La nostra ricerca si concentra sulla fisiopatologia del disturbo dello spettro autistico, ASD. E in particolare, esaminiamo i meccanismi molecolari coinvolti nell'ASD e ciò che causa i disturbi comportamentali. Questi insieme coinvolgeranno trattamenti specifici relativi all'ASD e miglioreranno la vita delle persone che soffrono di ASD.
Una delle sfide nella nostra ricerca è migliorare la ricerca sul comportamento correlato all'ASD e comunicarlo tra diversi laboratori. C'è molta variazione tra i diversi laboratori, il modo in cui eseguono le valutazioni comportamentali, e questo è un grosso problema per far avanzare i trattamenti sul campo. Quindi speriamo che con i nostri protocolli aiuteremo questi progressi e la comunicazione tra i laboratori di tutto il mondo.
Ottimizzando e dettagliando la toelettatura e i protocolli di test a tre camere, stabiliamo un quadro coerente su cui i ricercatori possono fare affidamento per ottenere risultati affidabili e riproducibili da modelli murini ASD. Questa standardizzazione faciliterà una migliore cooperazione e interpretazione dei risultati provenienti da diversi laboratori, portando a una migliore comprensione dell'ASD e allo sviluppo di potenziali terapie. Il nostro laboratorio è interessato a spiegare il processo di traduzione specifico del tipo di cellula nel comportamento simile all'autismo.
Inoltre, abbiamo anche studiato le potenziali applicazioni terapeutiche in modelli murini di ASD, come la metformina. Per iniziare, accendi le luci soffuse. Pulisci il tavolo e allestisci la stanza.
Preparare ogni gabbia di prova con un sottile strato di lettiera fresca. Posiziona una o due gabbie sul tavolo, separate l'una dall'altra e dall'ambiente della stanza da paraocchi di plastica bianca. Quindi, posiziona una telecamera prima di ogni gabbia per catturare il mouse di prova.
Copri le gabbie con un foglio di tessuto e trasferisci tutti i topi nella stanza per evitare stress durante il processo di trasferimento. Una volta che i topi sono stati posizionati nella sala prove, rimuovere il foglio. Prima dell'inizio dell'esperimento, lasciali nella stanza con le luci soffuse per almeno 30 minuti.
All'inizio del test, annotare il numero di identificazione del mouse e le informazioni sul test su una lavagna. Metti il topo di prova nella gabbia con lettiera fresca. Avviare la registrazione e posizionare il mouse di prova nella gabbia di prova.
Esci dalla stanza durante la sessione di registrazione di 20 minuti. Dopo 20 minuti, rientrare in camera. Presenta la lavagna alla fotocamera e interrompi la registrazione.
Rimetti il mouse di prova nella gabbia di casa e ripeti l'esperimento. Dopo gli esperimenti, riporta i topi nella loro stanza di alloggio. Il test di auto-toelettatura ha rivelato un aumento del tempo di toelettatura nei topi knockout Eif4ebp2 rispetto ai topi di controllo.
I topi knockout Eif4ebp2 hanno mostrato significativamente più attacchi di toelettatura rispetto ai topi di controllo. Per iniziare, pulisci il tavolo e accendi le luci soffuse. Posiziona lo strumento in plexiglass a tre camere sul tavolo circondato da tende per la privacy.
Posizionare una telecamera sopra la testa, assicurandosi che tutte e tre le camere si trovino nel fotogramma di registrazione della telecamera. Quindi, trasferisci i topi di prova e gli estranei nella stanza, coprendo le gabbie con un foglio di tessuto durante il processo di trasferimento. Togliete il lenzuolo una volta che sono nella stanza.
Lasciare i topi nella stanza per almeno 30 minuti con illuminazione soffusa prima dell'inizio dell'esperimento. Tenere le tre camere vuote durante l'assuefazione. Dopo aver selezionato un mouse di prova, scrivere il numero di identificazione sulla lavagna.
Posizionare il mouse di prova nello scomparto centrale mentre le ante scorrevoli rimangono chiuse. Apri le porte e avvia la registrazione per consentire al mouse di prova di esplorare le tre camere vuote per 10 minuti. Dopo 10 minuti, rientrare in camera.
Guidare delicatamente il mouse di prova verso lo scomparto centrale e chiudere le porte scorrevoli. Visualizza la lavagna e arresta la fotocamera. Posizionare due gabbie metalliche nelle camere sinistra e destra diagonalmente l'una di fronte all'altra negli angoli di ciascuna camera.
Misurare la distanza tra le gabbie e le pareti della camera. Assicurarsi che le gabbie non siano rivolte direttamente verso le porte della camera. Scegli un topo sconosciuto e introducilo in una delle gabbie metalliche, lasciando l'altra gabbia vuota.
Per avviare il test, premere il tasto di registrazione e rimuovere entrambe le porte scorrevoli prima di lasciare la stanza. Lasciare che il topo di prova esplori una gabbia metallica vuota in una camera e una gabbia contenente un topo estraneo nell'altra camera per 10 minuti. Dopo 10 minuti, rientrare in camera.
Visualizza la lavagna sulla fotocamera e termina la registrazione. Reintrodurre il mouse nello scomparto centrale e chiudere le porte di interconnessione. Posiziona un nuovo topo mai incontrato nella gabbia metallica precedentemente vuota.
Avvia la registrazione e apri le porte di interconnessione per consentire al mouse di prova di esplorare l'apparecchio per 10 minuti prima di lasciare la stanza. Il mouse di prova esplorerà due gabbie metalliche, una con il mouse S1 incontrato in precedenza e l'altra con il mouse S2 di nuova introduzione, per 10 minuti. Dopo 10 minuti, rientrare in camera.
Visualizza la lavagna sulla fotocamera e concludi la registrazione. Riporta tutti i topi nelle loro gabbie domestiche. Pulire accuratamente le camere e le gabbie metalliche utilizzando un disinfettante inodore e asciugare l'apparecchio prima dell'esperimento successivo.
Dopo il test, riportare i topi alla struttura di stabulazione. I topi preferivano interagire con S1 rispetto a un nuovo oggetto inanimato. Allo stesso modo, i topi C57BL/6J hanno mostrato più interesse per un S2 di nuova introduzione rispetto a un S1 familiare.
