Questo lavoro è stato sostenuto dal Programma S&T di Hebei (NO.E2020100001 e NO.22372502D), dal Progetto di Innovazione e Imprenditorialità di Alto Livello di Shijiazhuang (No. 07202203).

Gli esperimenti sugli animali sono stati condotti con l'approvazione del Comitato per la ricerca sugli animali e l'etica dell'Istituto di ricerca medica Hebei Yiling (numero di approvazione: N2022148). I topi maschi C57BL/6J del peso di 18-22 g (vedi Tabella dei materiali) sono stati ospitati nel nuovo centro di valutazione dei farmaci dell'Hebei Yiling Medical Research Institute. Sono stati forniti loro cibo normale e acqua pulita ed esposti alla luce artificiale per 12 ore al giorno. Le camere hanno mantenuto un intervallo di temperatura controllato di 20-26 °C e un'umidità relativa del 40%-70%.
1. Creazione di un modello murino di ipossia cronica (Figura 1)
<ol><li>Prima di iniziare l'esperimento, preparare gabbie per animali a pressione atmosferica normale e gabbie con un ambiente continuo a basso contenuto di ossigeno. Stabilisci un ambiente continuo a basso contenuto di ossigeno utilizzando un sistema di erogazione automatizzato del controllo del gas per lavare la camera con una miscela di ossigeno puro e azoto. NOTA: Questo sistema è programmato per controllare l'interruttore della valvola elettromagnetica, garantendo così un'erogazione precisa del gas sia in termini di tempo che di concentrazione.</li>
	<li>Dividi in modo casuale i topi in tre gruppi: un gruppo di controllo (Con), un gruppo modello (CH) e un gruppo di elettroagopuntura (EA + CH). Posizionare i topi di controllo e modello/elettroagopuntura separatamente nelle due gabbie, con 10 topi per gabbia. Mantenere il ciclo di luce a 12 h/12 h (chiaro/scuro). NOTA: Nel gruppo di controllo non viene indotto alcun trattamento o ipossia (Con). Il gruppo modello (CH) è costituito da topi con ipossia cronica. Il gruppo dell'elettroagopuntura (EA + CH) comprende topi indotti dall'ipossia trattati con elettroagopuntura.</li>
	<li>Per lo sviluppo di ipossia cronica, stabilire i parametri della camera a basso contenuto di ossigeno utilizzando un misuratore di ossigeno digitale per regolare la portata del gas e mantenere una concentrazione di ossigeno del 10%. Posizionare gli animali all'interno della camera a basso contenuto di ossigeno alle 9:00 e rimuoverli alle 17:00, per un totale di 8 ore di esposizione ininterrotta a basso contenuto di ossigeno al giorno per 3 mesi. NOTA: Quando si imposta l'erogazione di azoto gassoso per ridurre la concentrazione di ossigeno, si consiglia di procedere lentamente per evitare un'eccessiva introduzione di azoto gassoso in una sola volta, poiché porterà alla morte degli animali.</li>
	<li>Valutare il modello di disfunzione cognitiva indotta da ipossia cronica utilizzando l'esame istologico e i test comportamentali: il test in campo aperto15 e il test del labirinto d'acqua16.</li>
</ol>2. Anestesia (Figura 2)
<ol><li>Preparare la macchina per anestesia per piccoli animali (vedi Tabella dei materiali) e il termoforo a temperatura costante. NOTA: Durante l'anestesia, gli animali sono suscettibili all'ipotermia, sottolineando la necessità di utilizzare un termoforo a temperatura costante per l'isolamento.</li>
	<li>Posizionare il topo nella scatola di induzione dell'anestesia e indurlo rapidamente con isoflurano al 2%-2,5% di ossigeno (vedere la tabella dei materiali) per circa 1 minuto. NOTA: Questo pretrattamento a breve termine è un passaggio cruciale per garantire che i topi possano prosperare a basso dosaggio di concentrazione per un lungo periodo di tempo.</li>
	<li>Una volta che la loro eccitabilità è diminuita, pizzica la punta del mouse per controllare il suo riflesso. Quindi, trasferire il mouse sul termoforo a temperatura costante (37 °C).</li>
	<li>Regolare la portata dell'anestesia a una concentrazione di circa lo 0,5%. Collegare la macchina per anestesia alla bocca e al naso del topo. Procedere con il trattamento di elettroagopuntura garantendo il mantenimento dell'anestesia. NOTA: L'effetto dell'anestesia è stato confermato quando i topi hanno smesso di sbattere le palpebre. L'effetto dell'anestesia può durare almeno 30 minuti.</li>
</ol>3. Trattamento di elettroagopuntura
<ol><li>Per migliorare efficacemente la disfunzione cognitiva, selezionare punti di agopuntura specifici, come Baihui (GV20), Shenting (GV24) e Zusanli bilaterale (ST36), sulla base della teoria della medicina tradizionale cinese e dell'esperienza clinica (Figura 3). Somministrare il trattamento di elettroagopuntura 2 settimane prima del completamento del processo di modellazione.<ol><li>Individuare il punto di agopuntura GV20 sulla linea mediana della fronte, nel punto medio di una linea che collega la punta delle orecchie7. La profondità di inserimento dell'ago per agopuntura deve essere di 2 mm.</li>
		<li>Individuare il punto di agopuntura GV24 1,3 mm direttamente sopra il punto medio degli occhi del mouse sulla linea mediana della fronte17. La profondità di inserimento dell'ago per agopuntura deve essere di 2 mm.</li>
		<li>Localizzare il punto di agopuntura ST36 all'esterno dell'articolazione del ginocchio, circa 2 mm sotto la testa del perone 18,19. La profondità di inserimento dell'ago per agopuntura deve essere di 3-4 mm.</li>
	</ol></li>
	<li>Preparare aghi per agopuntura monouso (vedere la tabella dei materiali) e un dispositivo per elettroagopuntura (vedere la tabella dei materiali) per la procedura (figura 4).</li>
	<li>Posizionare il topo in posizione prona in leggera anestesia con isoflurano allo 0,5%, assicurandosi che la testa e gli arti siano immobilizzati. Tenere un ago in acciaio inossidabile (diametro: 0,18 mm; lunghezza: 7 mm) con la mano destra, usando il pollice, l'indice e il medio.</li>
	<li>Eseguire l'agopuntura sui punti di agopuntura GV20 e GV24 trasversalmente per 2 mm di profondità, sollevando la pelle sulla testa del topo con la mano sinistra. Perforare il punto di agopuntura ST36 verticalmente per una profondità di 3-4 mm toccando la testa del perone sul lato laterale dell'articolazione del ginocchio del topo e premendo sulla pelle con il pollice sinistro. NOTA: Per i punti di agopuntura situati sulla testa, si consiglia di inserire gli aghi nella sequenza di GV24 seguita da GV20. Questo ordine facilita la comodità operativa. I punti di agopuntura sono posizioni anatomiche discrete piuttosto che punti stazionari. Di conseguenza, lievi deviazioni nell'angolo di inserimento dell'ago non hanno alcun effetto sull'efficacia terapeutica, analogamente osservata nei pazienti sottoposti a trattamento di elettroagopuntura in ambito clinico.</li>
	<li>Collegare il dispositivo elettronico di agopuntura agli aghi, con GV20 e l'ST36 sinistro collegati a un set di elettrodi e GV24 e l'ST36 destro collegati a un altro (Figura 4). Selezionare la modalità ad onda continua, con un'intensità di corrente elettrica di 2 mA e una frequenza di 2 Hz 20,21. Confermare il trattamento ideale osservando lievi tremori locali nei punti di agopuntura e una tranquilla tolleranza da parte del topo.<ol><li>Quando si collega lo strumento elettrico per agopuntura, collegare l'estremità prossimale dell'ago. Questo aiuta a ridurre al minimo l'impatto causato dal peso della linea di connessione e di conseguenza migliora la prevenzione del distacco dell'ago. Se necessario, utilizzare del nastro adesivo per fissare l'ago inserito orizzontalmente e la linea di connessione.</li>
	</ol></li>
	<li>Somministrare il trattamento giornaliero per 30 minuti al giorno per 6 giorni consecutivi, con un solo giorno di riposo tra un ciclo di trattamento e l'altro.</li>
</ol>4. Test in campo aperto (Figura 5)
NOTA: Il test in campo aperto è un metodo convenzionale utilizzato per valutare il comportamento autonomo, il comportamento esplorativo, le capacità cognitive e il comportamento ansioso di animali da esperimento in ambienti nuovi e sconosciuti22. È costituito da una scatola di reazione in campo aperto e da un dispositivo di registrazione.
<ol><li>Per eseguire la prova, preparare un cubo a pareti bianche di 50 cm × 50 cm × 30 cm, con il fondo diviso in 25 quadrati uguali di 10 cm × 10 cm.</li>
	<li>Posizionare il mouse nella casella di reazione in campo aperto per l'acclimatazione. Consenti al mouse di esplorare la stanza di prova e familiarizzare con il nuovo ambiente durante il periodo di acclimatazione. Eseguire il test in campo aperto dopo aver acclimatato il topo all'ambiente sperimentale per 1 ora. NOTA: Questo garantisce la minimizzazione dell'ansia o dello stress indotto dalle alterazioni dell'ambiente, consentendo così esiti più precisi durante le successive valutazioni comportamentali.</li>
	<li>Posiziona il mouse al centro della scatola e monitoralo per 10 minuti dopo aver permesso al mouse di adattarsi all'ambiente per 2 minuti.<ol><li>Utilizzare un sistema di tracciamento video (vedere la tabella dei materiali) per registrare la traiettoria di movimento del mouse, la distanza totale percorsa, il tempo trascorso nell'area centrale, la velocità di attraversamento dell'area centrale e il numero di ingressi nell'area centrale durante il test.</li>
		<li>Eseguire le operazioni pertinenti come indicato nel manuale del prodotto del sistema di tracciamento video. Ogni topo viene sottoposto a un singolo test e inizia l'esplorazione dalla stessa posizione all'interno della scatola.</li>
		<li>Dopo ogni test, pulire la scatola da campo aperta con etanolo al 75% per evitare falsi risultati causati dall'interferenza degli odori quando si utilizza un mouse.</li>
	</ol></li>
</ol>5. Labirinto d'acqua (Figura 5)
NOTA: Il test del labirinto d'acqua è spesso impiegato come strumento di valutazione comportamentale in esperimenti che coinvolgono topi per valutare le loro capacità di apprendimento spaziale e di memoria23.
<ol><li>Preparare un serbatoio d'acqua circolare con un diametro di 120 cm e una profondità di 30 cm. Dividi il serbatoio in quattro quadranti uguali: I, II, III e IV. Se si utilizzano topi neri nell'esperimento, utilizzare un serbatoio di acqua bianca; Per i topi bianchi, utilizzare un serbatoio delle acque nere.</li>
	<li>Posiziona delle tende intorno al serbatoio dell'acqua circolare per evitare che il topo veda i ricercatori durante il test.</li>
	<li>Posizionare diversi marcatori sulla superficie superiore del serbatoio dell'acqua come segnali visivi per l'orientamento spaziale. Assicurarsi che questi marcatori rimangano fermi per tutta la durata dell'esperimento per mantenere la coerenza.</li>
	<li>Posizionare una piattaforma circolare con un diametro di 10 cm nel quadrante III del serbatoio dell'acqua come area di destinazione designata. Assicurati che la piattaforma possa essere facilmente spostata e fissata in qualsiasi posizione desiderata.</li>
	<li>Durante l'esperimento, introdurre acqua nel serbatoio mantenendo un intervallo di temperatura di 22-24 °C.<ol><li>Assicurarsi che il livello dell'acqua rimanga costantemente 1 cm sopra la piattaforma target. Includi una concentrazione del 20% di biossido di titanio non tossico nell'acqua per ottenere un netto contrasto tra i topi neri e lo sfondo bianco. Questo contrasto facilita la registrazione da parte della fotocamera dei movimenti del mouse e dei parametri rilevanti.</li>
	</ol></li>
	<li>Condurre un test di esplorazione spaziale continua di 5 giorni posizionando in sequenza ciascun topo nei quadranti I, II, III e IV.<ol><li>Posiziona il mouse rivolto verso il muro. Allontanati dal labirinto per evitare che il mouse usi la posizione dello sperimentatore come punto di riferimento. Registra il tempo impiegato dal mouse per trovare la piattaforma.</li>
		<li>Se il mouse non riesce a localizzare la piattaforma subacquea entro 90 secondi, guidare il mouse verso la piattaforma e fornire un periodo di apprendimento di 30 secondi. Inoltre, registrare il periodo di latenza come 90 s.</li>
		<li>Se il mouse individua la piattaforma subacquea entro 90 secondi, lasciarla rimanere sulla piattaforma per 10 secondi per l'apprendimento prima di rimuoverla dal serbatoio dell'acqua.</li>
		<li>Asciuga il topo con un asciugamano e rimettilo nella sua gabbia.</li>
		<li>Ruota la posizione di ciascun mouse in ogni quadrante ogni 20 minuti. Registra la distanza di nuoto, la velocità e il tempo impiegato da ciascun mouse per trovare la piattaforma (il periodo di latenza) utilizzando il sistema di tracciamento video (vedi Tabella dei materiali), eseguendo le operazioni pertinenti come indicato nel manuale del prodotto.</li>
		<li>Posiziona la piattaforma a 1 cm sopra la superficie dell'acqua il giorno 1. Posiziona la piattaforma a una profondità di 1 cm sotto la superficie dell'acqua nei giorni 2-5.</li>
	</ol></li>
	<li>Il giorno 6, rimuovi la piattaforma dal quadrante di destinazione e conduci un test di esplorazione spaziale.<ol><li>Posiziona il mouse nel quadrante I per esplorare liberamente per 90 s. Il computer registra la traiettoria di nuoto del mouse, il tempo trascorso nel quadrante bersaglio e il numero di volte in cui attraversa la piattaforma. NOTA: Al fine di ridurre al minimo gli errori sperimentali causati da fattori umani, è importante mantenere la posizione del punto di riferimento fissa nell'esperimento del labirinto d'acqua. Inoltre, lo sperimentatore dovrebbe ritirarsi immediatamente dopo aver messo il topo in acqua. Al termine dell'esperimento, i topi devono essere asciugati con un asciugamano e rimessi nelle loro gabbie per mantenere il calore.</li>
	</ol></li>
</ol>6. Colorazione con ematossilina ed eosina (HE) (Figura 6)
NOTA: L'esame istologico della regione ippocampale aiuta a valutare l'istituzione del modello di ipossia e a determinare l'efficacia del trattamento con agopuntura.
<ol><li>Dopo l'esperimento comportamentale, anestetizzare il topo con un'iniezione intraperitoneale di 20 mg/kg di pentobarbital sodico e perfonderlo con una soluzione di paraformaldeide al 10% (vedere Tabella dei materiali) per garantire la completa perfusione corporea. Isolare il tessuto cerebrale e immergerlo in una soluzione di paraformaldeide al 10% a temperatura ambiente (RT) per 3 giorni per ottenere la fissazione.</li>
	<li>Metti i campioni di cervello in una scatola di inclusione. Successivamente, lavare i campioni di cervello processati con acqua corrente per 6 ore.</li>
	<li>Utilizzare un processatore di tessuti automatizzato per disidratare i campioni utilizzando una serie di soluzioni alcoliche con concentrazioni crescenti, vale a dire, etanolo al 60% per 1 ora, etanolo al 70% per 1 ora, etanolo al 90% per 1 ora, etanolo al 95% per 2 ore e, infine, etanolo al 100% per 2 ore.</li>
	<li>Immergere i campioni di tessuto nello xilene per 2 ore per ottenere la trasparenza. Successivamente, al termine del processo di disidratazione, trasferire i campioni permeabilizzati in cera di paraffina riscaldata a 60 °C per 3 h. Infine, incorporali in un processore automatico.</li>
	<li>Utilizzare un'affettatrice rotativa per ottenere sezioni da 4 μm. Successivamente, sottoporre le sezioni alla colorazione con ematossilina per una durata compresa tra 3 e 8 minuti, seguita da colorazione con eosina per 1-3 minuti.</li>
	<li>Trasferire in sequenza le sezioni macchiate in contenitori separati di alcool puro e xilene. Quindi, sigillare e fissare le sezioni colorate con gomma neutra in preparazione all'esame patologico al microscopio ottico.</li>
	<li>Utilizzare uno scanner per diapositive (vedere Tabella dei materiali) per scansionare le fette. Successivamente, utilizzare il software di visualizzazione per ottenere i risultati della colorazione HE per la regione ippocampale. Confronta la disposizione dei neuroni e la condensazione dei nuclei neuronali.</li>
</ol>

Miglioramento cognitivo nei topi con ipossia cronica con agopuntura

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

L'agopuntura, una pratica medica non farmacologica nata in Cina oltre 2.000 anni fa, prevede l'inserimento di aghi sottili in punti specifici del corpo noti come punti di agopuntura. Si ritiene che questi punti siano collegati da canali o meridiani attraverso iquali scorre l'energia vitale del corpo, o "qi". Stimolando questi punti, l'agopuntura mira a ripristinare l'equilibrio e l'armonia del corpo. È stato dimostrato che tratta efficacemente varie condizioni, tra cui dolore cronico, ansia/depre...

La popolazione mondiale sta attualmente affrontando un problema critico di invecchiamento, con conseguente rapido aumento della prevalenza dei disturbi cognitivi. L'incidenza mondiale del deterioramento cognitivo è di circa 53,97 per 1000 anni-persona1. L'ipossia cerebrale cronica causata da disfunzioni vascolari o disturbi circolatori/respiratori rimane uno dei principali fattori di rischio per la demenza legata all'età2. Studi precedenti hanno dimostrato che l'ipossia cerebrale può aumentare la deposizione di amiloide-β modificando l'espressione di BACE13. Inoltre, l'ipossia è stata associata a disregolazione delle cellule gliali e neuroinfiammazione 4,5. Nonostante la crescente portata di questo problema, attualmente mancano farmaci occidentali efficaci per prevenire il declino cognitivo indotto dall'ipossia cronica. La medicina tradizionale cinese non farmacologica, in particolare l'agopuntura, è stata utilizzata per migliaia di anni per trattare i disturbi cognitivi e ha mostrato risultati promettenti nell'alleviare le malattie neurodegenerative 6,7. I punti di agopuntura di Baihui, Shenting e Zusanli sono punti efficaci per il trattamento della disfunzione cognitiva 8,9. Studi clinici hanno dimostrato che la terapia con elettroagopuntura migliora significativamente i punteggi Montreal Cognitive Assessment (MoCA) e Mini-Mental State Examination (MMSE) nei pazienti con deterioramento cognitivo vascolare e migliora efficacemente la disfunzione cognitiva8. Sebbene gli studi abbiano suggerito che l'agopuntura può migliorare significativamente la capacità di memoria dei ratti con legatura arteriosa, un modello di ipossia cerebrale acuta10, un modello di ipossia cerebrale acuta, non esiste alcun rapporto sugli effetti dell'agopuntura in qualsiasi modello di roditore con disturbi cognitivi indotti da ipossia cronica. La mancanza di ricerca sul meccanismo ne ha notevolmente ostacolato l'applicazione clinica.
Ricerche precedenti hanno dimostrato che sottoporre i ratti a un ambiente ipossico per un periodo di 8 settimane può aumentare significativamente i livelli di stress ossidativo e infiammazione nel cervello, con conseguente declino della funzione della memoria11. Il presente studio si propone di indagare l'impatto dell'agopuntura sui modelli di roditori al fine di approfondire la nostra comprensione. Vale la pena notare, tuttavia, che l'anestesia è tipicamente necessaria durante il trattamento di agopuntura nei roditori a causa del potenziale di agitazione durante la stimolazione ripetuta. L'anestesia prolungata può avere un impatto significativo sulla funzione cognitiva nei topi, poiché la maggior parte dei farmaci anestetici può sopprimere l'attività neurale e impedire l'elaborazione delle informazioni, portando a deficit comportamentali12. Diversi studi hanno dimostrato che la somministrazione di sevoflurano al 2,5% per una durata di 6 ore può compromettere notevolmente la memoria spaziale, la capacità di apprendimento e l'attenzione nei topi13. Inoltre, l'evidenza suggerisce che alte dosi di anestesia possono provocare la morte neuronale o danni ai nervi nei topi14. Pertanto, è imperativo identificare un approccio adeguato per ridurre al minimo la quantità complessiva di anestesia utilizzata. In questo studio, introduciamo un metodo di agopuntura efficace per il trattamento dei topi con deterioramento cognitivo, insieme a test comportamentali per valutare le loro capacità di memoria. È importante sottolineare che presentiamo una tecnica di anestesia pre-trattamento modificata che può ridurre efficacemente il dosaggio totale di anestesia somministrata durante l'esperimento.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>10% paraformaldehyde solution</td>
			<td>Bioroyee (Beijing) Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>RL3234</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ANY-maze</td>
			<td>Science</td>
			<td>&#160;SA201</td>
			<td>Video tracking system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C75BL/6J mice</td>
			<td>BEIJING HFK BIOSCIENCE CO.,LTD</td>
			<td>No.110322220103041767</td>
			<td>Gender: Male,&#160; Weight: 18&#8211;22 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electroacupuncture device</td>
			<td>Great Wall</td>
			<td>KWD-808 I</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hwato acupuncture&#160; needle</td>
			<td>Suzhou Medical Appliance Factory</td>
			<td>2655519&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>RWD Life Science Co.,Ltd</td>
			<td>R510-22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NanoZoomer Digital Pathology</td>
			<td>Hamamatsu Photonics K. K</td>
			<td>C9600-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal anesthesia machine</td>
			<td>RWD</td>
			<td>YL-LE-A106</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

acupuncture treatment in a mouse model of chronic hypoxia-induced cognitive dysfunction

Il trattamento dei disturbi del nervo centrale ha costantemente posto sfide significative al campo medico. L'agopuntura, una pratica non farmacologica radicata nella medicina tradizionale cinese, prevede l'inserimento di aghi sottili in punti precisi del corpo ed è comunemente impiegata per la gestione di diverse condizioni. Recentemente, l'agopuntura è emersa come un promettente intervento terapeutico per una serie di malattie neurologiche, tra cui ansia e disturbi respiratori. Tuttavia, il potenziale dell'agopuntura nel trattamento della disfunzione cognitiva indotta dall'ipossia cronica non è stato ancora esplorato. Questo documento presenta un protocollo completo per stabilire un modello murino di deterioramento cognitivo cronico indotto da ipossia, somministrare una lieve anestesia, eseguire un trattamento di agopuntura e valutare i cambiamenti comportamentali e le capacità di memoria utilizzando test in campo aperto e labirinti d'acqua. Il protocollo passo-passo fornisce istruzioni dettagliate su come localizzare e posizionare con precisione i punti di agopuntura e gli aghi per il miglioramento cognitivo. Utilizzando questo protocollo, i ricercatori possono condurre studi sistematici per valutare a fondo il potenziale terapeutico dell'agopuntura per la disfunzione cognitiva.

The global population is currently facing a critical aging problem, resulting in a rapid increase in the prevalence of cognitive disorders. The worldwide incidence of cognitive impairment is approximately 53.97 per 1000 person-years1. Chronic cerebral hypoxia caused by vascular dysfunction or circulatory/respiratory disorders remains one of the major risk factors for age-related dementia2. Previous studies have demonstrated that cerebral hypoxia can increase amyloid-&#946; deposition by modifying BACE1 expression3. Additionally, hypoxia has been associated with glial-cell dysregulation and neuroinflammation4,5. Despite the growing magnitude of this issue, effective Western medicines for preventing chronic hypoxia-induced cognitive decline are currently lacking. Non-pharmacological traditional Chinese medicine, particularly acupuncture, has been used for thousands of years to treat cognitive disorders and has shown promising results in alleviating neurodegenerative diseases6,7. The Baihui, Shenting, and Zusanli acupoints are effective points for treating cognitive dysfunction8,9. Clinical studies have demonstrated that electro-acupuncture therapy significantly improves the Montreal Cognitive Assessment (MoCA) and Mini-Mental State Examination (MMSE) scores in patients with vascular cognitive impairment and effectively ameliorates cognitive dysfunction8. Although studies have suggested that acupuncture can significantly enhance the memory ability of rats with arterial ligation-an acute cerebral hypoxia models10, an acute cerebral hypoxia model, there is no report on the effects of acupuncture in any rodent model with chronic hypoxia-induced cognitive disorders. The lack of research into the mechanism has considerably impeded its clinical application. 
Previous research has demonstrated that subjecting rats to a hypoxic environment for a period of 8 weeks can significantly elevate levels of oxidative stress and inflammation in the brain, resulting in a decline in memory function11. The present study aims to investigate the impact of acupuncture on rodent models in order to further our understanding. It is worth noting, however, that anesthesia is typically required during acupuncture treatment in rodents due to the potential for agitation during repeated stimulation. Prolonged anesthesia can significantly impact cognitive function in mice, as most anesthetic drugs can suppress neural activity and impede information processing, leading to behavioral deficits12. Several studies have shown that administering 2.5% sevoflurane for a duration of 6 h can notably impair spatial memory, learning ability, and attention in mice13. Furthermore, evidence suggests that high doses of anesthesia may result in neuronal death or nerve damage in mice14. Therefore, it is imperative to identify a suitable approach to minimize the overall amount of anesthesia used. In this study, we introduce an effective acupuncture method for treating mice with cognitive impairment, along with behavioral tests to assess their memory abilities. Importantly, we present a modified pre-treatment anesthesia technique that can effectively reduce the total dosage of anesthesia administered during the experiment.

Autore in primo piano: Miglioramento dei protocolli di anestesia per una migliore ricerca sull'agopuntura del topo

Trattamento con agopuntura in un modello murino di disfunzione cognitiva cronica indotta da ipossia

Selecting the right anesthesia protocol is crucial for conducting mouse acupuncture. Due to potential cognitive impairment associated with prolonged anesthesia, it represents an essential initial challenge, demanding careful consideration to minimize cognitive function risks in mice during the procedure. In this study, we propose an improved protocol that helps to minimize functional and behavioral abnormalities caused by excessive anesthesia dosing, and enhances the accuracy of the experiments.In the future, our laboratory aims to study the underlying mechanisms of acupuncture despite its observable therapeutic effects on behavior and pathology. Our research will focus on unraveling acupuncture to gain a deeper understanding of its mechanisms.

Caratterizzazione delle traiettorie di locomozione del topo nell'esperimento in campo aperto La mappa della traiettoria rivela che i topi del gruppo normale mostrano una profonda inclinazione per l'esplorazione in ambienti sconosciuti. Le loro traiettorie di attività sono concentrate principalmente negli angoli, coprendo l'intero campo aperto (pannello di sinistra). Al contrario, il gruppo di topi modello di ipossia a lungo termine mostra un desiderio significativamente diminuito di esplorare nuovi a...

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Qui, descriviamo un protocollo per l'implementazione di un trattamento di anestesia lieve e agopuntura su un modello murino di ipossia cronica e la conduzione di test comportamentali per valutare le alterazioni cognitive post-trattamento.

The treatment of central nervous disorders has consistently posed significant challenges to the medical field. Acupuncture, a non-pharmacological practice ...

La scelta del giusto protocollo di anestesia è fondamentale per condurre l'agopuntura del topo. A causa del potenziale deterioramento cognitivo associato all'anestesia prolungata, rappresenta una sfida iniziale essenziale, che richiede un'attenta considerazione per ridurre al minimo i rischi della funzione cognitiva nei topi durante la procedura. In questo studio, proponiamo un protocollo migliorato che aiuta a ridurre al minimo le anomalie funzionali e comportamentali causate da un dosaggio eccessivo di anestesia e migliora l'accuratezza degli esperimenti.In futuro, il nostro laboratorio si propone di studiare i meccanismi alla base dell'agopuntura nonostante i suoi effetti terapeutici osservabili sul comportamento e sulla patologia. La nostra ricerca si concentrerà sullo svelamento dell'agopuntura per ottenere una comprensione più profonda dei suoi meccanismi.

acupuncture-treatment-mouse-model-chronic-hypoxia-induced-cognitive

Research

JoVE Journal

Behavior

Acupuncture Treatment in a Mouse Model of Chronic Hypoxia-Induced Cognitive Dysfunction

722 Views.  Heilongjiang University of Chinese Medicine. La scelta del giusto protocollo di anestesia è fondamentale per condurre l'agopuntura del topo. A causa del potenziale deterioramento cognitivo associato all'anestesia prolungata, rappresenta una sfida iniziale essenziale, che richiede un'attenta considerazione per ridurre al minimo i rischi della funzione cognitiva nei topi durante la procedura. In questo studio, proponiamo un protocollo migliorato che aiuta a ridurre al minimo le anomalie funzionali e comportamentali causate da un dosaggio...