Il progetto viene finanziato attraverso l'ingegneria e scienze fisiche ricerca Consiglio EPSRC (EP/K503745/1), National Institute for Health Research (NIHR) Biomedical Research Centre (BRC) (BRC272/HI/JG/101440) e l'UCL cambiare creatori.

Il protocollo segue le linee guida della Commissione d'etica umana ricerca dell'University College di Londra.
Attenzione: Questo protocollo contiene un pericolo elettrico e un pericolo di ustione (saldatore); leggere entrambi prima di tentare questo protocollo. Questo protocollo prevede la connessione di un dispositivo per la pelle. Assicurarsi che in nessun momento c'è un percorso tra la rete della pelle e dell'elettricità. Non toccare mai l'elemento del saldatore. Tenere i fili per essere riscaldato con una pinzetta o morsetti. Mantenere la pulizia spugna bagnato durante l'uso. Restituiscono sempre il saldatore presso il suo stand quando non in uso. Mai messo sul banco di lavoro. Spegnere l'apparecchio e staccare la spina quando non in uso.
1. i componenti di Base di montaggio
Nota: Nella figura 3 fornisce una panoramica dettagliata dei passaggi del protocollo.
<ol><li>Per costruire il Bionic Clicker MK I, collegare lo schermo del sensore di bio-segnali del microcontrollore e avvitare i cavi EMG i morsetti a vite E, M e GND dello scudo (Vedi Figura 4). Continua al passo 1.6.</li>
	<li>
Per costruire il MK II, inserire il sensore del muscolo in una fila di tre pin il +, - e SIG fori (vedere la Figura 5) dall'alto e saldare sotto.
	<ol>
<li>Piegare i piedini di intestazione 90 ° con un paio di pinze a metà i perni. In questo modo i perni nella posizione corretta per il caso.</li>
		<li>Se utilizzando l'abduttore di indicis come input, continuare al passaggio 1.3, se non spostare al punto 1.4.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Rimuovere il cavo di riferimento nero breve dal sensore del muscolo.
	<ol>
<li>Tagliare i tre cavi di EMG con un filo di lama per eseguire dal polso alla parte posteriore della mano. Striscia la fine dei tre cavi EMG con una spogliarellista di filo.</li>
		<li>Inserire la fine spogliata del filo nero nel foro R, il filo blu nel foro E e il filo rosso nel foro M del sensore del muscolo (Figura 5). Saldare i fili nel posto sulla parte inferiore del sensore del muscolo. Spostare al punto 1.5.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Due elettrodi di clip nella parte inferiore del sensore del muscolo e un elettrodo al connettore del cavo nero riferimento.
	<ol>
<li>Attaccare il sensore di muscolo sul muscolo selezionato con gli elettrodi e posizionare l'elettrodo di riferimento nero in un luogo appropriato.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Tagliare 8 fili di multi-thread single core a lunghezza e ogni estremità della striscia: 5 brevi fili (7 cm) per eseguire dal microcontrollore per la scheda di controllo (rosso, nero, verde, bianco e blu) e 3 più lungo (circa 12 cm ma dipende dalla dimensione del polso) cavi (rosso, nero e verde) per correre da una parte del polso a altro. Nota: Se il posizionamento del sensore del muscolo su un muscolo diverso assicurarsi che i fili più lunghi verranno eseguito dal sito sensore muscolo al sito wireless microcontrollore.<ol>
<li>Inserire i fili nel microcontrollore pronto per saldatura: 2 fili rossi nel 3V del foro, 2 fili neri in foro GND, il filo verde lungo nel foro A0, il filo blu corto nel foro 2, il filo lungo bianco nel foro 3 e il filo verde corto nel foro 5. Saldare i fili nel posto sul lato inferiore del microcontrollore.</li>
		<li>Saldare l'altra estremità dei fili lunghi 3 a 3 prese di intestazione nell'ordine: rosso, nero, verde. Vedere la Figura 5. Se non utilizza l'abduttore di indicis procedere alla fase 2.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Posizionare le piastre del sensore di EMG sulla mano, come mostrato in Figura 6, con due degli elettrodi ad entrambe le estremità del muscolo abduttore indicis e un EMG sensore pad al centro del dorso della mano.
	<ol>
<li>Incastrare gli elettrodi l'estremità del connettore dei cavi dei sensori del muscolo (accoppiamento di Spinta). La clip di elettrodi blu e rosso sopra il muscolo, le clip di elettrodo nero sulla parte posteriore della mano.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. test EMG Output
<ol><li>Scarica la libreria per lo scudo di bio-segnali seguendo il link14 dalla sezione di riferimento. Scompatta il file e inserirlo nella cartella di librerie di sviluppo integrato (IDE) (solitamente si trova in documenti/Arduino/libraries). Passare al punto 2.3. Se costruire il MK II, passare al punto 2.2.</li>
	<li>Aggiungere le schede microcontrollore all'IDE, seguendo le istruzioni15.</li>
	<li>Scarica 'ThresholdTest.ino' per il MK I o 'BLEThresholdTest.ino' e 'BluefruitConfig.h' per la MK II e aprire nel software IDE (file supplementari).</li>
	<li>Scollegare il computer portatile dalla rete elettrica e poi e solo allora, collegare il microcontrollore il portatile tramite un cavo di Universal Serial Bus (USB).</li>
	<li>Caricare la versione pertinente del test di soglia per il microcontrollore e quindi aprire il monitor seriale (strumenti > Serial Monitor). Verrà ora visualizzato l'output di EMG.</li>
	<li>Spostare il dito indice da un lato e la mano senza muovere il dito indice. Annotare i valori visualizzati in ogni caso. Nota: Quando utilizzate il MK II assicuratevi che i cavi non spostano in quanto è estremamente sensibile al rumore generato in questo modo.</li>
	<li>Selezionare un valore che è di sopra di quello che si vede quando la mano viene spostata intorno, ma di sotto di quello che si vede quando il dito viene spostato da un lato a altro. Annotare questo valore. Nota: Il valore è selezionato in modo che il dispositivo viene attivato solo da un movimento propositivo del dito. Questo è il valore di soglia Trigger, il valore a cui il dispositivo verrà attivato. Il sensore di muscolo ha un'impostazione del guadagno che può essere modificata manualmente se il valore di soglia è difficile da trovare. Gli elettrodi debba essere sostituito. Se si utilizza il muscolo di indicis abduttore, è possibile impostare il guadagno al minimo come punto di partenza. L'impostazione del guadagno è alterato dal potenziometro sul sensore muscolo contrassegnato dal guadagno, e questo può essere cambiato da un piccolo cacciavite a testa piatta.</li>
</ol>3. test soglia
<ol><li>Scarica 'BoomTest.ino' per il MK I o 'BLEBoomTest.ino' e BluefruitConfig.h per il MK II e aprirlo nel software IDE.</li>
	<li>Modificare il codice fornito sostituendo 'PLACE_YOUR_THRESHOLD_TRIGGER_VALUE_HERE' con il valore di soglia Trigger precedentemente determinato al punto 2.8. Si tratta di linea 37 del codice per il MK I e la linea 47 del codice per il MK II.</li>
	<li>Caricare la versione corretta di BoomTest al microcontrollore e quindi aprire il monitor seriale (strumenti > Serial Monitor).</li>
	<li>Spostare la mano intorno (non muovendo il dito indice da lato a lato); nulla si vede sull'uscita seriale.</li>
	<li>Spostare il dito indice da lato a lato; appare la parola 'BOOM'. Nota: Se 'BOOM' appare al momento sbagliato o non a tutti, controllare i collegamenti e tornare al punto 2.7.</li>
</ol>4. 3D stampa il caso MK II
<ol><li>Se costruire il MK II, scaricare i file stl per tutti i 5 componenti del caso (vedere la Figura 7 per tutte le 5 parti). Stampare le parti del caso con qualsiasi metodo preferito. Procedere al punto 5.2. Se costruire il MK I, passare alla sezione 5. Nota: Il caso è stato stampato correttamente da entrambi deposizione fusa modellazione16 (FDM) e fotolitografia stampanti17.</li>
</ol>5. saldare la scheda di controllo
Nota: Se costruendo il MK II, procedere al punto 5.2.
<ol><li>
Inserire una riga di due pin di intestazione, cinque 10 resistori KΩ, un interruttore e due interruttori a pulsante per i componenti come illustrato nella Figura 8A; quindi saldarli nel posto sulla parte inferiore del bordo.
	<ol>
<li>Rompere le tracce di rame sulla scheda di striscia di affettare attraverso con un coltello artigianale, seguendo le linee grigia sulla Figura 8A. Questo consente per singole tracce per avere più funzioni su tutta la linea.</li>
		<li>Tagliare 7 fili (nero, rosso, blu, arancione, bianco, marrone e giallo) della lunghezza corretta con una fresa a filo in modo che corrono dal avambraccio al braccio superiore (circa 30cm). Tagliare un filo rosso di 7 cm, un filo nero di 3 cm e un'arancia e un filo blu di 4 cm.</li>
		<li>Striscia di entrambe le estremità dei fili con una spogliarellista di filo.</li>
		<li>Inserire i fili nella scheda di controllo, seguendo lo schema di circuito mostrato in Figura 9; saldare i fili nel posto sul lato inferiore.</li>
		<li>Saldare i fili lungo rossi e neri per un paio di spilli di intestazione e poi saldare i fili altri lunghi ad una striscia di perni di intestazione nell'ordine: blu, arancione, bianco, marrone, giallo.</li>
		<li>Saldare il 5V e pin GND del modulo wireless ai pin intestazione sulla scheda di controllo.</li>
		<li>Saldare il filo arancione breve al pin 2 del modulo di comunicazione wireless e il breve filo blu al pin 3.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Posto tre 10 KΩ resistori, un interruttore e due push pulsante opzioni come mostrato in Figura 10A e saldarli in posto sulla parte inferiore del bordo.
	<ol>
<li>Rompere le tracce di rame sulla scheda di striscia di affettare attraverso con un coltello artigianale, seguendo le linee grigia su Figura 10A. Questo consente per la traccia di avere funzioni multiple sul bordo.</li>
		<li>Tagliare i fili che erano precedentemente saldati al microcontrollore con una fresa a filo in modo che corrono attraverso lo strato metà del caso microcontrollore alla scheda di controllo senza interrompere il caso di chiusura (Figura 10B).</li>
		<li>Inserire i fili nella scheda di controllo, seguendo lo schema elettrico (Figura 11). Saldare i fili nel posto. Procedere al punto 6.2.</li>
	</ol>
</li>
</ol>6. montare Clicker e aggiornare microcontrollore
<ol><li>Rimontare il Clicker Bionic, collegare i connettori di intestazione dal controllo bordo fili al microcontrollore e scudo di bio-segnali (5V e GND sul MK I, pin 22-30 sulla MKII). Collegare la batteria al microcontrollore. Vedere la Figura 12. Passare al punto 6.3.</li>
	<li>Rimontare il Clicker Bionic, collegare il connettore di intestazione dal microcontrollore al sensore del muscolo (filo verde al SIG). Vedere la Figura 13.</li>
	<li>Collegare il microcontrollore al computer portatile tramite cavo USB.</li>
	<li>Scarica 'BionicClicker.ino' o ' BLEBionicClicker.ino e BluefruitConfig.h e aprirlo nel software IDE.</li>
	<li>Modificare il codice e sostituire 'PLACE_YOUR_THRESHOLD_TRIGGER_VALUE_HERE' con il valore di soglia Trigger determinato nel passaggio 2.7 (sulla linea 59 del codice per il MK I, linea 83 del codice per il MK II). Nota: Il nome che il dispositivo MK II appare come quando ci si connette tramite wireless può essere modificato modificando linea 47 del codice. Sostituire 'Bionic Clicker MK II' con un titolo alternativo.</li>
	<li>Scollegare il microcontrollore dal portatile rimuovendo il cavo USB.</li>
</ol>7. Collegare il dispositivo a un Computer
<ol><li>Se utilizzando il MK I, seguire le istruzioni per associare il modulo wireless al dispositivo seguendo guida18 del produttore. Se si utilizza il MK II, connettersi al dispositivo in modalità wireless seguendo la procedura per collegare una tastiera wireless per il computer utilizzato.</li>
</ol>8. test il Clicker
<ol><li>
Aprire alcuni software di battitura a macchina e immettere del testo, ad esempio 'Lorem ipsum dolor sit amet'. In questo modo le presse ad essere percepito per verificare se questi comandi vengono inviati e ricevuti. Nota: Se la batteria è Scarica il dispositivo può fornire comportamento irregolare; utilizzare sempre una batteria nuova.<ol>
<li>Premere il pulsante Avanti manuale per vedere il cursore spostare in avanti e il manuale indietro pulsante per visualizzare il cursore muoversi all'indietro. Sollevare il dito indice per anche andare avanti.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Per testare il clicker con il software di presentazione, sollevare il dito indice per avanzare le diapositive. Nota: L'opzione override consente la funzione di EMG on e off, e il manuale avanti e indietro pulsanti di avanzamento e ritirata le diapositive in entrambi gli scenari.</li>
</ol>9. Montare il Clicker
Nota: Se costruendo la MK II spostare al punto 9.2.
<ol><li>
Se costruire il MK I, tagliare i lati gancio e anello di materiale con le forbici, in modo che si adatta comodamente intorno al polso. Assicurarsi che i loop sono rivolti verso l'interno per non graffiare il polso.
	<ol>
<li>Tagliare il gancio bifacciale e ciclo materiale in modo che si adatta comodamente intorno al braccio superiore, ancora una volta assicurati che i loop si affacciano verso l'interno.</li>
		<li>Tagliare le strisce di velcro biadesivo alla dimensione del microcontrollore (10 x 5 cm) e scheda di controllo (2,5 cm x 6,4 cm). Tagliare una striscia che si adatta strettamente intorno alla batteria (4 x 12 cm).</li>
		<li>Utilizzando la pistola per colla, colla lato ciclo delle strisce sulla parte inferiore del microcontrollore e parte inferiore della scheda di controllo.</li>
		<li>Collegare la scheda di controllo per il cinturino da polso. Fissare la cinghia superiore del braccio il microcontrollore e la batteria.</li>
		<li>Collegare tutto: batteria 9 V The spine nel microcontrollore con il connettore PP3. Lo scudo di microcontroller e l'e-health collegare alla scheda di controllo tramite i fili saldati. Nota: Il MK I è ora terminato.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Se costruire il MK II, tagliare biadesivo velcro materiale 35 millimetri di larghezza e abbastanza a lungo per avvolgere intorno al polso (circa 22 cm per i polsi più piccoli).
	<ol>
<li>Far scorrere il materiale a strappo attraverso le clip nella parte inferiore del caso. Assicurarsi che i loop sono rivolti verso l'interno per non graffiare il polso.</li>
		<li>Collegare i fili saldati al microcontrollore che chiude nell'intestazione femmina nei perni maschio intestazione sul sensore del muscolo e gli elettrodi di clip con i cavi di EMG, spingendoli. Nota: Il MK II è ormai finito. Vedi Figura 14.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol>
	<li>Navarro, X., Krueger, T. B., Lago, N., Micera, S., Stieglitz, T., Dario, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+critical+review+of+interfaces+with+the+peripheral+nervous+system+for+the+control+of+neuroprostheses+and+hybrid+bionic+systems.">A critical review of interfaces with the peripheral nervous system for the control of neuroprostheses and hybrid bionic systems.</a> J Periph Nerv Syst. 10 (3), 229-258 (2005).</li><li>Yang, D. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+anthropomorphic+robot+hand+developed+based+on+underactuated+mechanism+and+controlled+by+EMG+signals.">An anthropomorphic robot hand developed based on underactuated mechanism and controlled by EMG signals.</a> J Bionic Eng. 6 (3), 255-263 (2009).</li><li>Chu, J. U., Moon, I., Lee, Y. J., Kim, S. 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Z., Melina, N. B., Kostas, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Open-Source,+Low-Cost,+Compliant,+Modular,+Underactuated+Fingers:+Towards+Affordable+Prostheses+for+Partial+Hand+Amputations.">Open-Source, Low-Cost, Compliant, Modular, Underactuated Fingers: Towards Affordable Prostheses for Partial Hand Amputations.</a> 2014 36th Annual International Conference of the IEEE Engineering in Medicine and Biology Society. , (2014).</li><li>Chatterjee, H. J., Hannan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Engaging the senses: object-based learning in higher education. , (2015).</li><li>Zainee, N. M., Chellappan, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emergency+clinic+multi-sensor+continuous+monitoring+prototype+using+e-Health+platform.">Emergency clinic multi-sensor continuous monitoring prototype using e-Health platform.</a> 2014 IEEE Conference on Biomedical Engineering and Sciences (IECBES). , (2014).</li><li>Paul, P., Motskin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engaging+the+Public+with+Your+Research.">Engaging the Public with Your Research.</a> Trends Immunol. 37 (4), 268-271 (2016).</li><li>. e-Health Sensor Platform V2.0 for Arduino and Raspberry Pi Available from: <a target="_blank" href="https://www.cooking-hacks.com/documentation/tutorials/ehealth-biometric-sensor-platform-arduino-raspberry-pi-medical#step3_1">https://www.cooking-hacks.com/documentation/tutorials/ehealth-biometric-sensor-platform-arduino-raspberry-pi-medical#step3_1</a> (2017)</li><li>. 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Gli autori non hanno nulla a rivelare.

La saturazione del MK II quando utilizzato su indicis il rapitore è meno di un problema di quanto potrebbe sembrare. Attento posizionamento degli elettrodi e corretto guadagno impostazione fermate dall'essere un problema quando il dispositivo viene utilizzato come un clicker. A meno che non siete interessati a registrare accuratamente l'attività degli indici abduttore, questo è improbabile che sia un problema a tutti. Non sovra-saturazione è stato visto su qualsiasi altro muscolo dopo aver impostato il guadagno. I falsi negativi con il MK II sono a causa della difficoltà di selezionare il valore di soglia corrispondenti quando si utilizza il indicis abduttori. Con muscoli più grandi la differenza tra la grandezza dell'attivazione non intenzionale del muscolo e propositivo che si irrigidisce il muscolo è maggiore, consentendo la selezione di un punto di soglia che è più lontano sia il falsi positivi e falsi negativi punti. Sulle mani particolarmente piccole muscolo abduttore indicis potrebbe essere troppo piccolo per gli elettrodi per essere posizionato correttamente (anche se con piccoli elettrodi questo potrebbe potenzialmente essere risolto).
La durata della batteria notevolmente più lunga per il MK II è utile per una varietà di motivi. In primo luogo, il MK I dispositivo ha iniziato ad agire in modo irregolare dopo 45 minuti di utilizzo, quindi non può essere utilizzata per le dimostrazioni più a lungo. In secondo luogo con una durata della batteria di multi-ora, il MK II può essere considerato come un controllo di input per un dispositivo utile, e con solo un piccolo aumento in dimensione fisica della batteria, potrebbe essere usato come un dispositivo di monitoraggio tutto il giorno. Il microcontrollore senza fili ha 6 ingressi analogici e 13 ingressi digitali; Ciò significa che la periferica potrebbe accettare segnali da sensori multipli del muscolo per creare un dispositivo con più gradi di libertà in ingressi di comando. Si deve anche osservare che il sensore muscolare potrebbe essere sostituito da qualsiasi biosensore con un'uscita analogica per creare un dispositivo che utilizza altri segnali biologici come input. Il codice del dispositivo può anche essere modificato facilmente per cambiare la sua funzionalità. Modifiche al software e all'hardware del dispositivo consentono semplici e varie modifiche al dispositivo.
Una limitazione del dispositivo nella sua forma attuale è che l'output di EMG non può essere inviato in modalità wireless a un alto tasso di dati come questo può sovraccaricare il buffer di microcontrollore senza fili. Un'altra limitazione è che la tecnica utilizza gli indici di abduttore come input, e come il muscolo è molto piccolo, si sovrappongono quasi la spaziatura degli elettrodi sulla mano; Se qualcuno ha le mani particolarmente piccole, potrebbe essere Impossibile posizionare correttamente gli elettrodi sopra questo muscolo.
Il dispositivo presenta parecchi vantaggi sopra i dispositivi più costosi quando si tratta di flessibilità a potenziali progetti di ricerca. È basso costo: il dispositivo costa 80 USD e canali aggiuntivi di EMG costano solo 35 USD, che lo rende ideale per piccoli o progetti degli studenti. È facile da personalizzare, il software può essere facilmente modificato e cambiato gli ingressi per altro hardware. Ha una dimensione piccola, quindi una persona che lo indossa non necessità di trasportare attrezzature pesanti o ingombranti. Appare anche come una tastiera wireless ad altri dispositivi, quindi è facilmente integrabile con qualsiasi dispositivo wireless compatibile. Il dispositivo è già stato incorporato in un dispositivo di assistenza che sarà pubblicato nel prossimo futuro.
A causa delle dimensioni e la facilità di personalizzazione del MK II, è già considerato per incorporazione in diversi progetti di ricerca come un modulo wireless di EMG e come un meccanismo trigger wireless. Esso serve anche come fondamento di una delle sessioni di laboratorio su un corso di master. Il miglioramento principale che vorremmo apportare al dispositivo è di aumentare il tasso di trasmissione senza fili; L'obiettivo è raggiungere 10 Hz, e se questo sarà fatto attraverso hardware o software è ancora da determinare.
I passaggi più critici all'interno del protocollo sono passaggi 2.6 e 2.7: la selezione del valore soglia Trigger. Al punto 2.6, particolare attenzione deve essere pagato al movimento dei cavi EMG, come questi possono agire come antenna e generare artefatti da movimento; Tuttavia, se queste sono mantenute stazionarie, questo non è un problema. Al punto 2.7, se il valore selezionato è troppo elevato, causando falsi negativi. Se questo valore è troppo basso, causando falsi positivi. Nel caso di indicis il rapitore, è molto difficile trovare un valore che non si traduca in occasionale falso negativo, anche se con muscoli più grandi questo non sembra essere un problema. Se trovare il valore corretto è ancora un problema, il guadagno può essere corretto da impostandola sul valore minimo e aumentarla fino a una grande differenza tra non-attivazione e l'attivazione è visto attraverso la lettura seriale, con i valori di stare sotto il punto di saturazione.
Nel complesso il MK II è un notevole miglioramento sopra il MK I come un potenziale dispositivo di ricerca, anche se perché il MK I ha un forte impatto visivo, è probabile essere ancora usate impegno pubblico in futuro eventi.

L'Aspire centro per riabilitazione ingegneria e tecnologie assistive indaga tecniche applicabili e trasferibili tra domini diversi in settori correlati di interesse, compresi ma non limitati a, tratto, distrofia muscolare, amputazione, l'invecchiamento della popolazione e la formazione di competenze specialistiche. Un settore di ricerca che il centro è coinvolto in è neuroprotesi. Le tante tecniche utilizzate per il controllo delle armi neuroprosthetic, EMG è uno degli ingressi più comuni per il controllo sistemi1,2,3,4,5,6. Questo è in gran parte grazie alla sua facilità d'uso e convenienza rispetto ad altri sistemi di controllo7. Recentemente sviluppato 3D-stampato protesi come la mano di Ada può costare solo 1.000 USD, quando si utilizza questo tipo di controllo8,9,10. Tuttavia, quando si tenta di dimostrare tali sistemi al pubblico non c'è nessun modo semplice per farlo senza l'ausilio di un amputato.
Per accrescere la consapevolezza delle attività di ricerca in questo campo ai membri del pubblico, è stato sviluppato un dispositivo di demo bionic clicker. È molto importante utilizzare la dimostrazione basata su oggetti che attira l'attenzione e accelera l'apprendimento e la comprensione del soggetto viene insegnato11. Il nostro dispositivo non solo aiuta a insegnare il concetto di EMG, ma anche per aumentare la conoscenza dell'attuale evoluzione delle moderne tecnologie. Inoltre, essa ispira le generazioni più giovani a scegliere studi all'interno di aree di scienza, tecnologia, ingegneria e matematica (STEM).
Il MK Clicker Bionic mi hanno fatto prontamente disponibili pezzi originali che erano già in uso all'interno del laboratorio. Ha consistito di un microcontrollore, un bio-segnali scudo12, elettrodi, una scheda di controllo, una scheda di comunicazione senza fili e una batteria da 9 V. Il dispositivo ha funzionato da far salire l'attività del muscolo abduttore indicis situato tra il dito indice e il pollice. Si innesca un cambiamento di diapositiva che imita una tastiera e inviando un 'giusto keypress' ogni volta che è stata raggiunta una soglia preselezionata. Scheda di controllo consentito per l'invio manuale di pressione dei tasti 'destra' e 'sinistra' (Avanzamento diapositive e diapositive di rifugio) e potrebbe anche essere utilizzata per ignorare l'input di EMG se qualcosa è andato storto durante una dimostrazione dal vivo.
Come parte della fisica medica e attività di coinvolgimento pubblico dipartimento di ingegneria biomedica, abbiamo dimostrato il Clicker Bionic ai membri del pubblico. Esso ha ricevuto una risposta entusiasta da parte del pubblico e generato interesse ad avviare diverse collaborazioni. Dopo il successo del dispositivo iniziale una seconda versione del dispositivo è stata progettata.
L'obiettivo per la progettazione del secondo dispositivo era quello di produrre un dispositivo che era più economico, meno ingombranti e più personalizzabile rispetto il primo dispositivo. Lo scopo di questo dispositivo era di progettare qualcosa che può essere facilmente modificato per progetti degli studenti e integrarsi economicamente i progetti esistenti. Il vantaggio principale di questo dispositivo rispetto ad altri disponibili1,2,3,4,5,6 è la sua facilità di utilizzo, dimensioni ridotte e basso costo. Anche se i dispositivi di bionic clicker non possono avere la risoluzione di altri dispositivi di ricerca, quali dispositivi di innesco, sono più di abbastanza buoni. Il MK II sarebbe una base ideale per qualsiasi sistema che utilizza una soglia di EMG per attivare un dispositivo, ad esempio un controller di protesi o dispositivo di assistenza.
Il disegno è stato basato intorno un microcontrollore funzionalità wireless e un sensore di muscolo. È compresa anche una 3,7 V 150 mAh ai polimeri di litio, una scheda di controllo manuale e un caso 3D-stampato. La figura 3 Mostra una panoramica delle differenze tra i disegni. Il design di MK II ha la stessa funzionalità di base come il dispositivo originale ma ha funzionalità significativamente più potenziale per nuove applicazioni quali monitoraggio EMG wireless.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1034">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">For the Mark I</td>
			<td style="width:77px;"></td>
			<td style="width:308px;"></td>
			<td style="width:407px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Laptop</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Any laptop with USB</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">USB B cable</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>From laptop to USB-B connection on Arduino</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Soldering Station</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Solder</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Hot glue gun</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Hot glue gun glue</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Items</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Small Single-Core Multi-thread Wires</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Black, Red, Yellow, Brown, Orange White, Blue,</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Arduino MEGA 2560</td>
			<td>Arduino</td>
			<td>Arduino MEGA 2560</td>
			<td>(Geniuno MEGA 2560 outside US)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">E-Health Shield v2.0</td>
			<td>Cooking Hacks</td>
			<td>e-Health Sensor Shield V2.0 for Arduino, Raspberry Pi and Intel Galileo [Biometric / Medical Applications]</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">EMG cables</td>
			<td>Cooking Hacks</td>
			<td>Electromyography Sensor (EMG) for e-Health Platform [Biometric / Medical Applications]</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">EMG Electrodes</td>
			<td>Sparkfun</td>
			<td>SEN-12969</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">9V battery</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Any</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Power cable</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>PP3 9v connector with jack</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Bluefruit EZ-KEY HID</td>
			<td>Adafruit</td>
			<td align="right">1535</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">strip board</td>
			<td>Amazon.co.uk</td>
			<td>Small Stripboard 25 X 64mm Pack of 3</td>
			<td>any similiar stripboard 2.54mm pitch 7x25</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">push button switch</td>
			<td></td>
			<td>COM-00097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">slide switch</td>
			<td>amazon.com</td>
			<td>20 Pcs On/Off/On DPDT 2P2T 6 Pin Vertical DIP Slide Switch 9x4x3.5mm</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">resistors</td>
			<td></td>
			<td>COM-11508</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Double sided Velcro</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Break Away Headers - Straight</td>
			<td>Sparkfun</td>
			<td>PRT-00116</td>
			<td>2, 2 and 5 needed</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">For the Mark II</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Laptop</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Any laptop with USB connection</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">USB micro cable</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>From laptop to USB micro (standard phone connector style)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Soldering Station</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Any</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Solder</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Items</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Small Single-Core Multi-thread Wires</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Black, Red, Green, White, Blue,</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Feather BLE 32U4</td>
			<td>Adafruit</td>
			<td align="right">2829</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">MyoWare</td>
			<td>Sparkfun</td>
			<td>SEN-13723</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">EMG cables</td>
			<td>Sparkfun</td>
			<td>CAB-12970</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">EMG electrodes</td>
			<td>Sparkfun</td>
			<td>SEN-12969</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">3.7 V LiPo</td>
			<td>Adafruit</td>
			<td align="right">1317</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Strip Board</td>
			<td>amazon.co.uk</td>
			<td>Small Stripboard 25 X 64mm Pack of 3</td>
			<td>2.54 pitch 7x9 rows</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Push Button switch</td>
			<td></td>
			<td>COM-00097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">slide switch</td>
			<td>amazon.com</td>
			<td>20 Pcs On/Off/On DPDT 2P2T 6 Pin Vertical DIP Slide Switch 9x4x3.5mm</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">resistors</td>
			<td></td>
			<td>COM-11508</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">3D printed parts</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Can be 3D printed yourself or printed from a website</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Double sided Velcro</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Break Away Headers - Straight</td>
			<td>Sparkfun</td>
			<td>PRT-00116</td>
			<td>3 pins needed</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Female Headers</td>
			<td>sparkfun</td>
			<td>PRT-00115</td>
			<td>3 pins needed</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the bionic clicker mark i &amp; ii

In questo manoscritto, presentiamo due sistemi 'Bionic Clicker', il primo disegnato per dimostrare l'elettromiografia (EMG) basato su sistemi di controllo per scopi didattici e la seconda per scopi di ricerca. EMG basato controllo sistemi di captare i segnali elettrici generati da attivazione muscolare e utilizzano come ingressi per i controller. Controller di EMG sono ampiamente usati nella protesi agli arti di controllo.
Il marchio ho (MK I) clicker permette di modificare la diapositiva di una presentazione sollevando il dito indice. È costruito attorno a un microcontrollore e un bio-segnali scudo. Ha generato un sacco di interesse da parte sia del pubblico e comunità di ricerca.
Il dispositivo di Mark II (MK II) qui presentato è stato progettato per essere un sistema più economico, più sottile e più personalizzabile che può essere facilmente modificato e trasmissione direttamente i dati EMG. È costruito utilizzando un microcontrollore in grado senza fili e un sensore di muscolo.

Il MK II è più conveniente, personalizzabile e meno ingombrante rispetto al MK ho dispositivo. L'intero che MK II costa solo leggermente più dello scudo di bio-segnali da solo (75 USD). Il dispositivo è significativamente più piccolo seduto sul polso, piuttosto che il braccio e il microcontrollore wireless supporti potenzialmente simultaneamente gli ingressi da 6 sensori di muscolo. L'autonomia funzionale del MK ho dispositivo utilizza una batteria da 9 V 550 mAh appena meno di un'ora e la durata della batteria funzionale del dispositivo MK II (quando viene utilizzato come un clicker) è di circa 8 ore utilizzando un 3,7 V 150 mAh; per un confronto tra i dispositivi, vedere tabella 1 .
Il Bionic Clicker MK II può avere un problema quando viene utilizzato sul rapitore indicis: l'amplificatore può saturare e prendere più di un secondo di scarico (Vedi Figura 15). Accurato posizionamento degli elettrodi e la corretta regolazione del guadagno in grado di superare questo problema. Questo non accade con il Bionic Clicker MK I o su qualsiasi altro comunemente usato i muscoli per EMG.
Mentre calibrare i dispositivi per trovare il valore di soglia Trigger, possono essere osservati molti valori diversi. Cadono in tre gamme: i valori quando la mano è ferma, i valori quando la lancetta si muove e i valori quando viene spostato il dito. La tabella 2 Mostra i valori registrati in ogni intervallo; per il fermo e mano spostando gli intervalli, i valori massimi sono indicati e per il dito tensing gamma è indicato il valore minimo. A trovarsi sopra la mano di valore in movimento e sotto il dito tensing valore viene selezionato il valore di soglia. Un valore più vicino alla mano campo mobile aumenta la probabilità di falsi positivi e riduce la probabilità di falsi negativi, mentre un valore più vicino al dito tensing gamma ha l'effetto opposto.
Entrambi i dispositivi dove testato per falsi negativi e falsi positivi quando tensing muscolo abduttore indici. Un falso negativo è stato registrato quando il dispositivo non ha innescato un cambiamento di diapositiva sulla contrazione del muscolo e un falso positivo è stato registrato se la diapositiva è cambiato quando nessun tensing si è verificato. Né dispositivo ha avuto un problema con falsi positivi, anche se il dispositivo MK II sperimentato l'occasionale falso negativo (meno del 5% del tempo). Il MK ho dispositivo non esperienze falsi positivi o negativi durante i primi 45 minuti di funzionamento, anche se il numero di falsi negativi aumenta rapidamente fino alla rottura totale dispositivo tra 50 minuti e un'ora (Vedi tabella 3).
Questi risultati indicano che il dispositivo è riuscito a obiettivi dichiarati. La tabella 1 Mostra che il MK II è più conveniente e ha una maggiore flessibilità rispetto alla MK I. tabella 2 e tabella 3 Mostra che il dispositivo funziona come previsto e può essere utilizzato come un dispositivo di innesco a base di EMG. Figura 15 Mostra i problemi che possono verificarsi se si utilizza l'abduttore di indici: non si tratta di un problema che si verifica con maggior parte dei muscoli e può essere risolto modificando il guadagno. Anche se i dispositivi hanno alcuni problemi, sono sufficienti per l'uso previsto.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55705/55705fig1.jpg"> Figura 1: Il bionico Clicker MK I. Questo dimostra il Clicker Bionic MK I e tutti i suoi componenti montati sul braccio sinistro. <a href="http://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55705/55705fig1large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55705/55705fig2.jpg"> Figura 2: Schema a blocchi dei dispositivi. Ogni casella rappresenta una sezione separata del dispositivo; all'interno di ogni scatola è la funzionalità che sezione ha come parte del dispositivo. <a href="http://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55705/55705fig2large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55705/55705fig3.jpg"> Figura 3 : I passaggi per costruire il dispositivo. Un diagramma di flusso che contiene una panoramica dettagliata di ogni passaggio del protocollo. <a href="http://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55705/55705fig3large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55705/55705fig4.jpg"> Figura 4 : MK iniziale ho Assemblea. Microcontrollore con i cavi di scudo ed elettrodo di bio-segnali. <a href="http://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55705/55705fig4large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55705/55705fig5.jpg"> Figura 5: Montaggio iniziale MK II. Microcontrollore con il sensore di muscolo e collegamenti saldati. <a href="http://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55705/55705fig5large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55705/55705fig6.jpg"> Figura 6 : Posizionamento degli elettrodi. Questa figura mostra il corretto posizionamento degli elettrodi sulla mano quando si utilizza il indicis abduttori. <a href="http://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55705/55705fig6large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55705/55705fig7.jpg"> Figura 7 : Parti di caso la MK II. Le parti del caso MK II pronta per la stampa a una stampante di fotolitografia. <a href="http://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55705/55705fig7large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55705/55705fig8.jpg"> Figura 8 : The MK controllare circuito. (un) del circuito dall'alto (grigi marchi dove il bordo di striscia ha avuto contatti rotti sulla parte inferiore). (b) completamento del circuito. <a href="http://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55705/55705fig8large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 9" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55705/55705fig9.jpg"> Figura 9 : The MK controllare il diagramma del circuito scheda. Il diagramma di circuito per il MK controllo bordo che mostra le connessioni tra i resistori, interruttori e cavi. <a href="http://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55705/55705fig9large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 10" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55705/55705fig10v2.jpg"> Figura 10 : The MK controllare circuito. (un) scheda di controllo dall'alto (contrassegno grigio dove il bordo di striscia ha avuto contatto rotto sulla parte inferiore). (b), del circuito completato <a href="http://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55705/55705fig10v2large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 11" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55705/55705fig11.jpg"> Figura 11: Diagramma di circuito del scheda di controllo la MK II. Il diagramma di circuito per il MK controllo bordo che mostra le connessioni tra i resistori, interruttori e cavi. <a href="http://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55705/55705fig11large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 12" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55705/55705fig12.jpg"> Figura 12 : L'assemblato I. MK Questo dimostra che tutti i componenti del MK ho dispositivo prima che essi sono stati montati sul braccio. <a href="http://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55705/55705fig12large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 13" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55705/55705fig13.jpg"> Figura 13 : Montaggio il Clicker MK II. (un) posto il microcontrollore nella parte inferiore del caso. (b) inserire la batteria nella sezione media e mettere il coperchio. (c) Posizionare il sensore di muscolo nel suo caso e mettere il coperchio. (d) Collegare il microcontrollore al sensore del muscolo e la batteria al microcontrollore. <a href="http://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55705/55705fig13large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 14" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55705/55705fig14.jpg"> Figura 14 : Il completato Bionic Clicker MK II. (un) sul cinturino in velcro. (b) sul polso. <a href="http://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55705/55705fig14large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 15" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55705/55705fig15.jpg"> Figura 15: Sovrasaturazione del sensore muscolo. Questa figura mostra cosa succede quando il sensore del muscolo è troppo saturi; gli altopiani sono quando l'attivazione muscolare era troppo forte per l'attuale impostazione del guadagno sul dispositivo. <a href="http://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55705/55705fig15large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<table fo:keep-together.within-page="1"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td>MK I</td>
			<td>MK II</td>
		</tr>
<tr>
<td>Sensore di EMG</td>
			<td>Generale Bio sensor</td>
			<td>Sensore dedicato muscolare</td>
		</tr>
<tr>
<td>Senza fili</td>
			<td>Modulo senza fili separato</td>
			<td>Sulla scheda microcontrollore</td>
		</tr>
<tr>
<td>EMG su reti wireless?</td>
			<td>No</td>
			<td>Sì</td>
		</tr>
<tr>
<td>Batteria</td>
			<td>9 V PP3</td>
			<td>150 mAh LiPo</td>
		</tr>
<tr>
<td>Tempo operativo</td>
			<td>1 h</td>
			<td>8 h</td>
		</tr>
<tr>
<td>Tempo di costruzione</td>
			<td>5 h</td>
			<td>4 h</td>
		</tr>
<tr>
<td>Costo totale</td>
			<td>$150</td>
			<td>$80</td>
		</tr>
<tr>
<td>Falsi positivi (%)</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td>Falsi negativi (%)</td>
			<td>0</td>
			<td>4.7</td>
		</tr>
</tbody></table>Tabella 1: confronto dei dispositivi. Questa tabella confronta diversi aspetti dei dispositivi, dal design alla funzionalità.
<table fo:keep-together.within-page="1"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td>Stazionario (massimo)</td>
			<td>Mano commovente (massimo)</td>
			<td>Dito Tensing (minimo)</td>
			<td>Valore di soglia</td>
		</tr>
<tr>
<td>MK I</td>
			<td>25</td>
			<td>35</td>
			<td>215</td>
			<td>200</td>
		</tr>
<tr>
<td>MK II</td>
			<td>40</td>
			<td>280</td>
			<td>460</td>
			<td>400</td>
		</tr>
</tbody></table>Tabella 2: risultati della calibrazione. Questa tabella mostra i valori ottenuti mantenendo la mano stazionario, muovendo la mano e dito tensing, così come il valore di soglia selezionata.
<table fo:keep-together.within-page="1"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td colspan="3">Numero di falsi negativi (testato ogni 30 s)</td>
			<td colspan="2">Numero di falsi positivi (spontanee attivazioni)</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>Primo 45 min</td>
			<td>45 min - 1h</td>
			<td>1-8 h</td>
			<td>Prima h</td>
			<td>1-8 h</td>
		</tr>
<tr>
<td>MK I</td>
			<td>0</td>
			<td>35</td>
			<td>N/A</td>
			<td>0</td>
			<td>N/A</td>
		</tr>
<tr>
<td>MK II</td>
			<td>4</td>
			<td>1</td>
			<td>40</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
		</tr>
</tbody></table>Tabella 3: test dei dispositivi. Confronto di falsi positivi e falsi negativi tra i due dispositivi.
I file di codice supplementare per MK I e MK II: <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/55705/BionicClicker.ino" target="_blank">Clicca qui per scaricare "BionicClicker.ino"</a> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/55705/BLEBionicClicker.ino" target="_blank">Clicca qui per scaricare "BLEBionicClicker.ino".</a> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/55705/BLEBoomTest.ino" target="_blank">Clicca qui per scaricare "BLEBoomTest.ino".</a> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/55705/BLEThresholdTest.ino" target="_blank">Clicca qui per scaricare "BLEThresholdTest.ino".</a> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/55705/BoomTest.ino" target="_blank">Clicca qui per scaricare "BoomTest.ino".</a> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/55705/ThresholdTest.ino" target="_blank">Clicca qui per scaricare "ThresholdTest.ino".</a> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/55705/Feather-Featherbase.stl" target="_blank">Clicca qui per scaricare "Piuma-Featherbase.stl".</a> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/55705/Feather-Feathermid.stl" target="_blank">Clicca qui per scaricare "Piuma-Feathermid.stl".</a> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/55705/Feather-Feathertop.stl" target="_blank">Clicca qui per scaricare "Piuma-Feathertop.stl".</a> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/55705/Myo-Myobase.stl" target="_blank">Clicca qui per scaricare "Myo-Myobase.stl".</a> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/55705/Myo-Myolid.stl" target="_blank">Clicca qui per scaricare "Myo-Myolid.stl".</a>

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The Bionic Clicker Mark I & II

Un dispositivo è stato creato per dimostrare il controllo basato su elettromiografia ad un pubblico laico. Dopo il successo del dispositivo iniziale, un secondo dispositivo è stato effettuato con una maggiore flessibilità nella funzionalità per scopi di ricerca e dimostrazione. Questo protocollo descrive il processo di creazione e calibrazione di entrambi i dispositivi.

Il Clicker Bionic contrassegnare I &amp; II

In this manuscript, we present two 'Bionic Clicker' systems, the first designed to demonstrate electromyography (EMG) based control systems for ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

The Bionic Clicker Mark I &amp; II

16.3K Views.  University College London. Un dispositivo è stato creato per dimostrare il controllo basato su elettromiografia ad un pubblico laico. Dopo il successo del dispositivo iniziale, un secondo dispositivo è stato effettuato con una maggiore flessibilità nella funzionalità per scopi di ricerca e dimostrazione. Questo protocollo descrive il processo di creazione e calibrazione di entrambi i dispositivi.

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High-resolution Fiber-optic Microendoscopy for in situ Cellular Imaging

Many biological and clinical studies require the longitudinal study and analysis of morphology and function with cellular level resolution. Traditionally, multiple experiments are run in parallel, with individual samples removed from the study at sequential time points for evaluation by light microscopy. Several intravital techniques have been developed, with confocal, multiphoton, and second harmonic microscopy all demonstrating their ability to be used for imaging in situ 1. With these systems, however, the required infrastructure is complex and expensive, involving scanning laser systems and complex light sources. Here we present a protocol for the design and assembly of a high-resolution microendoscope which can be built in a day using off-the-shelf components for under US$5,000. The platform offers flexibility in terms of image resolution, field-of-view, and operating wavelength, and we describe how these parameters can be easily modified to meet the specific needs of the end user.
We and others have explored the use of the high-resolution microendoscope (HRME) in in vitro cell culture 2-5, in excised 6 and living animal tissues 2,5, and in human tissues in vivo 2,7. Users have reported the use of several different fluorescent contrast agents, including proflavine 2-4, benzoporphyrin-derivative monoacid ring A (BPD-MA) 5, and fluoroscein 6,7, all of which have received full, or investigational approval from the FDA for use in human subjects. High-resolution microendoscopy, in the form described here, may appeal to a wide range of researchers working in the basic and clinical sciences. The technique offers an effective and economical approach which complements traditional benchtop microscopy, by enabling the user to perform high-resolution, longitudinal imaging in situ.

High-resolution Fiber-optic Microendoscopy for in situ Cellular Imaging

In many biological and clinical situations it is advantageous to study cellular processes as they evolve in their native microenvironment. Here we describe the assembly and use of a low-cost fiber-optic microscope which can provide real time imaging in cell culture, animal studies, and clinical patient studies.

Ad alta risoluzione in fibra ottica per Microendoscopy In situ Cellular Imaging

Many biological and clinical studies require the longitudinal study and analysis of morphology and function with cellular level resolution.  ...

Ricerca

Bioingegneria

Organotypic Collagen I Assay: A Malleable Platform to Assess Cell Behaviour in a 3-Dimensional Context

Cell migration is fundamental to many aspects of biology, including development, wound healing, the cellular responses of the immune system, and metastasis of tumor cells. Migration has been studied on glass coverslips in order to make cellular dynamics amenable to investigation by light microscopy. However, it has become clear that many aspects of cell migration depend on features of the local environment including its elasticity, protein composition, and pore size, which are not faithfully represented by rigid two dimensional substrates such as glass and plastic 1. Furthermore, interaction with other cell types, including stromal fibroblasts 2 and immune cells 3, has been shown to play a critical role in promoting the invasion of cancer cells. Investigation at the molecular level has increasingly shown that molecular dynamics, including response to drug treatment, of identical cells are significantly different when compared in vitro and in vivo 4. 
Ideally, it would be best to study cell migration in its naturally occurring context in living organisms, however this is not always possible. Intermediate tissue culture systems, such as cell derived matrix, matrigel, organotypic culture (described here) tissue explants, organoids, and xenografts, are therefore important experimental intermediates. These systems approximate certain aspects of an in vivo environment but are more amenable to experimental manipulation such as use of stably transfected cell lines, drug treatment regimes, long term and high-resolution imaging. Such intermediate systems are especially useful as proving grounds to validate probes and establish parameters required to image the dynamic response of cells and fluorescent reporters prior to undertaking imaging in vivo 5. As such, they can serve an important role in reducing the need for experiments on living animals.

A method is described for the preparation of a 3-dimensional matrix consisting of collagen type I and primary human fibroblasts. This organotypic gel serves as a useful substrate to assess invasive cell migration because it mimics basic features of tissue stroma and is amenable to many forms of microscopy.

Organotipiche Collagene I test: una piattaforma malleabile per valutare Comportamento cella in un 3-dimensionale Contesto

Cell migration is fundamental to many aspects of biology, including development, wound healing, the cellular responses of the immune system, and ...

Adhesion Frequency Assay for In Situ Kinetics Analysis of Cross-Junctional Molecular Interactions at the Cell-Cell Interface

The micropipette adhesion assay was developed in 1998 to measure two-dimensional (2D) receptor-ligand binding kinetics1. The assay uses a human red blood cell (RBC) as adhesion sensor and presenting cell for one of the interacting molecules. It employs micromanipulation to bring the RBC into contact with another cell that expresses the other interacting molecule with precisely controlled area and time to enable bond formation. The adhesion event is detected as RBC elongation upon pulling the two cells apart. By controlling the density of the ligands immobilized on the RBC surface, the probability of adhesion is kept in mid-range between 0 and 1. The adhesion probability is estimated from the frequency of adhesion events in a sequence of repeated contact cycles between the two cells for a given contact time. Varying the contact time generates a binding curve. Fitting a probabilistic model for receptor-ligand reaction kinetics1 to the binding curve returns the 2D affinity and off-rate.
The assay has been validated using interactions of Fc&gamma; receptors with IgG Fc1-6, selectins with glycoconjugate ligands6-9, integrins with ligands10-13, homotypical cadherin binding14, T cell receptor and coreceptor with peptide-major histocompatibility complexes15-19.
The method has been used to quantify regulations of 2D kinetics by biophysical factors, such as the membrane microtopology5, membrane anchor2, molecular orientation and length6, carrier stiffness9, curvature20, and impingement force20, as well as biochemical factors, such as modulators of the cytoskeleton and membrane microenvironment where the interacting molecules reside and the surface organization of these molecules15,17,19.
The method has also been used to study the concurrent binding of dual receptor-ligand species3,4, and trimolecular interactions19 using a modified model21.
The major advantage of the method is that it allows study of receptors in their native membrane environment. The results could be very different from those obtained using purified receptors17. It also allows study of the receptor-ligand interactions in a sub-second timescale with temporal resolution well beyond the typical biochemical methods.
To illustrate the micropipette adhesion frequency method, we show kinetics measurement of intercellular adhesion molecule 1 (ICAM-1) functionalized on RBCs binding to integrin &alpha;L&beta;2 on neutrophils with dimeric E-selectin in the solution to activate &alpha;L&beta;2.

Adhesion Frequency Assay for In Situ Kinetics Analysis of Cross-Junctional Molecular Interactions at the Cell-Cell Interface

An adhesion frequency assay for measuring receptor-ligand interaction kinetics when both molecules are anchored on the surfaces of the interacting cells is described. This mechanically-based assay is exemplified using a micropipette-pressurized human red blood cell as adhesion sensor and integrin &alpha;L&beta;2 and intercellular adhesion molecule-1 as interacting receptors and ligands.

Adesione saggio di frequenza per In Situ Analisi cinetica delle interazioni molecolari incrociati giunzionale alla cellula-cellula di interfaccia

The micropipette adhesion assay was developed in 1998 to measure two-dimensional (2D) receptor-ligand binding kinetics1. The assay uses a human red blood ...

Silk Film Culture System for in vitro Analysis and Biomaterial Design

Silk films are promising protein-based biomaterials that can be fabricated with high fidelity and economically within a research laboratory environment 1,2 . These materials are desirable because they possess highly controllable dimensional and material characteristics, are biocompatible and promote cell adhesion, can be modified through topographic patterning or by chemically altering the surface, and can be used as a depot for biologically active molecules for drug delivery related applications 3-8 . In addition, silk films are relatively straightforward to custom design, can be designed to dissolve within minutes or degrade over years in vitro or in vivo, and are produce with the added benefit of being transparent in nature and therefore highly suitable for imaging applications 9-13. The culture system methodology presented here represents a scalable approach for rapid assessments of cell-silk film surface interactions. Of particular interest is the use of surface patterned silk films to study differences in cell proliferation and responses of cells for alignment 12,14 . The seeded cultures were cultured on both micro-patterned and flat silk film substrates, and then assessed through time-lapse phase-contrast imaging, scanning electron microscopy, and biochemical assessment of metabolic activity and nucleic acid content. In summary, the silk film in vitro culture system offers a customizable experimental setup suitable to the study of cell-surface interactions on a biomaterial substrate, which can then be optimized and then translated to in vivo models. Observations using the culture system presented here are currently being used to aid in applications ranging from basic cell interactions to medical device design, and thus are relevant to a broad range of biomedical fields.

Silk Film Culture System for in vitro Analysis and Biomaterial Design

Silk films are a novel class of biomaterials readily customizable for an array of biomedical applications. The presented silk film culture system is highly adaptable to a variety of in vitro analyses. This system represents a biomaterial design platform offering in vitro optimization before direct translation to in vivo models.

Seta Film per la cultura del sistema In vitro Analisi e Progettazione Biomaterial

Silk films are promising protein-based biomaterials that can be fabricated with high fidelity and economically within a research laboratory environment ...

Cell Patterning on Photolithographically Defined 
Parylene-C: SiO2 Substrates

Cell patterning platforms support broad research goals, such as construction of predefined in vitro neuronal networks and the exploration of certain central aspects of cellular physiology. To easily combine cell patterning with Multi-Electrode Arrays (MEAs) and silicon-based &#8216;lab on a chip&#8217; technologies, a microfabrication-compatible protocol is required. We describe a method that utilizes deposition of the polymer parylene-C on SiO2&#160;wafers. Photolithography enables accurate and reliable patterning of parylene-C at micron-level resolution. Subsequent activation by immersion in fetal bovine serum (or another specific activation solution) results in a substrate in which cultured cells adhere to, or are repulsed by, parylene or SiO2 regions respectively. This technique has allowed patterning of a broad range of cell types (including primary murine hippocampal cells, HEK 293 cell line, human neuron-like teratocarcinoma cell line, primary murine cerebellar granule cells, and primary human glioma-derived stem-like cells). Interestingly, however, the platform is not universal; reflecting the importance of cell-specific adhesion molecules. This cell patterning process is cost effective, reliable, and importantly can be incorporated into standard microfabrication (chip manufacturing) protocols, paving the way for integration of microelectronic technology.

Cell Patterning on Photolithographically Defined 
Parylene-C: SiO2 Substrates

This protocol describes a microfabrication-compatible method for cell patterning on SiO2. A predefined parylene-C design is photolithographically printed on SiO2 wafers. Following incubation with serum (or other activation solution) cells adhere specifically to (and grow according to the conformity of) underlying parylene-C, whilst being repulsed by SiO2 regions.

Patterning cellulare su fotolitograficamente Definito parylene-C: SiO<sub&gt; 2</sub&gt; Substrati

Cell patterning platforms support broad research goals, such as construction of predefined in vitro neuronal networks and the exploration of certain ...

An Improved Method for the Preparation of Type I Collagen From Skin

Soluble type 1 collagen (COL1) is used extensively as an adhesive substrate for cell cultures and as a cellular scaffold for regenerative applications. Clinically, this protein is widely used for cosmetic surgery, dermal injections, bone grafting, and reconstructive surgery. The sources of COL1 for these procedures are commonly nonhuman, which increases the potential for inflammation and rejection as well as xenobiotic disease transmission. In view of this, a method to efficiently and quickly purify COL1 from limited quantities of autologously-derived tissues would circumvent many of these issues; however, standard isolation protocols are lengthy and often require large quantities of collagenous tissues. Here, we demonstrate an efficient COL1 extraction method that reduces the time needed to isolate and purify this protein from about 10 days to less than 3 hr. We chose the dermis as our tissue source because of its availability during many surgical procedures. This method uses traditional extraction buffers combined with forceful agitation and centrifugal filtration to obtain highly-pure, soluble COL1 from small amounts of corium. Briefly, dermal biopsies are washed thoroughly in ice-cold dH2O after removing fat, connective tissue, and hair. The skin samples are stripped of noncollagenous proteins and polysaccharides using 0.5 M sodium acetate and a high speed bench-top homogenizer. Collagen from residual solids is subsequently extracted with a 0.075 M sodium citrate buffer using the homogenizer. These extracts are purified using 100,000 MW cut-off centrifugal filters that yield COL1 preparations of comparable or superior quality to commercial products or those obtained using traditional procedures. We anticipate this method will facilitate the utilization of autologously-derived COL1 for a multitude of research and clinical applications.

Traditional procedures for the isolation of soluble type 1 collagen (COL1) require about 10 days from start to finish because of lengthy buffer incubations and laborious resuspensions of fibrils. Here, we describe a means to purify COL1 from small dermal biopsies in less than 3 hr.

Un metodo migliore per la preparazione di tipo I collagene della pelle

Soluble type 1 collagen (COL1) is used extensively as an adhesive substrate for cell cultures and as a cellular scaffold for regenerative applications. ...

In vivo and In vitro Rearing of Entomopathogenic Nematodes (Steinernematidae and Heterorhabditidae)

Entomopathogenic nematodes (EPN) (Steinernematidae and Heterorhabditidae) have a mutualistic partnership with Gram-negative Gamma-Proteobacteria in the family Enterobacteriaceae. Xenorhabdus bacteria are associated with steinernematids nematodes while Photorhabdus are symbionts of heterorhabditids. Together nematodes and bacteria form a potent insecticidal complex that kills a wide range of insect species in an intimate and specific partnership. Herein, we demonstrate in vivo and in vitro techniques commonly used in the rearing of these nematodes under laboratory conditions. Furthermore, these techniques represent key steps for the successful establishment of EPN cultures and also form the basis for other bioassays that utilize these organisms for research. The production of aposymbiotic (symbiont&#8211;free) nematodes is often critical for an in-depth and multifaceted approach to the study of symbiosis. This protocol does not require the addition of antibiotics and can be accomplished in a short amount of time with standard laboratory equipment. Nematodes produced in this manner are relatively robust, although their survivorship in storage may vary depending on the species used. The techniques detailed in this presentation correspond to those described by various authors and refined by P. Stock&#8217;s Laboratory, University of Arizona (Tucson, AZ, USA). These techniques are distinct from the body of techniques that are used in the mass production of these organisms for pest management purposes.

In vivo and In vitro Rearing of Entomopathogenic Nematodes Steinernematidae and Heterorhabditidae

The goal of this presentation is to demonstrate in vivo and in vitro techniques for the rearing of entomopathogenic nematodes. In vivo methods consider the rearing of these nematodes with an insect host, whereas the in vitro methods utilize rich agar media.

In vivo e in vitro Allevamento di Nematodi entomopatogeni (Steinernematidae e Heterorhabditidae)

Entomopathogenic nematodes (EPN) (Steinernematidae and Heterorhabditidae) have a mutualistic partnership with Gram-negative Gamma-Proteobacteria in the ...

Delivery of Therapeutic siRNA to the CNS Using Cationic and Anionic Liposomes

Prion diseases result from the misfolding of the normal, cellular prion protein (PrPC) to an abnormal protease resistant isomer called PrPRes. The emergence of prion diseases in wildlife populations and their increasing threat to human health has led to increased efforts to find a treatment for these diseases. Recent studies have found numerous anti-prion compounds that can either inhibit the infectious PrPRes isomer or down regulate the normal cellular prion protein. However, most of these compounds do not cross the blood brain barrier to effectively inhibit PrPRes formation in brain tissue, do not specifically target neuronal PrPC, and are often too toxic to use in animal or human subjects. 
We investigated whether siRNA delivered intravascularly and targeted towards neuronal PrPC is a safer and more effective anti-prion compound. This report outlines a protocol to produce two siRNA liposomal delivery vehicles, and to package and deliver PrP siRNA to neuronal cells. The two liposomal delivery vehicles are 1) complexed-siRNA liposome formulation using cationic liposomes (LSPCs), and 2) encapsulated-siRNA liposome formulation using cationic or anionic liposomes (PALETS). For the LSPCs, negatively charged siRNA is electrostatically bound to the cationic liposome. A positively charged peptide (RVG-9r [rabies virus glycoprotein]) is added to the complex, which specifically targets the liposome-siRNA-peptide complexes (LSPCs) across the blood brain barrier (BBB) to acetylcholine expressing neurons in the central nervous system (CNS). For the PALETS (peptide addressed liposome encapsulated therapeutic siRNA), the cationic and anionic lipids were rehydrated by the PrP siRNA. This procedure results in encapsulation of the siRNA within the cationic or anionic liposomes. Again, the RVG-9r neuropeptide was bound to the liposomes to target the siRNA/liposome complexes to the CNS. Using these formulations, we have successfully delivered PrP siRNA to AchR-expressing neurons, and decreased the PrPC expression of neurons in the CNS.

The goal of this protocol is to use cationic/anionic liposomes with a neuro-targeting peptide as a CNS delivery system to enable siRNA to cross the BBB. The optimization of a delivery system for treatments, like siRNA, would allow for more treatment options for prion and other neurodegenerative diseases.

La consegna dei terapeutica siRNA al SNC Utilizzando cationici e anionici liposomi

Prion diseases result from the misfolding of the normal, cellular prion protein (PrPC) to an abnormal protease resistant isomer called PrPRes.  The ...

Determination of Zeta Potential via Nanoparticle Translocation Velocities through a Tunable Nanopore: Using DNA-modified Particles as an Example

Nanopore technologies, known collectively as Resistive Pulse Sensors (RPS), are being used to detect, quantify and characterize proteins, molecules and nanoparticles. Tunable resistive pulse sensing (TRPS) is a relatively recent adaptation to RPS that incorporates a tunable pore that can be altered in real time. Here, we use TRPS to monitor the translocation times of DNA-modified nanoparticles as they traverse the tunable pore membrane as a function of DNA concentration and structure (i.e., single-stranded to double-stranded DNA).
TRPS is based on two Ag/AgCl electrodes, separated by an elastomeric pore membrane that establishes a stable ionic current upon an applied electric field. Unlike various optical-based particle characterization technologies, TRPS can characterize individual particles amongst a sample population, allowing for multimodal samples to be analyzed with ease. Here, we demonstrate zeta potential measurements via particle translocation velocities of known standards and apply these to sample analyte translocation times, thus resulting in measuring the zeta potential of those analytes.
As well as acquiring mean zeta potential values, the samples are all measured using a particle-by-particle perspective exhibiting more information on a given sample through sample population distributions, for example. Of such, this method demonstrates potential within sensing applications for both medical and environmental fields.

Here we use a polyurethane tunable nanopore integrated into a resistive pulse sensing technique to characterize nanoparticles surface chemistry via the measurement of particle translocation velocities, which can be used to determine the zeta potential of individual nanoparticles.

Determinazione della Zeta Potenziale tramite nanoparticelle Traslocazione Le velocità attraverso una Tunable Nanopore: usando le particelle di DNA modificato come esempio

Nanopore technologies, known collectively as Resistive Pulse Sensors (RPS), are being used to detect, quantify and characterize proteins, molecules and ...

The Organoid Reconstitution Assay (ORA) for the Functional Analysis of Intestinal Stem and Niche Cells

The intestinal epithelium is characterized by an extremely rapid turnover rate. In mammals, the entire epithelial lining is renewed within 4 - 5 days. Adult intestinal stem cells reside at the bottom of the crypts of Lieberk&#252;hn, are earmarked by expression of the Lgr5 gene, and preserve homeostasis through their characteristic high proliferative rate1. Throughout the small intestine, Lgr5+ stem cells are intermingled with specialized secretory cells called Paneth cells. Paneth cells secrete antibacterial compounds (i.e., lysozyme and cryptdins/defensins) and exert a controlling role on the intestinal flora. More recently, a novel function has been discovered for Paneth cells, namely their capacity to provide niche support to Lgr5+ stem cells through several key ligands as Wnt3, EGF, and Dll12.
When isolated ex vivo and cultured in the presence of specific growth factors and extracellular matrix components, whole intestinal crypts give rise to long-lived and self-renewing 3D structures called organoids that highly resemble the crypt-villus epithelial architecture of the adult small intestine3. Organoid cultures, when established from whole crypts, allow the study of self-renewal and differentiation of the intestinal stem cell niche, though without addressing the contribution of its individual components, namely the Lgr5+ and Paneth cells.
Here, we describe a novel approach to the organoid assay that takes advantage of the ability of Paneth and Lgr5+ cells to associate and form organoids when co-cultured. This approach, here referred to as &#34;organoid reconstitution assay&#34; (ORA), allows the genetic and biochemical modification of Paneth or Lgr5+ stem cells, followed by reconstitution into organoids. As such, it allows the functional analysis of the two main components of the intestinal stem cell niche.

The Organoid Reconstitution Assay ORA for the Functional Analysis of Intestinal Stem and Niche Cells

Intestinal organoid cultures are established from whole crypts and do not allow the analysis of self-renewal and differentiation in a cell-specific fashion. This protocol describes reconstitution of sorted stem (Lgr5+) and niche (Paneth) cells, which give rise to organoids while enabling their prior biochemical and genetic modification and functional analysis.

Il dosaggio di ricostituzione di Organoid (ORA) per l'analisi funzionale di nicchia cellule staminali intestinale e

The intestinal epithelium is characterized by an extremely rapid turnover rate. In mammals, the entire epithelial lining is renewed within 4 - 5 days. ...