minimo di 2 mm dal margine sternale dove si trova l&#39;arteria toracica interna. Danni all&#39;arteria produrrà spurgo pesante che è difficile da controllare. </li><li> Inserire i divaricatori torace fatti in casa pre-sterilizzati into l&#39;incisione e delicatamente tirare indietro per aprire l&#39;incisione in modo che sia di circa 8-10 mm di larghezza facendo attenzione ad evitare il polmone. I riavvolgitori devono essere allegati alla piattaforma chirurgica con perni. </li><li> A questo punto il cuore dovrebbe essere visibile, tuttavia, il polmone continua a coprire una porzione del cuore. Sollevare il pericardio delicatamente con pinze curve, tirarlo a parte, e far scorrere il tessuto dietro i divaricatori. Durante questa manipolazione del polmone si alza e lontano dal cuore. </li></ol> 4. Posizionamento LAD <ol><li> Individuare la LAD sulla superficie del cuore attraverso un microscopio di dissezione. Il LAD corre lungo il centro della parete cardiaca da vicino all&#39;apice del cuore giù attraverso il ventricolo sinistro. Il LAD appare rosso brillante e verrà pulsa forte. La vena qui viene a volte scambiato per il LAD, ma l&#39;illuminazione adeguata può aiutare a distinguere le due navi. Se l&#39;illuminazione è troppo luminosa può essere difficile apprezzare il coloredifferenze tra i vasi. </li><li> Utilizzare un frammento batuffolo di cotone sterile con un diametro di circa 1-2 mm per preparare il LAD per legatura. Posizionare il cotone tra l&#39;atrio sinistro e ventricolo sinistro, che alzerà l&#39;atrio sinistro e aiutare a smascherare il LAD e chiarire la sua posizione. Se il LAD non puo essere, il frammento può essere fatto scorrere ulteriormente in modo dell&#39;atrio sinistro è sollevato ancora più alto per rivelare l&#39;aorta dove il LAD origine. </li></ol> 5. LAD legatura <ol><li> Il posizionamento ideale per la legatura è di circa 2 mm rispetto alla punta del padiglione auricolare sinistro. Il tronco polmonare può essere utilizzato come marcatore per identificare l&#39;atrio sinistro. In alternativa, la posizione di legatura può essere visualizzato come un punto di 1-2 mm dalla ramificazione della circonflessa. Utilizzare pinze curve per applicare delicatamente la pressione in un sito immediatamente sotto il punto di legatura previsto. In questo modo sarà più facile vedere l&#39;arteria e aiuterà anche a tenere il cuore a postoe semplificare legando la legatura. Non applicare una pressione con le pinze per più di 5 secondi alla volta ed evitare la compressione del cuore che potrebbe alterare il pompaggio. </li><li> Utilizzare un ago conico per passare una sutura di seta 6-0 sotto la KOP, osservando con un microscopio da dissezione. Inserire l&#39;ago sotto l&#39;arteria con precisione l&#39;ago entra nella camera ventricolo sinistro se collocato troppo in profondità o danneggiare il LAD se l&#39;ago è troppo superficiale. Se il LAD è infortunato rimuovere l&#39;ago e la sutura LAD per controllare l&#39;emorragia, se l&#39;emorragia non può essere controllato è preferibile eutanasia dell&#39;animale. </li><li> Fare un doppio nodo sciolto con la sutura, lasciando un anello del diametro di 2-3 mm attraverso la quale un lungo pezzo di tubo PE-10 2-3 mm è collocato 8. </li><li> Stringere l&#39;anello intorno all&#39;arteria e il tubo quindi fissare il ciclo legando un nodo scorsoio supplementare, facendo attenzione a non danneggiare la parete del ventricolo. Per la legatura permanente, legare direttamente il LAD con unnodo 9. Confermare l&#39;occlusione di LAD controllando comparsa di un colore più chiaro nella parete anteriore del ventricolo sinistro che deve essere visualizzato entro pochi secondi dopo la legatura. </li><li> Rimuovere il divaricatore e chiudere temporaneamente la ferita pizzicando la pelle insieme con un morsetto bulldog. La lunghezza del tempo che ischemia viene mantenuta dipende dal disegno dell&#39;esperimento, ma è spesso 20, 30, 45 o 60 min. Il mouse rimane sul ventilatore per la durata del l&#39;occlusione dell&#39;arteria LAD. </li></ol> 6. Riperfusione <ol><li> Dopo il periodo di ischemia rimuovere la clip bulldog e inserire i divaricatori torace per esporre la legatura. Sciogliere il nodo e rimuovere il tubo PE-10. Conferma riperfusione osservando un ritorno del colore rosa-rosso della parete anteriore del ventricolo sinistro dopo 15-20 sec. </li><li> Lasciare la sutura a posto se 2% di cloruro di trifeniltetrazolo (TTC) e blu colorazione verranno eseguite dopo la riperfusione. Se la colorazione non è necessario, la sutura può be rimosso. </li><li> Il tempo di riperfusione dipenderà dal disegno esperimento, di solito si estende da 1 ora a 24 ore. </li></ol> 7. Petto di chiusura e post-operatoria Cura <ol><li> Chiudete la cavità toracica dalla cucitura chiuso l&#39;incisione nello spazio intercostale 3 ° con 4-0 sutura in seta. E &#39;importante che i polmoni sono chiari della sutura e non diventano intrappolati come il 3 ° e 4 ° costole sono suturati insieme. Mentre legando i nodi di sutura è utile applicare una leggera pressione al petto con porta-aghi per ridurre al minimo l&#39;aria ambiente che potrebbe essere intrappolato nella cavità toracica. </li><li> Chiudere tutti gli strati di muscoli con continui punti di sutura utilizzando 4-0 seta. Utilizzare punti di sutura in nylon per chiudere la pelle con una sutura continua. In alternativa, la pelle può essere chiusa con sutura interrotta. </li><li> Quando sutura è completa cessazione del flusso di isoflurano mentre ossigeno continua a fluire. Una volta che il mouse si sposta i baffi o la coda di esso, spallamentid iniziare a fare tentativi di respirare spontaneamente. Rimuovere il mouse dal ventilatore con il tubo di intubazione ancora conservato nella trachea. </li><li> Osservare attentamente l&#39;animale fino mouse riprende un normale modello di respirazione e poi estubare il mouse. Il tubo deve essere rimosso lentamente per evitare l&#39;aspirazione di secrezioni della cavità orale. </li><li> Confermare il mouse non è in alcun distress respiratorio osservando per un altro 3-5 minuti prima di rimetterla in una gabbia. Se i segni di disidratazione si osservano dopo l&#39;intervento chirurgico, fornire fino a 0,5 ml di soluzione salina sterile per iniezione intraperitoneale. </li><li> Per analgesia post-operatoria, somministrare un analgesico oppioide (buprenorfina, 0,1 mg / kg) per via sottocutanea (SC) prima che l&#39;animale è ambulatoriale e quindi fornire una dose supplementare ogni 4-6 ore per il prossimo 24 hr. Controllare i segni animali di disagio a 12 ore dopo l&#39;intervento chirurgico. Simulazione di infarto miocardico utilizzo della chirurgia sopravvivenza richiede la valutazione del dolore e angoscia dopo il recupero dalla surgery. L&#39;attuale best practice accettata è di fornire analgesia per le prime 24 ore a seguito di una procedura invasiva con ulteriori dosi indicate come garantito a causa della perdita di peso o segni di dolore. Per la legatura permanente, il peso corporeo deve essere monitorato ogni giorno per aiutare a misurare il recupero dell&#39;animale. </li><li> Ibuprofene (Motrin), un farmaco antinfiammatorio non steroideo (FANS) con anti-infiammatori, analgesici e l&#39;attività antipiretica, o altri FANS, può essere fornita acqua potabile dell&#39;animale come una soluzione di 0,2 mg / ml per due giorni prima della chirurgia e fino a 7 giorni dopo l&#39;intervento chirurgico in lungo con la buprenorfina per gestire qualsiasi ulteriore dolore / disagio. </li></ol> 8. Misurazione della Infarto miocardico Size <ol><li> Anestetizzare e intubare il mouse alla fine del tempo di riperfusione desiderato. Tagliare la pelle del petto sulla linea mediana al xifoidea. Aprire l&#39;addome e il diaframma sotto la gabbia toracica e da entrambi i lati della linea medioclavicolare. </li> &lt;li&gt; Esporre il cuore e poi ri-legare la LAD nella stessa posizione. Incannulare l&#39;aorta così 10% Phthalo Blu può essere iniettato lentamente direttamente in aorta a macchiare il cuore per delimitazione della zona ischemica dalla zona nonischemic 10. </li><li> Rapidamente asportare il cuore e lavarlo in 30 mM KCl (soluzione di cloruro di potassio) di cessare il battito del cuore e consentire il sezionamento più coerente. Congelare il cuore per almeno 4 ore a -20 ° C e tagliare il cuore a fette da 1 mm utilizzando una matrice cuore dispositivo 11 sezionamento. </li><li> Incubare fette di cuore con il 2% TTC a 37 ° C per 40 min. L&#39;area infartuale è delimitata come zona bianca mentre il tessuto vitale macchie rosso. </li><li> Fissare le fette colorate con il 10% di formaldeide durante la notte, che contribuirà ad aumentare il contrasto tra l&#39;area infartuale e il tessuto normale. Fotografare le fette e calcolare l&#39;area a rischio (AAR), la zona ischemica e l&#39;area infartuata utilizzando il software ImageJ. </li></ol> &lt;p class = &quot;jove_title&quot;&gt; 9. Misurazione dei livelli degli enzimi cardiaci Misurare troponina I cardiaca (cTnI) i livelli nel siero di topi ottenendo sangue dalla vena porta e poi isolare siero mediante centrifugazione. I livelli sierici di cTnI sono poi determinate con un quantitativo rapido cTnI dosaggio 12.

<ol>
	<li>Abarbanell, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+myocardial+and+vascular+injury.">Animal models of myocardial and vascular injury.</a> J Surg Res. 162, 239-249 (2010).</li><li>Gao, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+and+efficient+model+of+coronary+artery+ligation+and+myocardial+infarction+in+the+mouse.">A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse.</a> Circ Res. 107, 1445-1453 (2010).</li><li>Virag, J. A., Lust, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+artery+ligation+and+intramyocardial+injection+in+a+murine+model+of+infarction.">Coronary artery ligation and intramyocardial injection in a murine model of infarction.</a> J Vis Exp. , (2011).</li><li>Salto-Tellez, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+infarction+in+the+C57BL/6J+mouse:+a+quantifiable+and+highly+reproducible+experimental+model.">Myocardial infarction in the C57BL/6J mouse: a quantifiable and highly reproducible experimental model.</a> Cardiovasc Pathol. 13, 91-97 (2004).</li><li>Kumar, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+mouse+coronary+anatomy+and+myocardial+infarction+consequent+to+ligation.">Distinct mouse coronary anatomy and myocardial infarction consequent to ligation.</a> Coron Artery Dis. 16, 41-44 (2005).</li><li>Degabriele, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+appraisal+of+the+mouse+model+of+myocardial+infarction.">Critical appraisal of the mouse model of myocardial infarction.</a> Exp Physiol. 89, 497-505 (2004).</li><li>Shao, Y., Redfors, B., Omerovic, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+technique+for+coronary+artery+ligation+in+mice.">Modified technique for coronary artery ligation in mice.</a> J Vis Exp. , (2013).</li><li>Klocke, R., Tian, W., Kuhlmann, M. T., Nikol, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+animal+models+of+heart+failure+related+to+coronary+heart+disease.">Surgical animal models of heart failure related to coronary heart disease.</a> Cardiovasc Res. 74, 29-38 (2007).</li><li>Nossuli, T. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+chronic+mouse+model+of+myocardial+ischemia-reperfusion:+essential+in+cytokine+studies.">A chronic mouse model of myocardial ischemia-reperfusion: essential in cytokine studies.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 278, 1049-1055 (2000).</li><li>Cozzi, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrafine+particulate+matter+exposure+augments+ischemia-reperfusion+injury+in+mice.">Ultrafine particulate matter exposure augments ischemia-reperfusion injury in mice.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 291, 894-903 (2006).</li><li>Kim, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+closed-chest+model+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion.">A murine closed-chest model of myocardial ischemia and reperfusion.</a> J Vis Exp. , 3896 (2012).</li><li>Nagarajan, V., Hernandez, A. V., Tang, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prognostic+value+of+cardiac+troponin+in+chronic+stable+heart+failure:+a+systematic+review.">Prognostic value of cardiac troponin in chronic stable heart failure: a systematic review.</a> Heart. 98, 1778-1786 (2012).</li><li>Borst, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+employed+for+induction+and+analysis+of+experimental+myocardial+infarction+in+mice.">Methods employed for induction and analysis of experimental myocardial infarction in mice.</a> Cell Physiol Biochem. 28, 1-12 (2011).</li><li>Diepenhorst, G. M., van Gulik, T. M., Hack, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complement-mediated+ischemia-reperfusion+injury:+lessons+learned+from+animal+and+clinical+studies.">Complement-mediated ischemia-reperfusion injury: lessons learned from animal and clinical studies.</a> Ann Surg. 249, 889-899 (2009).</li><li>Benavides-Vallve, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+strategies+for+echocardiographic+evaluation+of+left+ventricular+function+in+a+mouse+model+of+long-term+myocardial+infarction.">New strategies for echocardiographic evaluation of left ventricular function in a mouse model of long-term myocardial infarction.</a> PLoS One. 7, 41691 (2012).</li><li>Bamberg, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accuracy+of+dynamic+computed+tomography+adenosine+stress+myocardial+perfusion+imaging+in+estimating+myocardial+blood+flow+at+various+degrees+of+coronary+artery+stenosis+using+a+porcine+animal+model.">Accuracy of dynamic computed tomography adenosine stress myocardial perfusion imaging in estimating myocardial blood flow at various degrees of coronary artery stenosis using a porcine animal model.</a> Invest Radiol. 47, 71-77 (2012).</li></ol>

Il dottor Noah Weisleder è un fondatore e Chief Scientific Officer presso TRIM-edicine, Inc.

Modelli di ischemia-riperfusione miocardica mouse sono un metodo efficace per la ricerca cardiovascolare per simulare clinico malattia cardiaca acuta o cronica 13,14. È stato applicato sforzo significativo per sviluppare e perfezionare approcci chirurgici che producono eventi ischemici e danni da riperfusione nei cuori di diversi tipi di animali diversi. Mentre ci sono particolari vantaggi per l&#39;utilizzo di diversi sistemi animali, il mouse ha caratteristiche che hanno portato a un vasto interesse a prod...

Modelli animali di infarto del miocardio (MI) sono importanti nella ricerca del complesso fisiopatologia della cardiopatia ischemica 1. Ischemia-riperfusione (I / R) infortunio è una delle principali cause del danno miocardico generato durante MI. Il danno da ischemia iniziale prodotto dalla occlusione della circolazione coronarica può essere minimizzato in pazienti MI dall&#39;uso di angioplastica per ripristinare perfusione in modo tempestivo. Anche se questo intervento ha notevolmente ridotto il numero di morti a causa di infarto miocardico acuto, il ripristino del flusso sanguigno nelle ischemiche risultati dell&#39;area in lesioni di I / R che porta alla morte dei cardiomiociti. Questa perdita di massa miocardica contribuisce alla riduzione della gittata cardiaca e la progressione verso l&#39;insufficienza cardiaca. Pertanto, lo studio dei meccanismi che provocano cardiomiociti morte dalla ferita I / R è un importante linea di indagine nella ricerca cardiovascolare. Chirurgico legatura coronarica è una tecnica sperimentale utile per indurre modelli di MI in vari tipi di animali, including il ratto, cane e maiale. Pubblicazioni in diversi laboratori hanno introdotto vari metodi per la creazione del modello cuore topi di lesioni di I / R 2,3. Al fine di ottenere comprensione di questi meccanismi, dobbiamo avere accesso a modelli animali affidabili in grado di riprodurre diversi aspetti del MI patologia. Lo sviluppo di tali modelli è essenziale anche per testare approcci terapeutici per il trattamento di infarto miocardico e associata lesione di I / R. La maggior parte delle tecniche chirurgiche attualmente disponibili per simulare MI in animali da esperimento coinvolgono dissezione chirurgica nella cavità toracica per esporre la discendente anteriore sinistra (LAD) che viene poi occluso da una legatura per determinato periodo di tempo per produrre l&#39;evento ischemico. Poi legatura che può essere rimosso per consentire riperfusione dell&#39;area ischemica e generazione di lesioni I / R. Una limitazione importante di questi approcci fatto che la posizione della letteratura sul LAD non è sempre riprodotto senza errori, chepuò portare alla variazione della gravità del MI indotta da questo approccio. La maggior parte delle tecniche disponibili solo descrivono in generale la posizione approssimativa del LAD nella parete anteriore del cuore. Come la ramificazione e la direzione della LAD possono variare in singoli animali la posizione non è sempre fisso e può essere facilmente confuso 4,5, inducono potenziali complicazioni durante l&#39;intervento 6. Le conseguenze di un posizionamento errato del legatura può essere eseguito da variabilità delle dimensioni dell&#39;infarto indotta nel ventricolo sinistro di compromettere completamente la specificità del modello. Presentiamo qui un metodo modificato di infarto I / R e legatura permanente nei topi che consente maggiore precisione di posizionamento della legatura sulla LAD. Applicando approcci specifici per l&#39;incisione iniziale e dissezione interna, così come l&#39;uso di manipolazioni per sollevare gli atri per consentire un migliore apprezzamento del LAD e il sito dove emerge dall&#39;aorta. Stabilire l&#39;posizione sulla LAD e la sua origine offre l&#39;opportunità di legare il LAD in modo riproducibile. Questo modello di infarto I / R e legatura permanente non solo riduce la variazione di dimensioni dell&#39;infarto dopo intervento chirurgico, può anche diminuire l&#39;incidenza di sanguinamento eccessivo durante l&#39;operazione.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="845">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:347px;">PhysioSuite with RightTemp Homeothermic Warming</td>
			<td style="width:192px;">Kent Scientific Corp</td>
			<td style="width:139px;">PS-RT</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:347px;">Light source</td>
			<td style="width:192px;">Zeiss</td>
			<td style="width:139px;">KL 1500 LCD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:347px;"></td>
			<td style="width:192px;"></td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:347px;">Mouse Heart Slicer Matrix</td>
			<td style="width:192px;">Zivic Miller</td>
			<td style="width:139px;">HSMS001-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:347px;">Micro Tray - Base, Lid, &#38; Mat (6.0 x 10 x 0.75)</td>
			<td style="width:192px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">6100A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:347px;">2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride</td>
			<td style="width:192px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:139px;">T8877</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Buprenorphine (Buprenex Injectable)</td>
			<td>Reckitt Benkiser Healthcare</td>
			<td>NDC 12496-0757-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">bupivacaine</td>
			<td style="width:192px;">Hospira</td>
			<td>NDC 0409-1163-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isoflurane</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>NDC 5260-04-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Betadine Soultion&#160;</td>
			<td>Purdue Pharma</td>
			<td>25655-41-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mouse Cardiac Troponin T(cTnT) ELISA</td>
			<td>Kamiya Biomedical Company</td>
			<td>KT-58997</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:347px;"></td>
			<td style="width:192px;"></td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:347px;">Fine Scissors</td>
			<td style="width:192px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">14040-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:347px;">Dumont #5 Forceps</td>
			<td style="width:192px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">11251-30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:347px;">Dumont #3 Forceps</td>
			<td style="width:192px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">11231-30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:347px;">Castroviejo Micro Needle Holders</td>
			<td style="width:192px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">12060-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:347px;">Slim Elongated Needle Holder</td>
			<td style="width:192px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">12005-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:347px;">Round Handled Needle Holders</td>
			<td style="width:192px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">12075-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:347px;"></td>
			<td style="width:192px;"></td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:347px;">Omano Trinocular Stereoscope</td>
			<td style="width:192px;">Microscope.com</td>
			<td style="width:139px;">OM99-V6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:347px;">SB2 Boom Stand with Universal Arm</td>
			<td style="width:192px;">Microscope.com</td>
			<td style="width:139px;">V6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:347px;">Tracheal Tube, 0.5mm, 1/16in Y</td>
			<td style="width:192px;">Kent Scientific Corp</td>
			<td style="width:139px;">RSP05T16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:347px;">Anesthesia Systems for Rodents and Small Animals</td>
			<td style="width:192px;">VetEquip, Inc</td>
			<td style="width:139px;">901807</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:347px;"></td>
			<td style="width:192px;"></td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:347px;">4-0 silk taper suture</td>
			<td style="width:192px;">Sharpoint&#8482; Products</td>
			<td style="width:139px;">DC-2515N</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:347px;">6-0 silk taper suture</td>
			<td style="width:192px;">Sharpoint&#8482; Products</td>
			<td style="width:139px;">DC-2150N</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a murine model of myocardial ischemia-reperfusion injury through ligation of the left anterior descending artery

Infarto miocardico acuto o cronico (MI) sono eventi cardiovascolari con conseguente elevata morbilità e mortalità. Stabilire i meccanismi patologici al lavoro durante MI e lo sviluppo di approcci terapeutici efficaci richiede una metodologia per simulare riproducibile l&#39;incidenza clinica e riflettere i cambiamenti fisiopatologici connessi con MI. Qui, descriviamo un metodo chirurgico per indurre MI in modelli murini che può essere utilizzato per breve ischemia-riperfusione (I / R) lesioni nonché legatura permanente. Il principale vantaggio di questo metodo è quello di facilitare la posizione della discendente anteriore sinistra arteria (LAD) per consentire legatura accurata di questa arteria per indurre ischemia del ventricolo sinistro del cuore del mouse. Posizionamento accurato della legatura sul LAD aumenta la riproducibilità delle dimensioni dell&#39;infarto e quindi produce risultati più affidabili. Maggiore precisione nel posizionamento della legatura migliorerà approcci chirurgiche standard per simulare MI nei topi, thus riduzione del numero di animali da laboratorio necessarie per gli studi statisticamente rilevanti e migliorare la nostra comprensione dei meccanismi che producono la disfunzione cardiaca che segue MI. Questo modello murino di MI è utile anche per la sperimentazione preclinica dei trattamenti mirati danno miocardico seguente MI.

Dopo 24 ore di riperfusione, analisi delle dimensioni dell&#39;infarto e l&#39;area a rischio (AAR), da Phthalo colorante blu e trifenil cloruro di tetrazolio (TTC), legatura del LAD può essere confermata osservando sbiancamento del tessuto miocardico distale alla sutura come pure disfunzione della parete anteriore. Riperfusione può essere verificata dal ritorno di colore rosso per il tessuto miocardico e la dimostrazione di una certa ripresa del movimento della parete anteriore. Aree INFA...

Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery at JoVE.com

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Si introduce un metodo chirurgico per indurre sperimentale ischemia / riperfusione (I / R) pregiudizio per simulare infarto del miocardio (MI) in modelli murini che consente una maggiore chiarezza posizionamento della legatura sulla discendente anteriore sinistra (LAD) per migliorare la riproducibilità di esperimenti MI nei topi.

Un modello murino di ischemia miocardica e riperfusione lesioni da legatura della arteria discendente anteriore sinistra

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

a-murine-model-myocardial-ischemia-reperfusion-injury-through

Research

JoVE Journal

Medicine

38.9K Views.  The Ohio State University.  Si introduce un metodo chirurgico per indurre sperimentale ischemia / riperfusione (I / R) pregiudizio per simulare infarto del miocardio (MI) in modelli murini che consente una maggiore chiarezza posizionamento della legatura sulla discendente anteriore sinistra (LAD) per migliorare la riproducibilità di esperimenti MI nei topi. 

Video: A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Permanent Ligation of the Left Anterior Descending Coronary Artery in Mice: A Model of Post-myocardial Infarction Remodelling and Heart Failure

Heart failure is a syndrome in which the heart fails to pump blood at a rate commensurate with cellular oxygen requirements at rest or during stress. It is characterized by fluid retention, shortness of breath, and fatigue, in particular on exertion. Heart failure is a growing public health problem, the leading cause of hospitalization, and a major cause of mortality. Ischemic heart disease is the main cause of heart failure.
Ventricular remodelling refers to changes in structure, size, and shape of the left ventricle. This architectural remodelling of the left ventricle is induced by injury (e.g., myocardial infarction), by pressure overload (e.g., systemic arterial hypertension or aortic stenosis), or by volume overload. Since ventricular remodelling affects wall stress, it has a profound impact on cardiac function and on the development of heart failure. A model of permanent ligation of the left anterior descending coronary artery in mice is used to investigate ventricular remodelling and cardiac function post-myocardial infarction. This model is fundamentally different in terms of objectives and pathophysiological relevance compared to the model of transient ligation of the left anterior descending coronary artery. In this latter model of ischemia/reperfusion injury, the initial extent of the infarct may be modulated by factors that affect myocardial salvage following reperfusion. In contrast, the infarct area at 24 hr after permanent ligation of the left anterior descending coronary artery is fixed. Cardiac function in this model will be affected by 1) the process of infarct expansion, infarct healing, and scar formation; and 2) the concomitant development of left ventricular dilatation, cardiac hypertrophy, and ventricular remodelling.
Besides the model of permanent ligation of the left anterior descending coronary artery, the technique of invasive hemodynamic measurements in mice is presented in detail.

Heart failure is the leading cause of hospitalization and a major cause of mortality. A model of permanent ligation of the left anterior descending coronary artery in mice is applied to investigate ventricular remodelling and cardiac dysfunction post-myocardial infarction. The technique of invasive hemodynamic measurements in mice is presented.

Legatura permanente dell&#39;arteria discendente anteriore sinistra coronarica nei topi: un modello di post-infarto rimodellante miocardico e insufficienza cardiaca

Heart failure is a syndrome in which the heart fails to pump blood at a rate commensurate with cellular oxygen requirements at rest or during stress. It ...

Ricerca

Medicina

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, hypotension, necrotizing enterocolitis, bowel transplantation, trauma and chronic inflammation. Intestinal ischemia-reperfusion (IR) injury is a consequence of acute mesenteric ischemia, caused by inadequate blood flow through the mesenteric vessels, resulting in intestinal damage. Reperfusion following ischemia can further exacerbate damage of the intestine. The mechanisms of IR injury are complex and poorly understood. Therefore, experimental small animal models are critical for understanding the pathophysiology of IR injury and the development of novel therapies.
Here we describe a mouse model of acute intestinal IR injury that provides reproducible injury of the small intestine without mortality. This is achieved by inducing ischemia in the region of the distal ileum by temporally occluding the peripheral and terminal collateral branches of the superior mesenteric artery for 60 min using microvascular clips. Reperfusion for 1 hr, or 2 hr after injury results in reproducible injury of the intestine examined by histological analysis. Proper position of the microvascular clips is critical for the procedure. Therefore the video clip provides a detailed visual step-by-step description of this technique. This model of intestinal IR injury can be utilized to study the cellular and molecular mechanisms of injury and regeneration.

Here we describe the detailed procedure of intestinal ischemia-reperfusion in mice which results in reproducible injury without mortality to encourage the standardization of this technique across the field. This model of intestinal ischemia-reperfusion injury can be utilized to study the cellular and molecular mechanisms of injury and regeneration.

Modello murino di ischemia-riperfusione intestinale Injury

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

A Mouse Model of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury Through Elevation of Intraocular Pressure

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, diabetic retinopathy, and retinal vascular occlusions. Rodent models of I/R injury are providing significant insights into mechanisms and treatment strategies for human I/R injury, especially with regard to neurodegenerative damage in the retinal neurovascular unit. Presented here is a protocol for inducing retinal I/R injury in mice through elevation of intraocular pressure (IOP). In this protocol, the ocular anterior chamber is cannulated with a needle, through which flows the drip of an elevated saline reservoir. Using this drip to raise IOP above systolic arterial blood pressure, a practitioner temporarily halts inner retinal blood flow (ischemia). When circulation is reinstated (reperfusion) by removal of the cannula, severe cellular damage ensues, resulting ultimately in retinal neurodegeneration. Recent studies demonstrate inflammation, vascular permeability, and capillary degeneration as additional elements of this model. Compared to alternative retinal I/R methodologies, such as retinal arterial ligation, retinal I/R injury by elevated IOP offers advantages in its&#160;anatomical specificity, experimental tractability, and technical accessibility, presenting itself as a valuable tool for examining neuronal pathogenesis and therapy in the retinal neurovascular unit.

This article describes a procedure for inducing retinal ischemia-reperfusion injury by elevated intraocular pressure in mice. Retinal ischemia-reperfusion injury by elevated intraocular pressure serves to model human pathologies characterized by compromised oxygen and nutrient delivery in the retina, enabling researchers to examine potential cellular mechanisms and treatments for human diseases of the retinal neurovascular unit.

Un modello murino di retina ischemia-riperfusione lesioni a causa di aumento della pressione intraoculare

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, ...

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by reduced blood supply to the heart, resulting in the loss of oxygen to and the ensuing necrosis of the heart muscle. The MI model has gained popularity for its use as a short-term ischemia-reperfusion model and a long-term permanent ligation model. Below, we describe a reliable method for the permanent ligation of the LAD. With mouse genetic engineering technology becoming more advanced, and with an increasing availability of quality murine surgical instruments, the mouse has become a popular model for MI surgeries. Our surgical model incorporates the use of an easily reversible anesthetic for the rapid recovery of the mouse; a minimally invasive endotracheal intubation without involving a tracheotomy; and a thoracentesis through the original thoracotomy site without creating an additional incision in the chest, as is done in some other methods, to effectively remove excess blood and air from the chest cavity. This method is comparatively less invasive than other methods, which dramatically reduces surgical and post-surgical complications and mortality and improves reproducibility.

Murine Left Anterior Descending LAD Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

We provide a reliable method for left anterior descending artery (LAD) ligation in a mouse model. This method is comparatively less invasive than other methods, involving endotracheal intubation, a left-sided thoracotomy approach, and thoracentesis. This method can be used as a model for both acute and chronic myocardial infarction (MI).

Murino discendente anteriore sinistra (LAD) Coronary legatura dell&#39;arteria: una migliore e semplificata del modello di infarto miocardico

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via recanalization of the coronary artery is the most effective strategy for reducing the size of ischemic myocardium. The coronary microvasculature cannot be visualized and imaged&#160;in vivo, but there are several invasive and noninvasive techniques that can be used to assess parameters which depend directly on coronary microvascular function. The endothelial function after ischemia reperfusion can be assessed also at the level of the coronary circulation via the coronary flow reserve (CFR).&#160;In this study, peak velocity of left anterior descending (LAD) coronary arteries was measured in rats in vivo via Transthoracic Doppler Echocardiography during resting and stress challenge (induced by Dobutamine). A normal heart can increase its coronary blood flow up to four times above the resting values during stress induction. Following ischemia reperfusion, we found a significantly diminished CFR, which can be used as a marker of coronary microvascular dysfunction. CFR has opened a window on the importance of microvascular dysfunction and has been shown to predict cardiovascular risk independent of whether the severe obstructive disease is present.

Coronary flow reserve (CFR), is defined as the ratio of maximal coronary blood flow to the resting coronary blood flow. We present a protocol for evaluating CFR in rats via ultrasound, which offers the opportunity to predict cardiovascular risk factors in the absence of obstructive coronary disease.

Valutazione della riserva del flusso coronario dopo la miaocardia Ischemia Reperfusione nei ratti

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...

Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine models of MI with permanent ligation of left-anterior descending (LAD) coronary artery closely mimics MI in humans. Murine models benefit from the extensive genetic engineering available nowadays. Here we propose a reproducible murine surgical model of myocardial infarction by permanent LAD coronary ligation. Our technique comprises anesthesia with ketamine/xylazine that can be rapidly reversed by administration of an antagonist, intubation without tracheotomy for mechanical-assisted ventilation, ventilation with application of extrinsic positive end-expiratory pressure (PEEP) to avoid alveolar collapse, a thoracotomy method limiting to the minimum surgical lesions made to skeletal muscles, and lung inflation without thoracentesis. This method is sparsely invasive, reproducible and reduces post-surgery mortality and complications.

Herein we describe a surgical procedure showing how to achieve permanent ligation of the left-anterior descending coronary artery in mice. This model is of high relevance to investigate the pathophysiology of myocardial infarction and the concomitant biological processes.

Modello di infarto miocardico Murine utilizzando la legatura permanente dell'arteria coronaria discendente anteriore sinistra

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine ...

Delayed Intramyocardial Delivery of Stem Cells after Ischemia Reperfusion Injury in a Murine Model

There is significant interest in the use of stem cells (SCs) for the recovery of cardiac function in individuals with myocardial injuries. Most commonly, cardiac stem cell therapy is studied by delivering SCs concurrently with the induction of myocardial injury. However, this approach presents two significant limitations: the early hostile pro-inflammatory ischemic environment may affect the survival of transplanted SCs, and it does not represent the subacute infarction scenario where SCs will likely be used. Here we describe a two-part series of surgical procedures for the induction of ischemia-reperfusion injury and delivery of mesenchymal stem cells (MSCs). This method of stem cell administration may allow for the longer viability and retention around damaged tissue by circumventing the initial immune response. A model of ischemia reperfusion injury was induced in mice accompanied by the delivery of mesenchymal stem cells (3.0 x 105), stably expressing the reporter gene firefly luciferase under the constitutively expressed CMV promoter, intramyocardially 7 days later. The animals were imaged via ultrasound and bioluminescent imaging for confirmation of injury and injection of cells, respectively. Importantly, there was no added complication rate when performing this two-procedure approach for SC delivery. This method of stem cell administration, collectively with the utilization of state-of-the-art reporter genes, may allow for the in vivo study of viability and retention of transplanted SCs in a situation of chronic ischemia commonly seen clinically, while also circumventing the initial pro-inflammatory response. In summary, we established a protocol for the delayed delivery of stem cells into the myocardium, which can be used as a potential new approach in promoting regeneration of the damaged tissue.

Stems cells are continuously investigated as potential treatments for individuals with myocardial damage, however, their decreased viability and retention within injured tissue can impact their long-term efficacy. In this manuscript we describe an alternative method for stem cell delivery in a murine model of ischemia reperfusion injury.

Consegna intramiocardica ritardata di cellule staminali dopo l'infortunio di ricottamento ischemia in un modello Murine

There is significant interest in the use of stem cells (SCs) for the recovery of cardiac function in individuals with myocardial injuries. Most commonly, ...

A Rat Lung Transplantation Model of Warm Ischemia/Reperfusion Injury: Optimizations to Improve Outcomes

From our experience with rat lung transplantation, we have found several areas for improvement. Information in the existing literature regarding methods for choosing appropriate cuff sizes for the pulmonary vein (PV), pulmonary artery (PA), or bronchus (Br) are varied, thus making the determination of proper cuff size during rat lung transplantation an exercise of trial and error. By standardizing the cuffing technique to use the smallest effective cuff appropriate for the size of the vessel or bronchus, one can make the transplantation procedure safer, faster, and more successful. Since diameters of the PV, PA, and Br are related to the body weight of the rat, we present a strategy to choosing an appropriate size using a weight-based guide. Since lung volume is also related to body weight, we recommend that this relationship should also be considered when choosing the proper volume of air for donor lung inflation during warm ischemia as well as for the proper volume of PBS to be instilled during bronchoalveolar lavage (BAL) fluid collection. We also describe methods for 4th intercostal space dissection, wound closure, and sample collection from both the native and transplanted lobes.

Here, we present optimizations to a rat lung transplantation model that serve to improve outcomes. We provide a size guide for cuffs based on body weight, a measurement strategy to ascertain the 4th intercostal space, and methods of wound closure and BAL (bronchoalveolar lavage) fluid and tissue collection.

Un modello di trapianto di polmone di ratto di ischemia calda / danno da riperfusione: ottimizzazioni per migliorare i risultati

From our experience with rat lung transplantation, we have found several areas for improvement. Information in the existing literature regarding methods ...

Induction of Myocardial Infarction and Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury in Mice

Acute myocardial infarction is a common cardiovascular disease with high mortality. Myocardial reperfusion injury can counteract the beneficial effects of heart reflow and induce secondary myocardial injury. A simple and reproducible model of myocardial infarction and myocardial ischemia-reperfusion injury is a good tool for researchers. Here, a customizable method to create a myocardial infarction (MI) model and MIRI by precision ligation of the left anterior descending coronary artery (LAD) through micromanipulation is described. Accurate and reproducible ligature positioning of the LAD helps obtain consistent results for heart injury. ST-segment changes can help to identify model accuracy. The serum level of cardiac troponin T (cTnT) is used to assess the myocardial injury, cardiac ultrasound is employed to evaluate the myocardial systolic function, and Evans-Blue/triphenyl tetrazolium chloride staining is used to measure infarct size. In general, this protocol reduces procedure duration, ensures controllable infarct size, and improves mouse survival.

Here we describe a simple and reproducible method that can induce myocardial infarction or myocardial ischemia-reperfusion injury in mice by precision ligation of the left anterior descending coronary artery through micromanipulation.

Induzione di infarto miocardico e danno da ischemia-riperfusione miocardica nei topi

Acute myocardial infarction is a common cardiovascular disease with high mortality. Myocardial reperfusion injury can counteract the beneficial effects of ...

Left Coronary Artery Ligation: A Surgical Murine Model of Myocardial Infarction

Ischemic heart disease and subsequent myocardial infarction (MI) is one of the leading causes of mortality in the United States and around the world. In order to explore the pathophysiological changes after myocardial infarction and design future treatments, research models of MI are required. Permanent ligation of the left coronary artery (LCA) in mice is a popular model to investigate cardiac function and ventricular remodeling post MI. Here we describe a less invasive, reliable, and reproducible surgical murine MI model by permanent ligation of the LCA. Our surgical model comprises of an easily reversible general anesthesia, endotracheal intubation that does not require a tracheotomy, and a thoracotomy. Electrocardiography and troponin measurement should be performed to ensure MI. Echocardiography at day 28 after MI will discern heart function and heart failure parameters. The degree of cardiac fibrosis can be evaluated by Masson's trichrome staining and cardiac MRI. This MI model is useful for studying the pathophysiological and immunological alterations after MI.

Presented here is a surgical procedure for permanent ligation of the left coronary artery in mice. This model can be used to investigate the pathophysiology and associated inflammatory response after myocardial infarction.

Legatura coronaria sinistra: un modello chirurgico murino di infarto miocardico

Ischemic heart disease and subsequent myocardial infarction (MI) is one of the leading causes of mortality in the United States and around the world. In ...