이 방법은 pT3 위암에 있는 탄성 라미나 넘어 종양 세포가 침략하는지 여부를 결정하는 것을 돕습니다. pT3 위암에 대한 예후 사진에서 탄성 라미나 침식. 이 기술의 주요 장점은 탄성 라미나를 식별하는 것이 편리하고 정확한 접근 법이라는 것입니다, 이는 pT3 위암에서 탄성 라미나 넘어 종양 세포가 침입하는지 여부를 평가하는 병리학자가 더 정확하게 만든다.
이 기술은 폐암과 암의 병리학 시험 단계 진단을 향해 있을 수 있습니다. 이 방법은 또한 폐암과 콜로-직장암의 TNM 단계 시스템에 적용될 수 있었습니다. 먼저, 10분 동안 코플린 항아리에 자일렌에 슬라이드를 담급다.
이 항아리에서 슬라이드를 제거하고 다른 코플린 항아리에 신선한 자일렌에 담그고 10 분 동안 더 넣습니다. 슬라이드를 100% 에탄올에 5분간 담근 다음, 5분 간 신선한 100% 에탄올로 옮기십시오. 다음으로 슬라이드를 95%에탄올로 2분간 담그십시오.
슬라이드를 70%에탄올이 들어 있는 병으로 2분간 전송합니다. 그 후, 새로운 코플린 항아리에 증류수로 슬라이드를 잠시 헹구십시오. 첫째, 티슈 페이퍼를 사용하여 슬라이드 또는 조직 주위의 과도한 용액을 닦아냅니다.
슬라이드를 실온과 습도와 일치하는 조건에 배치합니다. 각 슬라이드에 퍼망가네이트 칼륨 몇 방울을 추가하여 산화하여 추가된 부피가 각 슬라이드의 조직 섹션을 덮기에 충분하도록 합니다. 5분 후, 코플린 항아리에 증류수로 산화된 슬라이드를 헹구고 헹구기를 2~3번 반복하고 각 헹구기동안 새로운 물 병을 사용합니다.
조직은 관찰 가능한 갈색 이 있어야합니다. 이제 각 슬라이드에 몇 방울의 옥탈산을 추가하여 표백하여 추가된 부피가 각 슬라이드의 조직 섹션을 덮기에 충분하도록 합니다. 5분 후, 표백된 슬라이드를 증류수로 헹구고 헹구기를 2~3번 반복하고 각 헹구기 동안 새로운 물 병을 사용합니다.
슬라이드를 95% 알코올로 짧게 씻으십시오. 세탁된 슬라이드를 엘라스틴 용액에 8~24시간 동안 담가 두십시오. 그런 다음 슬라이드를 95%에 탄올에 직접 담그고 각 조직 섹션을 잘 구별합니다.
증류수로 슬라이드를 완전히 헹구십시오. 염색하는 블루 블랙 탄성 섬유와 회색 배경에 대해 현미경으로 확인하십시오. 반 기슨 솔루션의 슬라이드를 1분 동안 카운터스테인하여 사용된 부피가 각 슬라이드의 조직 섹션을 완전히 덮기에 충분하도록 합니다.
다음으로, 각 조직 섹션을 잘 구별하기 위해 몇 초 동안 조직 조각에 95%에탄올을 빠르게 떨어뜨립니다. 먼저 슬라이드를 95%의 알코올로 5분간 담그고 빠르게 탈수합니다. 슬라이드를 탈수 지속을 위해 5분 동안 100% 알코올로 전송합니다.
그런 다음 슬라이드를 5 분 동안 신선한 100 % 알코올로 옮기십시오. 매 번 침수할 때마다 3분간 지속되는 두 가지 색다른 색으로 슬라이드를 담급다. 그 후 슬라이드에 수지 장착 매체 1방울을 추가하고 커버 슬립을 위에 놓습니다.
현미경을 사용하여 텍스트 프로토콜에 설명된 대로 조직 섹션을 관찰하십시오. 이 연구에서는, 탄성 염색은 육수 탄성 라미나를 시각적으로 확인하기 위하여 이용됩니다. 대표적인 성공적인 염색은 엘라스틴 용액 염색 후, 반 기슨의 카운터스테인링 전에, 탄성 라미나는 명확하게 스테인드 블루 블랙 필라멘트의 형태로 볼 수 있음을 알 수 있습니다.
그들은 혈청 중피 세포에 가깝고, 탄성 라미나와 종양 세포 사이에 일정량의 거리가 여전히 보입니다. 반 기슨의 카운터스테인이 있는 전형적인 탄성 얼룩은 탄성 라미나가 블루 블랙으로 얼룩져 있음을 보여줍니다. 콜라겐 섬유는 빨간색으로 염색되고 근육 섬유와 암세포는 노란색으로 얼룩져 있습니다.
탄성 라미나 관통하는 암세포는 탄성 라미나 침공으로 간주됩니다. 암세포가 탄성 라미나에 가깝지만 침입하지 않는 반면 탄성 라미나 비침전으로 간주됩니다. 염색이 탄성 라미나다의 다중 층을 나타내는 반복적 구조를 드러내고 종양이 가장 바깥층 너머로 침입하지 않는 경우, 샘플은 탄성 라미나 비 침입으로 진단되어야 한다.
엘라스틴 용액은 염색 시간이 상대적으로 길기 때문에 밀봉 된 용기에 엘라스틴 염색으로 모든 슬라이드를 담그는 것이 가장 좋습니다. 엘라스틴 용액 염색 후 증류수로 씻어야합니다.
