Questi protocolli sono importanti per stabilire l'integrità e il normale funzionamento del sistema autonomo per valutare la funzionalità del sistema nervoso autonomo e rivelare disturbi del sistema vestibolare. Un funzionamento vestibolare o un deficit di coordinazione motoria possono segnalare danni al sistema autonomo. Queste tecniche possono rivelare l'integrità del funzionamento autonomo.
Le tecniche comportamentali possono essere suscettibili alle variabilità introdotte dallo sperimentatore. Consigliamo allo stesso ricercatore di condurre le tecniche durante l'esperimento e di trattare ogni roditore in modo identico. Per l'analisi verticale del movimento dell'ascensore, posiziona fino a quattro ratti da 200 a 250 grammi di due mesi in una scatola di plexiglass da 22,5 per 26 per 20 centimetri e modella in modo sicuro la scatola.
Posizionare la scatola sul pad dell'ascensore di un dispositivo di movimento verticale dell'ascensore e accendere il dispositivo all'impostazione più bassa per l'acclimatazione. Quindi, impostare l'ampiezza su 22 centimetri in su e 22 centimetri verso il basso da neutro e avviare il dispositivo con un periodo di ciclo iniziale a 2.500 millisecondi per cinque minuti, 2.000 millisecondi per cinque minuti e 1.500 millisecondi per cinque minuti. Quindi impostare il dispositivo su 1.000 millisecondi per due ore prima di rallentare il dispositivo in retromarcia utilizzando periodi di 1.500 millisecondi per cinque minuti, 2.000 millisecondi per cinque minuti e 2.500 millisecondi per cinque minuti.
Per una procedura di rotazione della ruota panoramica, posizionare il contenitore in plexiglass su una panca di legno e posizionare i ratti nel contenitore con il lungo asse dei loro corpi perpendicolare all'asta di rotazione orizzontale della ruota panoramica. Dopo aver chiuso la scatola in modo sicuro, posizionare un secondo set di ratti con una massa simile in un secondo contenitore in plexiglass con il lungo asse del corpo perpendicolare all'asta di rotazione orizzontale sul secondo braccio del dispositivo di rotazione della ruota panoramica. Dopo aver chiuso in modo sicuro la scatola, avviare la rotazione della ruota panoramica in senso orario a 16 gradi al secondo al quadrato per raggiungere una velocità angolare di 120 gradi al secondo.
Quando la ruota panoramica ha raggiunto la velocità di picco, inizia a rallentare a 48 gradi al secondo al quadrato per raggiungere zero gradi al secondo. Dopo una pausa di un secondo, fare in modo che il contenitore continui a ruotare in senso antiorario a 16 gradi al secondo al quadrato per raggiungere una velocità angolare di 120 gradi al secondo prima di decelerare a 48 gradi secondi al quadrato per raggiungere zero gradi al secondo. Quindi continuare la rotazione in senso antiorario per due ore per sessione per circa 720 rotazioni.
Per l'allenamento del bilanciere, posizionare due sgabelli in legno alti 0,75 metri nel campo sperimentale a circa 110 centimetri di distanza. Posizionare una scatola nera di plastica di 15 x 15 x otto centimetri sullo strumento di finitura e posizionare una stretta trave di legno di 2,5 x 130 centimetri tra i due sgabelli lasciando una distanza di 100 centimetri tra i bordi delle feci dallo sgabello iniziale allo sgabello di finitura. Posizionare una lampada allo sgabello di partenza e accendere la lampada.
Quindi spegnere la luce della stanza in modo che la stanza sia il più buia possibile e introdurre il primo topo al fascio nell'angolo illuminato. Se il topo non attraversa la sua volontà, spingere delicatamente l'animale ad attraversare la trave. Dopo tre giorni consecutivi di allenamento, posizionare il topo addestrato sullo sgabello di partenza vicino alla luce e avviare immediatamente un cronometro.
Il topo dovrebbe attraversare rapidamente il fascio di bilanciamento ed entrare nella scatola nera sullo sgabello di finitura. Ferma il cronometro non appena il naso dell'animale entra nella scatola scura sullo sgabello di finitura. Per il conteggio della defecazione dopo il trattamento di movimento, trasferire i ratti dal contenitore in plexiglass in singole scatole di campo aperto da 40 per 40 per 45 centimetri e contare il numero di pellet di feci nella scatola di plexiglass attribuita a ciascun roditore.
Per un test di comportamento a campo aperto, utilizzare una videocamera a infrarossi per registrare gli animali per tre minuti e utilizzare il metraggio video risultante per determinare la distanza totale percorsa per ogni animale. Qui, vengono mostrati i risultati rappresentativi del fascio di bilanciamento del tempo necessario per attraversare la trave di bilanciamento dopo tre giorni consecutivi di allenamento. Il movimento verticale dell'ascensore, i cambiamenti nel movimento verticale hertz e la rotazione della ruota panoramica aumentarono significativamente la defecazione.
Inoltre, il movimento verticale dell'ascensore, i cambiamenti nel movimento verticale di Hertz e la rotazione della ruota panoramica hanno diminuito significativamente la distanza in campo aperto percorsa. L'allenamento del fascio di bilanciamento è fondamentale in quanto i ratti devono essere motivati e sicuri quando attraversano il fascio. In caso contrario, il loro saldo non verrà misurato durante il periodo di valutazione.
Seguendo le procedure comportamentali, gli effetti di diversi farmaci di interesse sul funzionamento autonomo e sulla segnalazione cellulare possono essere valutati utilizzando questi saggi di stimolazione vestibolare.
