Rilevazione della mitofagia in Caenorhabditis elegans e cellule di mammifero utilizzando coloranti organelli-specifici

La degradazione dei mitocondri danneggiati da parte della mitofagia è essenziale per la funzione della rete mitocondriale. Sfortunatamente, questo processo diminuisce con l'età. Sviluppiamo e utilizziamo farmaci che attivano la mitofagia, promuovendo così un invecchiamento sano per comprendere la funzione della mitofagia nell'invecchiamento e nelle malattie legate all'età, incluso l'Alzheimer.

Una delle maggiori sfide è misurare il processo mitofagico senza influenzarlo. Recenti studi hanno dimostrato che l'espressione di GFP nei mitocondri delle cellule muscolari induce stress che è MT UPR. Pertanto, l'uso di coloranti in animali o cellule non transgenici è essenziale e integra le tecnologie genetiche.

Il nostro protocollo ha tre vantaggi principali. In primo luogo, non è necessario generare animali transgenici o cellule che esprimono biosensori mitofagici. In secondo luogo, non c'è bisogno di costose infrastrutture e competenze, come nel caso della microscopia elettronica.

E terzo, il cocktail di organelli è disponibile in commercio e il protocollo è semplice e veloce. Il nuovo composto attivante la mitofagia VL-850 induce una robusta mitofagia e in questo modo protegge dallo stress ossidativo e promuove la durata della vita. Ora la grande questione è determinare il meccanismo d'azione sottostante.

Abbiamo esplorato il meccanismo a più livelli, da quello cellulare a quello organismico utilizzando C.elegans e cellule di mammifero.