pT3N0M0胃癌組織のパラフィン埋め込みスライド上の弾性染色

この方法は、pT3胃癌において、腫瘍細胞が弾性薄層を超えて侵入したかどうかを判断するのに役立つ。pT3胃癌の予後画像における弾性薄層浸食。この技術の主な利点は、弾力性のある層を識別するための便利で正確なアプローチであり、病理学者が腫瘍細胞がpT3胃癌の弾性層層を超えて侵入するかどうかを評価する精度が高いということです。

この技術は、肺癌および癌の病理学的検査段階診断に向けて可能である。この方法は、肺癌および直腸癌のTNM段階システムにも適用することができる。まず、スライドをコプリン瓶に10分間浸します。

この瓶からスライドを取り出し、別のコプリン瓶に新鮮なキシレンに10分間浸します。スライドを5分間100%エタノールに浸し、さらに5分間新鮮な100%エタノールに移します。次に、95%エタノールにスライドを2分間浸します。

70%エタノールを含む瓶にスライドを2分間移します。この後、新しいコプリン瓶に蒸留水でスライドを短時間すすいでください。まず、ティッシュペーパーを使用して、スライドまたは組織の周りの余分な溶液を拭き取ります。

室温と湿度に合致する条件でスライドを配置します。各スライドに過マンガン酸カリウムを数滴加え、酸化し、追加されたボリュームが各スライドの組織セクションを覆うのに十分であることを確認します。5分後、酸化したスライドをコプリン瓶の蒸留水ですすいで、すすを2〜3回繰り返し、それぞれのすすいに新しい水瓶を使用します。

組織は、観察可能な茶色を持っている必要があります。さて、各スライドにシュウ酸を数滴加え、漂白し、追加されたボリュームが各スライドの組織セクションを覆うのに十分であることを確認します。5分後、漂白したスライドを蒸留水ですすい、すすを2〜3回繰り返し、それぞれのすすめに新しい水瓶を使用します。

スライドを95%アルコールで短時間洗います。洗浄したスライドをエラスチン溶液に8~24時間浸漬します。その後、スライドを95%エタノールに直接浸し、各組織セクションをうまく区別します。

蒸留水でスライドを完全にすすい。青黒の弾性繊維の染色と灰色の背景がないか、顕微鏡的に確認してください。バンギーソン溶液のスライドに1分間対抗し、使用するボリュームが各スライドの組織セクションを完全に覆うのに十分であることを確認します。

次に、95%エタノールを数秒間組織スライスに急速にドロップし、各組織セクションを良好に区別します。まず、スライドを95%アルコールに5分間浸して、素早く脱水します。脱水を続けるには、スライドを100%アルコールに5分間移します。

その後、スライドを新鮮な100%アルコールにさらに5分間移します。3分間続く各浸漬とキシレンの2つの異なる変更にスライドを浸します。その後、スライドに樹脂製の取り付け媒体を1滴加え、カバースリップを上に置きます。

顕微鏡を使用して、テキストプロトコルに概説されているように組織切片を観察する。本研究では、弾性染色を利用して、弾性層の薄層を視覚的に同定する。代表的な染色に成功した場合、エラスチン溶液染色後、ファン・ギーソンの対抗染色の前に、弾性層は青色黒色に染色されたフィラメントの形ではっきりと見られることが明らかになる。

それらは漿膜中皮細胞に近く、弾性層と腫瘍細胞の間には一定量の距離が見られる。ファンギーソンのカウンターステインを用いて典型的な弾性染色は、弾性薄層が青黒色に染色されていることを示しています。コラーゲン線維は赤色に染色され、筋線維やがん細胞は黄色に染まっています。

弾性層を貫通する癌細胞は、弾性層の浸潤と考えられる。一方、がん細胞は弾性層に近いが侵入していないのに対し、弾性層は非侵入と考えられている。染色によって弾性層の複数の層を示す繰り返し構造が明らかになり、腫瘍が最外層を越えて侵入しない場合、サンプルは弾性薄層非侵襲と診断されるべきである。

エラスチン溶液はaであり、染色時間は相対的に長いので、すべてのスライドを密閉容器に入れてエラスチン染色で浸漬するのが最善です。エラスチン溶液染色後、蒸留水で洗い流す必要があります。