Diese Methode hilft zu bestimmen, ob Tumorzelle über elastische Lamina bei pT3 Magenkrebs eingedrungen ist. elastische Laminaerosion im prognostischen Bild für pT3 Magenkrebs. Der Hauptvorteil dieser Technik ist, dass es bequem ist, und genaue Ansatz, um die elastische Lamina zu identifizieren, die es für Pathologe präziser macht, zu beurteilen, ob Tumorzellen über elastische Lamina bei pT3 Magenkrebs eindringen.
Diese Technik kann auf eine pathologische Teststadium Diagnose von Lungenkrebs und Krebs. Diese Methode könnte auch auf das TNM-Stadiumsystem von Lungenkrebs und Kolorektalkrebs angewendet werden. Tauchen Sie zunächst die Dias in Xylol für 10 Minuten in ein Coplin-Glas ein.
Entfernen Sie die Dias aus diesem Glas und tauchen Sie sie für weitere 10 Minuten in frisches Xylol in ein anderes Coplin-Glas ein. Tauchen Sie die Dias in 100%Ethanol für fünf Minuten, und dann übertragen Sie sie auf frische 100%Ethanol für weitere fünf Minuten. Als nächstes tauchen Sie die Dias für zwei Minuten in 95% Ethanol ein.
Die Dias für zwei Minuten in ein Glas mit 70% Ethanol geben. Danach die Dias kurz mit destilliertem Wasser in einem neuen Coplin-Glas abspülen. Verwenden Sie zunächst Tissuepapier, um überschüssige Lösung auf dem Dia oder um das Gewebe herum abzuwischen.
Stellen Sie die Dias unter Bedingungen, die der Raumtemperatur und -feuchtigkeit entsprechen. Fügen Sie ein paar Tropfen Kaliumpermanganat zu jedem Dia, um sie zu oxidieren, um sicherzustellen, dass das Volumen hinzugefügt ist genug, um den Gewebeabschnitt auf jedem Dia zu decken. Nach fünf Minuten die oxidierten Dias mit destilliertem Wasser in Coplin-Gläsern abspülen, die Spülung zwei- bis dreimal wiederholen und für jede Spülung ein neues Glas Wasser verwenden.
Das Gewebe sollte eine beobachtbare braune Farbe haben. Fügen Sie nun ein paar Tropfen Oxalsäure zu jedem Dia hinzu, um sie zu bleichen, um sicherzustellen, dass das hinzugefügte Volumen ausreicht, um den Gewebeabschnitt auf jedem Dia zu bedecken. Nach fünf Minuten die gebleichten Dias mit destilliertem Wasser abspülen, die Spülung zwei- bis dreimal wiederholen und für jede Spülung ein neues Glas Wasser verwenden.
Waschen Sie die Dias kurz in 95% Alkohol. Die gewaschenen Dias acht bis 24 Stunden in Elastinlösung eintauchen. Dann tauchen Sie die Dias direkt in 95%Ethanol für ein bis zwei Minuten, um jeden Gewebeabschnitt gut zu unterscheiden.
Spülen Sie die Dias vollständig mit destilliertem Wasser. Prüfen Sie mikroskopisch auf die blau-schwarze elastische Faserfärbung und den grauen Hintergrund. Gegendiebedien endieldien die Dias in einer van Gieson-Lösung für eine Minute, um sicherzustellen, dass das verwendete Volumen ausreicht, um den Gewebeabschnitt auf jedem Dia vollständig abzudecken.
Als nächstes, schnell fallen 95%Ethanol auf die Gewebescheiben für ein paar Sekunden, um jeden Gewebeabschnitt gut zu unterscheiden. Um zu beginnen, tauchen Sie die Rutschen in 95% Alkohol für fünf Minuten, um sie schnell zu dehydrieren. Übertragen Sie die Dias auf 100% Alkohol für fünf Minuten, um die Dehydrierung fortzusetzen.
Dann übertragen Sie die Rutschen auf frischen 100%Alkohol für fünf zusätzliche Minuten. Tauchen Sie die Dias in zwei verschiedene Veränderungen von Xylol ein, wobei jedes Eintauchen drei Minuten dauert. Danach fügen Sie einen Tropfen harziges Montagemedium auf die Folie und legen Sie einen Deckelschlupf darüber.
Beobachten Sie mit einem Mikroskop die im Textprotokoll beschriebenen Gewebeabschnitte. In dieser Studie wird elastische Färbung verwendet, um subserosale elastische Lamina visuell zu identifizieren. Eine repräsentative erfolgreiche Färbung zeigt, dass nach der Elastinlösung Färbung, aber vor van Giesons Gegenfärbung, die elastische Lamina deutlich in Form von Filamenten zu sehen ist, die blau-schwarz gefärbt sind.
Sie sind in der Nähe der serosalen mesotheliale Zellen, und eine gewisse Entfernung ist immer noch zwischen der elastischen Lamina und den Tumorzellen zu sehen. Typische elastische Färbungen mit van Giesons Gegenfleck zeigen, dass die elastische Lamina blau-schwarz gefärbt ist. Die Kollagenfasern sind rot gefärbt, und die Muskelfasern und Krebszellen sind gelb gefärbt.
Krebszellen, die in die elastische Lamina eindringen, gelten als elastische Laminainvasion. Während Krebszellen in der Nähe, aber nicht eindringen die elastische Lamina gilt als elastische Lamina Nicht-Invasion. Wenn die Färbung eine sich wiederholende Struktur zeigt, die auf mehrere Schichten elastischer Lamina hindeutet, und der Tumor nicht über die äußerste Schicht hinaus eindringt, sollte die Probe als elastische Lamina-Nicht-Invasion diagnostiziert werden.
Elastin-Lösung ist eine und die Färbung Sehnseine ist relativ lang, so ist es am besten, alle Dias mit der Elastin Färbung in einem versiegelten Behälter eintauchen. Nach der Elastinlösung Färbung, sollte mit destilliertem Wasser weggewaschen werden.
