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Analytical Chemistry

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キャピラリー電気泳動 (CE)

概要

ソース: 研究所博士 b. ジル Venton - ヴァージニアの大学の

キャピラリー電気泳動 (CE) は、サイズや料金に応じて電場内の分子を分ける分離手法です。CE は、電解質溶液で満たされている毛細血管と呼ばれる小さなガラス管で実行されます。検体は、電荷、溶媒の粘性およびサイズによって異なります電気泳動移動度の違いにより区切られます。伝統的な電気泳動のゲルはゲルと分離、ジュール加熱効果が台無しになるので適用できる電圧の量に制限します。毛細血管表面区域の容積比が大きい、従ってよりよい熱を放散します。キャピラリー電気泳動実験のため適用される電圧が非常に大きいため、多くの場合 10,000-20,000 V。

キャピラリー電気泳動の高性能版の役に立ちます。液体クロマトグラフィーと比較して、CE 版より速くより効率的。ただし、キャピラリー電気泳動に最適荷電分子を分離させて液体クロマトグラフィーの制限ではないです。CE は高速液体クロマトグラフィー (HPLC) よりも大きいピーク容量分離はより効率的でありより多くのピークを検出することができますを意味します。インストルメンテーションは、非常に単純なことができます。ただし、高速液体クロマトグラフィーより汎用性と多くの固定とモバイルの段階は、分子の種類によって開発されています。

手順

1. CE の計測セットアップ

  1. CE 楽器とコンピューターを入れます。コンピューターのソフトウェアを使用して、ウォーム アップを許可する UV 分析用光源をオンします。いくつかのソフトウェアは、インジケーター ランプ使用の準備ができて (ランプ アイコン色に変わります)。
  2. 方法ファイルを作る。CE を実行するための重要なパラメーターを設定します。この分析でカートリッジとサンプルの保管温度は 35 ° c. です。UV 検出のための波長は 214 nm。
  3. 時間プログラムを書きます。プログラムは一般的に、(解析の前にキャピラリーをきれい) にリンス手順、注入の手順、および、電気泳動のステップで構成されます。リンス ステップ 20 psi の圧力を使用して 1 分の 2 洗口液を実行します。最初のリンスは、水酸化ナトリウムは、毛細血管壁にシラノール基が脱プロトン化したかどうかを確認できます。2 回目のすすぎは、実行バッファー (0.025 M ホウ酸バッファーここ) と毛細血管を確認するは左が平衡バッファーです。
  4. 注入圧注入 0.5 psi で使用は 5 s。

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結果

ダイエットペプシのエレクトロフェロを収集し、ペプシのサンプルはそれぞれ図 1 2に表示されます。安息香酸、アスパルテーム、カフェインの 3 つのピーク、ダイエットペプシで観察され、基準として同様の移行時間を持っています。正規のペプシのカフェイン ピークがアスパルテームと安息香酸のピークではないことがあります。CE 解析は、移行時間が 3-4 分だ?...

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申請書と概要

キャピラリー電気泳動は、多くの専門の版のために使用されます。たとえば、品質の製品または接しないがないかどうかを確認するテストのため製薬業界で使用それ。CE は毛細血管の壁は、酸性 pH を有する中立的な作ることができる従って薬毛細血管に固執しないと基本のアミノ グループと薬を分離する場合に特に便利です。

CE のモードは、ヒトゲノム DNA を分離して?...

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