The authors would like to acknowledge the work of Annemarie Baars and Jos&#233; Lozeman-van &#8216;t Klooster in performing, assisting and teaching experiments using the mHB set-up.

NOTA: Gli esperimenti sono stati approvati dal Comitato di sperimentazione animale della University Medical Center Utrecht e Università di Utrecht, Paesi Bassi. Inoltre, gli esperimenti sugli animali hanno seguito i principi della cura degli animali da laboratorio e si riferiscono alle linee guida per la cura e l&#39;uso dei mammiferi in Neuroscienze e Behavioural Research. 25 1. set-up sperimentale NOTA: L&#39;apparato standard di MHB composto da una scatola PVC grigio sperimentale (100 x 50 x 50 cm) separati da un vano aggiuntivo (50 x 50 x 50 cm) in cui i compagni di gruppo dell&#39;animale sperimentale possono essere posizionati durante il periodo di prova da un trasparente, setto forato 1. Se la presenza di compagni di gruppo è indesiderato o se gli animali ospitati sono testati singolarmente, sostituire la partizione trasparente da una parete in PVC grigio (Figura 1;. Vedi anche Ohl et al (2001) 1). Il MHB (with diverse misure) utilizzati per i test cognitivi sono descritti nel capitolo 5 del protocollo. <ol><li> Posizionare la scheda (60 x 20 x 0,5 cm, in PVC grigio) al centro della scatola. NOTA: La scheda può contenere 20 cilindri (ᴓ 1,5 cm) 14 sfalsati in due linee o 23 cilindri (ᴓ 3 centimetri) 8 sfalsati in tre linee. </li><li> Dividere l&#39;area intorno al bordo da linee nere in 10 rettangoli (20 x 15 cm) e 2 piazze (20 x 20 cm). </li><li> Posizionare una luce fase sopra il bordo per creare un contrasto maggiore dell&#39;intensità della luce tra la scheda (che rappresenta un&#39;area protetta confrontabile con il centro di un campo aperto o nel vano luce di una prova di transizione luce-buio) e la scatola (area protetta) al fine di aumentare il carattere repulsivo del consiglio di amministrazione 4,8. </li><li> Casa gli animali sotto un 12 hr invertito ciclo giorno-notte (ad esempio, luci spente alle 7:00 e luci su alle 7:00 PM). NOTA: Tuttavia, il MHB può ancheDa usare sotto la pianificazione luce convenzionale (vedi la discussione sui potenziali difetti) 1,6. </li><li> Eseguire il test comportamentali nella fase più attiva degli animali (ad esempio, 10:00-2:00) 4,15. </li><li> Mantenere un periodo di adattamento di due settimane dopo l&#39;arrivo degli animali nelle strutture. Durante questo periodo ha la stessa persona che effettua l&#39;esperimento comportamentale di gestire gli animali quattro volte a settimana e comprendono tutte le procedure di trattamento da eseguire durante la prova vera e propria. Maniglia gli animali esclusivamente durante il tempo del giorno in cui gli animali saranno esposti a test in seguito. </li><li> Registrare le sperimentazioni per la conservazione dei dati sul video e al fine di ottimizzare i risultati e ridurre la variabilità dell&#39;osservatore inter, praticare il punteggio comportamentale con una registrazione video di esperimenti precedenti 2. Assicurati di standardizzare tutte le azioni e le procedure eseguite dall&#39;osservatore. </li></ol> 2. Behavioral Testing - senza la presenza di compagni di gruppo <ol><li> Eseguire test comportamentali in camera gli animali sono alloggiati in regolarmente (per evitare eventuali effetti di trasporto in una posizione di test) e installare tutte le apparecchiature di test prima dell&#39;arrivo degli animali nelle strutture (abituare gli animali alla presenza dell&#39;apparecchio). </li><li> Sollevare l&#39;animale dalla base della coda dalla gabbia casa e direttamente posizionarlo nella MHB. </li><li> Inserire ogni animale nell&#39;apparato nello stesso angolo di fronte alla parete (come indicato in Figura 1). </li><li> Lasciare che l&#39;animale di esplorare liberamente la MHB per un periodo di tempo (spesso 5 min 1,6,16-18). </li><li> Hai un osservatore esperto in diretta i parametri comportamentali che utilizzano software comportamentale punteggio. Utilizzare i parametri elencati nella tabella 1. Nota: alcuni parametri comportamentali (ad esempio, a motore e il comportamento esplorativo) potrebbero essere lanciati automaticamente come ad esempio, </em&gt; Discusso da Henry et al. (2010) 19, dopo necessaria regolazione del MHB. </li><li> Pulire l&#39;apparecchio con acqua corrente e un tovagliolo di carta dopo ogni prova per evitare una polarizzazione basata su stimoli olfattivi. NOTA: Possibili effetti testing ordine quando prova gli animali sistemati devono essere tenuti in conto 17,20. </li></ol> 3. Behavioral Testing - in presenza di Gruppo Mates <ol><li> Nel caso della stabulazione in gruppo, misurare l&#39;interazione con il suoi compagni di gabbia durante la sperimentazione animale sperimentale e. <ol><li> Posizionare i compagni di gruppo nel vano gruppo prima del test l&#39;animale sperimentale per consentire assuefazione (principalmente 10-30 min 1,12). NOTA: Test in condizioni socio-stress è possibile, sistemando una gabbia compagno dominante nel vano gruppo quando si verifica un socialmente sconfitto individuale 13. </li><li> Posto l&#39;animale sperimentale nel vano di prova e lasciarlo liberoly esplorare il MHB come descritto nella sezione 2. NOTA: Possibili effetti testing ordine quando prova gli animali sistemati devono essere tenuti in conto 17,20. </li><li> Hai un osservatore esperto in diretta i parametri comportamentali che utilizzano software comportamentale punteggio. Utilizzare i parametri elencati nella tabella 1. </li><li> Pulire l&#39;apparecchio con acqua corrente e un tovagliolo di carta dopo ogni prova per evitare una polarizzazione basata su stimoli olfattivi. </li></ol></li></ol> 4. Novel Object Recognition and Food Intake Inibizione <ol><li> Familiarizzare gli animali con un oggetto (ad esempio un dado o un pellet di cibo) nella loro gabbia home 2 giorni prima dell&#39;esperimento. </li><li> Inserire l&#39;oggetto familiarità nella apparecchiatura 2 cm di distanza da un oggetto romanzo (ad esempio un bullone o cibo non familiare) nell&#39;angolo di fronte al punto di partenza. </li><li> Misurare il tempo che l&#39;animale porta ad avvicinarsi al romanzo e familiare oggetti / cibo. Utilizzare i parametri in &lt;strong&gt; Tabella 1. </li><li> Pulire l&#39;apparecchio con acqua corrente e un tovagliolo di carta dopo ogni prova per evitare una polarizzazione basata su stimoli olfattivi. </li></ol> 5. test cognitivi <ol><li> Inserire un bordo inferiore (35 x 22 x 1 cm) con 10 cilindri nel mezzo della scatola (Figura 1) per testare ratti 3,22. Ridurre la scatola di dimensioni 50 x 50 cm per testare topi 21 inserendo una partizione in PVC grigio. </li><li> PROFUMO tutti i cilindri con un sapore animali vengono attratti (ad esempio, vaniglia) e esca tutto con una ricompensa (ad esempio, un pezzo di mandorla, un premio altamente appetibile per topi e ratti) sotto una griglia in modo che gli animali non possono rimuoverlo. </li><li> Cilindri Cue (spesso tre) con un anello colorato (in contrasto con il PVC grigio) e li esca con una ricompensa rimovibile (ad esempio, 0,05 g pezzo di mandorla). </li><li> Familiarizzare gli animali con la ricompensa giornaliera nei 2 giorni prima l&#39;esperimentoloro gabbia a casa, offrendo con le pinzette e fare in modo che gli animali mangiano. </li><li> Hai un osservatore esperto in diretta i parametri comportamentali che utilizzano software comportamentale punteggio. Misurare i parametri elencati nella Tabella 2 in aggiunta ai parametri comportamentali menzionati nella sezione 2 (Tabella 1), ad eccezione dei parametri relativi al rilevamento di oggetti o assunzione di cibo inibizione. </li><li> Fase 1: Con ogni animale, effettuare quattro prove al giorno con un intervallo inter-trial costante (ad esempio, 30-60 min) fino ad una costante di tempo per completare un processo viene raggiunto (cioè, quando tutti e tre pezzi di mandorla sono stati raccolti). </li><li> Fase 2: Cue e esca tre cilindri diversi e pongono gli animali nel setup per quattro prove per testare la capacità di apprendimento di inversione. </li><li> Pulire l&#39;apparecchio con acqua corrente e un tovagliolo di carta dopo ogni prova per evitare una polarizzazione basata su stimoli olfattivi. </li></ol>

<ol>
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Rev. 26 (8), 907-923 (2002).</li><li>Ohl, F., Roedel, A., Binder, E., Holsboer, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+high+and+low+anxiety+on+cognitive+performance+in+a+modified+hole+board+test+in+C57BL/6+and+DBA/2+mice.">Impact of high and low anxiety on cognitive performance in a modified hole board test in C57BL/6 and DBA/2 mice.</a> Eur. J. Neurosci. 17 (1), 128-136 (2003).</li><li>Gordan, M. L., Jungwirth, B., Ohl, F., Kellermann, K., Kochs, E. 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The authors have nothing to disclose.

Il paradigma MHB può essere utilizzato per misurare molteplici dimensioni del comportamento incondizionato. Il protocollo può essere leggermente modificato a seconda dello scopo dell&#39;esperimento. In questo protocollo discutiamo le impostazioni, i tempi e le misure di solito utilizzati nel nostro laboratorio. Tuttavia, piccole deviazioni alle misurazioni dell&#39;apparato sono stati utilizzati in passato e anche la quantità di cilindri sul bordo possono variare 3. Spesso studi impiegano un tempo di prova di 5 minuti per ogni prova, ma altre volte test possono anche essere opportuno, vale a dire, terminando la prova non appena un processo cognitivo è stato completato con successo e ad estendere i tempi di test se gli animali sono molto ansiosi o di handicap. L&#39;ora del giorno di test è stato selezionato per essere in condizioni di luce rossa dal roditori sono animali notturni e sono più attivi nella prima fase di buio. Roedel et al. (2006) mostra gli effetti di luce o di testing fase oscura sulle prestazioni comportamentali e cognitivenei topi DBA nel MHB 16. Altri studi hanno eseguito esperimenti MHB in condizioni di luce bianca 1,6, tuttavia, va notato che il test in condizioni di luce bianca può indurre inibizione comportamentale e perturbazioni cognitivo (come mostrato in topi DBA) 16. Le tabelle 1 e 2 contengono una grande quantità di parametri comportamentali da misurare. Durante l&#39;analisi dei dati questo può portare ad alcuni parametri che indicano un aumento significativo di ad esempio &#39;latenza alla prima tavola entrata&#39;, ma non in altri parametri dello stesso sistema motivazionale (in questo caso &#39;Avoidance&#39;). In alcuni casi, questo può portare a risultati inconcludenti. Guilloux et al. (2011) ha introdotto z-score comportamentali integrati per il fenotipo comportamentale nei topi 24. Con l&#39;uso di z-score comportamentali integrati i parametri multipli possono essere combinati in un singolo z-score descrive un particolare motivatiosistema finale. I successivi z-score possono a loro volta essere più facilmente rispetto attraverso test comportamentali ed esperimenti. Oltre alle caratteristiche descritte di questo paradigma, un uso più profonda emerso nello studio di Salomons et al. (2012). L&#39;assuefazione alla novità di due ceppi di topi (BALC / CJ e 129P3 / J) nel MHB è stato confrontato, esibendo una differenza in termini di flessibilità comportamentale che indica un profilo non-adattiva del comportamento dei topi 129P3 / J 4, mirroring compromessa capacità di adattamento e, probabilmente, anche ansia patologica. Concludendo, il MHB permette di misurare molteplici dimensioni comportamentali in un singolo esperimento. Combinando le caratteristiche di una lavagna tradizionale buco e test a campo aperto, comportamento incondizionato, l&#39;interazione sociale, la cognizione e capacità di adattamento, cioè, il benessere può essere indagato. Questo possibile verificare per esempio essere utilizzato per valutare le variazioni comportamentali dovuti pharmacological- e / omanipolazioni genetiche, l&#39;allevamento selettivo e capacità di adattamento. In confronto alle batterie di test classici, il numero di animali necessari è chiaramente ridotto e stress vissuto dagli animali durante la prova è estremamente bassa.

La scheda buco modificata (MHB) viene utilizzato per valutare molteplici dimensioni del comportamento incondizionata, soprattutto in topi e ratti 1. Un certo numero di prove ampiamente utilizzati misurare un singolo parametro comportamentale che non copre completamente l&#39;intero fenotipo di una dimensione comportamentale. Il MHB è stato sviluppato sulla base del concetto che i roditori possono mostrare il loro ricco repertorio comportamentale solo in un ambiente di test ricco 2 e permette quindi di osservazioni etologiche complesse. Il set-up comprende le caratteristiche del bordo del foro tradizionale e il test a campo aperto, risultando in un unico paradigma complesso che superi gli svantaggi di una batteria di test (ad esempio, nel ridurre il numero di animali usato 1,3,4, aggirando la possibili effetti di ordine di prova 5, e riducendo il tempo-effetto e costi 6). In contrasto con la maggior parte dei test comportamentali (ad esempio, Hånell &amp; Marklund, 2014) 7 &lt;/ Sup&gt;, un vantaggio della MHB è che gli animali non hanno bisogno di essere cibo privati ​​per aumentare la motivazione per risolvere il compito. Inoltre, l&#39;isolamento sociale può essere eluso durante la prova mettendo compagni di gruppo dell&#39;animale sperimentale in un (gruppo-) vano separato dal vano di prova da un setto forato trasparente, consentendo visivo, uditivo e olfattivo contatto 8,9. Il MHB è stato (farmacologicamente) validato sia per topi e ratti 1,6. Una vasta gamma di comportamenti può essere misurata, come comportamento di evitamento, la valutazione del rischio, l&#39;eccitazione, l&#39;esplorazione, l&#39;attività locomotoria, assuefazione, affinità sociale e cognizione 2,8-10. Inoltre, il MHB può essere combinato con un test di inibizione dell&#39;assunzione di cibo, così come romanzo oggetto test di riconoscimento 10,11. Infine, il MHB può anche essere usato per eseguire esperimenti di stress sociali testando animali socialmente vinti ponendo l&#39;individuo dominanteil vano gruppo 12,13. Questo protocollo per topi e ratti darà una panoramica delle molteplici applicazioni del MHB.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="843">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">Name of Reagent/ Equipment</td>
			<td style="width:133px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:380px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="254">
			<td height="254" style="height:255px;width:211px;">Standard mHB apparatus</td>
			<td style="width:133px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td style="width:380px;">The standard mHB apparatus consists of a grey PVC experimental box (100x50x50 cm) separated from a group compartment (50x50x50 cm) by a transparent, perforated partition. If the presence of group mates is unwanted or if individually housed animals are tested, the transparent partition is replaced by a partition made of grey PVC. The board (60x20x0.5 cm; made of grey PVC) is placed in the middle of the box and can contain 20 cylinders (&#7443; 1.5 cm) staggered in two lines or 23 cylinders (&#7443; 3 cm) staggered in three lines positioned on the board. The area around the board is divided by black lines into 10 rectangles (20x15 cm) and 2 squares (20x20 cm).</td>
		</tr>
		<tr height="210">
			<td height="210" style="height:210px;width:211px;">Cognitive mHB apparatus</td>
			<td style="width:133px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>The box for cognitive testing is 50x50 cm by inserting a partition made of grey PVC in the standard mHB. A smaller board (35x22x1 cm) with 10 cylinders is placed in the middle of the box. All cylinders are scented with a flavor animals are attracted to (e.g. vanilla) and all are baited with a reward (e.g. a piece of almond) beneath a grid so the animals cannot remove it. Cylinders (often three) are cued with a colored ring (contrasting with the grey PVC) and are baited with a removable reward (e.g. 0.05 g piece of almond).&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Vanilla flavor</td>
			<td style="width:133px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>Vanilla flavor dissolved in water (0.02%)</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">Camera</td>
			<td style="width:133px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>Camera that generates sufficient quality output to rescore the behavior from video.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">Stage light</td>
			<td style="width:133px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>A theather light that allows to adjust the light intensity and the dimensions of the surface that is lit.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="88">
			<td height="88" style="height:88px;width:211px;">Behavioral scoring software</td>
			<td style="width:133px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>Behavioral scoring software.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the modified hole board - measuring behavior, cognition and social interaction in mice and rats

Questo protocollo descrive la scheda buco modificata (MHB), che combina le caratteristiche di una scheda buco tradizionale e in campo aperto ed è progettato per misurare molteplici dimensioni del comportamento incondizionato a piccoli mammiferi di laboratorio (ad esempio, topi, ratti, toporagni albero e piccoli primati). Questo paradigma è una valida alternativa per l&#39;uso di una batteria di prova comportamentale, dal momento che un ampio spettro comportamentale profilo comportamentale di un animale può essere studiata in un singolo test. L&#39;apparecchiatura è costituita da una scatola, che rappresenta l&#39;area &#39;protetta&#39;, separate da un compartimento gruppo. Una tavola, in cui piccoli cilindri sono sfalsate in tre linee, è posto al centro della scatola, che rappresenta l&#39;area &#39;non protetta&#39; del set-up. Le capacità cognitive degli animali possono essere misurati con il tasso di adescamento dei cilindri sulla scheda e misurando la memoria di lavoro e di riferimento. Altro comportamento incondizionato, come activity-Related-, ansia Correlate e il comportamento sociale, si può osservare con questo paradigma. Flessibilità comportamentale e la capacità di abituare ad un nuovo ambiente possono inoltre essere osservate sottoponendo gli animali a più prove in MHB, rivelando spaccato capacità di adattamento degli animali. A causa di testare gli effetti dell&#39;ordine in una batteria di prova comportamentale, animali naive dovrebbero essere utilizzati per ogni singolo esperimento. Testando molteplici dimensioni comportamentali in un unico paradigma e quindi aggirare questo problema, il numero di animali sperimentali utilizzati è ridotto. Inoltre, evitando l&#39;isolamento sociale durante il test e senza la necessità di alimentare privare gli animali, la MHB rappresenta un sistema di prova comportamentale, inducendo eventuali bassissima quantità di stress.

La grande quantità di parametri che possono essere misurati in MHB rendono questa configurazione particolarmente adatto a misurare molteplici dimensioni comportamentali. Un esempio è l&#39;identificazione di adattamento comportamentale ad un ambiente romanzo di esposizione ripetuta alla prova. . Salomons et al (2010) hanno studiato l&#39;abitudine di due ceppi di topi inbred (BALB / CJ e 129P3 / J) al MHB in due diverse condizioni di luce (luce rossa: il contrasto tra scatola e pensione: 45 lux contro luce bianca: contrasto tra scatola e cartone: 115 lux (vedere anche il paragrafo 1.3 del protocollo)) 4. Topi BALC / CJ mostrano una diminuzione (abituare) latenza fino alla prima voce di pensione (vedi tabella 1), in condizioni di luce rossa, come mostrato in Figura 2A. Contrastingly, 129P3 / J topi mostrano alcun segno di assuefazione su prove. La figura 2B mostra l&#39;esperimento in condizioni di luce bianca. Topi BALB / CJ mostrare più una latenza riduzione della prima voce tavola su prove anche se che l&#39;unanimals mostrano un modello assuefazione più lento rispetto alla condizione di luce rossa. Topi 129P3 / J non solo mostrare più compromessa assuefazione, ma anche una tendenza verso sensibilizzazione sotto la condizione di luce bianca. Allo stesso modo, in uno studio di Salomons (2012) 129P2 / OlaHsd topi hanno mostrato una flessibilità comportamentale alterata in risposta rispetto novità a BALB / cOlaHsd topi 23. La differenza nella capacità assuefazione diventa così evidente tra due ceppi inbred di topi durante il test in MHB 4. La versione cognitiva del MHB può ad esempio essere utilizzata per misurare disturbi cognitivi nei topi. Van der Kooij et al. (2010) usato questo set-up per misurare il funzionamento cognitivo di C57BL / 6J con lieve cerebrale ipossia-ischemia (45 min di ipossia; HI-45), grave HI (75 min di ipossia; HI-75) e verso sham- topi di controllo 9. La possibilità di effettuare le prove (cioè, per i fori innescati meno di 5 min) è mostrato in Figura 3A. </strong&gt; Il numero di errori di memoria a breve termine (rivisita a un foro esca), errori di memoria a lungo termine (visite a un buco non esca) e gli errori di omissione (nessuna visita a un buco esca) sono mostrati in figura 3B-D rispettivamente. Per confermare che il gruppo HI-45 non ha avuto deficit cognitivo, questo gruppo è stato testato contro i finti-controlli in un compito di inversione. I tre fori esca sono stati nominati per tre cilindri differenti e gli animali sono stati testati per 4 prove. L&#39;effetto di inversione diventa evidente quando si confrontano l&#39;ultima prova della prima fase con il primo processo di inversione di fase. La durata di completare le quattro prove inversione fornisce un&#39;indicazione sulle prestazioni complessive. La Figura 4 mostra la latenza per completare il processo per entrambi i gruppi e un chiaro effetto complessivo del trattamento è evidente. Ciò significa che nel compito di inversione esiste effettivamente una perdita di flessibilità cognitiva (re-learning) nel gruppo HI-45 che sia<html> venuto rilevabile utilizzando il MHB 9. <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig1.jpg" /> Figura 1. Schema della scheda buco modificato. (A) Il set-up è composto da un vano di prova (box) con in mezzo il (non protetto) scheda indicata con linee a zig-zag e il vano gruppo. <img alt="Figura 5" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig5.jpg" /> = Romanzo oggetto, <img alt="Figura 6" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig6.jpg" /> = Oggetto familiare, <img alt="Figura 7" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig7.jpg" /> = Punto di partenza. (B) Schema della versione cognitiva della scheda buco modificato per topi. (C) Vista laterale di un cilindro usati nella versione cognitiva della scheda buco modificato. Un pezzo di mandorla è disposto sotto la griglia di tutti i cilindri.target = &quot;_ blank&quot;&gt; Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig2.jpg" /> Figura 2. La luce rossa o condizioni di luce bianca. (A) Latenza fino prima voce di bordo (media + SEM) di BALB / CJ e 123P3 / J topi misurati in condizioni di luce rossa (scatola 0-5 lux e pensione 45 lux). A ripetute misure ANOVA con regolazione Huyn-Feldt rivelato un ceppo (P = 0.025), studio (p &lt;0.001) e studio di interazione x ceppo (P &lt;0,001) effetto post hoc analisi:. Tra ceppi: * = p &lt;0,0026, tra due prove consecutive: $ = P &lt;0,0026 (BALB / CJ) (B) La latenza del primo ingresso scheda (media + SEM) in condizioni di luce bianca (scatola 0-5 lux e bordo 120 lux).. A ripetute misure ANOVA con regolazione Huyn-Feldt rivelato un ceppo (P = 0,031), studio (p &lt;0.001) e studio di interazione x ceppo (P &lt;0,001) effe. ct analisi post hoc: tra i ceppi: * = p &lt;0,0026, tra due prove consecutive: $ = P &lt;0,0026 (BALB / CJ) e T = P &lt;0,0026 (123P3 / J). Questa cifra è stata modificata da Salomons et al. 2010 4. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52529/52529fig2highres.jpg" target="_blank">Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.</a> <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig3.jpg" /> Figura 3. test cognitivi nella MHB (fase 1). Tutte le cifre mostrano media + SEM. (A) La latenza di completare il processo (sec) dei topi sham-controllo, HI-45 e HI-75. (B) Numero di errori di omissione, visite foro (C) non esca e (D) rivisita per fori innescati. * = P &lt;0.05, ** = P &lt;0,01, *** = P &lt;0.001 vs sham HI-75, # = P &lt;0.05, ## = P &lt;0.01, ### = P &lt;0.001HI-45 vs HI-75. Questo dato è stato modificato da van der Kooij et al. 2010 9. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52529/52529fig3highres.jpg" target="_blank">Cliccate qui per vedere una versione più grande di questa figura.</a> <img alt="Figura 4" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig4.jpg" /> Figura 4. Reversal apprendimento compito (fase 2). La latenza per completare un processo (sec) nel compito di inversione di apprendimento (media + SEM). Effetti di prova: # = P &lt;0.05, ## = P &lt;0.01 (primo compito inversione di prova vs. precedente processo). Effetto del trattamento: * = P &lt;0.05, ** = P &lt;0.01 (HI-45 vs sham). Questo dato è stato modificato da van der Kooij et al. 2010 9. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td> Sistema </td><td> Attività </td><td> Parametro misurato </td></tr><tr><td> Avoio ballo </td><td> Ingresso Consiglio </td><td> Frequenza, la latenza (s), la durata (%) e la durata media (s) sulla scheda </td></tr><tr><td> Valutazione del rischio </td><td> Attends allungato </td><td> Frequenza e latenza (s) di posture del corpo allungato (compresi arti posteriori) </td></tr><tr><td> Arousal </td><td> Grooming </td><td> Frequenza, la latenza (s), la durata (%) e la durata media (s) di auto-governare </td></tr><tr><td></td><td> Defecazione </td><td> Frequenza e la latenza (s) di boli prodotto </td></tr><tr><td></td><td> Minzione </td><td> Frequenza e la latenza (s) di minzioni </td></tr><tr><td> Esplorazione Diretto </td><td> Visite Hole </td><td> Frequenza e la latenza (s) di visite cilindri </td></tr><tr><td></td><td> Esplorazione oggetto Novel </td><td> Frequenza, la latenza (s), la durata (%) e la durata media (s) esplorare il nuovo oggetto </td></tr><tr><td> Esplorazione undirected </td><td> Scatola allevamento &lt;/ Td&gt; <td> Frequenza e latenza (s) della impennate nella casella (zampe anteriori non toccare la parete) </td></tr><tr><td></td><td> Bordo allevamento </td><td> Frequenza e la latenza (s) di impennate sulla scheda </td></tr><tr><td></td><td> Esplorazione Hole </td><td> Frequenza e la latenza (s) di esplorazioni cilindri </td></tr><tr><td> Memoria </td><td> Esplorazione oggetto familiare </td><td> Frequenza, la latenza (s), la durata (%) e la durata media (s) esplorando l&#39;oggetto familiare </td></tr><tr><td> Affinità sociale </td><td> Interazione di gruppo </td><td> Frequenza, latenza (s), durata (%) e la durata media (s) interagente con il vano di gruppo </td></tr><tr><td> Attività locomotoria </td><td> Crossing Linea </td><td> Frequenza e la latenza (s) di incroci di linea </td></tr></tbody></table> Tabella 1: Elenco dei parametri comportamentali <table border="0" cellpadding="0" cellspacing = &quot;0&quot;&gt; <tbody><tr><td> Sistema di memoria </td><td> Parametro </td><td> Descrizione </td></tr><tr><td> La memoria a lungo termine </td><td> Scelta sbagliata </td><td> Visita a cilindro non innescati; naso sotto il bordo </td></tr><tr><td> Errore di omissione </td><td> Omissione di un cilindro esca </td><td> Nessuna visita a un cilindro esca </td></tr><tr><td> Memoria a breve termine </td><td> Scelta ripetuta </td><td> Rivisitare a cilindro esca; naso sotto il bordo </td></tr><tr><td> Le prestazioni generali </td><td> Tempo di prova totale </td><td> Tempo fino sono stati visitati tutti i cilindri innescati </td></tr></tbody></table> Tabella 2: Elenco dei parametri cognitivi

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The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

This protocol describes the modified hole board, which is a behavioral test set-up that comprises the characteristics of an open field and a traditional hole board. This set-up enables the differential analysis of unconditioned behavior of small laboratory mammals as well as the analysis of cognitive abilities.

The Hole Consiglio Modified - Behavior, Cognition e l&#39;interazione sociale in topi e ratti di misura

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

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Research

JoVE Journal

Behavior

17.6K Views.  Utrecht University. This protocol describes the modified hole board, which is a behavioral test set-up that comprises the characteristics of an open field and a traditional hole board. This set-up enables the differential analysis of unconditioned behavior of small laboratory mammals as well as the analysis of cognitive abilities. 

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The Successive Alleys Test of Anxiety in Mice and Rats

The plus-maze was derived from the early work of Montgomery. He observed that rats tended to avoid the open arms of a maze, preferring the enclosed ones. Handley, Mithani and File et al. performed the first studies on the plus-maze design we use today, and in 1987 Lister published a design for use with mice. 
Time spent on, and entries into, the open arms are an index of anxiety; the lower these indices, the more anxious the mouse is. Alternatively, a mouse that spends most of its time in the closed arms is classed as anxious. 
One of the problems of the plus-maze is that, while time spent on, and entries into, the open arms is a fairly unambiguous measure of anxiety, time in the central area is more difficult to interpret, although time spent here has been classified as &#x201C;decision making&#x201D;. In many tests central area time is a considerable part of the total test time.
Shepherd et al. produced an ingenious design to eliminate the central area, which they called the &#x201C;zero maze&#x201D;. However, although used by several groups, it has never been as widely adopted as the plus-maze. 
In the present article I describe a modification of the plus-maze design that not only eliminates the central area but also incorporates elements from other anxiety tests, such as the light-dark box and emergence tests. It is a linear series of four alleys, each having increasing anxiogenic properties. It has given similar results to the plus-maze in general. Although it may not be more sensitive than the plus-maze (more data is needed before a firm conclusion can be reached on this point), it provides a useful confirmation of plus-maze results which would be useful when, for example, only a single example of a mutant mouse was available, as, for example, in ENU-based mutagenesis programs.

The plus-maze measures anxiety-like behaviour in rodents. There are two opposite closed and two opposite open arms; anxious rodents avoid the open arms. The central area is neither completely open nor closed, so time spent here is ambiguous and difficult to interpret. Here a modification of the plus-maze protocol eliminating this area is described.

Le successive Vicoli test di ansia nei topi e nei ratti

The plus-maze was derived from the early work of Montgomery. He observed that rats tended to avoid the open arms of a maze, preferring the enclosed ones.  ...

Ricerca

Comportamento

Moderate Prenatal Alcohol Exposure and Quantification of Social Behavior in Adult Rats

Alterations in social behavior are among the major negative consequences observed in children with Fetal Alcohol Spectrum Disorders (FASDs). Several independent laboratories have demonstrated robust alterations in the social behavior of rodents exposed to alcohol during brain development across a wide range of exposure durations, timing, doses, and ages at the time of behavioral quantification. Prior work from this laboratory has identified reliable alterations in specific forms of social interaction following moderate prenatal alcohol exposure (PAE) in the rat that persist well into adulthood, including increased wrestling and decreased investigation. These behavioral alterations have been useful in identifying neural circuits altered by moderate PAE1, and may hold importance for progressing toward a more complete understanding of the neural bases of PAE-related alterations in social behavior. This paper describes procedures for performing moderate PAE in which rat dams voluntarily consume ethanol or saccharin (control) throughout gestation, and measurement of social behaviors in adult offspring.

The goal of the protocol presented here is to describe procedures to expose rats to moderate levels of alcohol during prenatal brain development and to quantify resulting alterations in social behavior during adulthood.

Moderata esposizione prenatale di alcool e quantificazione di comportamento sociale in ratti adulti

Alterations in social behavior are among the major negative consequences observed in children with Fetal Alcohol Spectrum Disorders (FASDs). Several ...

Assessment of Social Cognition in Non-human Primates Using a Network of Computerized Automated Learning Device (ALDM) Test Systems

Fagot &#38; Paleressompoulle1 and Fagot &#38; Bonte2 have published an automated learning device (ALDM) for the study of cognitive abilities of monkeys maintained in semi-free ranging conditions. Data accumulated during the last five years have consistently demonstrated the efficiency of this protocol to investigate individual/physical cognition in monkeys, and have further shown that this procedure reduces stress level during animal testing3. This paper demonstrates that networks of ALDM can also be used to investigate different facets of social cognition and in-group expressed behaviors in monkeys, and describes three illustrative protocols developed for that purpose. The first study demonstrates how ethological assessments of social behavior and computerized assessments of cognitive performance could be integrated to investigate the effects of socially exhibited moods on the cognitive performance of individuals. The second study shows that batteries of ALDM running in parallel can provide unique information on the influence of the presence of others on task performance. Finally, the last study shows that networks of ALDM test units can also be used to study issues related to social transmission and cultural evolution. Combined together, these three studies demonstrate clearly that ALDM testing is a highly promising experimental tool for bridging the gap in the animal literature between research on individual cognition and research on social cognition.

Assessment of Social Cognition in Non-human Primates Using a Network of Computerized Automated Learning Device ALDM Test Systems

Fagot &#38; Paleressompoulle1 have published an automated learning device (ALDM) aimed at testing individual cognitive abilities in semi-free ranging monkeys. The main goal of our protocol is to use a network of ALDM test units to study social cognition in non-human primates.

Valutazione della cognizione sociale in primati non umani Uso di una rete di computerizzato Automated Learning dispositivo Systems (ALDM) prova

Fagot &#38; Paleressompoulle1 and Fagot &#38; Bonte2 have published an automated learning device (ALDM) for the study of cognitive abilities of monkeys ...

The Social Dimension of Stress: Experimental Manipulations of Social Support and Social Identity in the Trier Social Stress Test

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations supportive behavior of other people as well as positive social relationships can act as powerful resources to cope with stress. In order to study the interplay between these variables, this protocol describes two effective experimental manipulations of social relationships and supportive behavior in the laboratory. In the present article, these two manipulations are implemented in the Trier Social Stress Test (TSST)&#8212;a standard stress induction paradigm in which participants are subjected to a simulated job interview. More precisely, we propose (a) a manipulation of the relationship between different protagonists in the TSST by making a shared social identity salient and (b) a manipulation of the behavior of the TSST-selection committee, which acts either supportively or unsupportively. These two experimental manipulations are designed in a modular fashion and can be applied independently of each other but can also be combined. Moreover, these two manipulations can also be integrated into other stress protocols and into other standardized social interactions such as trust games, negotiation tasks, or other group tasks.

Previous research on the social dimension of stress has focused on two important variables: social identity and social support. This protocol introduces an effective experimental manipulation of these two social variables and describes their implementation in a standard stress induction paradigm (Trier Social Stress Test).

La dimensione sociale dello stress: manipolazioni sperimentali di sostegno sociale e identità sociale nella Trier Social Stress Test

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations ...

A Method for Evaluating the Reinforcing Properties of Ethanol in Rats without Water Deprivation, Saccharin Fading or Extended Access Training

Operant oral self-administration methods are commonly used to study the reinforcing properties of ethanol in animals. However, the standard methods require saccharin/sucrose fading, water deprivation and/or extended training to initiate operant responding in rats. This paper describes a novel and efficient method to quickly initiate operant responding for ethanol that is convenient for experimenters and does not require water deprivation or saccharin/sucrose fading, thus eliminating the potential confound of using sweeteners in ethanol operant self-administration studies. With this method, Wistar rats typically acquire and maintain self-administration of a 20% ethanol solution in less than two weeks of training. Furthermore, blood ethanol concentrations and rewards are positively correlated for a 30 min self-administration session. Moreover, naltrexone, an FDA-approved medication for alcohol dependence that has been shown to suppress ethanol self-administration in rodents, dose-dependently decreases alcohol intake and motivation to consume alcohol for rats self-administering 20% ethanol, thus validating the use of this new method to study the reinforcing properties of alcohol in rats.

This protocol describes a novel and efficient method to quickly initiate operant responding for ethanol in rats that, contrary to standard methods, does not require water deprivation or saccharin/sucrose fading to initiate responding.

Un metodo per valutare le proprietà di rinforzo di etanolo in ratti senza acqua privazione, Saccarina dissolvenza o di formazione accesso esteso

Operant oral self-administration methods are commonly used to study the reinforcing properties of ethanol in animals. However, the standard methods ...

Examining Recall Memory in Infancy and Early Childhood Using the Elicited Imitation Paradigm

The ability to recall the past allows us to report on details of previous experiences, from the everyday to the significant. Because recall memory is commonly assessed using verbal report paradigms in adults, studying the development of this ability in preverbal infants and children proved challenging. Over the past 30 years, researchers have developed a non-verbal means of assessing recall memory known as the elicited or deferred imitation paradigm. In one variant of the procedure, participants are presented with novel three-dimensional stimuli for a brief baseline period before a researcher demonstrates a series of actions that culminate in an end- or goal-state. The participant is allowed to imitate the demonstrated actions immediately, after a delay, or both. Recall performance is then compared to baseline or to performance on novel control sequences presented at the same session; memory can be assessed for the individual target actions and the order in which they were completed. This procedure is an accepted analogue to the verbal report techniques used with adults, and it has served to establish a solid foundation of the nature of recall memory in infancy and early childhood. In addition, the elicited or deferred imitation procedure has been modified and adapted to answer questions relevant to other aspects of cognitive functioning. The broad utility and application of imitation paradigms is discussed, along with limitations of the approach and directions for future research.

The elicited imitation procedure was established to examine the development of recall memory in infancy and early childhood. This procedure has been widely used to establish a solid foundation of the nature of recall memory in infancy and early childhood.

Esaminando Richiamo Memoria in prima e seconda infanzia Utilizzando il suscitato imitazione Paradigma

The ability to recall the past allows us to report on details of previous experiences, from the everyday to the significant. Because recall memory is ...

The Rodent Psychomotor Vigilance Test (rPVT): A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article describes a rodent version of the PVT&#8212;termed the &#34;rPVT&#34;&#8212;that measures similar aspects of attention (i.e., performance accuracy, motor speed, premature responding, and lapses in attention). Data are presented that demonstrate both the short- and long-term usefulness of the rPVT when employed with laboratory rats. Rats easily learn the rPVT, and learning to perform the basic procedure takes less than two weeks of training. Once acquired, rat performances in the rPVT show a high degree of similarity to these same performance measures in the human PVT, including similarities in, lapses in attention, reaction times, vigilance decrements across session time (i.e., the human &#34;time-on-task&#34; effects), and the response-stimulus interval (RSI) effect described for humans. Thus the rPVT can be an extremely valuable tool for assessing the effects of a wide range of variables on sustained attention quite similar to human PVT performances, and thus can be useful for developing novel treatments for neurobehavioral dysfunctions.

The Rodent Psychomotor Vigilance Test rPVT: A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

A rat version of the human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is described that measures aspects of attention similar to those measured with the human PVT, including aspects of human vigilance such as performance accuracy, motor speed, premature responding, and lapses in attention.

Il roditore psicomotorio vigilanza Test (rPVT): un metodo per la valutazione delle prestazioni neurocomportamentali in ratti e topi

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article ...

Measuring Active and Passive Tameness Separately in Mice

Domesticated animals such as dogs and laboratory mice show a high level of tameness, which is important for humans to handle them easily. Tameness has two behavioral components: a reluctance to avoid humans (passive tameness) and a motivation to approach humans (active tameness). To quantify these components in mice, we previously developed behavioral tests for active tameness, passive tameness, and the willingness to stay on a human hand, each designed to be completed within 3 min. The data obtained were used for selective breeding, with a large number of mice analyzed per generation. The active tameness test measures the movement of the mouse toward a human hand and the contact it engages in. The passive tameness test measures the duration of time that a mouse tolerates human touch. In the stay-on-hand test, a mouse is placed on a human hand and touched slowly using the thumb of that hand; the duration of time that the animal remains on the hand is measured. Here, we describe the test set-up and apparatus, explain the procedures, and discuss the appropriate data analysis. Finally, we explain how to interpret the results.

Tameness in animals includes a reduction of avoidance responses to humans (passive tameness) and an increase in active approaches to humans (active tameness). Here, we describe detailed protocols for three behavioral tests (active tameness, passive tameness, and stay-on-hand tests) to separately measure the active and passive tameness of mice.

Attiva e passiva docilità separatamente nei topi di misura

Domesticated animals such as dogs and laboratory mice show a high level of tameness, which is important for humans to handle them easily. Tameness has two ...

A High-performance Liquid Chromatography Measurement of Kynurenine and Kynurenic Acid: Relating Biochemistry to Cognition and Sleep in Rats

The kynurenine pathway (KP) of tryptophan degradation has been implicated in psychiatric disorders. Specifically, the astrocyte-derived metabolite kynurenic acid (KYNA), an antagonist at both N-methyl-d-aspartate (NMDA) and &#945;7 nicotinic acetylcholine (&#945;7nACh) receptors, has been implicated in cognitive processes in health and disease. As KYNA levels are elevated in the brains of patients with schizophrenia, a malfunction at the glutamatergic and cholinergic receptors is believed to be causally related to cognitive dysfunction, a core domain of the psychopathology of the illness. KYNA may play a pathophysiologically significant role in individuals with schizophrenia. It is possible to elevate endogenous KYNA in the rodent brain by treating animals with the direct bioprecursor kynurenine, and preclinical studies in rats have demonstrated that acute elevations in KYNA may impact their learning and memory processes. The current protocol describes this experimental approach in detail and combines a) a biochemical analysis of blood kynurenine levels and brain KYNA formation (using high-performance liquid chromatography), b) behavioral testing to probe the hippocampal-dependent contextual memory (passive avoidance paradigm), and c) an assessment of sleep-wake behavior [telemetric recordings combining electroencephalogram (EEG) and electromyogram (EMG) signals] in rats. Taken together, a relationship between elevated KYNA, sleep, and cognition is studied, and this protocol describes in detail an experimental approach to understanding function outcomes of kynurenine elevation and KYNA formation in vivo in rats. Results obtained through variations of this protocol will test the hypothesis that the KP and KYNA serve pivotal roles in modulating sleep and cognition in health and disease states.

Alterations in the kynurenine pathway (KP) neuroactive metabolites are implicated in psychiatric illnesses. Investigating the functional outcomes of an altered kynurenine pathway metabolism in vivo in rodents may help elucidate novel therapeutic approaches. The current protocol combines biochemical and behavioral approaches to investigate the impact of an acute kynurenine challenge in rats.

Una misura di cromatografia liquida ad alte prestazioni della chinurenina e acido chinurenico: materia biochimica di cognizione e di sonno in ratti

The kynurenine pathway (KP) of tryptophan degradation has been implicated in psychiatric disorders. Specifically, the astrocyte-derived metabolite ...

A Conditioned Place Preference Protocol for Measuring Incubation of Craving in Rats

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed incubation of drug craving. Here, we describe a morphine conditioned place preference (CPP) protocol for measuring the incubation of craving in rats. In this protocol, a CPP paradigm mainly employing somatosensory cues is used to establish a long-term reward memory of morphine. A three-chamber CPP box that differs in the texture of the chamber floor is constructed. First, the animals are tested for their baseline preference to the two side chambers for three consecutive days. Then, they are injected intraperitoneally with morphine/saline and put into their non-preferred/preferred chamber for 45 min. After 6 days of conditioning, their preference to the side chambers is tested for 15 min at different time points after the last conditioning session. With this paradigm, the reward memory of morphine could last for at least 18 days. To test whether the above-mentioned protocol can model increased craving, the number of entrances into the two side chambers are counted during the abstinence period. The results show that the entrances increased, suggesting that the CPP paradigm could mimic the incubation of craving. Future studies can employ this model to study neural mechanisms underlying long-term memory and incubation of craving.

Here, a morphine conditioned place preference (CPP) protocol is described to measure incubation of craving in rats.

Un protocollo di Conditioned Place Preference per l'incubazione di Craving nei ratti di misura

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed ...