此方法有助于确定肿瘤细胞是否侵入在 pT3 胃癌中超过弹性层。pT3 胃癌预后图中的弹性层层侵蚀。该技术的主要优点是,它方便,准确的方法,以确定弹性层,这使得它更精确的病理学家评估肿瘤细胞是否侵入超过弹性层在pT3胃癌。
该技术可用于肺癌和癌症的病理测试阶段诊断。该方法也适用于肺癌和结肠癌的TNM阶段系统。首先,将幻灯片浸入二甲苯中,在科普林罐中浸泡 10 分钟。
从这个罐子里取下幻灯片,将它们浸入另一个Coplin罐子中的新鲜二甲苯中再浸泡10分钟。将幻灯片浸入 100%乙醇中 5 分钟,然后将它们转移到新鲜 100%乙醇中再浸泡 5 分钟。接下来,将幻灯片浸入95%乙醇中两分钟。
将幻灯片转移到装有 70% 乙醇的罐子中两分钟。在此之后,用蒸馏水在一个新的Coplin罐中短暂冲洗幻灯片。首先,使用纸巾擦去幻灯片上或组织周围的任何多余的溶液。
将幻灯片放在与室温和湿度相匹配的条件下。在每张幻灯片中加入几滴高锰酸钾以氧化它们,确保添加的体积足以覆盖每张幻灯片上的组织部分。五分钟后,用科普林罐中的蒸馏水冲洗氧化滑梯,重复冲洗两到三次,每次冲洗使用一罐新水。
组织应具有可观察到的棕色。现在,在每张幻灯片中加入几滴草酸来漂白它们,确保添加的体积足以覆盖每张幻灯片上的组织部分。五分钟后,用蒸馏水冲洗漂白的滑梯,重复冲洗两到三次,每次冲洗使用一罐新水。
用 95% 的酒精短暂清洗滑梯。将洗涤的幻灯片浸入弹性液中8至24小时。然后直接将幻灯片浸入 95%乙醇中一到两分钟,使每个组织部分都分好。
用蒸馏水完全冲洗幻灯片。从微观上检查蓝黑色弹性纤维染色和灰色背景。将幻灯片在 van Gieson 溶液中对进行一分钟对,确保使用的体积足以完全覆盖每张幻灯片上的组织部分。
接下来,迅速将95%乙醇滴到组织切片上几秒钟,使每个组织部分都分好。首先,将幻灯片浸入 95% 酒精中五分钟,快速脱水。将幻灯片转移到 100%酒精五分钟,以继续脱水。
然后,将幻灯片转移到新鲜 100% 酒精中,再多喝五分钟。将幻灯片浸入两种不同的二甲苯变化中,每次浸入持续三分钟。在此之后,在幻灯片中加入一滴树脂安装介质,并在顶部放置盖滑。
使用显微镜观察文本协议中概述的组织部分。在这项研究中,弹性染色被用于视觉识别亚性弹性层。一个具有代表性的成功染色表明,在弹性蛋白溶液染色后,但在范吉森的反染色之前,弹性层可以清楚地看到以丝片的形式染色蓝黑色。
它们靠近血清间血细胞,弹性层和肿瘤细胞之间仍有一定距离。典型的弹性染色与范吉森的反面表明,弹性层是染色的蓝黑色。胶原纤维染成红色,肌肉纤维和癌细胞染成黄色。
穿透弹性层的癌细胞被认为是弹性层侵入。而癌细胞接近,但没有入侵弹性层被认为是弹性层非入侵。如果染色显示多层弹性层重复结构,且肿瘤不侵入最外层,则应诊断样品为弹性层非侵入。
弹性蛋白溶液是一个,染色时间相对长,所以最好将弹性蛋白染色的所有幻灯片浸入密封容器中。弹性蛋白溶液染色后,应用蒸馏水冲走。