Этот метод помогает определить, является ли опухолевая клетка вторглись за эластичный ламина в рак желудка pT3. эластичная ламина эрозии в прогностический картина для рака желудка pT3. Основным преимуществом этой техники является то, что это удобный и точный подход к выявлению эластичной ламины, что делает его более точным для патологоанатома, чтобы оценить, являются ли опухолевые клетки вторгаются за пределы эластичной ламины в раке желудка pT3.
Этот метод может быть к патологическое испытание стадии диагностики рака легких и рака. Этот метод также может быть применен к ТНМ стадии системы рака легких и коло-ректального рака. Во-первых, погрузить слайды в ксилен в банку Coplin в течение 10 минут.
Удалите слайды из этой банки и погрузите их в свежий ксилен в другой банке Coplin еще на 10 минут. Погрузите горки в 100%-ный этанол в течение пяти минут, а затем перенесите их на свежий 100%этанол еще на пять минут. Затем погрузите горки в 95% этанола в течение двух минут.
Перенесите слайды в банку, содержащую 70% этанола в течение двух минут. После этого, промыть слайды кратко с дистиллированной водой в новой банке Coplin. Во-первых, используйте бумагу для уничтожения любого избыточного раствора на слайде или вокруг ткани.
Поместите горки в условиях, которые соответствуют комнатной температуре и влажности. Добавьте несколько капель перманганата калия к каждому слайду, чтобы окислить их, убедившись, что добавленный объем достаточно, чтобы покрыть раздел ткани на каждом слайде. Через пять минут, промыть окисленные горки с дистиллированной водой в coplin банки, повторяя промыть два-три раза и с помощью новой банки воды для каждого полоскания.
Ткань должна иметь наблюдаемый коричневый цвет. Теперь добавьте несколько капель щавелевой кислоты к каждому слайду, чтобы отбелить их, убедившись, что добавленный объем достаточно, чтобы покрыть раздел ткани на каждом слайде. Через пять минут, промыть отбеленные горки с дистиллированной водой, повторяя промыть два-три раза и с помощью новой банки воды для каждого полоскания.
Вымойте слайды кратко в 95% алкоголя. Погрузите промытые горки в раствор эластина в течение восьми-24 часов. Затем погрузите слайды непосредственно в 95% этанола в течение одной-двух минут, чтобы дифференцировать каждый раздел ткани хорошо.
Промыть горки полностью дистиллированной водой. Проверьте микроскопически на сине-черные эластичные волокна окрашивания и серый фон. Счетчик слайдов в ван Gieson решение в течение одной минуты, убедившись, что объем используется достаточно, чтобы покрыть раздел ткани на каждом слайде полностью.
Далее, быстро падение 95% этанола на ткани ломтиками в течение нескольких секунд, чтобы дифференцировать каждый раздел ткани хорошо. Для начала, погрузить слайды в 95% алкоголя в течение пяти минут, чтобы обезвоживать их быстро. Перенесите слайды на 100% алкоголя в течение пяти минут, чтобы продолжить обезвоживание.
Затем перенесите слайды на свежий 100%-ный алкоголь еще на пять минут. Погрузите горки в две различные изменения ксилена с каждым погружением продолжительностью три минуты. После этого добавьте одну каплю смоляной крепления среды на слайд и поместите крышку скольжения на вершине.
Используя микроскоп, наблюдайте за секциями тканей, изложенными в текстовом протоколе. В этом исследовании, упругое окрашивание используется для визуального выявления подсеросальной эластичной ламины. Представитель успешного окрашивания показывает, что после окрашивания раствора эластина, но перед тем, как ван Гисон пристегнирует, упругой ламины можно хорошо увидеть в виде нитей, окрашенных сине-черным.
Они находятся близко к серозальным мезотелиальным клеткам, и определенное количество расстояния все еще видно между эластичной ламиной и опухолевыми клетками. Типичные эластичные окрашивания со столешним ван Гисона демонстрируют, что эластичная ламина окрашена в сине-черный цвет. Коллагеновые волокна окрашены в красный цвет, а мышечные волокна и раковые клетки окрашены в желтый цвет.
Раковые клетки, проникающие в эластичную ламину, считаются эластичным вторжением ламины. В то время как раковые клетки, близкие, но не вторгающиеся в эластичную ламину, считаются эластичными ламинами, не вторгающимся. Если окрашивание показывает повторяющуюся структуру, указывающую на несколько слоев эластичной ламины, и опухоль не вторгается за пределы внешнего слоя, образец должен быть диагностирован как упругой ламины не-вторжения.
Эластин решение и окрашивание время относительно долго, так что лучше погрузить все слайды с эластина окрашивания в герметичном контейнере. После окрашивания раствора эластина следует смыть дистиллированной водой.
