蛍光粉を使用した小売環境における微生物汚染を追跡する - 小売デリカ環境の例

要約

本研究の全体的な目標は、小売デリ設定で食中毒病原体リステリア菌の潜在的なクロス汚染メカニズムを実証することであった。この方法は、病原体汚染を追跡するために、異なる様々な環境に適用することができる。

要約

小売環境での食中毒病原体の交差汚染は食中毒のリスク増加に貢献して重要な公衆衛生問題である。このようなデリ肉、チーズ、そしていくつかのケースでは、生鮮食品などのすぐに食べられる（RTE）加工食品は、 リステリア菌などの病原体による汚染に起因する食品媒介疾患のアウトブレイクに関与している。 L.に関してリステリアは 、デリスライサーは、多くの場合、交差汚染の主な情報源である。この研究の目的は、細菌汚染をシミュレートし、小売環境でこの汚染を追跡するために蛍光化合物を使用することであった。モックデリキッチンは小売環境をシミュレートするように設計されました。デリの肉は、蛍光化合物を接種し、ボランティアは、食品小売業従業員に期待されるものと同様の一連のタスクを完了するために募集された。志願者は、スライスパッケージ、およびデリ冷凍肉を保存するように指示した。潜在的な交差汚染は、特定の領域をスワブし、分光光度計を用いて綿棒領域の光学密度を測定することによって模擬​​小売環境で追跡した。結果は、スライサーの上、冷蔵庫（ すなわちデリケース）グリップと様々な分野が交差汚染のリスクが最も高いを持っていたことが示された。この研究の結果は、小売店の従業員のより集中訓練材料を開発するために使用されてもよい。また、同じような方法論は、食品生産環境（ 例えば 、小農場）、病院、老人ホーム、クルーズ船、ホテルなどでの微生物汚染を追跡するために使用することができる。

概要

特に小売セクションの調理環境における食品由来病原体の交差汚染は、原因肉だけでなく、野菜を^1-5など、さまざまなソースからの食中毒のリスクの増加に主要な関心事である。ほとんどの場合、細菌性病原体は、汚染された食品の⁶を通じて小売環境を入力してください。消費前⁷へのさらなる介入または治療（ すなわち 、調理または加熱）は通常存在しないように、小売レベルでの準備すぐに食べられる食品は特に懸念される。また、汚染されたRTE食品に存在する病原体は、次いで、小売環境における他の食品または食品接触表面に転写することができる。

交差汚染は、小売、食品、環境の事実上すべてのタイプの中で発生する可能性がありますが、デリが原因病原体リステリアmonocytogとのRTEデリ肉の協会特に特に重要であるエン^2。米国食品医薬品局（FDA）農業食品安全検査局（USDA-FSIS）米国商務省が実施したリスクアセスメントの分析に基づき、汚染されたデリの肉は、リステリア症の症例の90％を担当している可能性が高い - まれL.によって引き起こさまだ厳しい人間の病気リステリア-米国^8。一般的には、小売·食品サービス施設でスライスデリ肉はLの高いリスクと関連している米国農務省にあるあらかじめスライスされたデリの肉に比べてリステリアは、メーカー⁹で工場を視察した。これは、食品取扱着信原材料、あるいは治療後⁷汚染されることがあり、加工食品による病原体の導入の可能性の増大の可能性があります。全体的に、リステリア症は、米国では年間食中毒に起因すると推定死亡者の約28％を占める

なぜなら中のLのしわのリスク小売段階でスライスデリ肉の汚染をリステリア 、デリスライサー自体は小売環境^2,10における食品由来の病原体の表面移動のための重要な因子として同定されている。シーン¹で示すように、スライスは、消費前の最後の処理工程であるため、デリスライサーは、理解と相互汚染^を防止する^ため1の両方の重要管理点を考慮する必要があります。

本研究の全体的な目標は、このようなグロ胚芽などの蛍光粉を使用して、小売デリ環境の汚染を追跡する方法論を開発することでした。これは、細菌の交差汚染及び衛生慣行^11,12をシミュレートするために使用されている蛍光化合物である。この研究は、スライサに汚染された肉、周囲の環境、およびその他のデリ肉からの病原体の移動を追跡するように設計した。それは、CONTの経路を理解することが重要です小売従業員と管理職のための効果的な介入と教育材料の両方を開発するためのアミノ化。同様のアプローチは、他の処理環境（ 例えば、鶏肉、牛肉）、農場、病院内の病原体伝達をシミュレートするために使用することができる。

プロトコル

1。標準曲線

1. 37.5 mgの蛍光粉を計量し、6ミリリットル200プルーフエタノールに溶解する。 200プルーフのエタノール中のこの溶液を2倍希釈系列を作る。
2. ボルテックス10秒のすべてのサンプルおよび370 nmの吸光度を測定する。
3. 1ミリリットル200プルーフエタノールあたりの蛍光粉の量を計算する。
4. 蛍光粉の濃度に基づいて吸光度を実証する（x軸上の370 nmでのy軸上に吸光度ミリグラム/ mlの濃度）の標準曲線を調製する。

2。蛍光粉とデリの肉（ボローニャ）の接種

1. きれいなナイフとまな板を使用して、約100ミリメートルの厚さのサンプルにデリの肉​​をカット。 A、B、Cのラベル3サンプルを調製
2. 少し湿った、清潔なスポンジを使用して蛍光粉に均一に被覆のサンプルA。均等に肉のサンプルに粉を広げた。蛍光粉の試料BとCを接種しないでください。
3. ラップでサンプルをラップし、「A」のような蛍光粉体塗装サンプルにラベルを付け、テープで、BとCと2のサンプルを残り。
4. 実験が実施される模擬キッチンで4℃に保っデリケースや冷蔵庫内のサンプルを置きます。

3。モックデリキッチンの準備

1. キッチンで清潔な手袋、70％エタノールスプレーを提供する。
2. スライサー面積約13 Wの電球と黒のコンパクト蛍光灯を取り付けます。
3. 拭き取り用のテンプレートとして機能するようにアルミ箔を5センチ×5cmのカットアウトを準備します。
4. 6ミリリットルの95％エタノールを含む15ミリリットルのチューブを準備します。

4。ビデオ設定

マウント同時にモックデリのすべての領域を観察するための戦略的な場所にある3台のビデオカメラ。 （プロトコル5で説明したように）スライサー手順をシミュレートする前に、カメラの電源を入れ、同時に結果を分析する（ように）プロトコル7で説明した。

5。交差汚染を追跡するためにシミュレートデリスライス手続き

サンプルサイズを改善し、変化を取り入れる、それぞれの機関の施設内倫理委員会によるプロトコルの承認後に参加者を募集し、この研究を行うためには。参加者はや経験は、小売デリ環境で作業していない場合があります大学生することができます。彼らはデリが入ると、各参加者が手袋を身に着けていることを確認してください。調査が完了すると「後」画像に続いて黒蛍光灯の下で絵 "の前に"を取る。以下のように各参加者に明確な書面と口頭の指示を提供します。

1. 冷蔵庫に移動します。
2. 「A」と表示された肉を削除します。
3. 肉のラップを解除し、ラップを保存します。
4. スライサーの搬送トレイに肉を置きます。
5. 肉グリップ付き肉を固定します。
6. 電源スイッチをONにします。
7. SLIを調整「2」のcerインデックスノブ。
8. スライスとは、デリ紙に肉の5個を分配。
9. オフ電源スイッチを切り、肉のグリップを離します。
10. 「A」と表示され、ビニール袋に肉のスライスを配置します。
11. 肉 "A"を再ラップして冷蔵庫に戻ります。
12. リピートは「B」と「C」と表示された肉を2-11繰り返します。

6。蛍光粉を定量化する

デリキッチンでモックスライス（5.4節）終了後の蛍光粉を定量化する。これは次の手順を実行します。の場合：

1. 無菌のセンチ×5cmのアルミ箔のテンプレートを使用し、 図1にマークされた領域の上に置きます。
2. 領域をスワブ、95％エタノールに浸した無菌のアルギン酸カルシウムの綿棒を使用し、無菌のポリプロピレンチューブ内に6ミリリットルの95％エタノール中に置く。
3. 徹底的にチューブをボルテックスし、370 nmの吸光度を読み取ることがガラスキュベットに移す。
4. standarを参照してください。以下の式を用いて蛍光粉末の量（y）を決定するために、曲線dは、xは吸光度ではy = mx + bの、mは、標準曲線の傾きであり、bは切片である。
5. データの正規化については、以下の式を用いてサンプリングされた面積当たりの蛍光粉末のパーセントを計算する：

7。ビデオ分析

ビデオテープの参加者、彼らの完全なタスク5.1から5.12など。 SYNCおよび全ての角度を同時に見ることができるようにDVDディスクにビデオ録画を保存します。手のタッチ数デリ環境（4異なる研究者が独立して完全なデータセットを分析し）での様々な表面上で（ボランティアがモックデリの領域に触れる回数）を記録するためにビデオを見る。

結果

図1に、ボランティアが割り当てられたタスクを完了した後にふいたスライサーの領域を表します。ボランティアは、これらの様々な表面上で、手で直接触れるの平均周波数を分析するためにビデオテープに録画されました。手の接触頻度は、4つの異なる観察者により分析し、平均した。これらの結果を図2に実証される。データは、肉のグリップ、デリの肉ラッパ?...

ディスカッション

本研究の全体的な目標は、交差汚染が食中毒のリスクをコントロールし、削減するための戦略を開発するために、小売デリ環境で発生する可能性がどのように細菌を証明することであった。デリ小売環境は、L.のために特に高いリスクを有する汚染をリステリア 。米国農務省食品安全検査局は、小売店でスライスデリ肉はデリ肉はスライスして、連邦政府検査所⁹でパッ?...

資料

Name	Company	Catalog Number	Comments
Glo Germ Powder	Glo Germ Co		Purchased from vendor
Ethanol	Sigma	E7023
Permanent markers	Sharpie		Purchased from stationary store
Gloves	VWR	82026-424
Deli Meat	NA	NA	Bologna Chub from regular grocery store
Cutting Board	NA	NA	A regukar kitchen cutting board
Knife	NA	NA	A regular kitchen knife
5 cm x 5 cm sterile templates	NA	NA	Aluminum foil templates cut into 5 cm x 5 cm templates and sterilized
15 ml Polypropylene centrifuge tubes	VWR	89039-664
Cotton swabs	Puritan	25-806
Glass cuvettes	VWR	470019-186
Vortex	VWR	58816-121
Flip camera	Flip Ultra HD	NA	Purchased online
Deli slicer	Bizerba	SE-12
Deli refrigerator	True Company	TDBD-722
Scale		NA
Spectrophotometer	Milton Roy Company	NA	Spectronic 20D