The authors gratefully acknowledge the National Science Foundation (NSF) for financial support of this work through a CAREER award (CBET-0746210) and through award CBET-1159500. We would like to thank Dr. Turkson (Univ. of Hawaii Cancer Center) and Dr. Altomare (Univ. of Central Florida College of Medicine) for assistance with cell culture.

1.培養細胞株<ol><li>解凍TE 71（マウス胸腺上皮細胞）、MDA-MB-231（ヒト乳癌細胞）、A549（ヒト肺癌細胞）及びOVCAR3（ヒト卵巣癌細胞）未満で2分間温水に寒剤バイアルを保持することにより。 106×gで6分間のそれぞれの細胞株および遠心分離機に、10％FBSを補充した10ミリリットルDMEM培地を追加します。 </li><li>サスペンションを吸引除去し、ペレットに3ミリリットルのメディアを追加します。適切に数回ピペッティングして細胞を混ぜます。この細胞溶液をT75フラスコにおいて10％FBSを補充した7 mlのDMEM培地を温め事前に加え、37℃で95％空気/ 5％CO 2の加湿雰囲気中でフラスコを保ちます。継代0として、このフラスコにラベルを付けます。 </li><li>細胞の密集度が80％に達すると、10分間、0.05％トリプシンでそれらをインキュベートすることによって細胞を収穫。培地の等量を添加することによりトリプシンを中和します。遠心106×gで6分間、このソリューション。サスペンションを削除し、それに3ミリリットルに新鮮な培地を追加します。ミックスWELリットルと7ミリリットル培地を含む培養フラスコに少量（100μl）を転送します。インキュベーター内で培養フラスコをインキュベートします。継代1としてフラスコにラベルを付けます。 </li><li>通路11または12まで培養細胞株。 </li></ol>ナノ粒子の作製2。 <ol><li> 〜10 -6 M（調整）希釈していないMEH-PPV原液の調製<ol><li>バイアル中の分子量（平均Mn）は150,000-250,000 /モルと3 mlのテトラヒドロフラン（THF）に1mgのポリ[2-メトキシ-5-（2-エチルヘキシルオキシ）-1,4-フェニレンビニレン]（MEH-PPV）を追加。ホットプレート上で80℃で加熱しながら2時間混合物を攪拌します。 </li><li> 0.2μmのシリンジフィルターを使用して、新しいバイアル中の上記溶液をフィルタリングします。 「希釈されていないMEH-PPV原液」として、このソリューションにラベルを付けます。ステップ2.1.3と2.1.4で説明したように、この溶液は濃度の微調整後のナノ粒子製剤に関与することになります。 </li><li> 3ミリリットルのTHFに希釈されていないMEH-PPVストック溶液50μlを追加。 「希釈したMEH-PPV原液」として、このソリューションにラベルを付けます。 1cmの石英キュベットに移し、UV-VIS分光法により495 nmの吸光度を測定します。 </li><li>希釈したMEH-PPV原液の吸光度が0.17以上である場合には、一度に1ミリリットルをより多くのTHFを加えることで希釈されていないMEH-PPVの原液を希釈し、495 nmで測定された吸光度がであるまで、ステップ2.1.3を繰り返し0.13から0.17の範囲です。 </li><li>以下に示すようにランベルト・ベールの法則を用いて、希釈したMEH-PPVストック溶液のモル濃度を計算します。ここでは0.15吸光度プロトコルの残りの一例として使用されている（ すなわち、観察された吸光度に基づいて、次のすべての計算を調整する）、使用MEH-PPVの吸光係数が10 7 M -1 cm -1で、使用するパスの長さがあります1センチメートル。 A =εxbxc（式1） （ε - モル吸光係数、A - 吸光度、B - 経路長、C - 溶液の濃度） 0。15 = 10 7 M -1 cm -1で×1センチXC（式2） C = 1.5×10 -8 M（式3） 次のように希釈されていないMEH-PPVストック溶液の濃度を見つけるために、この濃度を使用します。 M 1、V 1 = M 2、V 2（式4） X 3050μlの0.15×10 -7 M = M 2×50μlの（式5） M 2 = 9.15×10 -7 M（式6） これは「調整希釈していないMEH-PPV原液」の濃度です。 </li></ol></li><li>調整希釈していないMEH-PPV原液にMEH-PPVの質量を計算します<ol><li>セクション2.1.4で得られたモル濃度は10 6グラム/モルであるMEH-PPVの分子量（M w）を用いて、以下のように調整し、未希釈ストック溶液1mlにMEH-PPVの質量を算出します。 M = N / V（N - 。ノーモル、V - Lでボリューム）（式7） このように、1ml中のMEH-PPVの質量はウント調整しますiluted原液は9.15×10 -4 gです。 </li></ol></li><li> MEH-PPVでブレンドPCBM <ol><li> PCBMは、50重量％のPCBMの質量に対して定義されたMEH-PPVの溶液を、ドープされた50重量％にするためにストックMEH-PPVの溶液に添加されるフェニル-C 61 -酪酸メチルエステル（PCBM）の質量を計算しますMEH-PPVの（ すなわち、MEH-PPVの半分質量）。 2.2節で得られたMEH-PPVの重量を使用することにより。 MEH-PPV×100％= 50重量％のPCBMのPCBM / 9.15×10 -4グラムの質量（式8） PCBM = 4.57×10 -4グラムの質量（式9） </li><li>バイアル中に1mgのPCBMを計量し、500μlのTHFを加えます。 910.88グラム/モルとしてPCBMの分子量を用いて、この溶液にPCBMの濃度を算出します PCBMのモル濃度の溶液= 0.001グラム/（* 500μlの910.88グラム/モル）（式10） PCBMの溶液のモル濃度= 2.19×10 -9モル/μlの（式11） </li><li> PCBM溶液の体積を計算すると、調整に追加するために必要MEを原液PCBMは、ステップ2.3.2において算出モル濃度を用いて、THF中MEH-PPVの溶液をドープした50重量％を得るために、H-PPV原液 / 910.88 GX PCBM×1モル1μL/ 2.19×10 -9モル= 229μlの（式12）の4.57×10 -4グラム 調整希釈していないMEH-PPVストック溶液1mlにPCBM溶液を229μl加え、よく混ぜます。 </li></ol></li><li>再沈殿法によるナノ粒子の作製<ol><li>転送、それに接続された針で1mlシリンジにブレンドされたMEH-PPV / PCBM溶液1ml。 </li><li>急速1,200rpmで攪拌​​しながら脱イオン水4mlにブレンドされたMEH-PPV / PCBM溶液1mlを注入します。注射直後に攪拌を停止します。さらに処理することなく、これらのナノ粒子を使用してください。 </li></ol></li></ol>イメージングのためのナノ粒子を有する細胞株の3インキュベーション注：すべての画像化実験は、35mmのペトリ皿に完成しました。 <ol><li> nanopartiの取り込み細胞株におけるクル<ol><li> 12 継代まで培養細胞株。 35ミリメートルのペトリ皿中の12 番目の継代培養細胞で。 24時間後に細胞を40％コンフルエントとなるように35ミリメートルのペトリ皿に添加した細胞の濃度を調整します。 </li><li>この段階では、ペトリ皿から、10％FBSを補充したDMEM培地を除去回1×DPBSで細胞を洗浄し、ペトリ皿に2ミリリットルのDMEMにナノ粒子懸濁液100μlを加えます。 </li><li> 24時間後、ペトリ皿からDMEM /ナノ粒子懸濁物を除去し、1×DPBSで3回細胞を洗浄します。その後、10分間、4％パラホルムアルデヒドを用いてインキュベートすることによって細胞を固定。 DPBSで二回洗浄します。 2分間の色素とインキュベートすることにより、300 nMのDAPIで細胞を染色。 DPBSで二回洗浄します。そして、撮像のためにDPBSで細胞を維持します。 </li></ol></li><li> ROSの検出<ol><li>ペトリ皿、細胞株当たり6、文化A549およびOVCAR3細胞株セクション3.1.1で説明したように。ラベルペトリ皿は、 表1に示します 。 </li><li> 表1に示すように、ペトリ皿の3つに2ミリリットルのDMEMにナノ粒子懸濁液100μlを加え、24時間インキュベートします。 、光用量を投与された24時間後に細胞を洗浄し、HBSSで細胞を懸濁しますペトリ皿（ハンクス液）のための無料メディアを染めます。 </li><li> 15分間のソーラーシミュレータのランプをウォームアップ。 UV光をフィルタリングするために、ランプの前にUVフィルターを置きます。ペトリ皿の表面で0.5日（50ミリワット/ cm 2）での強度を得るためにランプ電力を調整することにより、基準太陽電池を有するランプを較正します。この特定の設定では、その状態は、ランプに供給される218 Wの電力で達成されました。 </li><li>以下の計算に示すように、180 J / cm 2の光投与量になる60分のためにランプ（蓋オープン）の下でペトリ皿を置きます： 50 mWの/ cmで2×3600秒/千= 180 J / cm 2の</li><li> HBSSを取り外し、洗浄することなく、さらにペトリ皿に、10％FBSを補充した2ミリリットルDMEM培地を追加します。別の2時間細胞をインキュベートします。 </li><li>陽性対照のために30分間、100μMの過酸化水素（H 2 O 2）で細胞をインキュベートします。 </li><li> 37℃で30分間の色素で細胞を培養することによって、ROS検出試薬の最終濃度5μMですべてのペトリ皿で​​細胞を染色。 </li><li> 10分間、4％パラホルムアルデヒドを用いてインキュベートすることによって細胞を固定します。 DPBSで二回洗浄します。 2分間の色素とインキュベートすることにより、300 nMのDAPIで細胞を染色。 DPBSで二回洗浄します。そして、撮像のためにDPBSで細胞を維持します。 </li></ol></li><li> PIおよびアネキシンV FITCによるアポトーシスおよび壊死<ol><li> 5ペトリ皿で​​培養それぞれの細胞株。残りの2ペトリ皿は対照試料となりながら、これらのペトリ皿のうち3つは実験のためになります。 Eなどのナノ粒子を用いた実験のために3ペトリ皿をインキュベートセクション3.1.2でxplained。対照サンプルは、ナノ粒子とともにインキュベートしていません。 </li><li> 24時間インキュベートした後ステップ3.2.3に従ってください。 </li><li>ランプ（蓋オープン）の下で3実験ペトリ皿を置き、20分、40分で1分および60分で1で1を削除します。これは、60、120及び180の光用量J / cm 2であり、それぞれ（セクション3.2.4で計算）に曝露された三つの試料が得られます。次に、制御ペトリ皿の一つに180 J / cm 2の光投与量を管理します。これは、ナノ粒子が存在しない場合に適用される光線量とコントロールです。残りのコントロールサンプル（無ナノ粒子及び適用されていない光線量）に光線量を適用しないでください。 </li><li> 10％FBSを補充したDMEM培地でHBSSを交換し、4時間インキュベーターでペトリ皿を保ちます。 </li><li> 15分間の色素で細胞をインキュベートすることにより実験的およびアネキシンV FITC20μlのと対照ペトリ皿で​​細胞を染色。 DPBSで二回洗浄します。 Cを染色2分間の色素を用いてインキュベートすることにより300 nmのDAPIと同様に300 nmのPI（ヨウ化プロピジウム）でells。 DPBSで二回洗浄します。そして、撮像のためにDPBSで細胞を維持します。 </li></ol></li></ol>ナノ粒子の4固有細胞毒性<ol><li> 96ウェルプレート中の細胞培養を数えます<ol><li>培地を除去し、10分間、0.05％トリプシンで細胞をインキュベートしたDPBSで細胞を2回洗浄することにより培養フラスコから細胞を収穫します。得られた細胞溶液に、10％FBSを補充した2 mlのDMEM培地を加えます。一重に細胞クラスターを分離するために、適切に解決策を混ぜます。 </li><li> 100μlの細胞懸濁液を取り、10％FBSを補充した900μlのDMEM培地に加えます。よく混ぜます。血球計数器上にこの懸濁液10μlを置きます。血球計数器を用いて細胞をカウントし4.1.1 4×10 5細胞/ mlで細胞懸濁液の濃度を調整します。 </li><li> 0時間とラベル5 96ウェルプレートを取り、24時間R、48時間、72時間および96時間。 表2に示すようなウェル/ 2,500細胞を播種、ウェルに5×10 4細胞 / mlの細胞液（TE 71およびA549）の50μLを追加します。 OVCAR3およびMDA-MB-231細胞株について、同じ手順を実行します。 </li><li> 24時間後、1×DPBSでウェルを洗浄し、 表2に示すようにウェル中にナノ粒子の濃度の増加の50μLを加える。へ2.4.2からDMEMに20、100、及びナノ粒子懸濁液180μLを添加することにより、種々のナノ粒子の濃度を準備それぞれ0.4×10 -4 mg / mlで、2.0×10 -4 mg / mlで、3.6×10 -4 mg / mlの、ナノ粒子の濃度を生じる2 mlの最終容積を得ます。各細胞株は、ナノ粒子の各濃度について三つ組を有します。 </li></ol></li><li>暗所での細胞生存率を測定します<ol><li>すぐにナノ粒子を添加した後、0時間プレートに10μlのMTTを追加します。ホルマザンcryst 4時間プレートをインキュベートALSを形成します。ウェルに50μlの可溶化溶液を追加します。ホルマザン結晶を溶解するために6時間プレートをインキュベートします。 </li><li>マイクロプレートリーダーで570 nmの吸光度を記録することによって、0時間プレートの細胞生存率を測定します。 </li><li> 24時間のプレートの場合、1×DPBSで細胞を洗浄し、ナノ粒子を各ウェル後24時間のインキュベーションに50μlのメディアを追加。 4.2.1と4.2.2で説明したように、MTTを加え、プレートをお読みください。 </li><li> 48時間、72時間、および96時間のプレートの場合、1×DPBSで細胞を洗浄し、ナノ粒子と24時間のインキュベーション後にウェルに50μlのメディアを追加。残りの期間のために細胞をインキュベートします。 </li><li> 4.2.5 4.2.1と4.2.2で説明したように）特定の時点での細胞生存率を測定します。 </li><li> （n = 3）で3回完全な実験を繰り返します</li></ol></li></ol> 5. PDT後細胞生存率を測定<ol><li>細胞を計数し、96ウェルプレートで培養します。 <ol><li> 9のセットにラベルを付けますTE 71 + A549プレート及びOVCAR3 + MDA-MB-231プレートの両方について、表3に示すように、6ウェルプレート、。 4.1.3に示すように、プレートのレイアウトは同じです。 </li><li>セクション4.1.2 の表2に示したのと同様のレイアウトでセクション4.1で説明したように96ウェルプレートをシード。 </li><li> 4.1.4で説明したように24時間後にプレートにナノ粒子を追加します。 </li><li>ナノ粒子を添加した後の24時間は、1×DPBSで細胞を洗浄し、各ウェルに50μlのHBSSを追加します。 </li><li> 3.2.3で説明したようにそれぞれの光用量でプレートを照射します。 </li><li> 10％FBSを補充した50μlのDMEM培地でHBSSを交換し、PDT後の各期間のプレートをインキュベート。 </li><li> 4.2.1及び4.2.2で説明したように各時間期間の後、細胞生存率を測定します。 </li></ol></li></ol> 6.蛍光顕微鏡<ol><li>ナノ粒子の取り込み<ol><li>顕微鏡Aのランプをオンにしますイメージングの前にNDレーザ30分。顕微鏡のステージ上で（セクション3.1で説明したように）固定された細胞を含むペトリ皿を置きます。 </li><li> 表4に示すように、フィルタを使用して、ナノ粒子およびDAPIからの蛍光を集める。ImageJソフトウェアで位相コントラスト、ナノ粒子及びDAPI画像をオーバーレイ。 </li></ol></li><li> ROSの検出<ol><li> 30分前に、イメージング顕微鏡のランプをオンにします。顕微鏡のステージ上で（セクション3.2で説明したように）細胞を含むペトリ皿を置きます。 </li><li> 表4に示すようにフィルタを使用することにより、ナノ粒子、DAPI、およびROS検出試薬からの蛍光を集める。ImageJソフトウェアで試薬画像を検出位相差、ナノ粒子、DAPIおよびROSオーバーレイ。 </li></ol></li><li> PIおよびアネキシンV FITCによるアポトーシスおよび壊死<ol><li> 30分前に、イメージング顕微鏡のランプをオンにします。で説明したように細胞を含むペトリ皿（置きます顕微鏡のステージ上のセクション3.3）。 </li><li> 表4に示すようにフィルタを使用することにより、ナノ粒子、DAPI、PIおよびアネキシンV FITCからの蛍光を集める。ImageJソフトウェアで位相コントラスト、ナノ粒子、DAPI、PIおよびアネキシンV FITC画像をオーバーレイ。 </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Dolmans, D., Fukumura, D., Jain, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photodynamic+therapy+for+cancer.">Photodynamic therapy for cancer.</a> Nat Rev Cancer. 3 (5), 380-387 (2003).</li><li>Dougherty, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photodynamic+therapy.">Photodynamic therapy.</a> J Natl Cancer Inst. 90 (12), 889-905 (1998).</li><li>Ferrari, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+nanotechnology:+Opportunities+and+challenges.">Cancer nanotechnology: Opportunities and challenges.</a> Nat Rev Cancer. 5 (3), 161-171 (2005).</li><li>Oleinick, N. L., Morris, R. L., Belichenko, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+apoptosis+in+response+to+photodynamic+therapy:+what,+where,+why,+and+how.">The role of apoptosis in response to photodynamic therapy: what, where, why, and how.</a> Photochem Photobiol Sci. 1 (1), 1-21 (2002).</li><li>Ormond, A., Freeman, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dye+Sensitizers+for+Photodynamic+Therapy.">Dye Sensitizers for Photodynamic Therapy.</a> Materials. 6 (3), 817-840 (2013).</li><li>Pass, H. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photodynamic+Therapy+in+Oncology+-+Mechanisms+and+Clinical+Use.">Photodynamic Therapy in Oncology - Mechanisms and Clinical Use.</a> J Natl Cancer Inst. 85 (6), 443-456 (1993).</li><li>Sariciftci, N. S., Smilowitz, L., Heeger, A. J., Wudl, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photoinduced+electron+transfer+from+a+conducting+polymer+to+buckminsterfullerene.">Photoinduced electron transfer from a conducting polymer to buckminsterfullerene.</a> Science. 258 (5087), 1474-1476 (1992).</li><li>Sperandio, F. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photoinduced+electron-transfer+mechanisms+for+radical-enhanced+photodynamic+therapy+mediated+by+water-soluble+decacationic+C-70+and+C84O2+Fullerene+Derivatives.">Photoinduced electron-transfer mechanisms for radical-enhanced photodynamic therapy mediated by water-soluble decacationic C-70 and C84O2 Fullerene Derivatives.</a> Nanomed-Nanotechnol. 9 (4), 570-579 (2013).</li><li>Fan, J. Q., Fang, G., Zeng, F., Wang, X. D., Wu, S. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Water-Dispersible+Fullerene+Aggregates+as+a+Targeted+Anticancer+Prodrug+with+both+Chemo-+and+Photodynamic+Therapeutic+Actions.">Water-Dispersible Fullerene Aggregates as a Targeted Anticancer Prodrug with both Chemo- and Photodynamic Therapeutic Actions.</a> Small. 9 (4), 613-621 (2013).</li><li>Grynyuk, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photoexcited+fullerene+C-60+disturbs+prooxidant-antioxidant+balance+in+leukemic+L1210+cells.">Photoexcited fullerene C-60 disturbs prooxidant-antioxidant balance in leukemic L1210 cells.</a> Materialwiss Werkstofftech. 44 (2-3), 139-143 (2013).</li><li>Liu, X. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Separately+doped+upconversion-C-60+nanoplatform+for+NIR+imaging-guided+photodynamic+therapy+of+cancer+cells.">Separately doped upconversion-C-60 nanoplatform for NIR imaging-guided photodynamic therapy of cancer cells.</a> Chem Commun. 49 (31), 3224-3226 (2013).</li><li>Trpkovic, A., Todorovic-Markovic, B., Trajkovic, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxicity+of+pristine+versus+functionalized+fullerenes:+mechanisms+of+cell+damage+and+the+role+of+oxidative+stress.">Toxicity of pristine versus functionalized fullerenes: mechanisms of cell damage and the role of oxidative stress.</a> Arch Toxicol. 86 (12), 1809-1827 (2012).</li><li>Chen, Z. Y., MA, L. J., Liu, Y., Chen, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+of+Functionalized+Fullerenes+in+Tumor+Theranostics.">Applications of Functionalized Fullerenes in Tumor Theranostics.</a> Theranostics. 2 (3), 238-250 (2012).</li><li>Park, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bulk+heterojunction+solar+cells+with+internal+quantum+efficiency+approaching+100%.">Bulk heterojunction solar cells with internal quantum efficiency approaching 100%.</a> Nat Photonics. 3 (5), 297-302 (2009).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

ナノ粒子を製造しながら、ナノ粒子の取り込みを達成するために、それはいくつかの重要な措置を維持するために必要でした。それは、この溶液の濃度は、形成されるナノ粒子のサイズを決定する上で重要な役割を果たしていることが観察されたように、THF中（50重量％のPCBMとブレンド）10 -6 M MEH-PPV溶液を、DI水に注入するように調製しました。濃度は、UV-VIS分光法により確認しまし...

光線力学療法（PDT）は、光増感剤は、光増感剤は、活性酸素種（ROS）を生成する光に標的組織に投与し、露光時にされています。そのような一重項酸素及びスーパーオキシドなどのROS種は、酸化ストレス、細胞および組織1-4に続く構造的損傷を誘発することができます。これにより、アプリケーションが容易にこの方法が盛んに研究されており、臨床試験が行わ5,6をとっています 。しかし、そのような（縮小生物学的利用能および潜在的な急性毒性につながる）増感剤の暗い増感剤の毒性、光（による増感剤の非選択的分布に）患者の感受性、および疎水性のような重要な問題が残っています。 ここでは、製造およびPDTの次世代光増感としてフラーレンを配合したポリマーナノ粒子を行うインビトロ評価のための方法を報告しています。ナノ粒子の自己凝集によって形成されます半導体ポリマーMEH-PPV（ポリ[2-メトキシ-5-（2-エチルヘキシルオキシ）-1,4-フェニレンビニレン]）、これらの材料は、互換性の中に溶解させたフラーレンPCBM（フェニルC 61 -酪酸メチルエステル）と溶媒を急速に非相溶性溶媒（ 図1A）に注入されます。ホストポリマーとしてMEH-PPVの選択は、三重形成率の高さにつながる、高い吸光係数によって動機づけ、およびフラーレンPCBM 7への効率的かつ超高速充電およびエネルギー転送の両方されています。これらのプロパティは、PDT内の一重項酸素とスーパーオキシド形成の感作のために理想的です。 フラーレンは、実際には両方の分子とナノ粒子の形態8-13に 、PDTに適用されています。しかし、重度の細胞毒性がさらなる発展を妨げている12。ここでは、MEH-PPVのホストマトリックス中にフラーレンをカプセル化すると、その私PDTの増感材料に複合MEH-PPV / PCBMのナノ粒子の結果を得るためにすることを示します本質的に細胞傷害性ではないよ、ナノ粒子サイズおよび表面電荷、および前述の光物理的特性に起因する低光用量で利回りの高い効果的なPDT治療による癌細胞に対する特異性を示します。

<table><tbody><tr><td>Poly[2-methoxy-5-(2-ethylhexyloxy)-1,4-phenylenevinylene] (MEH-PPV)</td><td>Sigma Aidrich</td><td>536512-1G</td><td>average M&lt;sub&gt;n&lt;/sub&gt;&amp;nbsp;150,000-250,000</td></tr><tr><td>[6,6]-Phenyl C61&amp;nbsp;butyric acid methyl ester (PCBM)</td><td>Sigma Aidrich</td><td>684449-500MG</td><td>&gt;99.5%</td></tr><tr><td>Tetrahydrofuran (THF)</td><td>EMD</td><td>TX0284-6</td><td>Drisolv</td></tr><tr><td>1 ml syringe</td><td>National Scientific Company</td><td>37510-1</td><td>For filtration of MEH-PPV solution</td></tr><tr><td>Syringe filter</td><td>VWR</td><td>28145-495</td><td>25 mm, 0.2 &amp;micro;m, PTFE</td></tr><tr><td>1 ml syringe</td><td>Hamilton Company</td><td>81320</td><td>For injection of MEH-PPV solution into water to make nanoparticles</td></tr><tr><td>Dulbecco&#039;s Modification of Eagle&#039;s Medium/Ham&#039;s F-12 50/50 Mix (DMEM)</td><td>Corning (VWR)</td><td>45000-350</td><td></td></tr><tr><td>Hank&#039;s Balanced Salt Solution without phenol red (HBSS)</td><td>Quality Biological (VWR)</td><td>10128-740</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco&#039;s Phosphate-Buffered Saline, 1x without calcium and magnesium (DPBS)</td><td>Corning (VWR)</td><td>45000-436</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum, Regular (Heat Inactivated) (FBS)</td><td>Corning (VWR)</td><td>45000-736</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin EDTA 1x 0.25%</td><td>Corning (VWR)</td><td>45000-664</td><td>Trypsin/2.21 mM EDTA in HBSS without sodium bicarbonate, calcium and magnesium Porcine Parvovirus Tested</td></tr><tr><td>16% Paraformaldehyde</td><td>Electron Microscopy Sciences&amp;nbsp;</td><td>15710</td><td>16% paraformaldehyde is diluted to 4% by adding PBS</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>&amp;nbsp;Biotium VWR</td><td>89139-054</td><td>Nuclear stain</td></tr><tr><td>5 ml pipettes</td><td>VWR</td><td>82050-478</td><td></td></tr><tr><td>75 cm&lt;sup&gt;2&lt;/sup&gt; culture flask</td><td>VWR</td><td>82050-856</td><td>for culturing cells</td></tr><tr><td>96-well plates</td><td>VWR</td><td>82050-771</td><td>for MTT assays</td></tr><tr><td>Tissue Culture Dishes with Vents</td><td>Greiner Bio-One (VWR)</td><td>82050-538</td><td></td></tr><tr><td>Propidium iodide</td><td>Molecular probes</td><td>P3566</td><td></td></tr><tr><td>Annexin V FITC</td><td>Invitrogen</td><td>A13199</td><td>dye for apoptosis</td></tr><tr><td>Celltiter 96 non-R 1000 assays</td><td>Promega (VWR)</td><td>&lt;a href=&quot;https://www.vwrsp.com/catalog/product/index.cgi?catalog_number=PAG4000&quot;&gt;PAG4000&lt;/a&gt;</td><td>MTT</td></tr><tr><td>CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection</td><td>Invitrogen</td><td>C10444</td><td>For ROS detection</td></tr><tr><td>UV-vis spectrometer</td><td>Agilent 8453</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fluorescence spectrometer</td><td>NanoLog HoribaJobin Yvon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dynamic light scattering</td><td>PD2000DLS, Precision detector</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Incubator</td><td>NuAir DH Autoflow</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Confocal microscope</td><td>Zeiss Axioskop2</td><td></td><td>63X oil immersion objective lens</td></tr><tr><td>Epiluminescence microscope</td><td>Olympus IX71</td><td></td><td>60X water immersion objective lens, Andor Zyla sCMOS camera</td></tr><tr><td>Solar Simulator</td><td>Newport 67005 Oriel Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Reference solar cell</td><td>Oriel&amp;nbsp;</td><td></td><td>VLSI Standards Incorporated</td></tr><tr><td>Microplate reader</td><td>BioTek Ex808</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hemocytometer</td><td>Hausser Scientific Partnership</td><td>3200</td><td>For counting cells</td></tr></tbody></table>

photodynamic therapy with blended conducting polymer/fullerene nanoparticle photosensitizers

In this article a method for the fabrication and reproducible in-vitro evaluation of conducting polymer nanoparticles blended with fullerene as the next generation photosensitizers for Photodynamic Therapy (PDT) is reported. The nanoparticles are formed by hydrophobic interaction of the semiconducting polymer MEH-PPV (poly[2-methoxy-5-(2-ethylhexyloxy)-1,4-phenylenevinylene]) with the fullerene PCBM (phenyl-C61-butyric acid methyl ester) in the presence of a non-compatible solvent. MEH-PPV has a high extinction coefficient that leads to high rates of triplet formation, and efficient charge and energy transfer to the fullerene PCBM. The latter processes enhance the efficiency of the PDT system through fullerene assisted triplet and radical formation, and ultrafast deactivation of MEH-PPV excited stated. The results reported here show that this nanoparticle PDT sensitizing system is highly effective and shows unexpected specificity to cancer cell lines.

取り込みおよびナノ粒子の本質的な細胞傷害性 50重量％ブレンドMEH-PPV / PCBMのナノ粒子は、TE 71、MDA-MB-231、A549及びOVCAR3細胞株と共にインキュベートしました。 PCBMブレンドレベルは、共役ポリマーとフラーレン14の間の理想的な電荷およびエネルギー伝達特性を与えることが示されている50重量％のPCBMとして選ば ​​れました。ナノ粒子の取り込みの蛍光画像は?...

Watch this Scientific Journal Video about Photodynamic Therapy with Blended Conducting Polymer/Fullerene Nanoparticle Photosensitizers at JoVE.com

Photodynamic Therapy with Blended Conducting Polymer/Fullerene Nanoparticle Photosensitizers

This protocol describes a method for the fabrication of conducting polymer nanoparticles blended with fullerene. These nanoparticles were investigated for their potential use as a next generation photosensitizers for Photodynamic Therapy (PDT).

ポリマー/フラーレンナノ粒子の光増感を実施ブレンドと光線力学療法

In this article a method for the fabrication and reproducible in-vitro evaluation of conducting polymer nanoparticles blended with fullerene as the next ...

photodynamic-therapy-with-blended-conducting-polymerfullerene

Research

JoVE Journal

Chemistry

8.5K ビュー.  University of Central Florida. This protocol describes a method for the fabrication of conducting polymer nanoparticles blended with fullerene. These nanoparticles were investigated for their potential use as a next generation photosensitizers for Photodynamic Therapy (PDT). 

ビデオ: Photodynamic Therapy with Blended Conducting Polymer/Fullerene Nanoparticle Photosensitizers

Anticancer Efficacy of Photodynamic Therapy with Lung Cancer-Targeted Nanoparticles

Photodynamic therapy (PDT) is a non-invasive and non-surgical method representing an attractive alternative choice for lung cancer treatment. Photosensitizers selectively accumulate in tumor tissue and lead to tumor cell death in the presence of oxygen and the proper wavelength of light.
To increase the therapeutic effect of PDT, we developed both photosensitizer- and anticancer agent-loaded lung cancer-targeted nanoparticles. Both enhanced permeability and retention (EPR) effect-based passive targeting and hyaluronic-acid-CD44 interaction-based active targeting were applied. CD44 is a well-known hyaluronic acid receptor that is often introduced as a biomarker of non-small cell lung cancer. 
In addition, a combination of PDT and chemotherapy is adopted in the present study. This combination concept may increase anticancer therapeutic effects and reduce adverse reactions. 
We chose hypocrellin B (HB) as a novel photosensitizer in this study. It has been reported that HB causes higher anticancer efficacy of PDT compared to hematoporphyrin derivatives1. Paclitaxel was selected as the anticancer drug since it has proven to be a potential treatment for lung cancer2. 
The antitumor efficacies of photosensitizer (HB) solution, photosensitizer encapsulated hyaluronic acid-ceramide nanoparticles (HB-NPs), and both photosensitizer- and anticancer agent (paclitaxel)-encapsulated hyaluronic acid-ceramide nanoparticles (HB-P-NPs) after PDT were compared both in vitro and in vivo. The in vitro phototoxicity in A549 (human lung adenocarcinoma) cells and the in vivo antitumor efficacy in A549 tumor-bearing mice were evaluated.
The HB-P-NP treatment group showed the most effective anticancer effect after PDT. In conclusion, the HB-P-NPs prepared in the present study represent a potential and novel photosensitizer delivery system in treating lung cancer with PDT.

Photodynamic therapy (PDT) is an alternative choice for lung cancer treatment. To increase the therapeutic effect of PDT, lung cancer-targeted nanoparticles combined with chemotherapy were developed. Both in vitro and in vivo anticancer efficacies of PDT with prepared nanoparticles were evaluated.

肺癌標的化ナノ粒子と光線力学療法の抗がん効能

Photodynamic therapy (PDT) is a non-invasive and non-surgical method representing an attractive alternative choice for lung cancer treatment. ...

がん研究

A 'Plug and Play' Method to Create Water-dispersible Nanoassemblies Containing an Amphiphilic Polymer, Organic Dyes and Upconverting Nanoparticles

In this protocol, we first describe a procedure to synthesize lanthanide doped upconverting nanoparticles (UCNPs). We then demonstrate how to generate amphiphilic polymers in situ, and describe a protocol to encapsulate the prepared UCNPs and different organic dye molecules (porphyrins and diarylethenes) using polymer shells to form stable water-dispersible nanoassemblies. The nanoassembly samples containing both the UCNPs and the diarylethene organic dyes have interesting photochemical and photophysical properties. Upon 365 nm UV irradiation, the diarylethene group undergoes a visual color change. When the samples are irradiated with visible light of another specific wavelength, the color fades and the samples return to the initial colorless state. The samples also emit visible light from the UCNPs upon irradiation with 980 nm near-infrared light. The emission intensity of the samples can be tuned through alternate irradiation with UV and visible light. Modulation of fluorescence can be performed for many cycles without observable degradation of the samples. This versatile encapsulation procedure allows for the transfer of hydrophobic molecules and nanoparticles from an organic solvent to an aqueous medium. The polymer helps to maintain a lipid-like microenvironment for the organic molecules to aid in preservation of their photochemical behavior in water. Thus this method is ideal to prepare water-dispersible photoresponsive systems. The use of near-infrared light to activate upconverting nanoparticles allows for lower energy light to be used to activate photoreactions instead of more harmful ultraviolet light.

Organic dye molecules and oleic acid coated upconverting nanoparticles are not water-soluble. This protocol describes a &#8216;plug and play&#8217; method that enables the transfer of organic dye molecules and upconverting particles from their initial hydrophobic solvent to water.

「プラグアンドプレイ」両親媒性ポリマー、有機染料及びアップコンバーティングナノ粒子を含む水分散性Nanoassembliesを作成する方法を

In this protocol, we first describe a procedure to synthesize lanthanide doped upconverting nanoparticles (UCNPs). We then demonstrate how to generate ...

化学

Electroactive Polymer Nanoparticles Exhibiting Photothermal Properties

A method for the synthesis of electroactive polymers is demonstrated, starting with the synthesis of extended conjugation monomers using a three-step process that finishes with Negishi coupling. Negishi coupling is a cross-coupling process in which a chemical precursor is first lithiated, followed by transmetallation with ZnCl2. The resultant organozinc compound can be coupled to a dibrominated aromatic precursor to give the conjugated monomer. Polymer films can be prepared via electropolymerization of the monomer and characterized using cyclic voltammetry and ultraviolet-visible-near infrared (UV-Vis-NIR) spectroscopy. Nanoparticles (NPs) are prepared via emulsion polymerization of the monomer using a two-surfactant system to yield an aqueous dispersion of the polymer NPs. The NPs are characterized using dynamic light scattering, electron microscopy, and UV-Vis-NIR-spectroscopy. Cytocompatibility of NPs is investigated using the cell viability assay. Finally, the NP suspensions are irradiated with a NIR laser to determine their effectiveness as potential materials for photothermal therapy (PTT).

A protocol is presented for the synthesis and preparation of nanoparticles consisting of electroactive polymers.

電気活性ポリマーナノ粒子出展光熱プロパティ

A method for the synthesis of electroactive polymers is demonstrated, starting with the synthesis of extended conjugation monomers using a three-step ...

工学

5-Aminolevulinic Acid-mediated Photodynamic Therapy on Primary Bone Tumor and Bone Metastases Cell Lines

Bone metastases are associated with poor prognosis and low quality of life for the affected patients. Photodynamic therapy (PDT) emerges as a noninvasive therapy that can target local metastatic bone lesions. This paper presents an in vitro method to study the PDT effect in adherent cell lines. To this end, we demonstrate a step-by-step approach to subject both primary (giant cell bone tumor) and human bone metastatic cancer cell lines (derived from a primary invasive ductal breast carcinoma and renal carcinoma) to 5-aminolevulinic acid (5-ALA)-mediated PDT. 
After 24 h post 5-ALA-PDT irradiation (blue light-wavelength 436 nm), the therapeutic effect was assessed in terms of cell migration potential, viability, apoptotic features, and cellular growth arrest (senescence). Post 5-ALA-PDT irradiation, musculoskeletal-derived cell lines respond differently to the same doses and exposure of PDT. Depending on the extent of cellular damage triggered by PDT exposure, two different cell fates-apoptosis and senescence were noted. Variable sensitivity to PDT therapy among different bone cancer cell lines provides useful information for selecting more appropriate PDT settings in clinical settings. This protocol is designed to exemplify the use of PDT in the context of musculoskeletal neoplastic cell lines. It may be adjusted to investigate the therapeutic effect of PDT on various cancer cell lines and various photosensitizers and light sources.

<meta charset="utf8"></head><body>原発性骨腫瘍および骨転移細胞株に対する5-アミノレブリン酸媒介光線力学療法

This protocol presents a step-by-step methodological approach of exposing bone metastatic cells lines and primary bone tumors to 5-aminolevulinic acid-mediated photodynamic therapy (PDT). The effects on cell migration potential/invasiveness, viability, apoptosis, and senescence potential are also analyzed following PDT exposure.

原発性骨腫瘍および骨転移細胞株に対する5-アミノレブリン酸媒介光線力学療法

Bone metastases are associated with poor prognosis and low quality of life for the affected patients. Photodynamic therapy (PDT) emerges as a noninvasive ...

Optical Control of Living Cells Electrical Activity by Conjugated Polymers

Hybrid interfaces between organic semiconductors and living tissues represent a new tool for in-vitro and in-vivo applications. In particular, conjugated polymers display several optimal properties as substrates for biological systems, such as good biocompatibility, excellent mechanical properties, cheap and easy processing technology, and possibility of deposition on light, thin and flexible substrates. These materials have been employed for cellular interfaces like neural probes, transistors for excitation and recording of neural activity, biosensors and actuators for drug release. Recent experiments have also demonstrated the possibility to use conjugated polymers for all-optical modulation of the electrical activity of cells. Several in-vitro study cases have been reported, including primary neuronal networks, astrocytes and secondary line cells. Moreover, signal photo-transduction mediated by organic polymers has been shown to restore light sensitivity in degenerated retinas, suggesting that these devices may be used for artificial retinal prosthesis in the future. All in all, light sensitive conjugated polymers represent a new approach for optical modulation of cellular activity.
In this work, all the steps required to fabricate a bio-polymer interface for optical excitation of living cells are described. The function of the active interface is to transduce the light stimulus into a modulation of the cell membrane potential. As a study case, useful for in-vitro studies, a polythiophene thin film is used as the functional, light absorbing layer, and Human Embryonic Kidney (HEK-293) cells are employed as the biological component of the interface. Practical examples of successful control of the cell membrane potential upon stimulation with light pulses of different duration are provided. In particular, it is shown that both depolarizing and hyperpolarizing effects on the cell membrane can be achieved depending on the duration of the light stimulus. The reported protocol is of general validity and can be straightforwardly extended to other biological preparations.

A method for stimulation of in-vitro cell cultures electrical activity with visible light, based on the use of organic semiconducting polymers is described.

生細胞共役ポリマーにより電気的活動の光制御

Hybrid interfaces between organic semiconductors and living tissues represent a new tool for in-vitro and in-vivo applications. In particular, conjugated ...

生物工学

An Integrated System to Remotely Trigger Intracellular Signal Transduction by Upconversion Nanoparticle-mediated Kinase Photoactivation

Upconversion nanoparticle (UCNP)-mediated photoactivation is a new approach to remotely control bioeffectors with much less phototoxicity and with deeper tissue penetration. However, the existing instrumentation on the market is not readily compatible with upconversion application. Therefore, modifying the commercially available instrument is essential for this research. In this paper, we first illustrate the modifications of a conventional fluorimeter and fluorescence microscope to make them compatible for photon upconversion experiments. We then describe the synthesis of a near-infrared (NIR)-triggered caged protein kinase A catalytic subunit (PKA) immobilized on a UCNP complex. Parameters for microinjection and NIR photoactivation procedures are also reported. After the caged PKA-UCNP is microinjected into REF52 fibroblast cells, the NIR irradiation, which is significantly superior to conventional UV irradiation, efficiently triggers the PKA signal transduction pathway in living cells. In addition, positive and negative control experiments confirm that the PKA-induced pathway leading to the disintegration of stress fibers is specifically triggered by NIR irradiation. Thus, the use of protein-modified UCNP provides an innovative approach to remotely control light-modulated cellular experiments, in which direct exposure to UV light must be avoided.

In this protocol, caged protein kinase A (PKA), a cellular signal transduction bioeffector, was immobilized on a nanoparticle surface, microinjected into the cytosol, and activated by the upconverted UV light from near-infrared (NIR) irradiation, inducing downstream stress fiber disintegration in the cytosol.

キナーゼのアップコン バージョンのナノ粒子を介した光活性化によって細胞内シグナル伝達をリモートでトリガーする統合システム

Upconversion nanoparticle (UCNP)-mediated photoactivation is a new approach to remotely control bioeffectors with much less phototoxicity and with deeper ...

An In-House-Built and Light-Emitting-Diode-Based Photodynamic Therapy Device for Enhancing Verteporfin Cytotoxicity in a 2D Cell Culture Model

This paper describes a novel, simple, and low-cost device to perform in vitro photodynamic therapy (PDT) assays, named the PhotoACT. The device was built using a set of conventional programmable light-emitting diodes (LEDs), a liquid crystal display (LCD) module, and a light sensor connected to a commercial microcontroller board. The box-based structure of the prototype was made with medium-density fiberboards (MDFs). The internal compartment can simultaneously allocate four cell culture multiwell microplates.
As a proof of concept, we studied the cytotoxic effect of the photosensitizer (PS) verteporfin against the HeLa cell line in two-dimensional (2D) culture. HeLa cells were treated with increasing concentrations of verteporfin for 24 h. The drug-containing supernatant medium was discarded, the adherent cells were washed with phosphate-buffered saline (PBS), and drug-free medium was added. In this study, the effect of verteporfin on cells was examined either without light exposure or after exposure for 1 h to light using red-green-blue (RGB) values of 255, 255, and 255 (average fluence of 49.1 &#177; 0.6 J/cm2). After 24 h, the cell viability was assessed by the 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay.
Experimental results showed that exposure of cells treated with verteporfin to the light from the device enhances the drug&#39;s cytotoxic effect via a mechanism mediated by reactive oxygen species (ROS). In addition, the use of the prototype described in this work was validated by comparing the results with a commercial PDT device. Thus, this LED-based photodynamic therapy prototype represents a good alternative for in vitro studies of PDT.

Here, we describe a novel, simple, and low-cost device to successfully perform in vitro photodynamic therapy (PDT) assays using two-dimensional HeLa cell culture and verteporfin as a photosensitizer.

2D細胞培養モデルにおけるベルテポルフィン細胞毒性を高めるための自作発光ダイオードベースの光線力学治療装置

This paper describes a novel, simple, and low-cost device to perform in vitro photodynamic therapy (PDT) assays, named the PhotoACT. The device was built ...

生化学

An In Vitro Approach to Photodynamic Therapy

Photodynamic therapy (PDT) is a medical procedure that involves incubation of an exogenously applied photosensitizer (PS) followed by visible light photoactivation to induce cell apoptosis. The Federal Drug Administration has approved PDT for the treatment of actinic keratosis, and clinical guidelines recommend PDT as a treatment for certain non-melanoma skin cancers and acne vulgaris. PDT is an advantageous therapeutic modality as it is low cost, non-invasive, and associated with minimal adverse events and scaring. In the first step of PDT, a PS is applied and allowed to accumulate intracellularly. Subsequent light irradiation induces reactive oxygen species formation, which may ultimately lead to cell apoptosis, membrane disruption, mitochondrial damage, immune modulation, keratinocyte proliferation, and collagen turnover. Herein, we present an in vitro method to study PDT in an adherent cell line. This treatment protocol is designed to simulate PDT and may be adjusted to studying the use of PDT with various cell lines, photosensitizers, incubation temperatures, or photoactivation wavelengths. Squamous cell carcinoma cells were incubated with 0, 0.5, 1.0, and 2 mM 5-aminolevulinic acid (5-ALA) for 30 min and photoactivated with 417 nm blue light for 1,000 s. The primary outcome measure was apoptosis and necrosis, as measured by annexin-V and 7-aminoactinomycin D flow cytometry. There was a dose-dependent increase in cell apoptosis following thirty-minute incubation of 5-ALA. To achieve high inter-test validity, it is important to maintain consistent incubation and light parameters when performing in vitro PDT experiments. PDT is a useful clinical procedure and in vitro research may allow for the development of novel PSs, optimization of protocols, and new indications for PDT.

An In Vitro Approach to Photodynamic Therapy

Photodynamic therapy (PDT) is a medical procedure that involves incubation of an exogenously applied photosensitizer (PS) followed by visible light photoactivation to induce apoptosis. We present an in vitro PDT protocol designed to simulate PDT that may be used to study differences in PS incubation and light treatment parameters.

体外光線力学的治療へのアプローチ

Photodynamic therapy (PDT) is a medical procedure that involves incubation of an exogenously applied photosensitizer (PS) followed by visible light ...

医学

Rose Bengal-Mediated Photodynamic Therapy to Inhibit Candida albicans

Invasive Candida albicans infection is a significant opportunistic fungal infection in humans because it is one of the most common colonizers of the gut, mouth, vagina, and skin. Despite the availability of antifungal medication, the mortality rate of invasive candidiasis remains ~50%. Unfortunately, the incidence of drug-resistant C. albicans is increasing globally. Antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) may offer an alternative or adjuvant treatment to inhibit C. albicans biofilm formation and overcome drug resistance. Rose bengal (RB)-mediated aPDT has shown effective cell killing of bacteria and C. albicans. In this study, the efficacy of RB-aPDT on multidrug-resistant C. albicans is described. A homemade green light-emitting diode (LED) light source is designed to align with the center of a well of a 96-well plate. The yeasts were incubated in the wells with different concentrations of RB and illuminated with varying fluences of green light. The killing effects were analyzed by the plate dilution method. With an optimal combination of light and RB, 3-log growth inhibition was achieved. It was concluded that RB-aPDT might potentially inhibit drug-resistant C. albicans.

Rose Bengal-Mediated Photodynamic Therapy to Inhibit Candida albicans

The growing incidence of drug-resistant Candida albicans is a serious health issue worldwide. Antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) may offer a strategy to fight against drug-resistant fungal infections. The present protocol describes Rose bengal-mediated aPDT efficacy on a multidrug-resistant C. albicans strain in vitro.

カンジダ・アルビカンスを阻害するローズベンガル媒介光線力学療法

Invasive Candida albicans infection is a significant opportunistic fungal infection in humans because it is one of the most common colonizers of the gut, ...

ポリマー/フラーレンナノ粒子の光増感を実施ブレンドと光線力学療法

要約

さらに動画を探す

この動画の章

肺癌標的化ナノ粒子と光線力学療法の抗がん効能

「プラグアンドプレイ」両親媒性ポリマー、有機染料及びアップコンバーティングナノ粒子を含む水分散性Nanoassembliesを作成する方法を

電気活性ポリマーナノ粒子出展光熱プロパティ

原発性骨腫瘍および骨転移細胞株に対する5-アミノレブリン酸媒介光線力学療法

原発性骨腫瘍および骨転移細胞株に対する5-アミノレブリン酸媒介光線力学療法

生細胞共役ポリマーにより電気的活動の光制御

キナーゼのアップコンバージョンのナノ粒子を介した光活性化によって細胞内シグナル伝達をリモートでトリガーする統合システム

2D細胞培養モデルにおけるベルテポルフィン細胞毒性を高めるための自作発光ダイオードベースの光線力学治療装置

体外光線力学的治療へのアプローチ

カンジダ・アルビカンスを阻害するローズベンガル媒介光線力学療法

ポリマー/フラーレンナノ粒子の光増感を実施ブレンドと光線力学療法

要約

さらに動画を探す

この動画の章

肺癌標的化ナノ粒子と光線力学療法の抗がん効能

「プラグアンドプレイ」両親媒性ポリマー、有機染料及びアップコンバーティングナノ粒子を含む水分散性Nanoassembliesを作成する方法を

電気活性ポリマーナノ粒子出展光熱プロパティ

原発性骨腫瘍および骨転移細胞株に対する5-アミノレブリン酸媒介光線力学療法

原発性骨腫瘍および骨転移細胞株に対する5-アミノレブリン酸媒介光線力学療法

生細胞共役ポリマーにより電気的活動の光制御

キナーゼのアップコン バージョンのナノ粒子を介した光活性化によって細胞内シグナル伝達をリモートでトリガーする統合システム

2D細胞培養モデルにおけるベルテポルフィン細胞毒性を高めるための自作発光ダイオードベースの光線力学治療装置

体外光線力学的治療へのアプローチ

カンジダ・アルビカンスを阻害するローズベンガル媒介光線力学療法

キナーゼのアップコンバージョンのナノ粒子を介した光活性化によって細胞内シグナル伝達をリモートでトリガーする統合システム