Il modello chirurgico di legatura permanente dell'arteria sinistra nei topi può essere utilizzato per studiare la fisiopatologia e la risposta infiammatoria associata dopo infarto miocardico. Questo metodo fornisce un modello murino affidabile e producibile di MI, che è facile, sicuro e meno invasivo. Per iniziare, preriscaldare uno sterilizzatore a perline a 250 gradi Celsius e posizionare strumenti chirurgici autoclavati in esso per alcuni minuti.
Garantire la profondità dell'anestesia nel mouse controllando la risposta a un pizzico fermo del dito. Pesare il topo per stimare il dosaggio del farmaco analgesico pre-operatorio buprenorfina e iniettare il farmaco per via intraperitoneale. Taglia la pelliccia sul lato sinistro del torace usando un rasoio elettrico.
Dopo aver disinfettato il sito chirurgico, posizionare il mouse in posizione supina su una tavola inclinata. Fissare la testa e gli arti del mouse utilizzando una fascia elastica attaccata rispettivamente agli incisivi superiori e al nastro adesivo. Applicare lubrificante oftalmico sterile sugli occhi per prevenire la secchezza durante l'anestesia.
Apri la mascella e tira delicatamente la lingua fuori dalla cavità orale. Identificare l'apertura della laringe illuminando la faringe orale usando un laringoscopio. Tagliare circa 0,5 centimetri da un ago del catetere calibro 24 e inserire l'ago smussato nello schermo di plastica.
Dirigere l'ago smussato con lo scudo di plastica nella trachea. Estrarre l'ago, lasciando lo scudo di plastica nella trachea. Impostare il ventilatore su una frequenza respiratoria di 137 battiti al minuto, ottimizzato per i topi utilizzati in questo studio e il volume corrente 0,18 capacità di chiusura.
Collegare i tubi del respiratore allo schermo del catetere e confermare la corretta intubazione cercando un movimento toracico sincronizzato con il ventilatore. Scollegare il tubo del respiratore dallo schermo del catetere e posizionare l'animale in posizione supina su una tavola chirurgica preriscaldata a temperatura controllata. Ricollegare il mouse al ventilatore.
Dopo aver disinfettato il sito chirurgico, sollevare delicatamente la pelle con una pinza e praticare una piccola incisione trasversale cutanea lungo la linea tra i muscoli pettorali maggiori e minori sinistro usando un paio di forbici chirurgiche. Separare i muscoli pettorali sottostanti con una pinza e forbici da dissezione. Dopo aver praticato un'incisione nel terzo spazio intercostale, allungare delicatamente le costole usando i divaricatori per esporre il ventricolo sinistro.
Spostare il grasso pericardico da parte e individuare l'arteria coronaria sinistra, che corre dal bordo dell'atrio sinistro verso l'apice del cuore. Passa un 8-0 sutura di nylon sotto l'arteria coronaria sinistra con l'aiuto di un portaaghi. Delegare l'arteria coronaria sinistra con un doppio nodo seguito da un secondo nodo.
Rimuovere i divaricatori e inserire un ago da catetere di calibro 22 nella cavità toracica. Rimuovere l'ago, lasciando la punta dello scudo di plastica nella cavità toracica. Chiudere la gabbia toracica utilizzando una sutura di nylon 4-0.
Collegare una siringa allo schermo di plastica da 22 gauge e rimuovere lentamente l'aria in eccesso intrappolata nella cavità toracica premendo delicatamente il torace per stabilire una pressione dell'aria negativa. Rimuovere lo scudo di plastica. Spegnere l'alimentazione di isoflurano e posizionare il mouse sul ventilatore che fornisce ossigeno.
Inizia una respirazione spontanea del topo, spegnere il ventilatore. Tenere il mouse sotto una lampada di calore e monitorare fino a quando non è sveglio. L'animale non deve essere lasciato incustodito fino a quando non ha recuperato abbastanza coscienza per mantenere la recumbency sternale.
Monitorare il mouse quotidianamente per qualsiasi segno di dolore o disagio. Continuare l'iniezione intraperitoneale di buprenorfina ogni 6-8 ore per altri due giorni dopo l'intervento chirurgico. I segnali attivi dell'ECG e della respirazione sono stati verificati prima di acquisire i dati ecocardiografici.
La misurazione ecocardiografica dei parametri funzionali cardiaci è stata osservata 28 giorni dopo la legatura delle arterie coronarie sinistra. Sono state osservate le immagini M-mode della vista peroneale dell'asse corto dei cuori SHAM e MI. Le immagini MI hanno mostrato un movimento difettoso della parete cardiaca dopo la legatura dell'arteria coronaria sinistra.
Indicatori di insufficienza cardiaca, come aumento della massa ventricolare sinistra, diminuzione della frazione di eiezione e diminuzione della gittata cardiaca sono stati osservati nel gruppo MI rispetto al gruppo SHAM. La colorazione tricromatica di Masson delle sezioni del ventricolo inferiore, medio e superiore ha mostrato un aumento della colorazione del collagene nel cuore infartuato, indicando un aumento della fibrosi. Nella maggior parte dei casi, l'arteria non è fattibile.
Tuttavia, legando il tessuto miocardico da 2 a 4 millimetri sotto il bordo dell'atrio sinistro si ottiene una legatura efficiente dell'arteria.
