Quest'opera è stata sostenuta da donazioni per la ricerca scientifica (KAKENHI) come segue: 15H 05724, 16H 01491 e 15H 04289.

Tutti gli esperimenti sono stati eseguiti in conformità con le linee guida per gli esperimenti sugli animali dal National Institute of Genetics (NIG), e tutte le procedure sono state approvate dal comitato di NIG per Animal Care e uso (approvazione n. 26-9).
1. gli animali
<ol><li>
Allevamento selettivo
	<ol>
<li>Creare topi d'archivio eterogenei selvaggio-derivato del6 (WHS) incrociando 8 ceppi inbred (MSM, HMI, BLG2, PGN2, KJR, CHD, NJL e BFM/2), evitando qualsiasi di consanguineità (accoppiamento tra fratelli o cugini)7. Condurre un allevamento selettivo, a partire dalla terza generazione (G3), selezionando topi che visualizzano più lungo "tempo di contatto" (gruppo selezionato, 16 famiglie di accoppiamento coppie) secondo la docilità attivo di prova (Vedi punto 3.1).</li>
		<li>Generare il controllo non selezionate gruppo (anche 16 famiglie di accoppiamento coppie) tramite accoppiamento casuale da G3 in poi. Per un esperimento rappresentativo, è possibile utilizzare topi ottenuti da (S1) selezionati e non selezionati (C1) gruppi di topi WHS per mostrare il modello di docilità sia attiva che passiva, utilizzando i tre test di docilità (Vedi punto 3.1-3.3). Per gli esperimenti, utilizzare 10 G15 topi per gruppo (S1 e C1).</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Rappresentante animali oggetto
	<ol>
<li>Svezzare tutti i topi dai loro genitori a 3 settimane di età e ospitarli in gruppi dello stesso sesso con littermates, utilizzando gabbie di plastica dimensioni standard contenenti trucioli di legno, fino al collaudo. Mantenere tutti gli animali presso una struttura animale NIG sotto un ciclo luce/buio di 12/12 h (luci accese da 06:00 a 18:00) e una temperatura costante (23 ± 2 ° C).</li>
		<li>Assicurarsi che il cibo e l'acqua sono disponibile ad libitum. Testare i topi a 6 settimane dell'età durante il periodo di luce per analizzare le loro interazioni con gli esseri umani durante parte della giornata quando gli esseri umani sono in genere attivi.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Protocollo di gestione
	<ol>
<li>Utilizzare pinzette grande coperte con tubicini di silicone per trasferire i topi a nuove gabbie di raccoglierle delicatamente da loro code. Utilizzare le pinzette per separarli dai genitori allo svezzamento e spostarli durante gli esperimenti. Nessuno dei topi dovrebbero ricevere trattamento prima delle prove di docilità.</li>
		<li>Trasferire i topi in una camera sperimentale appena prima delle prove di docilità.</li>
		<li>Tenere i topi maschi separati uno da altro dopo il test, per evitare l'aggressione Inter-maschio in topi WHS.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. attrezzature
<ol><li>Utilizzare un apparato di campo aperto (400 x 400 x 400 mm, grigiastro polivinilcloruro).</li>
	<li>Illuminare il campo aperto utilizzando una clip luce con un bulbo bianco neutro (100 lux) fissato ad un'altezza di 450 mm sopra il campo aperto (Figura 1).</li>
	<li>Registrare tutti i comportamenti utilizzando una fotocamera digitale compatta disponibile in commercio fissata a 850 mm sopra il campo aperto utilizzando un cavalletto (Figura 1).</li>
	<li>Indossare guanti di stoffa sotto i guanti in lattice per proteggere le mani da essere morso alle durante la prova di docilità passiva (una rara reazione).</li>
	<li>Misurare il periodo di prova usando un cronometro.</li>
</ol>3. test
Nota: I primi due test (docilità attiva e passiva docilità) sono stati condotti per 1 min ciascuna, e la prova di soggiorno a portata di mano è stata condotta per meno di 1 min. Tutti e tre i test sono stati condotti nell'apparato di campo aperto e registrato utilizzando una fotocamera digitale. Procedura di disinfezione di iodofori deve essere eseguita su tutti i apparats prima di eventuali studi di comportamento.
<ol><li>
Procedure per test di docilità attivo
	<ol>
<li>Accendere la fotocamera digitale e avviare la registrazione.</li>
		<li>Prendere un mouse delicatamente dalla coda utilizzando un paio di pinzette grande (Vedi punto 1.3.1) e trasferirlo dalla gabbia al centro dell'apparato di campo aperto.</li>
		<li>Avviare il cronometro.</li>
		<li>Posizionare la mano sinistra nell'angolo inferiore sinistro dell'apparecchio.</li>
		<li>Tenere il palmo rivolto verso l'alto e muovere le dita lentamente e costantemente per garantire che il mouse si connette la mano a un essere umano. Il tempo medio per spostare tutte le quattro dita da mignolo al dito indice dovrebbe essere circa 0.5 s, con un ciclo di movimenti ripetuti continuamente.</li>
		<li>Spostare la mano verso il mouse lentamente, ad una velocità media di circa 13 cm/s, fermandosi a 10 cm dal lato del corpo del mouse.</li>
		<li>Se il mouse tenta di allontanarsi, mantenere la stessa distanza. Se il mouse si avvicina, tenere la mano nella stessa posizione e continuare a muovere le dita leggermente. Se il mouse cerca di arrampicarsi lungo il braccio, è possibile restituirlo al campo utilizzando la mano libera.</li>
		<li>Concludere il test dopo 1 min, ritirare la mano e procedere al test passiva docilità.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Procedure per passiva docilità di prova
	<ol>
<li>Seguire la stessa procedura per quanto riguarda il test attivo docilità, ma invece di fermarsi a 10 cm dal corpo del mouse, toccare lentamente il mouse con la punta delle dita.</li>
		<li>Lasciare le dita nella stessa posizione, contatto con il mouse, fino a quando il mouse si allontana. Quando il mouse cerca di rompere il contatto, seguirla, in movimento ad una velocità media di circa 23 cm/s e reinizializzare il tocco.</li>
		<li>Concludere il test dopo 1 min. riavviare il cronometro immediatamente per avviare il test di soggiorno a portata di mano.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Procedure per soggiorno a portata di mano di prova
	<ol>
<li>Sollevare il mouse dalla coda utilizzando un paio di pinzette grande e posizionarlo delicatamente sul palmo sinistro. Tenere la mano vicino al pavimento dell'apparato di campo aperto.</li>
		<li>Colpo il mouse delicatamente ad una velocità media di 0,5 s/corsa con il pollice sinistro fino a quando lascia la mano.</li>
		<li>Ripetere i passaggi 3.3.1 - 3.3.2 3x.</li>
		<li>Dopo la terza prova, fermare il video registrazione; tutti i test di docilità sono ormai concluso.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Procedure post-sperimentale
	<ol>
<li>Pesare il mouse e contare il numero di feci e urina rimasta in campo aperto.</li>
		<li>Contrassegnare il mouse individualmente tramite un punzone di orecchio.</li>
		<li>Pulire l'apparecchio e sperimentatore guanti con un tovagliolo di carta imbevuto di disinfettante iodoforo 0,2%.</li>
		<li>Pulire l'apparecchio con un panno asciutto.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. comportamentale analisi
Nota: Le registrazioni Video sono state segnate con tanaMove versione 0.01 (Windows 7), software di registrazione di evento per analisi comportamentale (Figura 2). Il software è liberamente disponibile (supplementare materiali 1) e dal nostro sito Web (http://www.mgrl-lab.jp/MGRL_software.html). Un individuo che era cieco per le condizioni di prova ha ottenuto tutti i filmati. La durata di tutti gli indici comportamentali è stata misurata in incrementi di 0,1-s. Durante le marcature, l'osservatore premuta la lettera appropriata sulla tastiera (Vedi punto 4.1) su notando un dato comportamento.
<ol><li>
Assegnazione dei tasti per l'analisi dei video
	<ol>
<li>Assegnare tasti per ogni indice di comportamento. Utilizzando i tasti appropriati per ogni indice comportamentale è fondamentale per riepilogare i dati automaticamente al punto 4.3. Nota: Le assegnazioni utilizzate in questo studio sono mostrate nella Figura 3.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Analisi video
	<ol>
<li>Analizzare ogni video registrazione 3x per diversi indici comportamentali (Figura 3B). Auto-governare il comportamento non è stato segnato. Assicurarsi che l'altoparlante incorporato del computer è acceso per sentire il suono del timer nel video.</li>
		<li>Lancio tanaMove.</li>
		<li>Trascinare e rilasciare il file video da analizzare nella finestra di tanaMove. Confermare che il file sia caricato e che il percorso e il nome del file CSV output del file nella casella File di dati [CSV] è corretto.</li>
		<li>Fare clic sul pulsante pronto . Questo attiva una nuova finestra per immettere i tasti assegnati.</li>
		<li>Fare clic sul pulsante Play per avviare il file video. Fare clic sul pulsante Stop per mettere in pausa il file video.</li>
		<li>Premere il tasto A quando il mouse è osservato "in direzione" o si avvicina la mano, tra cui in piedi ad annusare. Premere il tasto R quando il mouse è osservato "locomoting" senza intestazione verso la mano durante la prova di docilità attivo.</li>
		<li>Premere il tasto W per almeno 0,3 s (almeno tre intervalli nella finestra) quando si sente il suono di timer a 60 s.</li>
		<li>Avviare l'analisi del test passiva docilità dopo la mano sinistra entra il video. Premere il tasto A quando il mouse è stato osservato in direzione o si avvicina la mano e il tasto R quando il mouse è osservato che viaggiano senza che si dirige verso la mano durante il test di passiva docilità.</li>
		<li>Premere il tasto W per almeno 0,3 s (almeno tre intervalli nella finestra) quando si sente il suono di timer a 60 s.</li>
		<li>Premere il tasto T quando il mouse è osservato "stare" sulla mano nella prova di soggiorno a portata di mano.</li>
		<li>Dopo la prova di soggiorno a portata di mano, fare clic sul pulsante Stop per arrestare il controllo del video.</li>
		<li>Fare clic sul pulsante indietro e digitare un nuovo nome di file per l'output di dati CSV.</li>
		<li>Fare clic sul pulsante pronto per attivare una nuova finestra per immettere i tasti assegnati.</li>
		<li>Fare clic sul pulsante " Gioca " per riavviare il filmato e avviare l'osservazione del test attivo docilità.</li>
		<li>Quando il mouse è osservato "contattare" l'umano, che comprende tutti i comportamenti di contatto volontariato ma i contatti non accidentali, quali atterraggio su una palma dopo il salto, durante la docilità attivo test, premere il tasto T .</li>
		<li>Premere il tasto W per almeno 0,3 s (almeno tre intervalli nella finestra) quando si sente il suono di timer a 60 s.</li>
		<li>Premere il tasto T quando il mouse permette lo sperimentatore a toccare il suo corpo durante la prova di passiva docilità.</li>
		<li>Premere il tasto W per almeno 0,3 s (almeno tre intervalli nella finestra) quando si sente il suono di timer a 60 s.</li>
		<li>Fare clic sul pulsante Stop per interrompere il video.</li>
		<li>Fare clic sul pulsante indietro e digitare un nuovo nome di file per l'output di dati CSV.</li>
		<li>Fare clic sul pulsante pronto per attivare una nuova finestra per immettere i tasti assegnati.</li>
		<li>Fare clic sul pulsante " Gioca " per riavviare il filmato e avviare l'osservazione del test attivo docilità.</li>
		<li>Quando il mouse è osservato "salto" durante la prova di docilità attivo, premere il tasto J .</li>
		<li>Premere il tasto W per almeno 0,3 s (almeno tre intervalli nella finestra) quando si sente il suono di timer a 60 s. Quindi avviare l'osservazione del test passiva docilità.</li>
		<li>Premere il tasto J quando il mouse è osservato "salto" durante la prova di passiva docilità.</li>
		<li>Fare clic sul pulsante Stop per arrestare il controllo del video quando si sente il suono di timer a 60 s.</li>
		<li>Fare clic sul pulsante indietro e digitare un nuovo nome di file per l'output di dati CSV.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Riepilogare i dati
	<ol>
<li>Salvare tutti i file di dati raw (CSV) nella stessa cartella con il file supplementari 2. xlsm (Supplemental materiali 2).</li>
		<li>Aprire il file supplementari 2. xlsm e fare clic sul pulsante riepiloga .</li>
		<li>Salvare i risultati come file separato e utilizzarlo per un'ulteriore analisi del comportamento docilità.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol>
	<li>Albert, F. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phenotypic+differences+in+behavior,+physiology+and+neurochemistry+between+rats+selected+for+tameness+and+for+defensive+aggression+towards+humans.">Phenotypic differences in behavior, physiology and neurochemistry between rats selected for tameness and for defensive aggression towards humans.</a> Hormones and Behavior. 53 (3), 413-421 (2008).</li><li>Belyaev, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Destabilizing+selection+as+a+factor+in+domestication.">Destabilizing selection as a factor in domestication.</a> Journal of Heredity. 70 (5), 301-308 (1978).</li><li>Trut, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+canid+domestication:+the+farm-fox+experiment.">Early canid domestication: the farm-fox experiment.</a> American Scientist. 87 (2), 160-169 (1999).</li><li>Price, E. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Animal Domestication and Behavior. , (2002).</li><li>Goto, T., Tanave, A., Moriwaki, K., Shiroishi, T., Koide, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selection+for+reluctance+to+avoid+humans+during+the+domestication+of+mice.">Selection for reluctance to avoid humans during the domestication of mice.</a> Genes, Brain and Behavior. 12 (8), 760-770 (2013).</li><li>Matsumoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+breeding+and+selection+mapping+using+a+novel+wild-derived+heterogeneous+stock+of+mice+revealed+two+closely+linked+loci+for+tameness.">Selective breeding and selection mapping using a novel wild-derived heterogeneous stock of mice revealed two closely linked loci for tameness.</a> Scientific Reports. 7, 4607 (2017).</li><li>Koide, T., Goto, T., Takano-Shimizu, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomic+mixing+to+elucidate+the+genetic+system+of+complex+traits.">Genomic mixing to elucidate the genetic system of complex traits.</a> Experimental Animals. 61 (5), 503-509 (2012).</li><li>Albert, F. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+architecture+of+tameness+in+a+rat+model+of+animal+domestication.">Genetic architecture of tameness in a rat model of animal domestication.</a> Genetics. 182 (2), 541-554 (2009).</li><li>Cottle, C. A., Price, E. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+the+nonagouti+pelage-color+allele+on+the+behavior+of+captive+wild+Norway+rats+(Rattus+norvegicus).">Effects of the nonagouti pelage-color allele on the behavior of captive wild Norway rats (Rattus norvegicus).</a> Journal of Comparative Psychology. 101 (4), 390-394 (1987).</li><li>Hayssen, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+the+nonagouti+coat-color+allele+on+behavior+of+deer+mice+(Peromyscus+maniculatus):+a+comparison+with+Norway+rats+(Rattus+norvegicus).">Effects of the nonagouti coat-color allele on behavior of deer mice (Peromyscus maniculatus): a comparison with Norway rats (Rattus norvegicus).</a> Journal of Comparative Psychology. 111 (4), 419-423 (1997).</li><li>Arakawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+male-specific+QTL+for+social+interaction+behavior+in+mice+mapped+with+automated+pattern+detection+by+a+hidden+Markov+model+incorporated+into+newly+developed+freeware.">A male-specific QTL for social interaction behavior in mice mapped with automated pattern detection by a hidden Markov model incorporated into newly developed freeware.</a> Journal of Neuroscience Methods. 234, 127-134 (2014).</li></ol>

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

I risultati rappresentativi coprono nove indici comportamentali dalla docilità attiva, passiva docilità e test di soggiorno a portata di mano. Un confronto tra i punteggi tra i selezionati e gruppi di controllo ha rivelato le differenze libere nella docilità. Questi risultati indicano che le tre prove sono valide per misura docilità nei topi.
Livelli di docilità negli animali possono essere difficili da quantificare empiricamente. Diversi metodi sono stati sviluppati per la valutazione di...

Allevamento selettivo durante l'addomesticamento ha cambiato le caratteristiche degli animali domestici per renderli meglio adattato per vivere con gli esseri umani1,2,3. "Docilità" è un tratto comune del comportamento osservato in animali domestici. Gli studi di allevamento selettivo per docilità in animali rivelano come loro fenotipi sono cambiate nel corso di addomesticamento. In un famoso studio, volpi si sono allevate selettivamente per docilità e un gruppo di volpi che ha esibito un alto livello di docilità era stabilito2. Le volpi hanno mostrato anche altri cambiamenti di fenotipo che coinvolgono morfologia, riproduzione, colore del mantello e tratti fisiologici. Selettiva di allevamento per docilità nei topi, un animale da laboratorio popolare, può aiutare a rivelare il meccanismo sottostante il cambiamento in una varietà di fenotipi durante l'addomesticamento.
Docilità ha due componenti comportamentali: approcci attivi agli esseri umani (attivo docilità) ed una riduzione nell'evitare di esseri umani (passiva docilità)4. In uno studio precedente, abbiamo stabilito tre test comportamentali per caratterizzare i livelli di docilità nei topi: docilità attiva, passiva docilità e soggiorno-su-mano test5. Il primo test è stato progettato per quantificare la docilità attivo del mouse misurando la latenza del suo approccio spontaneo verso un essere umano e il tempo che trascorso a contatto con una mano umana. Il secondo test è stato progettato per quantificare passiva docilità misurando quanto tempo un mouse tollerato essere toccato dalla mano dell'uomo. La prova di soggiorno-su-mano era destinata a quantificare prevenzione comportamentale di essere accarezzato lievemente dalla mano dell'uomo. Questi tre valutazioni richiedono solo un apparato di campo aperto, una fotocamera digitale e un grosso paio di pinzette. Possono essere completati in sequenza all'interno di 3 min, consentendo una grande quantità di dati da raccogliere al giorno.
Nello studio precedente, abbiamo caratterizzato e confrontato i comportamenti di docilità utilizzando una serie di diversi ceppi di topi inbred: 10 ceppi selvatici, uno sforzo fantasia giapponese del mouse-derivato e laboratorio sei ceppi5. La maggior parte addomesticati ceppi ha mostrati una docilità passiva significativamente superiore rispetto ai ceppi selvatici, ma la docilità attivi non hanno differito fra i due gruppi. Da questi risultati, abbiamo concluso che i topi domestici che sono i fondatori di ceppi di laboratorio principalmente sono stati selezionati per la loro docilità passiva, ma non per docilità attivo, nella loro storia di allevamento.
Abbiamo condotto successivo allevamento selettivo con otto diversi ceppi di topi selvatici per generare una popolazione geneticamente eterogenea6. Abbiamo scelto gli animali che ha segnato in alto sul test attivo docilità e con successo ha aumentato la loro docilità attivo nelle successive generazioni, rispetto ad un gruppo di controllo. Questo risultato ha indicato che le prove di misurano in modo affidabile la docilità nei topi.
Qui, descriviamo il metodo completo per la misurazione di indici comportamentali utilizzando i tre test comportamentali. Innanzitutto, spieghiamo il set-up e le apparecchiature necessarie. Successivamente, abbiamo dettagliatamente la procedura dettagliata per l'esecuzione degli esperimenti, raccolta dati attraverso video e analisi dei dati utilizzando freeware che abbiamo sviluppato ha detto. Infine, mostrare risultati rappresentativi confrontando la piscina dei topi selettivamente allevati con un gruppo di controllo.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="818">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">open-field apparatus</td>
			<td style="width:169px;">O&#8217;Hara &#38; Co. Ltd.</td>
			<td style="width:151px;">OF-3102</td>
			<td style="width:283px;">400&#215;400&#215;400 mm, grayish polyvinylchloride</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">compact digital camera</td>
			<td>Ricoh Company, Ltd.</td>
			<td>CX-5</td>
			<td>production in the company is over</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">latex pure gloves</td>
			<td>AS ONE</td>
			<td>BioLab, IKG-8002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">stopwatch</td>
			<td>SEIKO</td>
			<td>SSBJ018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Iodophor sanitizer</td>
			<td>Ecolab G.K. (CLEA Japan)</td>
			<td>CL-4123</td>
			<td>Mikro Klene</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring active and passive tameness separately in mice

Animali domestici come cani e topi di laboratorio mostrano un elevato livello di docilità, che è importante per gli esseri umani di gestirli facilmente. Docilità ha due componenti comportamentali: una certa riluttanza a evitare gli esseri umani (passiva docilità) e una motivazione per gli esseri umani di approccio (attivo docilità). Per quantificare questi componenti nei topi, abbiamo sviluppato in precedenza test comportamentali per docilità attiva, passiva docilità, e la volontà di rimanere su una mano umana, ognuna progettata per essere completato entro 3 min. I dati ottenuti sono stati utilizzati per l'allevamento selettivo, con un gran numero di topi analizzati per generazione. Il test attivo docilità misura il movimento del mouse verso una mano umana e il contatto in che si impegna. Il test di passiva docilità misura la durata di tempo che un mouse tollera tocco umano. Nella prova di soggiorno a portata di mano, un mouse è posizionato su una mano umana e toccato lentamente con il pollice della mano; la durata di tempo che l'animale rimane sulla mano viene misurata. Qui, descriviamo il test set-up e apparato, spiegare le procedure e discutere l'analisi di dati appropriato. Infine, ci spiega come interpretare i risultati.

Abbiamo precedentemente condotto allevamento selettivo per docilità attivo in topi miceandsuccessfully prodotto che ha mostrato un alto livello di docilità attivo6. I risultati rappresentativi della docilità test per i gruppi selezionati e non selezionati dei topi alla 15° generazione (G15) sono riportati in Figura 4. Topi dal gruppo selezionato Punteggio più alto nel test attivo docilità, esibendo una durata significa...

Watch this Scientific Journal Video about Measuring Active and Passive Tameness Separately in Mice at JoVE.com

Measuring Active and Passive Tameness Separately in Mice

Docilità negli animali include una riduzione delle risposte di evitare agli esseri umani (docilità passivo) e un aumento in attivi approcci agli esseri umani (attivo docilità). Qui, descriviamo protocolli dettagliati per tre test comportamentali (docilità attiva, passiva docilità e soggiorno-su-mano test) per misurare separatamente la docilità attiva e passiva dei topi.

Attiva e passiva docilità separatamente nei topi di misura

Domesticated animals such as dogs and laboratory mice show a high level of tameness, which is important for humans to handle them easily. Tameness has two ...

measuring-active-and-passive-tameness-separately-in-mice

Research

JoVE Journal

Behavior

7.0K Views.  National Institute of Genetics. Docilità negli animali include una riduzione delle risposte di evitare agli esseri umani (docilità passivo) e un aumento in attivi approcci agli esseri umani (attivo docilità). Qui, descriviamo protocolli dettagliati per tre test comportamentali (docilità attiva, passiva docilità e soggiorno-su-mano test) per misurare separatamente la docilità attiva e passiva dei topi.

Video: Measuring Active and Passive Tameness Separately in Mice

The Successive Alleys Test of Anxiety in Mice and Rats

The plus-maze was derived from the early work of Montgomery. He observed that rats tended to avoid the open arms of a maze, preferring the enclosed ones. Handley, Mithani and File et al. performed the first studies on the plus-maze design we use today, and in 1987 Lister published a design for use with mice. 
Time spent on, and entries into, the open arms are an index of anxiety; the lower these indices, the more anxious the mouse is. Alternatively, a mouse that spends most of its time in the closed arms is classed as anxious. 
One of the problems of the plus-maze is that, while time spent on, and entries into, the open arms is a fairly unambiguous measure of anxiety, time in the central area is more difficult to interpret, although time spent here has been classified as &#x201C;decision making&#x201D;. In many tests central area time is a considerable part of the total test time.
Shepherd et al. produced an ingenious design to eliminate the central area, which they called the &#x201C;zero maze&#x201D;. However, although used by several groups, it has never been as widely adopted as the plus-maze. 
In the present article I describe a modification of the plus-maze design that not only eliminates the central area but also incorporates elements from other anxiety tests, such as the light-dark box and emergence tests. It is a linear series of four alleys, each having increasing anxiogenic properties. It has given similar results to the plus-maze in general. Although it may not be more sensitive than the plus-maze (more data is needed before a firm conclusion can be reached on this point), it provides a useful confirmation of plus-maze results which would be useful when, for example, only a single example of a mutant mouse was available, as, for example, in ENU-based mutagenesis programs.

The plus-maze measures anxiety-like behaviour in rodents. There are two opposite closed and two opposite open arms; anxious rodents avoid the open arms. The central area is neither completely open nor closed, so time spent here is ambiguous and difficult to interpret. Here a modification of the plus-maze protocol eliminating this area is described.

Le successive Vicoli test di ansia nei topi e nei ratti

The plus-maze was derived from the early work of Montgomery. He observed that rats tended to avoid the open arms of a maze, preferring the enclosed ones.  ...

Ricerca

Comportamento

Trace Fear Conditioning in Mice

In this experiment we present a technique to measure learning and memory. In the trace fear conditioning protocol presented here there are five pairings between a neutral stimulus and an unconditioned stimulus. There is a 20 sec trace period that separates each conditioning trial. On the following day freezing is measured during presentation of the conditioned stimulus (CS) and trace period. On the third day there is an 8 min test to measure contextual memory. The representative results are from mice that were presented with the aversive unconditioned stimulus (shock) compared to mice that received the tone presentations without the unconditioned stimulus. Trace fear conditioning has been successfully used to detect subtle learning and memory deficits and enhancements in mice that are not found with other fear conditioning methods. This type of fear conditioning is believed to be dependent upon connections between the medial prefrontal cortex and the hippocampus. One current controversy is whether this method is believed to be amygdala-independent. Therefore, other fear conditioning testing is needed to examine amygdala-dependent learning and memory effects, such as through the delay fear conditioning.

In the following experiment we describe a protocol for trace fear conditioning in mice. This type of associative memory includes a trace period that separates the neutral stimulus and the unconditioned stimulus.

Trace paura condizionata in topi

In this experiment we present a technique to measure learning and memory. In the trace fear conditioning protocol presented here there are five pairings ...

Measuring Attentional Biases for Threat in Children and Adults

Investigators have long been interested in the human propensity for the rapid detection of threatening stimuli. However, until recently, research in this domain has focused almost exclusively on adult participants, completely ignoring the topic of threat detection over the course of development. One of the biggest reasons for the lack of developmental work in this area is likely the absence of a reliable paradigm that can measure perceptual biases for threat in children. To address this issue, we recently designed a modified visual search paradigm similar to the standard adult paradigm that is appropriate for studying threat detection in preschool-aged participants. Here we describe this new procedure. In the general paradigm, we present participants with matrices of color photographs, and ask them to find and touch a target on the screen. Latency to touch the target is recorded. Using a touch-screen monitor makes the procedure simple and easy, allowing us to collect data in participants ranging from 3 years of age to adults. Thus far, the paradigm has consistently shown that both adults and children detect threatening stimuli (e.g., snakes, spiders, angry/fearful faces) more quickly than neutral stimuli (e.g., flowers, mushrooms, happy/neutral faces). Altogether, this procedure provides an important new tool for researchers interested in studying the development of attentional biases for threat.

Here we describe a touch-screen visual search paradigm that can be used to study threat detection across the lifespan. The paradigm has already been used in various studies demonstrating that both children and adults detect threatening stimuli like snakes, spiders, and angry faces faster than non-threatening stimuli.

Misurazione attenzionali pregiudizi per minacce a bambini e adulti

Investigators have long been interested in the human propensity for the rapid detection of threatening stimuli. However, until recently, research in this ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure multiple dimensions of unconditioned behavior in small laboratory mammals (e.g., mice, rats, tree shrews and small primates). This paradigm is a valuable alternative for the use of a behavioral test battery, since a broad behavioral spectrum of an animal&#8217;s behavioral profile can be investigated in one single test.
The apparatus consists of a box, representing the &#8216;protected&#8217; area, separated from a group compartment. A board, on which small cylinders are staggered in three lines, is placed in the center of the box, representing the &#8216;unprotected&#8217; area of the set-up. The cognitive abilities of the animals can be measured by baiting some cylinders on the board and measuring the working and reference memory. Other unconditioned behavior, such as activity-related-, anxiety-related- and social behavior, can be observed using this paradigm. Behavioral flexibility and the ability to habituate to a novel environment can additionally be observed by subjecting the animals to multiple trials in the mHB, revealing insight into the animals&#8217; adaptive capacities.
Due to testing order effects in a behavioral test battery, na&#239;ve animals should be used for each individual experiment. By testing multiple behavioral dimensions in a single paradigm and thereby circumventing this issue, the number of experimental animals used is reduced. Furthermore, by avoiding social isolation during testing and without the need to food deprive the animals, the mHB represents a behavioral test system, inducing if any, very low amount of stress.

This protocol describes the modified hole board, which is a behavioral test set-up that comprises the characteristics of an open field and a traditional hole board. This set-up enables the differential analysis of unconditioned behavior of small laboratory mammals as well as the analysis of cognitive abilities.

The Hole Consiglio Modified - Behavior, Cognition e l&#39;interazione sociale in topi e ratti di misura

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

Testing for Odor Discrimination and Habituation in Mice

This video demonstrates a technique to establish the presence of a normally functioning olfactory system in a mouse. The test helps determine whether the mouse can discriminate between non-social odors and social odors, whether the mouse habituates to a repeatedly presented odor, and whether the mouse demonstrates dishabituation when presented with a novel odor. Since many social behavior tests measure the experimental animal&#8217;s response to a familiar or novel mouse, false positives can be avoided by establishing that the animals can detect and discriminate between social odors. There are similar considerations in learning tests such as fear conditioning that use odor to create a novel environment or olfactory cues as an associative stimulus. Deficits in the olfactory system would impair the ability to distinguish between contexts and to form an association with an olfactory cue during fear conditioning. 
In the odor habitation/dishabituation test, the mouse is repeatedly presented with several odors. Each odor is presented three times for two minutes. The investigator records the sniffing time directed towards the odor as the measurement of olfactory responsiveness. A typical mouse shows a decrease in response to the odor over repeated presentations (habituation). The experimenter then presents a novel odor that elicits increased sniffing towards the new odor (dishabituation). After repeated presentation of the novel odor the animal again shows habituation. This protocol involves the presentation of water, two or more non-social odors, and two social odors. In addition to reducing experimental confounds, this test can provide information on the function of the olfactory systems of new knockout, knock-in, and conditional knockout mouse lines.

This manuscript describes a protocol to examine the olfactory system of rodents. The olfactory habituation/dishabituation test will allow investigators to determine whether a mouse habituates to a repeatedly presented odor and whether the mouse demonstrates dishabituation when presented a novel odor.

Test per Odore Discriminazione e assuefazione nei topi

This video demonstrates a technique to establish the presence of a normally functioning olfactory system in a mouse. The test helps determine whether the ...

Continuous Noninvasive Measuring of Crayfish Cardiac and Behavioral Activities

A crayfish is a pivotal aquatic organism that serves both as a practical biological model for behavioral and physiological studies of invertebrates and as a useful biological indicator of water quality. Even though crayfish cannot directly specify the substances that cause water quality deterioration, they can immediately (within a few seconds) warn humans of water quality deterioration via acute changes in their cardiac and behavioral activities.
In this study, we present a noninvasive method that is simple enough to be implemented under various conditions due to a combination of simplicity and reliability in one model.
This approach, in which the biological organisms are implemented into environmental evaluation processes, provides a reliable and timely alarm for warning of and preventing acute water deterioration in an ambient environment. Therefore, this noninvasive system based on crayfish physiological and ethological parameter recordings was investigated for the detection of changes in an aquatic environment. This system is now applied at a local brewery for controlling&#160;quality of the water used for beverage production, but it can be used at any water treatment and supply facility for continuous, real-time water quality evaluation and for regular laboratory investigations of crayfish cardiac physiology and behavior.

This article presents a noninvasive biomonitoring system for the continuous recording and analyses of crayfish cardiac and locomotor activities. This system consists of a near-infrared optical sensor, a video-tracking module, and software for evaluating crayfish heartbeats that reflects its physiological condition and characterizes crayfish behavior during heartbeat fluctuations.

Continua la misurazione non invasiva dell'attività cardiaca e comportamentali di gamberi

A crayfish is a pivotal aquatic organism that serves both as a practical biological model for behavioral and physiological studies of invertebrates and as ...

Assessing the Autonomic and Behavioral Effects of Passive Motion in Rats using Elevator Vertical Motion and Ferris-Wheel Rotation

The overall goal of this study is to assess the autonomic and behavioral effects of passive motion in rodents using the elevator vertical motion and Ferris-wheel rotation devices. These assays can help confirm the integrity and normal functioning of the autonomic nervous system. They are coupled to quantitative measures based on defecation counting, open-field examination, and balance beam crossing. The advantages of these assays are their simplicity, reproducibility, and quantitative behavioral measures. The limitations of these assays are that the autonomic reactions could be epiphenomena of non-vestibular disorders and that a functioning vestibular system is required. Examination of disorders such as motion sickness will be greatly aided by the detailed procedures of these assays.

Protocols are presented to assess the autonomic and behavioral effects of passive motion in rodents using elevator vertical motion and Ferris-wheel rotation.

Valutazione degli effetti autonomi e comportamentali del movimento passivo nei ratti utilizzando il movimento verticale dell'ascensore e la rotazione della ruota panoramica

The overall goal of this study is to assess the autonomic and behavioral effects of passive motion in rodents using the elevator vertical motion and ...

Assessment of Memory Function in Pilocarpine-induced Epileptic Mice

Cognitive impairment is one of the most common comorbidities in temporal lobe epilepsy. To recapitulate epilepsy-associated cognitive decline in an animal model of epilepsy, we generated pilocarpine-treated chronic epileptic mice. We present a protocol for three different behavioral tests using these epileptic mice: novel object location (NL), novel object recognition (NO), and pattern separation (PS) tests to evaluate learning and memory for places, objects, and contexts, respectively. We explain how to set the behavioral apparatus and provide experimental procedures for the NL, NO, and PS tests following an open field test that measures the animals&#8217; basal locomotor activities. We also describe the technical advantages of the NL, NO, and PS tests with respect to other behavioral tests for assessing memory function in epileptic mice. Finally, we discuss possible causes and solutions for epileptic mice failing to make 30 s of good contact with the objects during the familiarization sessions, which is a critical step for successful memory tests. Thus, this protocol provides detailed information about how to assess epilepsy-associated memory impairments using mice. The NL, NO, and PS tests are simple, efficient assays that are appropriate for the evaluation of different kinds of memory in epileptic mice.

This article presents experimental procedures for assessing memory impairments in pilocarpine-induced epileptic mice. This protocol can be used to study the pathophysiologic mechanisms of epilepsy-associated cognitive decline, which is one of the most common comorbidities in epilepsy.

Valutazione della funzione di memoria nei topi epilettici indotti da pilocarpina

Cognitive impairment is one of the most common comorbidities in temporal lobe epilepsy. To recapitulate epilepsy-associated cognitive decline in an animal ...

Tactile Semiautomatic Passive-Finger Angle Stimulator (TSPAS)

Passive tactile perception is the ability to passively and statically perceive stimulus information coming from the skin; for example, the ability to sense spatial information is the strongest in the skin on the hands. This ability is termed tactile spatial acuity, and is measured by the tactile threshold or discrimination threshold. At present, the two-point threshold is extensively used as a measure of tactile spatial acuity, although many studies have indicated that critical deficits exist in two-point discrimination. Therefore, a computer-controlled tactile stimulus system was developed, the tactile semiautomated passive-finger angle stimulator (TSPAS), using the tactile angle discrimination threshold as a new measure for tactile spatial acuity. The TSPAS is a simple, easily operated system that applies raised angle stimuli to a subject&#39;s passive fingerpad, while controlling movement speed, distance, and contact duration. The components of the TSPAS are described in detail as well as the procedure to calculate the tactile angle discrimination threshold.

Tactile Semiautomatic Passive-Finger Angle Stimulator TSPAS

Presented is the tactile semiautomated passive-finger angle stimulator TSPAS, a new way to assess tactile spatial acuity and tactile angle discrimination using a computer-controlled tactile stimulus system that applies raised angle stimuli to a subject&#39;s passive fingerpad, while controlling for movement speed, distance, and contact duration.

Stimolatore ad angolo passivo-dito semiautomatico tattile (TSPAS)

Passive tactile perception is the ability to passively and statically perceive stimulus information coming from the skin; for example, the ability to ...

Chronic Stress Shifts Effort-Related Choice Behavior in a Y-Maze Barrier Task in Mice

Mood disorders, including major depressive disorder, can be precipitated by chronic stress. The Y-maze barrier task is an effort-related choice test that measures motivation to expend effort and obtain reward. In mice, chronic stress exposure significantly impacts motivation to work for a higher value reward when a lesser value reward is freely available compared to unstressed mice. Here we describe the chronic corticosterone administration paradigm, which produces a shift in effortful responding in the Y-maze barrier task. In the Y-maze task, one arm contains 4 food pellets, while the other arm contains only 2 pellets. After mice learn to select the high reward arm, barriers with progressively increasing height are then introduced into the high reward arm over multiple test sessions. Unfortunately, most chronic stress paradigms (including corticosterone and social defeat) were developed in male mice and are less effective in female mice. Therefore, we also discuss chronic non-discriminatory social defeat stress (CNSDS), a stress paradigm we developed that is effective in both male and female mice. Repeating results with multiple distinct chronic stressors in male and female mice combined with increased usage of translationally relevant behavior tasks will help to advance the understanding of how chronic stress can precipitate mood disorders.

The Y-maze barrier task is a behavior test that examines motivation to expend effort for reward. Here, we discuss testing multiple well-validated chronic stressors including chronic corticosterone and social defeat stress with this behavior, as well as the novel chronic non-discriminatory social defeat stress (CNSDS), which is effective in females.

Lo stress cronico sposta il comportamento di scelta correlato allo sforzo in un'attività di barriera del labirinto Y nei topi

Mood disorders, including major depressive disorder, can be precipitated by chronic stress. The Y-maze barrier task is an effort-related choice test that ...