Gli autori vorrebbero riconoscere il programma estivo di laurea di ricerca, il gruppo di utenti Tecnologia Accademico, il Center for Digital Learning, e il Centro della Scienza presso l&#39;Università di Redlands. Gli autori desiderano dedicare questo lavoro alla memoria di Lou Yango.

Il protocollo qui descritto è stato approvato dal Comitato Istituzionale cura e l&#39;uso degli animali presso l&#39;Università di Redlands. I topi C58, C57, e FVB utilizzati in questi studi sono stati allevati presso l&#39;Università di Redlands Vivarium a magazzino originariamente ottenuto dalla Jackson Laboratory (Bar Harbor, ME). Sentinelle di questo vivaio sono stati sottoposti a screening ogni sei mesi e hanno trovato ad essere patogeno libero. 1. Le attrezzature e Camera Set Up Nota: Abbiamo usato due arene diverse per i test oggetto romanzo: una gabbia rettangolare di plastica trasparente (45 cm x 24 cm x 20 cm) o una gabbia circolare opaco con un diametro alla base di 41 cm; Tuttavia, ogni gabbia può essere utilizzato. Pearson et al. Utilizzata una gabbia rettangolare più piccolo (20 cm x 30 cm x 20 cm) nel loro dosaggio. Dettagli da questo disegno sperimentale specifico si trovano più sotto, ma data la novità di questo saggio, non ci sono standard accettati nel campo della fenotipizzazione comportamentale per nessuna delle variabili descritte. <ol><li&gt; Riempire la scena test con circa ½ in di biancheria da letto di pannocchia. </li><li> Selezionare quattro diversi oggetti nuovi. Selezionare quattro oggetti che sono approssimativamente della stessa dimensione, costruiti in plastica ad alta densità per facilitare la pulizia e resistere masticazione e diversi tra loro per forma e colore. È importante sottolineare che, garantire che i topi di prova non siano esposti a questi oggetti prima di essere eseguito nel saggio. Nota: Per esempio, un mattone rosa giocattolo, una scimmia rossa, una piastrella bianca con scritta blu e un dado bianco standard sono stati utilizzati qui. </li><li> In campo rettangolare, inserire questi oggetti circa 3 cm dagli angoli. In ambito turno, posizionare gli oggetti in modo che siano a distanze uguali l&#39;uno dall&#39;altro e circa 10 cm dai lati. Registrare il posizionamento di ogni oggetto come un numero diverso, 1-4 (Figura 1). Assicurarsi che gli oggetti sono disposti in un ordine casuale o controbilanciato tutta test. </li><li> Posizionare una telecamera direttamente sopra la sperimentazioneArena per registrare l&#39;intera scena durante i periodi di acclimatazione e di prova. Nota: Avendo investigatori nella stessa stanza con i topi sono potenzialmente in grado di influenzare i livelli di attività e di esplorazione durante il test. </li></ol> 2. Oggetto Novel Exploration test <ol><li> Test all&#39;inizio del ciclo luce in una stanza illuminata con luce fluorescente a circa 100 lux. Assicurarsi che l&#39;illuminazione è uniforme in tutta l&#39;arena test di standardizzare l&#39;aspetto durante la registrazione video. </li><li> Inserire un notecard di dimensioni note nel fondo dell&#39;arena test e iniziare la registrazione video. </li><li> Trasferire il mouse di prova in un&#39;arena di test vuoto per 10 minuti per servire come un periodo di acclimatazione. registrare video il periodo di acclimatazione. </li><li> Dopo il periodo di acclimatazione, lasciare il mouse in campo, aggiungere rapidamente i quattro oggetti nuovi per l&#39;arena di prova e registrare il comportamento del mouse per altri 10 min. </li><li> Una volta che le piene 20 min di acclimatazione / pe testriodo è trascorso, riportare il mouse di prova alla sua gabbia casa e pulire accuratamente e asciugare gli oggetti nuovi e test Arena con sapone per i piatti non profumato e l&#39;acqua. </li></ol> 3. punteggio Video <ol><li> Completare tutte scoring comportamento utilizzare il video per facilitare l&#39;affidabilità. Nota: Il software di registrazione comportamentale Noldus The Observer è stato utilizzato per eseguire i passi 22 come descritto qui, ma un programma specializzato non è necessario: <ol><li> Prima di segnare il primo video, impostare il progetto schema di codifica nel software di registrazione comportamentale con la creazione di un nuovo progetto o per la modifica di un progetto simile già esistente. <ol><li> Nell&#39;ambito del dialogo Imposta progetto, impostare l&#39;acquisizione dei dati di &#39;non in linea di osservazione.&#39; All&#39;interno della scatola Comportamento Coding, il programma &quot;Scrabble&quot;, &quot;scavare&quot;, &quot;allevamento&quot;, &quot;grooming&quot; e &quot;Sniff oggetto 1, 2, 3 e 4&quot; come «Stato Eventi &#39;. Programma &quot;salto&quot; come un &#39;punto Evento&#39;. Nota: Definiziones per questi comportamenti sono descritti in dettaglio altrove 11. Nota: State Events hanno un inizio e di fine tempo, mentre il punto Eventi raccolgono semplicemente dati di conteggio. Le combinazioni di tasti per ogni comportamento discrete sono generate dal software e questi tasti corrispondenti sono programmati in una tastiera secondaria (fase 3.1.2). </li><li> Per programmare la tastiera secondaria, aprire il software della tastiera, fare clic sul pulsante appropriato secondario tastiera visualizzata sullo schermo, digitare la combinazione di tasti appropriata e fare clic su OK. Una volta che la tastiera secondario è stato programmato, chiudere il software come il programma verrà eseguito in background del computer. </li></ol></li><li> Una volta che il progetto ed è stato istituito, utilizzare il software di registrazione del comportamento di segnare il numero e la durata delle posteriori (definiti come entrambe le zampe anteriori di essere immessi su un muro dell&#39;arena), scava (definita come due zampe anteriori del mouse scavare nella la biancheria da letto dell&#39;arena), l&#39;auto-sposi (definito come il mOuse leccare qualsiasi regione del proprio corpo e / o il mouse toccare qualsiasi parte del viso con le zampe anteriori), e salti (definito come un allevamento mouse e poi saltare in modo che tutti i quattro piedi sono da terra contemporaneamente). <ol><li> Per segnare un video, andare su File&gt; Apri progetto e quindi osservare&gt; condizioni&gt; Nuovo. Il programma richiede un nome di file. Una volta nominato, selezionare il file video di supporto appropriato. </li><li> Iniziare il punteggio facendo clic sul pulsante Begin osservazione. Nota: Quando aver topo comportamento ripetitivo, tutti gli eventi statali richiedono due tasti, il primo corrispondente all&#39;avvio del comportamento e il secondo corrispondente alla fine del comportamento. Point Events richiedono solo una battitura. </li></ol></li><li> Punteggio ottenuto il numero di volte che il mouse annusò ogni oggetto. Annusa sono definiti come ogni volta che un mouse si sposta il naso all&#39;interno di 0,5 cm di un oggetto. Misurare la durata sniff utilizzando il software di registrazione comportamentale nello stesso modo in cui repetdurate comportamento itive sono stati misurati (fase 3.1.2). <ol><li> Ogni volta che un mouse annusa un oggetto, registrare il numero di posizione corrispondente, che porterà a una stringa di numeri dalla fine del periodo di prova 10 min (ad esempio 1.243.421 ...). registrare manualmente questi dati. Nota: Per facilitare l&#39;efficienza e la coerenza, mentre i video di punteggio, i numeri corrispondono sempre ad una determinata posizione, non oggetto. </li><li> Se un mouse annusa un oggetto, guarda lontano, poi annusa di nuovo l&#39;oggetto, contare il numero due volte. </li><li> Una volta che l&#39;intero 10 min video è stato segnato, visualizzare i dati cliccando su Analizza&gt; Analisi del Comportamento&gt; Nuovo. Una volta che i dati appaiono sullo schermo, l&#39;esportazione o copiare e incollare in un foglio a parte. </li></ol></li><li> Registrare la distanza totale il mouse viaggiato all&#39;interno dell&#39;arena durante il test. Nota: Il software di video tracking, calibrato per monitorare il mouse di prova e registrare la distanza totale spostato in centimetri, è stato utilizzatoper eseguire questa operazione. Tutti i video ottenuti dal software video inseguimento avevano un notecard di dimensioni note poste in campo all&#39;inizio del video. <ol><li> Utilizzare il notecard per calibrare ogni video all&#39;interno del software impostando una linea di calibrazione lungo ciascuna estremità del notecard e inserendo la lunghezza appropriata all&#39;interno schermata di calibrazione del software. Una volta che le linee sono disegnate, immettere la lunghezza nota e la larghezza della notecard che corrispondono a ciascuna riga. </li><li> In Impostazioni Arena, selezionare l&#39;intera arena. Nota: aree separate del campo possono essere differenziati nel software, se, per esempio, il movimento del mouse lungo le pareti vs. attraverso il centro era di interesse. </li><li> All&#39;interno di Impostazioni di controllo di prova, selezionare una durata di dieci minuti. In Impostazioni di rilevamento, scegliere un oggetto scuro su uno sfondo chiaro. Nota: questo avrebbe bisogno di essere cambiato, se sono stati utilizzati topi albini o se lo sfondo è una tonalità più scura. </li><li> Una volta che le impostazionisono stati programmati, segnare i video. Fai clic su Acquisizione&gt; Apri acquisizione. Nella casella di acquisizione di controllo, fare clic su Nuovo Processo e quindi Inizia la prova. Dopo dieci minuti è trascorso, il programma si arresta ei dati possono essere visualizzati. </li><li> Fai clic su Analizza&gt; calcolare le statistiche. Una volta che i dati appaiono sullo schermo, l&#39;esportazione o copiare e incollare in un foglio a parte. </li></ol></li></ol></li></ol> 4. Analisi statistica, Sequencing <ol><li> All&#39;interno della stringa di numeri corrispondenti ad oggetto indagini generati da ogni topo, identificare il numero totale di tutte le possibili combinazioni 3 cifre senza numeri di ripetizione (ad esempio 121, 123, 124 ma non 112 o 122). Nota: Un programma scritto in linguaggio di programmazione Python è stato utilizzato per identificare il numero di volte in cui ogni possibile sequenza appare nella stringa di numeri. Non è necessario usare un programma esterno, e questa fase potrebbe essere completato molti modi diversi (per esempio usandouna funzione Trova in Microsoft Word o Excel). </li><li> Registrare il numero di volte che si verifica ogni sequenza e identificare le tre sequenze più frequentemente utilizzate per ogni mouse. Nota: sequenze varieranno dal mouse e la sequenza reale è di minore interesse rispetto al numero di volte che è stato ripetuto una sequenza (cioè l&#39;adesione ad un modello è più importante del modello stesso). </li><li> Poiché il numero totale di sequenze ripetizione di un topo sarà correlata positivamente al livello di attività, correggere questi valori dividendo la quantità di modelli più frequenti per il numero totale di modelli per ciascun topo. Ciò produrrà un indice di ripetizione sequenza che è indipendente dall&#39;attività complessiva. </li><li> Confrontare il numero di volte che ciascun topo ripete le sue sequenze più comuni (corretta per il livello di attività) tra i gruppi utilizzando un ANOVA appropriata, multipla procedura di confronto (test di Dunnett, per esempio) e test post-hoc. </li></ol><ol><li> Utilizzando la stessa stringa di numeri generati in precedenza (passo 3.1.3.1), identificare l&#39;oggetto preferenza romanzo ogni topo contando il numero totale di volte ogni oggetto è stato studiato, o in altre parole, contando il numero totale di 1 sec, 2 sec , 3 sec, e 4 sec nella stringa di dati. Corretto per livello di attività e confronto tramite ANOVA come descritto sopra (passi 4,3-4,4). Nota: Questi metodi pubblicati dal nostro laboratorio 22 e descritti qui si basano pesantemente sul Pearson et al 17. </li></ol>

<ol>
	<li>American Psychological Association. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders. , (2013).</li><li>Baio, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+of+Autism+Spectrum+Disorder+Among+Children+Aged+8+Years+-+Autism+and+Developmental+Disabilities+Monitoring+Network,+11+Sites,+United+States.">Prevalence of Autism Spectrum Disorder Among Children Aged 8 Years - Autism and Developmental Disabilities Monitoring Network, 11 Sites, United States.</a> Morb. Mortal. Wkly. Rep. 63 (SS02), 1-21 (2010).</li><li>Moy, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Social+approach+and+repetitive+behavior+in+eleven+inbred+mouse+strains.">Social approach and repetitive behavior in eleven inbred mouse strains.</a> Behav. Brain Res. 191 (1), 118-129 (2008).</li><li>Bodfish, J. W., Symons, F. J., Parker, D. E., Lewis, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Varieties+of+repetitive+behavior+in+autism:+comparisons+to+mental+retardation.">Varieties of repetitive behavior in autism: comparisons to mental retardation.</a> J. Autism Dev. Disord. 30 (3), 237-243 (2000).</li><li>Lewis, M. H., Kim, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiology+of+restricted+repetitive+behavior.">The pathophysiology of restricted repetitive behavior.</a> J. Neurodev. Disord. 1 (2), 114-132 (2009).</li><li>Lewis, M. H., Bodfish, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repetitive+behavior+disorders+in+autism.">Repetitive behavior disorders in autism.</a> Ment. Retard. Dev. Disabil. Res. Rev. 4, 80-89 (1998).</li><li>Lam, K. S. L., Bodfish, J. W., Piven, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+three+subtypes+of+repetitive+behavior+in+autism+that+differ+in+familiarity+and+association+with+other+symptoms.">Evidence for three subtypes of repetitive behavior in autism that differ in familiarity and association with other symptoms.</a> J. Child Psychol. Psychiatry. 49 (11), 1193-1200 (2008).</li><li>Bishop, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subcategories+of+Restricted+and+Repetitive+Behaviors+in+Children+with+Autism+Spectrum+Disorders.">Subcategories of Restricted and Repetitive Behaviors in Children with Autism Spectrum Disorders.</a> J. Autism Dev. Disord. 43 (6), 1287-1297 (2013).</li><li>Lewis, M. H., Tanimura, Y., Lee, L. W., Bodfish, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+restricted+repetitive+behavior+in+autism.">Animal models of restricted repetitive behavior in autism.</a> Behav. Brain Res. 176 (1), 66-74 (2007).</li><li>Korff, S., Stein, D. J., Harvey, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stereotypic+behaviour+in+the+deer+mouse:+Pharmacological+validation+and+relevance+for+obsessive+compulsive+disorder.">Stereotypic behaviour in the deer mouse: Pharmacological validation and relevance for obsessive compulsive disorder.</a> Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. 32 (2), 348-355 (2008).</li><li>Ryan, B. C., Young, N. B., Crawley, J. N., Bodfish, J. W., Moy, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Social+deficits,+stereotypy+and+early+emergence+of+repetitive+behavior+in+the+C58/J+inbred+mouse+strain.">Social deficits, stereotypy and early emergence of repetitive behavior in the C58/J inbred mouse strain.</a> Behav. Brain Res. 206 (1), 178-188 (2010).</li><li>Moy, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+behavioral+tasks+relevant+to+autism:+phenotypes+of+10+inbred+strains.">Mouse behavioral tasks relevant to autism: phenotypes of 10 inbred strains.</a> Behav. Brain Res. 176, 4-20 (2007).</li><li>Moy, S. S., Nadler, J. J., Poe, M. D., Nonneman, R. J., Young, N. B., Koller, B. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+mouse+test+for+repetitive,+restricted+behaviors:+relevance+to+autism.">Development of a mouse test for repetitive, restricted behaviors: relevance to autism.</a> Behav. Brain Res. 188 (1), 178-194 (2008).</li><li>Moy, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repetitive+behavior+profile+and+supersensitivity+to+amphetamine+in+the+C58/J+mouse+model+of+autism.">Repetitive behavior profile and supersensitivity to amphetamine in the C58/J mouse model of autism.</a> Behav. Brain Res. 259, 200-214 (2014).</li><li>Scattoni, M. L., Gandhy, S. U., Ricceri, L., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unusual+repertoire+of+vocalizations+in+the+BTBR+T+tf/J+mouse+model+of+autism.">Unusual repertoire of vocalizations in the BTBR T+tf/J mouse model of autism.</a> PLoS ONE. 3 (8), e3067 (2008).</li><li>Muehlmann, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Further+characterization+of+repetitive+behavior+in+C58+mice:+developmental+trajectory+and+effects+of+environmental+enrichment.">Further characterization of repetitive behavior in C58 mice: developmental trajectory and effects of environmental enrichment.</a> Behav. Brain Res. 235, 143-149 (2012).</li><li>Pearson, B. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+and+cognitive+stereotypies+in+the+BTBR+T+tf/J+mouse+model+of+autism.">Motor and cognitive stereotypies in the BTBR T+tf/J mouse model of autism.</a> Genes Brain Behav. 10 (2), 228-235 (2011).</li><li>Belzung, C., Crusio, W. E., Gerlai, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+exploratory+behavior.">Measuring exploratory behavior.</a> Handbook of molecular genetic techniques for brain and behavior research (techniques in the behavioral and neural sciences). , 739-749 (1999).</li><li>Kalueff, A. V., Keisala, T., Minasyan, A., Kuuslahti, M., Tuohimaa, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+stability+of+novelty+exploration+in+mice+exposed+to+different+open+field+tests.">Temporal stability of novelty exploration in mice exposed to different open field tests.</a> Behav. Process. 72, 104-112 (2006).</li><li>Prut, L., Belzung, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+open+field+as+a+paradigm+to+measure+the+effects+of+drugs+on+anxiety-like+behaviors:+a+review.">The open field as a paradigm to measure the effects of drugs on anxiety-like behaviors: a review.</a> Eur. J. Pharmacol. 46, 3-33 (2003).</li><li>Walsh, R. N., Cumins, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+open-field+test:+a+critical+review.">The open-field test: a critical review.</a> Psychol. Bull. 83 (3), 482-504 (1976).</li><li>Blick, M. G., Puchalski, B. H., Bolanos, V. J., Wolfe, K. M., Green, M. C., Ryan, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+object+exploration+in+the+C58/J+mouse+model+of+autistic-like+behavior.">Novel object exploration in the C58/J mouse model of autistic-like behavior.</a> Behav. Brain Res. 282, 54-60 (2015).</li><li>Crawley, J. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+phenotypes+of+inbred+mouse+strains:+implications+and+recommendations+for+molecular+studies.">Behavioral phenotypes of inbred mouse strains: implications and recommendations for molecular studies.</a> Psychopharmacol. 132, 107-124 (1997).</li><li>Logue, S. F., Owen, E. H., Rasmussen, D. L., Wehner, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+locomotor+activity,+acoustic+and+tactile+startle+and+prepulse+inhibition+of+startle+in+inbred+mouse+strains+and+F1+hybrids:+implications+of+genetic+background+for+single+gene+and+quantitative+trait+loci+analyses.">Assessment of locomotor activity, acoustic and tactile startle and prepulse inhibition of startle in inbred mouse strains and F1 hybrids: implications of genetic background for single gene and quantitative trait loci analyses.</a> Neurosci. 80 (4), 1075-1086 (1997).</li><li>Lamprea, M. R., Cardenas, F. P., Setem, J., Morato, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thigmotactic+responses+in+an+open-field.">Thigmotactic responses in an open-field.</a> Braz. J. Med. Biol. Res. 41, 135-140 (2008).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Qui, vi presentiamo un test recentemente sviluppato che può essere utile per quantificare i comportamenti del mouse con la faccia di validità per ordine superiore comportamenti ripetitivi negli esseri umani. A differenza di dosaggi più affermati come la Barnes o T-labirinto, questo nuovo metodo di analisi oggetto di esplorazione non richiede alcuna formazione del mouse né è particolarmente provoca ansia. Inoltre, il romanzo di esplorazione oggetto non richiede alcun cibo o stimoli sociali, consentendo un più atten...

Disturbo dello spettro autistico (ASD) è un disordine dello sviluppo neurologico composto da tre sintomi principali: riduzione di valore sociale, difficoltà a comunicare attraverso il linguaggio e comportamenti ripetitivi fantasia 1. Dal 2000, il numero di individui che sono stati diagnosticati con ASD è aumentato da 1 a 150-1 a 68 nel giro di dieci anni 2. Sebbene la prevalenza del disturbo continua ad aumentare, la causa della malattia non è ancora noto. C&#39;è stato un aumento negli sforzi per individuare modelli murini appropriati per il core e sintomi associati di ASD, in quanto questi modelli potrebbero portare a una maggiore comprensione dei sintomi sottostanti e le cause di ASD. Ci sono più ceppi inbred mouse che compaiono per visualizzare i comportamenti con la faccia di validità per i sintomi principali della ASD, tra cui comportamenti ripetitivi 3. Limitati, comportamenti ripetitivi (RRBs) sono un sintomo di base di alcuni disturbi psichiatrici come ASD.RRBs può aumentare con la gravità del disturbo 4, e possono drasticamente interrompere lo stile di vita degli individui affetti. RRBs sono in genere presenti in due categorie, di ordine inferiore comportamenti ripetitivi, che negli esseri umani consistono in azioni come dondolo e mano-sbattimento; e di ordine superiore comportamenti ripetitivi, che consistono di stretta aderenza alla routine e resistenza al cambiamento 5-8. Comportamenti ripetitivi di ordine inferiore sono stati ampiamente studiati nei roditori in cui si manifestano come stereotipie motorie, che possono essere facilmente osservabili nella creazione di un laboratorio 9. Questi comportamenti sembrano avere una buona validità viso per RRBs negli esseri umani, e potenzialmente forte validità di costrutto e 10. Test per la presenza di RRBs di ordine inferiore può essere completato attraverso il monitoraggio video di attività del mouse per studiare i periodi e la durata di queste stereotipie motorie 11. ordine superiore comportamenti ripetitivi rappresentano una sfida per la ri biomedica di basela ricerca utilizzando i roditori, in quanto questi RRBs non sono così facilmente identificati attraverso la semplice osservazione. A causa della difficoltà nell&#39;identificare questi comportamenti, esistono meno saggi stabilite per ordine superiore comportamento ripetitivo. Tradizionalmente, RRBs di ordine superiore sono stati misurati nei roditori utilizzando un paradigma labirinto in cui l&#39;animale prova è addestrato per raggiungere competenza in fuga. La posizione di fuga è poi passato e il numero di prove necessarie per ri-imparare la posizione di fuga viene registrata 12. Questi test non sono l&#39;ideale in quanto richiedono un lungo periodo di formazione, spesso inducono ansia, e può portare a risultati molto variabili. L&#39;esplorazione del foro di bordo è stato anche utilizzato per quantificare ordine superiore RRBs 13,14. Questo approccio non richiede allenamenti lunghi, ma non si basano su motivazioni alimenti e / o di discriminazione olfattiva. I dosaggi più elevati per RRBs ordine che non sono ansiogeno o richiedono una formazione sarebbe un buon complemento per il repertorio esistente di foro di bordo exploratio<html> n e saggi labirinto-based attualmente in uso. Il C58 / J (C58) inbred ceppo di topi esemplifica fortemente alti livelli di comportamenti stereotipi associati con ASD, cioè ripetitivo, stereotipie motorie ad inutili e livelli elevati di auto-governare 3,11. Inoltre, i topi C58 mostrano RRBs attraverso elevati livelli di allevamento, di nuovo lanciando e raspando 11,14,16. Questo ceppo inizia mostrando questi comportamenti in anticipo nel periodo neonatale e continua a mostrare loro tutta l&#39;età adulta. L&#39;ideale sarebbe poter verificare la presenza di elevati ordine superiore RRBs integrare le RRBs ordine inferiore ben documentati presenti in questo ceppo così come altri ceppi di topi. Il saggio oggetto di esplorazione romanzo qui descritto prevede la possibilità per i ricercatori di osservare di ordine inferiore e RRBs di ordine superiore allo stesso tempo, in quanto dà la possibilità di misurare i comportamenti a motivi geometrici e stereotipie motorie ripetitive. e_content &quot;&gt; Uso esplorazione oggetto romanzo come un saggio per ordine superiore comportamenti ripetitivi stato sviluppato da Pearson et al. 17. Questa nuova valutazione è un&#39;estensione del consolidata test a campo aperto 18-21 con l&#39;aggiunta di quattro oggetti innovativi per l&#39;arena. i topi sono stati autorizzati a indagare liberamente questi oggetti non familiari e il numero e l&#39;ordine delle indagini oggetto è stato rintracciato. le indagini degli oggetti sono stati poi analizzati per la presenza di modelli, con i topi BTBR visualizzare i numeri elevati di indagini fantasia tra gli oggetti. l&#39;utilizzo di questo test, i topi in grado di visualizzare di ordine superiore comportamenti ripetitivi e fantasia, eliminando la necessità di imparare i comportamenti così come la rimozione di stimoli inutili. esplorazione oggetto Novel induce RRBs di ordine superiore, in quanto consente ai topi di creare schemi e sequenze forma attraverso la loro esplorazione naturale . Usando questo test permette al ricercatore di quantificare la presenza di questi RRBs di ordine superiore. Pearson et al. sviluppato questo saggio e utilizzato per verificare la presenza di eventuali comportamenti ripetitivi ordine superiore nella BTBR ceppo inbred mouse, con risultati interessanti 17. Abbiamo recentemente pubblicato uno studio di follow-up a guardare i comportamenti del C58, C57BL / 6J (C57) e / NJ (FVB) ceppi FVB, così come un esame più dettagliato in potenziali variabili confondenti presenti in questo saggio, e possibile approcci statistici per l&#39;analisi dei dati generati 22.

<table><tbody><tr><td>Standard Polycarbonate Rodent Cage (45 cm x 24 cm x 20 cm)</td><td></td><td></td><td>Multiple cages are desirable to facilitate testing of multiple mice&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Plastic Opaque Circular Testing Arena (41 cm base diameter)</td><td>United States Plastic Corp.</td><td>13931</td><td>Multiple arenas are desirable to facilitate testing of multiple mice&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Standard Corn-Cob Rodent Bedding</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Novel Object - red monkey</td><td>Hasbro, Pawtucket RI</td><td></td><td>from Barrel of Monkeys</td></tr><tr><td>Novel Object - rectangular 2 x 4 LEGO</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Novel Object - tile</td><td>Thinkfun Inc., Alexandria VA</td><td></td><td>from Toot and Otto</td></tr><tr><td>Novel Object - standard white die</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Video Camera</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Behavioral Logging Software - The Observer</td><td>Noldus, Wageningen, The Netherlands</td><td>other programs may be used</td><td></td></tr><tr><td>Video Tracking Software - EthoVision</td><td>Noldus, Wageningen, The Netherlands</td><td>other programs may be used</td><td></td></tr><tr><td>X-Keys input keyboard</td><td>P.I. Engineering, Williamstown MI</td><td>829484</td><td></td></tr><tr><td>MacroWorks II</td><td>P.I. Engineering, Williamstown MI</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

novel object exploration as a potential assay for higher order repetitive behaviors in mice

Restricted, repetitive behaviors (RRBs) are a core feature of autism spectrum disorder (ASD) and disrupt the lives of affected individuals. RRBs are commonly split into lower-order and higher-order components, with lower order RRBs consisting of motor stereotypies and higher order RRBs consisting of perseverative and sequencing behaviors. Higher order RRBs are challenging to model in mice. Current assays for RRBs in mice focus primarily on the lower order components, making basic biomedical research into potential treatments or interventions for higher-order RRBs difficult. Here we describe a new assay, novel object exploration. This assay uses a basic open-field arena with four novel objects placed around the perimeter. The test mouse is allowed to freely explore the arena and the order in which the mouse investigates the novel objects is recorded. From these data, patterned sequences of exploration can be identified, as can the most preferred object for each mouse. The representative data shared here and past results using the novel object exploration assay illustrate that inbred mouse strains do demonstrate different behavior in this assay and that strains with elevated lower order RRBs also show elevated patterned behavior. As such, the novel object exploration assay appears to possess good face validity for higher order RRBs in humans and may be a valuable assay for future studies investigating novel therapeutics for ASD.

I dati rappresentativi 22 mostrano che C58 femminile / topi J visualizzati un numero maggiore di modelli in sequenza rispetto agli altri ceppi in ambito turno (figura 2, pannello A), ma non in campo rettangolare (Figura 2, pannello C). Nessuno dei tre ceppi maschi differivano tra loro (figura 2, pannelli B e D). I dati rappresentativi mostrano che entrambi i topi C58 / J maschili e femminili mostrano una forte preferenza per o...

Watch this Scientific Journal Video about Novel Object Exploration as a Potential Assay for Higher Order Repetitive Behaviors in Mice at JoVE.com

Novel Object Exploration as a Potential Assay for Higher Order Repetitive Behaviors in Mice

Higher order restricted, repetitive behaviors (RRBs) disrupt the lives of affected individuals. These behaviors are challenging to model in rodents, making basic biomedical research into potential treatments or interventions for RRBs difficult. Here we describe novel object exploration as a potential assay for higher order RRBs in mice.

Esplorazione oggetto romanzo come un test Potenziale di ordine superiore ripetitivi comportamenti nei topi

Restricted, repetitive behaviors (RRBs) are a core feature of autism spectrum disorder (ASD) and disrupt the lives of affected individuals.  RRBs are ...

novel-object-exploration-as-potential-assay-for-higher-order

Research

JoVE Journal

Behavior

8.3K Views.  University of Redlands. Higher order restricted, repetitive behaviors (RRBs) disrupt the lives of affected individuals. These behaviors are challenging to model in rodents, making basic biomedical research into potential treatments or interventions for RRBs difficult. Here we describe novel object exploration as a potential assay for higher order RRBs in mice.

Video: Novel Object Exploration as a Potential Assay for Higher Order Repetitive Behaviors in Mice

Marble Burying and Nestlet Shredding as Tests of Repetitive, Compulsive-like Behaviors in Mice

Obsessive-compulsive disorder (OCD) and autism spectrum disorders (ASD) are serious and debilitating psychiatric conditions and each constitutes a significant public health concern, particularly in children. Both of these conditions are highlighted by the repeated expression of meaningless behaviors. Individuals with OCD often show checking, frequent hand washing, and counting. Children with ASDs also engage in repetitive tapping, arm or hand flapping, and rocking. These behaviors can vary widely in intensity and frequency of expression. More intense forms of repetitive behaviors can even result in injury (e.g.&#160;excessive grooming, hand washing, and self-stimulation). These behaviors are therefore very disruptive and make normal social discourse difficult. Treatment options for repetitive behaviors in OCD and ASDs are somewhat limited and there is great interest in developing more effective therapies for each condition. Numerous animal models for evaluating compulsive-like behaviors have been developed over the past three decades. Perhaps the animal models with the greatest validity and ease of use are the marble burying test and the nestlet shredding test. Both tests take advantage of the fact that the target behaviors occur spontaneously in mice. In the marble burying test, 20 marbles are arrayed on the surface of clean bedding. The number of marbles buried in a 30 min session is scored by investigators blind to the treatment or status of the subjects. In the nestlet shredding test, a nestlet comprised of pulped cotton fiber is preweighed and placed on top of cage bedding and the amount of the nestlet remaining intact after a 30 min test session is determined. Presently, we describe protocols for and show movie documentation of marble burying and nestlet shredding. Both tests are easily and accurately scored and each is sensitive to small changes in the expression of compulsive-like behaviors that result from genetic manipulations, disease, or head injury.

Disease, head injury, genetic modifications, and treatment of mice with drugs can have profound effects on behavior. Utilizing well-characterized and validated approaches such as marble burying and nestlet shredding, compulsive-like behaviors can be documented accurately in mice as models of human obsessive-compulsive disorder and autism spectrum disorder.

Obsessive-compulsive disorder (OCD) and autism spectrum disorders (ASD) are serious and debilitating psychiatric conditions and each constitutes a ...

Ricerca

Comportamento

Novel Object Recognition Test for the Investigation of Learning and Memory in Mice

The object recognition test (ORT) is a commonly used behavioral assay for the investigation of various aspects of learning and memory in mice. The ORT is fairly simple and can be completed over 3 days: habituation day, training day, and testing day. During training, the mouse is allowed to explore 2 identical objects. On test day, one of the training objects is replaced with a novel object. Because mice have an innate preference for novelty, if the mouse recognizes the familiar object, it will spend most of its time at the novel object. Due to this innate preference, there is no need for positive or negative reinforcement or long training schedules. Additionally, the ORT can also be modified for numerous applications. The retention interval can be shortened to examine short-term memory, or lengthened to probe long-term memory. Pharmacological intervention can be used at various times prior to training, after training, or prior to recall to investigate different phases of learning (i.e., acquisition, early or late consolidation, or recall). Overall, the ORT is a relatively low-stress, efficient test for memory in mice, and is appropriate for the detection of neuropsychological changes following pharmacological, biological, or genetic manipulations.

The object recognition test (ORT) is a simple and efficient assay for evaluating learning and memory in mice. The methodology is described below.

Test di riconoscimento di oggetto romanzo per l'indagine di apprendimento e memoria in topi

The object recognition test (ORT) is a commonly used behavioral assay for the investigation of various aspects of learning and memory in mice. The ORT is ...

A Behavioral Assay for Investigating the Role of Spatial Memory During Instinctive Defense in Mice

Evolution has selected a repertoire of defensive behaviors that are essential for survival across all animal species. These behaviors are often stereotyped actions elicited in response to innately aversive sensory stimuli, but their success requires enough flexibility for adapting to different spatial environments, which can change rapidly. Here, we describe a behavioral assay to evaluate the influence of learned spatial knowledge on defensive behaviors in mice. We have adapted the widely used Barnes maze spatial memory assay to investigate how mice navigate to a shelter during escape responses to innately aversive sensory stimuli in a novel environment, and how they adapt to acute changes in the environment. This new assay is an ethological paradigm that does not require training and exploits the natural exploration patterns and navigation strategies in mice. We propose that the set of protocols described here are a powerful means of studying goal-directed behaviors and stimulus-triggered navigation, which should be of interest to both the fields of instinctive behaviors and spatial memory.

This protocol describes a behavioral assay, based on the Barnes maze test, to study how instinctive defensive actions are modified by the knowledge of spatial environment.

Un'analisi comportamentale per investigare il ruolo della memoria spaziale durante la difesa istintiva nei topi

Evolution has selected a repertoire of defensive behaviors that are essential for survival across all animal species. These behaviors are often ...

Analyzing Spatial Learning and Prosocial Behavior in Mice Using the Barnes Maze and Damsel-in-Distress Paradigms

The Barnes maze is a reliable measure of spatial learning and memory that does not require food restriction or exposure to extremely stressful stimuli. The Barnes maze can also assess other mouse behaviors, such as general motivation to escape from the maze platform and exploratory behavior. The Barnes maze can measure whether a genetic mutation or environmental variable can impact the acquisition and retention of spatial memories, as well as provide information about the search strategy employed by the mice. Here we use the Barnes maze to detect a memory deficit in adult mice following a single developmental ethanol exposure event. The newly described Damsel-in-Distress paradigm exposes a male mouse to a female mouse trapped in a chamber in the open center field of the arena. It provides an opportunity for the mouse to socially respond to the trapped female and exhibit prosocial behavior. The Damsel-in-Distress paradigm can also be used to examine mouse behavior in a novel arena and measure locomotor activity. Both the Barnes Maze and the Damsel-in-Distress protocols require minimal financial investment and most aspects of the tests can be constructed from common lab supplies. These flexible and accessible tools can also be used to detect behavioral changes over the course of development.

This protocol measures spatial learning and memory using the Barnes maze. A novel Damsel-in-Distress paradigm is used to assess locomotor activity and prosocial behavior in mice.

Analisi apprendimento spaziale e comportamento prosociale nei topi utilizzando il labirinto di Barnes e paradigmi Damsel in Distress

The Barnes maze is a reliable measure of spatial learning and memory that does not require food restriction or exposure to extremely stressful stimuli. ...

Novel Object Recognition and Object Location Behavioral Testing in Mice on a Budget

Ethologically relevant behavioral testing is a critical component of any study that uses mouse models to study the cognitive effects of various physiological or pathological changes. The object location task (OLT) and the novel object recognition task (NORT) are two effective behavioral tasks commonly used to reveal the function and relative health of specific brain regions involved in memory. While both of these tests exploit the inherent preference of mice for the novelty to reveal memory for previously encountered objects, the OLT primarily evaluates spatial learning, which relies heavily on hippocampal activity. The NORT, in contrast, evaluates non-spatial learning of object identity, which relies on multiple brain regions. Both tasks require an open-field-testing arena, objects with equivalent intrinsic value to mice, appropriate environmental cues, and video recording equipment and the software. Commercially available systems, while convenient, can be costly. This manuscript details a simple, cost-effective method for building the arenas and setting up the equipment necessary to perform the OLT and NORT. Furthermore, the manuscript describes an efficient testing protocol that incorporates both OLT and NORT and provides typical methods for data acquisition and analysis, as well as representative results. Successful completion of these tests can provide valuable insight into the memory function of various mouse model systems and appraise the underlying neural regions that support these functions.

Here we provide a protocol which includes comprehensive instructions for the economical establishment of murine object location and novel object recognition behavioral testing, including the design, cost, and construction of required equipment as well as execution of behavioral testing, data collection, and analysis.

Riconoscimento di oggetti nuovi e oggetto posizione comportamentali test in topi con un budget limitato

Ethologically relevant behavioral testing is a critical component of any study that uses mouse models to study the cognitive effects of various ...

A Behavioral Test Battery for the Repeated Assessment of Motor Skills, Mood, and Cognition in Mice

Pharmacological and toxicological studies in neurodegeneration require comprehensive behavioral analysis in mice because motor dysfunctions and dysfunctions in mood and cognition are common and often shared symptoms in neurodegenerative diseases. Shown here is a behavioral test battery for motor, mood, and cognition, which can be repeatedly tested in a longitudinal study. This battery assesses the overall behavioral phenotype in mice by examining each domain of behavior with at least two independent well-accepted tests (i.e., open-field test and rotarod test for motor function, social interaction test, elevated plus maze test, and forced swim test for emotional function, and Morris water maze test and novel object recognition test for cognitive function). Therefore, this sensitive and comprehensive test battery is a powerful tool for the study of behavioral alternation in neurodegeneration.

A comprehensive behavioral test battery of motor skills, mood&#8212;including social interaction, depression, and anxiety&#8212;and cognition is designed for the repeated assessment of neurodegeneration-related behavioral changes in mice.

Una batteria di Test comportamentali per la valutazione ripetuta di abilità motorie, l'umore e cognizione in topi

Pharmacological and toxicological studies in neurodegeneration require comprehensive behavioral analysis in mice because motor dysfunctions and ...

<meta charset="utf8"></head><body>Saggi comportamentali per il disturbo dello spettro autistico in modelli murini

Strategies for Assessing Autistic-Like Behaviors in Mice

Autism spectrum disorder (ASD) is a neurobiologically complex condition with a heterogeneous genetic etiology. Clinically, ASD is diagnosed by social communication impairments and restrictive or repetitive behaviors, such as hand flapping or lining up objects. These behavioral patterns can be reliably observed in mouse models with ASD-linked genetic mutations, making them highly useful tools for studying the underlying cellular and molecular mechanisms in ASD. Understanding how genetic changes affect the neurobiology and behaviors observed in ASD will facilitate the development of novel targeted therapeutic compounds to ameliorate core behavioral impairments. Our lab has employed several protocols encompassing well-described training and testing procedures that reflect a wide range of behavioral deficits related to ASD. Here, we detail two assays to study the core features of ASD in mouse models: self-grooming (a measure of repetitive behavior) and the three-chamber social interaction test (a measure of social interaction approach and preference for social novelty).

<meta charset="utf8"></head><body>Strategie per valutare i comportamenti simil-autistici nei topi

Rodent models are valuable tools for studying core behaviors related to autism spectrum disorder (ASD). In this article, we expound on two behavioral tests for modeling the core features of ASD in mice: self-grooming, which assesses repetitive behavior, and the three-chamber social interaction test, which documents social impairments.

Strategie per valutare i comportamenti simil-autistici nei topi

Autism spectrum disorder (ASD) is a neurobiologically complex condition with a heterogeneous genetic etiology. Clinically, ASD is diagnosed by social ...

Assessment of Spontaneous Alternation, Novel Object Recognition and Limb Clasping in Transgenic Mouse Models of Amyloid-&#946; and Tau Neuropathology

Here we describe a staged, behavioral testing approach that can be used to screen for compounds that exhibit in vivo efficacy on cognitive and functional motor behaviors in transgenic mouse models of &#946;-amyloidosis and tauopathy. The paradigm includes tests for spontaneous alternation in a Y-maze, novel object recognition, and limb clasping. These tests were selected because they: 1) interrogate function of cognitive or motor domains and the correlate neural circuitry relevant to the human disease state, 2) have clearly defined endpoints, 3) have easily implementable quality control checks, 4) can be run in a moderate throughput format, and 5) require little intervention by the investigator. These methods are designed for investigators looking to screen compounds for activity in short-term and working memory tasks, or functional motor behaviors associated with Alzheimer's disease mouse models. The methods described here use behavioral tests that engage a number of different brain regions including hippocampus and various cortical areas. Investigators that desire cognitive tests that specifically assess cognition mediated by a single brain region could use these techniques to supplement other behavioral tests.

Described here is a staged, behavioral screening approach that can be used to screen for compounds that exhibit in vivo efficacy on cognitive and functional motor behaviors in transgenic mouse models of &#946;-amyloidosis and tauopathy. These methods are optimized to screen compounds for activity in short-term and working memory tasks.

Valutazione di alternanza spontanea, riconoscimento novello di oggetti e attacco degli arti nei modelli di topo transgenico Modelli di neuropathologia di Amiloide-β e Tau

Here we describe a staged, behavioral testing approach that can be used to screen for compounds that exhibit in vivo efficacy on cognitive and functional ...

Esplorazione oggetto romanzo come un test Potenziale di ordine superiore ripetitivi comportamenti nei topi

Riepilogo

Esplora Altri Video

Capitoli in questo video

Marble Burying and Nestlet Shredding as Tests of Repetitive, Compulsive-like Behaviors in Mice

Test di riconoscimento di oggetto romanzo per l'indagine di apprendimento e memoria in topi

Un'analisi comportamentale per investigare il ruolo della memoria spaziale durante la difesa istintiva nei topi

Analisi apprendimento spaziale e comportamento prosociale nei topi utilizzando il labirinto di Barnes e paradigmi Damsel in Distress

Riconoscimento di oggetti nuovi e oggetto posizione comportamentali test in topi con un budget limitato

Una batteria di Test comportamentali per la valutazione ripetuta di abilità motorie, l'umore e cognizione in topi

Strategie per valutare i comportamenti simil-autistici nei topi

Strategie per valutare i comportamenti simil-autistici nei topi

Strategie per valutare i comportamenti simil-autistici nei topi

Valutazione di alternanza spontanea, riconoscimento novello di oggetti e attacco degli arti nei modelli di topo transgenico Modelli di neuropathologia di Amiloide-β e Tau