Il disturbo articolare e l'ATM sono un gruppo di circa 30 malattie umane che colpiscono i muscoli articolari e il dolore dei tessuti circostanti è il motivo principale per cui i pazienti con TMD vanno in ospedale finora. Non esiste un trattamento efficace per il dolore TMD a causa della scarsa comprensione del meccanismo del dolore. Per studiare il meccanismo del dolore abbiamo sviluppato un modello murino di TMD doloroso seguito dall'analisi del comportamento del dolore.
La valutazione del dolore nella ricerca sul dolore artificiale è una vera sfida a causa della variabilità intrinseca dell'analisi del comportamento. Inoltre, il diverso uso di laboratorio, il diverso protocollo per valutare il dolore, rendono difficile il riferimento incrociato tra diversi studi. In questo articolo di JOE abbiamo descritto una versione visualizzata di un test di fiamma, filamento e forza posteriore per il dolore artificiale maggiore.
Questi protocolli forniscono un metodo dettagliato per l'implementazione diretta e combinati con approcci per valutare in modo completo il dolore dell'ATM. Possono essere applicati per valutare il comportamento del dolore in varie condizioni di dolore orale, come il dolore autogeno, la penna dell'ATM, la penna muscolare e la penna neuropatica. Per iniziare a posizionare il topo anestetizzato sulla piattaforma chirurgica, preparare una siringa da insulina sterile o un ago calibro 31 per iniettare CFA nell'articolazione tempo-mandibolare.
Coprire l'ago con una guaina in tubo di polietilene, lasciando sporgere solo due millimetri della punta dell'ago per evitare un inserimento profondo. Successivamente, palpare l'arco zigomatico per individuare l'articolazione mandibolare temporale o il sito di iniezione dell'ATM. Quindi inserire l'ago nel sito di iniezione, che si trova sotto l'estremità posteriore dell'arco zigomatico.
Iniettare lentamente 10 microlitri di CFA nella capsula dell'ATM e attendere almeno cinque secondi prima di estrarre gradualmente l'ago. Per iniziare, stabilire un modello murino di dolore infiammatorio dell'ATM tramite iniezione intraarticolare di CFA. Una volta che il topo si è completamente ripreso, posizionare il tubo di contenimento nella gabbia del topo per almeno un'ora nella stanza comportamentale prima di eseguire il test per acclimatare il topo all'ambiente di test.
Quindi accendere il software compatibile per misurare con la forza e aprire il programma N-B-I-T-R-S-D-V 2.6 0.3. Ora seleziona le opzioni di comunicazione appropriate. Scegli la modalità assistita UDP, quindi seleziona l'IP locale corretto e cerca l'IP e la porta del dispositivo facendo clic su Cerca.
Una volta visualizzati l'IP di destinazione e la porta di destinazione, fare clic su Apri. Impostare l'asse Y facendo clic su 10 nell'intervallo Y.Quindi fare clic su imposta. Infine fai clic su acquisizione.
Quindi, seleziona solo il canale uno per il grafico blu e disattiva gli altri canali non collegati al dispositivo. Fare clic su play per avviare la registrazione della forza del morso. Ora metti il topo in un tubo di plastica da 50 millilitri modificato per trattenere liberamente il topo e sposta la placca del morso verso la bocca del topo.
Registrare il morso volontario per due minuti per sessione. Quindi fare clic su pausa per interrompere la registrazione e fare clic su Salva. Ora classifica i dati nella seconda colonna del file Excel dal massimo al minimo, seleziona i primi cinque valori dell'ampiezza della forza del morso per ulteriori analisi.
Registra il valore del canale uno dal programma e sottralo o aggiungilo ai primi cinque valori dell'ampiezza della forza del morso. Per ottenere i valori relativi della forza del morso da questo test, prendere la media di questi cinque valori per determinare la forza relativa media del morso per un topo. I topi trattati con CFA hanno mostrato una riduzione significativa della forza del morso relativa il primo giorno dopo l'iniezione rispetto al gruppo PBS con un recupero graduale nel tempo, la percentuale di variazione della forza del morso è diminuita significativamente nei topi trattati con CFA il primo giorno con una tendenza al recupero entro il giorno 12.
Per iniziare, metti una gabbia di rete metallica nella gabbia dei topi e abitua i topi nella stanza comportamentale per almeno un'ora prima delle procedure di test. Quindi accendere la macchina di prova elettronica von Fray. Per misurare la soglia di estrazione della testa, premere il massimo e impostare l'unità su 500 grammi, che è un'unità arbitraria impostata dalla macchina.
Impostare il valore su zero per avviare la registrazione ora. Metti i topi nella gabbia della rete metallica. Applicare il filamento von fray perpendicolarmente all'area dell'articolazione temporo-mandibolare.
Registrare il valore della forza applicata dal filamento o l'intensità dello stimolo in grammi che innesca la reazione come primo test. Quindi imposta il valore della forza sullo schermo su zero e attendi 10 secondi mentre il mouse rimane all'interno della gabbia. Inizia ad applicare nuovamente il filamento e registra che la soglia di ritiro della testa del valore era significativamente più bassa nei topi trattati con CFA il primo giorno rispetto al basale seguito da un recupero parziale.
Nel corso del tempo, la variazione percentuale della soglia di ritiro della testa è diminuita notevolmente nei topi trattati con CFA il primo giorno, con un miglioramento osservato fino al giorno 12.
