Analisi dell'endocitosi assorbimento e trasporto retrogrado alla rete Trans-Golgi utilizzando Nanobodies funzionalizzati in cellule coltivate

Questo metodo consente la produzione e l'applicazione di nano-corpi batterici espressi e funzionalizzati per analizzare il trasporto di proteine retrograde dalla superficie cellulare ai compartimenti intercellulari. In particolare la rete Trans-Golgi. Il principale vantaggio di questa tecnica è l'uso del solfato. Una modifica post-traduzione altamente specifica, compartimentata e sensibile per valutare l'arrivo del complesso nano-corpo del reporter nel compartimento DTN. Questo metodo in combinazione con altri nano-corpi derivati per l'imaging delle cellule vita e la microscopia elettronica può anche essere usato per studiare i processi endocitici dei recettori della superficie cellulare correlati alla malattia. Il nostro repertorio di nano-corpi funzionalizzati è stato progettato per studiare il trasporto retrogrado in cellule coltivate. Tuttavia, questi strumenti possono anche essere applicati in organismi multicellulari. Per iniziare questa procedura, scegliere una colonia batterica contenente il vettore di interesse dalla piastra e inoculare un pallone contenente 20 millilitri di mezzo LB integrato con antibiotici. Incubare durante la notte a 37 anni