מכתים אלסטי על פרפין-שקופיות מוטבעות של רקמת סרטן pT3N0M0 קיבה

שיטה זו מסייעת לקבוע אם תא הגידול פלש מעבר לאמינה אלסטית בסרטן קיבה pT3. שחיקת למינה אלסטית בתמונה הפרוגנוסטית לסרטן קיבה pT3. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שזה נוח, וגישה מדויקת לזהות את lamina אלסטי, מה שהופך אותו מדויק יותר עבור פתולוג כדי להעריך אם תאים סרטניים לפלוש מעבר לאמינה אלסטית בסרטן קיבה pT3.

טכניקה זו יכולה להיות לקראת אבחון שלב בדיקה פתולוגית של סרטן ריאות וסרטן. שיטה זו יכולה להיות מיושמת גם על מערכת שלב TNM של סרטן ריאות וסרטן קולו-רקטלי. ראשית, לטבול את השקופיות קסילן בצנצנת קופלין במשך 10 דקות.

הסר את השקופיות מן הצנצנת הזאת לטבול אותם קסילן טרי בצנצנת קופלין אחרת במשך 10 דקות נוספות. לטבול את השקופיות ב 100% אתנול במשך חמש דקות, ולאחר מכן להעביר אותם טרי 100% אתנול במשך חמש דקות נוספות. לאחר מכן, לטבול את השקופיות ב 95%אתנול במשך שתי דקות.

מעבירים את השקופיות לצנצנת המכילה 70% אתנול לשתי דקות. לאחר מכן, לשטוף את המגלשות בקצרה עם מים מזוקקים בצנצנת קופלין חדשה. ראשית, השתמש בנייר טישו כדי למחוק כל פתרון עודף על השקופית או סביב הרקמה.

מקם את השקופיות בתנאים התואמים לטמפרטורת החדר ולחות. הוסף כמה טיפות של אשלגן permanganate לכל שקופית כדי לחמצן אותם, לוודא כי נפח הוסיף מספיק כדי לכסות את סעיף הרקמה על כל שקופית. לאחר חמש דקות, שוטפים את המגלשות המחמצנות במים מזוקקים בצנצנות קופלין, חוזרים על שטיפה פעמיים עד שלוש פעמים ולהשתמש בצנצנת מים חדשה לכל שטיפה.

לרקמה צריך להיות צבע חום ניתן לצפייה. עכשיו, להוסיף כמה טיפות של חומצה אוקסלית לכל שקופית כדי להלבין אותם, לוודא כי עוצמת הקול הוסיף מספיק כדי לכסות את סעיף הרקמה על כל שקופית. לאחר חמש דקות, שוטפים את המגלשות הלבנות במים מזוקקים, חוזרים על שטיפה פעמיים עד שלוש פעמים ולהשתמש בצנצנת מים חדשה לכל שטיפה.

לשטוף את השקופיות לזמן קצר 95% אלכוהול. לטבול את השקופיות שטף פתרון אלסטין במשך שמונה עד 24 שעות. ואז לטבול את השקופיות ישירות 95%אתנול במשך 1 עד 2 דקות כדי להבדיל כל קטע רקמה היטב.

שוטפים את המגלשות לחלוטין במים מזוקקים. בדקו מיקרוסקופית את הכתמת הסיבים האלסטיים הכחולים-שחורים ואת הרקע האפור. נטרל את השקופיות בתסרון ואן גיסון למשך דקה אחת, וודא שאמצעי האחסון שבו נעשה שימוש מספיק כדי לכסות את מקטע הרקמה בכל שקופית לחלוטין.

לאחר מכן, במהירות טיפה 95% אתנול על פרוסות הרקמה במשך כמה שניות כדי להבדיל כל קטע רקמה היטב. כדי להתחיל, לטבול את המגלשות ב 95% אלכוהול במשך חמש דקות כדי לייבש אותם במהירות. מעבירים את המגלשות ל-100% אלכוהול למשך חמש דקות כדי להמשיך את ההתייבשות.

לאחר מכן, להעביר את המגלשות טרי 100% אלכוהול במשך חמש דקות נוספות. לטבול את השקופיות בשני שינויים שונים של קסילן עם כל טבילה שנמשך שלוש דקות. לאחר מכן, הוסף טיפה אחת של מדיום הרכבה שף לשקופית והצב תלוש כיסוי על גבי.

באמצעות מיקרוסקופ, התבונן במקטעי הרקמה כמתואר בפרוטוקול הטקסט. במחקר זה, כתמים אלסטיים מנוצלים כדי לזהות חזותית לאמינה אלסטית תת-תת-תת-ארוסאלית. הכתמה מוצלחת מייצגת מגלה כי לאחר הכתמת תספורת אלסטין, אך לפני ההכתמה הנגדית של ואן גיסון, ניתן לראות בבירור את הלמינה האלסטית בצורה של סיבים מוכתמים בכחול-שחור.

הם קרובים לתאי mesothelial serosal, כמות מסוימת של מרחק עדיין נראה בין למינה אלסטית לתאי הגידול. כתמים אלסטיים אופייניים עם הנגד של ואן גיסון מראים שהלמינה האלסטית מוכתמת בכחול-שחור. סיבי הקולגן מוכתמים באדום, וסיבי השריר ותאי הסרטן מוכתמים בצהוב.

תאים סרטניים חודרים למינה אלסטית נחשב פלישה אלסטית למינה. בעוד תאים סרטניים להיות קרוב אבל לא לפלוש לאמינה אלסטית נחשב אלסטי למינה אי פלישה. אם הכתם מגלה מבנה חוזר המעיד על שכבות מרובות של למינה אלסטית, והגידול אינו פולש מעבר לשכבה החיצונית ביותר, יש לאבחן את המדגם כלא פלישה אלסטית.

פתרון אלסטין הוא זמן הכתמים ארוך יחסית, ולכן עדיף לטבול את כל השקופיות עם כתמי אלסטין במיכל אטום. לאחר כתמי תווי אלסטין, יש לשטוף אותם במים מזוקקים.