Tracking-Mikrobielle Kontamination in Einzelhandelsumgebungen mit fluoreszierenden Pulver - Ein Feinkost Einzelhandel Beispiel Umwelt

Zusammenfassung

Das Ziel dieser Studie war es, das Potenzial Kreuzkontamination Mechanismus von lebensmittelbedingten Krankheitserreger Listeria monocytogenes in einem Einzelhandels deli Einstellung zu demonstrieren. Diese Methode kann zu einer Vielzahl von unterschiedlichen Umgebungen angewendet, um Infektion mit Krankheitserregern zu verfolgen.

Zusammenfassung

Kreuzkontamination von lebensmittelbedingten Krankheitserreger im Retail-Umfeld ist eine bedeutende Problem der öffentlichen Gesundheit einen Beitrag zu einem erhöhten Risiko für Lebensmittelvergiftungen. Ready-to-eat (RTE) verarbeiteten Lebensmitteln wie Wurst, Käse, und in einigen Fällen frischen Produkten, im lebensmittelbedingten Krankheitsausbrüchen durch Kontamination mit Krankheitserregern wie Listeria monocytogenes beteiligt. In Bezug auf L. monocytogenes, deli Aufschnittmaschinen sind oft die Hauptquelle der Kreuzkontamination. Das Ziel dieser Studie war es, eine fluoreszierende Verbindung verwenden, um bakterielle Verunreinigungen zu simulieren und verfolgen diese Verunreinigung im Einzelhandel Einstellung. Ein Mock deli Küche wurde entwickelt, um die Einzelhandelsumgebung zu simulieren. Deli Fleisch wurde mit der fluoreszierenden Verbindung geimpft und Freiwilligen wurden rekrutiert, um eine Reihe von Aufgaben ähneln denen eines Lebensmitteleinzelhandel Mitarbeiter erwartet abzuschließen. Die Freiwilligen wurden angewiesen, in Scheiben schneiden, verpacken und lagern Sie das Fleisch in einem Feinkostladen Kühlschrank. Das PotentialKreuzkontamination in der Schein Einzelhandel durch Abtupfen bestimmten Bereichen und Messen der optischen Dichte der aufgewischt Bereich mit einem Spektralphotometer verfolgt. Die Ergebnisse zeigten, dass der Kühlschrank (dh deli Fall) Griff und verschiedene Bereiche auf der Schneidemaschine hatte das höchste Risiko für eine Kreuzkontamination. Die Ergebnisse dieser Studie verwendet werden, um gezieltere Schulungsmaßnahmen Material für Beschäftigte im Einzelhandel zu entwickeln. Darüber hinaus könnten auch ähnliche Methoden verwendet werden, um mikrobielle Kontamination der Lebensmittelproduktionsumgebungen (z. B. kleine Betriebe), Krankenhäuser, Pflegeheime, Kreuzfahrtschiffe und Hotels zu verfolgen.

Einleitung

Kreuzkontamination von lebensmittelbedingten Krankheitserreger in der Zubereitung von Speisen Umwelt, vor allem im Händlerbereich, ist ein wichtiges Anliegen aufgrund einer erhöhten Gefahr von Lebensmittelvergiftungen aus einer Vielzahl von Quellen, einschließlich der Fleisch sowie Gemüse ^05.01. Am häufigsten bakteriellen Krankheitserregern in das Retail-Umfeld durch kontaminierte Lebensmittel ^6. Ready-to-eat Lebensmitteln auf Einzelhandelsebene hergestellt werden, sind von besonderer Bedeutung, da es in der Regel keine weitere Intervention oder Behandlung (dh Kochen oder Heizen) vor dem Verzehr ^7. Außerdem auf kontaminierten Lebensmitteln vorhanden RTE Erreger können dann auf andere Lebensmittel oder Lebensmittelkontaktflächen im Retail-Umfeld übertragen werden.

Während Kreuzkontamination kann in praktisch jeder Art von Lebensmitteleinzel Umgebung auftreten, sind von besonderem Interesse Feinkostläden speziell wegen der Assoziation von RTE Wurstwaren mit dem Erreger Listeria monocytogenen ^2. Auf der Grundlage einer Risikobewertung analysiert von der US Food and Drug Administration (FDA) und der US-Landwirtschaftsministerium für Lebensmittelsicherheit und Kontrolle Service (USDA-FSIS) durchgeführt wurde, sind kontaminierte Wurst wahrscheinlich für 90% der Fälle von Listeriose verantwortlich - eine seltene noch schwere Krankheit beim Menschen verursacht durch L. monocytogenes - in den Vereinigten Staaten ^8. Im Allgemeinen haben die Wurstwaren im Einzelhandel und Food-Service-Betriebe, in Scheiben geschnitten mit einem höheren Risiko verbunden gewesen L. monocytogenes im Vergleich zu presliced ​​Wurst in einem USDA geprüft Anlage durch den Hersteller ^9. Dies könnte wegen der erhöhten Wahrscheinlichkeit der Einschleppung von Krankheitserregern von Lebensmitteln umgehen, eingehenden Rohstoffe oder verarbeiteten Lebensmitteln, die sich möglicherweise kontaminierten Nachbehandlung ⁷ sein. Insgesamt entfallen Listeriose für etwa 28% der geschätzten Todesfälle durch Lebensmittelvergiftungen verursacht pro Jahr in den USA

Aufgrund der inerhöhtes Risiko von L. monocytogenes in Wurst auf Einzelhandelsebene in Scheiben geschnitten, hat die deli Aufschnittmaschine sich als wichtiger Faktor für die Oberflächen Übertragung von Krankheitserregern im Einzelhandel ^2,10 identifiziert worden. Wie Sheen ¹ angedeutet, ist der letzte Schneidbearbeitungsschritt vor dem Verzehr, daher sollte die deli Aufschnittmaschine als ein kritischer Kontrollpunkte sowohl für das Verständnis und die Kreuzkontamination verhindert werden ^1.

Das Ziel dieser Studie war es, eine Methodik, um eine Kontamination im Einzelhandel deli-Umgebung mit einer Leuchtstoffpulver, wie Glo Keimbahn zu entwickeln. Dies ist eine fluoreszierende Verbindung, die verwendet wurde, um bakterielle Kontamination und Hygienepraktiken ^11,12 simulieren. Diese Studie wurde konzipiert, um Erreger Übertragung durch kontaminierte Fleisch an die Schneidemaschine, die Umgebung und andere Wurstwaren zu verfolgen. Es ist wichtig, die Wege der cont verstehenAminierung beide wirksame Interventionen und Unterrichtsmaterial für den Einzelhandel Mitarbeiter und Führungskräfte zu entwickeln. Ein ähnlicher Ansatz verwendet werden, um Krankheitserreger Übertragung in andere Verarbeitungsumgebungen (z. B. Geflügel und Rind), Betriebe und Krankenhäuser zu simulieren.

Protokoll

1. Standardkurve

1. Wiegen 37,5 mg Leuchtstoffpulver und in 6 ml 200 Proof-Ethanol lösen. Stellen Sie 2-fach serielle Verdünnungen von dieser Lösung in 200 Proof-Ethanol.
2. Vortex alle Proben für 10 sec und die Extinktion bei 370 nm auf.
3. Berechnen Sie die Menge an fluoreszierendem Pulver pro 1 ml 200 Proof-Ethanol.
4. Vorbereitung der Standardkurve (Konzentration in mg / ml auf der y-Achse und die Absorption bei 370 nm auf der X-Achse), um die Absorption, basierend auf Fluoreszenzpulverkonzentration zeigen.

2. Impfen Deli Fleisch (Bologna) mit Leuchtstoffpulver

1. Schneiden Sie das Fleisch in deli ca. 100 mm dicken Proben mit einem sauberen Messer und Schneidebrett. Vorbereitung drei Proben, die mit A, B und C.
2. Probe A Coat gleichmäßig mit Leuchtstoffpulver mit einem leicht feuchten, sauberen Schwamm. Verbreiten Sie das Pulver auf der Fleischprobe gleichmäßig. Inokulieren keine Proben B und C mit der Leuchtstoffpulver.
3. Wickeln Sie die Proben mit Plastikfolie und beschriften Sie die Leuchtstoffpulver beschichtet Probe als "A" und die verbleibenden zwei Proben B und C mit Klebeband.
4. Die Proben werden in der deli Fall oder Kühlschrank bei 4 ° C in der Mock-Küche, wo das Experiment durchgeführt wird gehalten.

3. Mock Deli Kitchen Vorbereitung

1. Geben sauberen Handschuhen und 70% Ethanol-Spray in der Küche.
2. Montieren schwarz Kompaktleuchtstofflampen mit 13 W Glühbirnen rund um den Slicer-Bereich.
3. Bereiten Sie eine 5 cm x 5 cm Ausschnitt aus Aluminiumfolie, die als Vorlage für einen Abstrich zu dienen.
4. Bereiten Sie 15 ml Röhrchen mit 6 ml 95% Ethanol.

4. Video-Setup

Berg drei Videokameras an strategischen Stellen, um alle Bereiche des Mock deli in der gleichen Zeit zu beobachten. Schalten Sie die Kamera, bevor die Simulation der Slicer-Verfahren (wie in Protokoll Nr. 5 erklärt) und die Ergebnisse gleichzeitig zu analysieren (wieerklärt in Protokoll Nr. 7).

5. Simulation Deli Slicing Verfahren, um Kreuzkontamination verfolgen

Zur Verbesserung der Stichprobengröße und Variation zu integrieren, führen diese Studie durch die Rekrutierung von Teilnehmern nach der Genehmigung des Protokolls vom Institutional Review Board der jeweiligen Institution. Der Teilnehmer kann ein Student, oder auch nicht haben Erfahrung im Einzelhandel deli Umgebungen. Stellen Sie sicher, dass jeder Teilnehmer trägt Handschuhe, wenn sie die deli eingeben. Nehmen Sie ein "Vorher"-Bild unter Schwarzfluoreszenzlicht, gefolgt von einem "nach"-Bild nach Abschluss der Studie. Stellen Sie klare schriftliche und mündliche Anweisungen, um jedem Teilnehmer wie folgt:

1. Zum Kühlschrank.
2. Fleisch mit "A" entfernen.
3. Packen Sie Fleisch und sparen Plastikfolie.
4. Legen Sie Fleisch auf Schlitten Tablett Schneidemaschine.
5. Sichern Sie Fleisch mit Fleisch Griff.
6. Schalten Sie das Gerät einschalten.
7. Stellen slicer Index Knopf auf "2".
8. Scheibe und verzichten 5 Stücke Fleisch auf deli Papier.
9. Schalten Sie den Netzschalter aus und lassen Sie Fleisch Griff.
10. Zeigen Fleischscheiben in Kunststoffbeutel mit der Aufschrift "A".
11. Rewrap Fleisch "A" und zurück zum Kühlschrank.
12. Wiederholen Sie die Schritte 2-11 mit Fleisch mit der Bezeichnung "B" und "C".

6. Quantifizierung der Leuchtstoffpulver

Quantifizierung der fluoreszierenden Pulver nach Abschluss der Mock Slicing (Abschnitt 5.4) in der Feinkostküche. Dazu gehen Sie folgendermaßen vor:

1. Verwenden Sie die sterile 5 cm x 5 cm Aluminiumfolie Schablone und legen Sie es auf den in Abbildung 1 markierten Bereiche.
2. Verwenden Sie eine sterile Calciumalginat Wattestäbchen in 95% Ethanol getränkten Tupfer die Gegend, und legen in 6 ml 95% Ethanol in einem sterilen Polypropylenröhrchen.
3. Wirbel das Rohr gründlich und in ein Glasküvetten die Extinktion bei 370 nm abgelesen.
4. Siehe die standard-Kurve, die Menge an Leuchtstoffpulver (y) unter Verwendung der folgenden Gleichung bestimmen: y = mx + b wobei x die Absorptionsfähigkeit ist, m die Steigung der Standardkurve und b der Achsenabschnitt.
5. Zur Normalisierung der Daten, die Berechnung der Prozent Fluoreszenzpulver pro Fläche abgetastet unter Verwendung der folgenden Formel:

7. Videoanalyse

Videotape die Teilnehmer, wie sie vollständige Aufgaben von 5,1 bis 5,12. Synchronisieren und speichern Sie die Videoaufnahmen auf DVD-Discs, so dass alle Winkel können gleichzeitig angezeigt werden. Sehen Sie die Videos, die Anzahl der Hand berührt (die Anzahl der Freiwilligen Bereiche berühren, in der Mock-Feinkostladen) auf verschiedenen Oberflächen in der Umwelt Feinkostladen (4 verschiedene Forscher die kompletten Daten unabhängig voneinander eingestellt analysieren) aufzeichnen.

Ergebnisse

Abbildung 1 stellt die Bereiche der Schneidemaschine, die abgetupft wurden, nachdem die Freiwilligen abgeschlossen, die zugewiesenen Aufgaben. Die Freiwilligen wurden auf Video aufgezeichnet, um die mittlere Frequenz der Handkontakt auf diesen verschiedenen Oberflächen zu analysieren. Die Häufigkeit der Handkontakt wurde von vier verschiedenen Beobachtern analysiert und gemittelt. Diese Ergebnisse sind in Fig. 2 gezeigt. Die Daten zeigen, dass das Fleisch Griff, Deli Fleisch-Wrapper, ...

Diskussion

Das Ziel dieser Studie war es zu zeigen, wie bakterielle Kreuzkontamination konnte in einem Einzelhandels deli Umgebung, um Strategien zu kontrollieren und reduzieren das Risiko von lebensmittelbedingten Erkrankungen zu entwickeln auftreten. Der Einzelhandels deli Umgebung einen besonders hohen Risiko für L. monocytogenes. Die USDA-FSIS berichtet, dass Deli Fleisch auf den Einzelhandel in Scheiben geschnitten hat ein sieben mal höher Verbindung mit Listeriose, dass Deli Fleisch in Scheiben geschnitten und in ...

Materialien

Name	Company	Catalog Number	Comments
Glo Germ Powder	Glo Germ Co		Purchased from vendor
Ethanol	Sigma	E7023
Permanent markers	Sharpie		Purchased from stationary store
Gloves	VWR	82026-424
Deli Meat	NA	NA	Bologna Chub from regular grocery store
Cutting Board	NA	NA	A regukar kitchen cutting board
Knife	NA	NA	A regular kitchen knife
5 cm x 5 cm sterile templates	NA	NA	Aluminum foil templates cut into 5 cm x 5 cm templates and sterilized
15 ml Polypropylene centrifuge tubes	VWR	89039-664
Cotton swabs	Puritan	25-806
Glass cuvettes	VWR	470019-186
Vortex	VWR	58816-121
Flip camera	Flip Ultra HD	NA	Purchased online
Deli slicer	Bizerba	SE-12
Deli refrigerator	True Company	TDBD-722
Scale		NA
Spectrophotometer	Milton Roy Company	NA	Spectronic 20D