この射出精度の検証と評価の方法は、一貫性があり再現性のある尾静脈注射を促進するための重要な品質管理ステップと動物研究の重要な段階を提供します。実施直後に蛍光イメージングによる注射を評価すると、目的の量で血液循環に入ったかどうかを判断できるという利点があります。尾静脈注射は、視覚的なデモンストレーションの恩恵を受け、注射部位からの注入された薬剤のクリアランスを観察することによって強化することができる実践的な操作である。
ムザミル・サレムとの手順を実証することは、私の研究室の博士課程の学生ブルック・ディールです。尾静脈注射の前に、麻酔動物を近赤外線蛍光画像装置に横に置き、尾部に注射部位を露出させ、蛍光基線を確立する。画像が取得された後、動物を起こしやすい位置の外科ベンチに移し、暖かい水に浸すことによって尾脈管を拡張する。
約1分後、側面が見える方向になるように尾を向ける。横尾静脈は色が濃く見えるはずです。アルコールパッドで静脈の長さを殺菌します。
尾を横に配置し、25~27ゲージの針ベベル側を上方に挿入し、持ち上げられた尾翼側に平行に、尾の遠位尾骨椎領域から始まり、必要に応じて適切な針の配置が失敗した場合は、より近位に移動します。針の挿入に成功すると、針の縁に血液フラッシュバックが観察されるべきである。フラッシュバックが見えない場合は、針先を尾から取り外さずにゆっくりと動かして静脈挿入を見つけます。
針が適切に配置されたら、注射用材料を注射器を針の縁に挿入し、プランジャーを押して内容物を静脈に送達します。あるいは、血流インジケータを有するカテーテルを使用することができる。カテーテルのインジケータセグメントの迅速なフラッシュバックは、正しい配置に従って観察されます。
わずかな背圧を使用して、注射器に血液を引き込み、注入する前に血管内の適切な配置を確認することができます。繰り返しますが、抵抗は感じられます。すべての材料が配達されたら、針を取り除き、凝固を確実にするために少なくとも1分間、滅菌ガーゼで圧力を加えます。
ペンで注射部位をマークし、取得した画像の白色光チャンネルに注射部位が表示されるようにします。注射部位での蛍光後シグナルを評価するために、近赤外線画像化段階に動物を戻し、その側面に動物を向けて、画像化のために横尾に注射部位を露出させる。蛍光のベースラインおよび注射後の注射部位を分析するために、尾静脈注射後の蛍光領域の前後の注射部位近くの尾部の近くの近赤外イメージャーソフトウェアに関心のある領域を描くことができる。
正常に配信された注射は、注射の前後にほぼ同じレベルの蛍光シグナルを示します。尾の長さ全体に蛍光が見える画像は許容されず、分析から除去する必要があります。任意の行動、外科的、またはエクスビボ分子技術は、この手順に従って通常通り行うことができる。
この技術は、尾静脈注射の品質管理を提供し、適切に注射された薬剤の静脈血流による速いクリアランスを明らかにし、静脈が見逃された場合は注射部位でプールする。この方法で使用される試薬は危険ではありませんが、蛍光ベースの薬剤が危険物と組み込まれている場合は適切な予防措置を講じる必要があります。
