Name: repeated blood collection from tail vein of non-anesthetized rats with a vacuum blood collection system
Uploaded: 2017-12-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 12 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System at JoVE.com

著者が確認するあります。

すべてのプロシージャは、動物ケア委員会の華中大学の科学と技術 (武漢、中国) に同済医学大学評議会によって承認されました。原稿が到着に従って準備された (動物資源研究領域: In Vivo実験のレポート) のガイドライン6。
1. 畜産
<ol><li>Sprague-dawley (SD) ラットを使用 (n = 20、男性 10 例、8 週齢、261 に 291 g の重量を量ることを意味 = 272.85 ±9.07 g) 実験動物センターの華中科学技術大学から、ケアとの使用のためのガイドに従いラットを維持実験動物、米国国立衛生研究所 (NIH 文書 No.85-23, 1996 改訂) 刊</li>
	<li>ハウス食品や飲料水への無料アクセスと標準的な条件の下で。保つ木シェービング 530 cm2ケージでラットは寝具します。各ケージに 2 匹のラットを家します。部屋の環境 (マイクロ分離または換気ケージング) にすべてのケージを開けてください。</li>
	<li>実験的プロトコルに携わるスタッフは定期的にラットを扱うことを確認します。</li>
	<li>部屋の温度 21 ° C と 23 ° c. の間を維持します。通常塩の食事料金を与える (0.3 %nacl) 研究中。</li>
</ol>2. 採血手順
注: 真空の血のコレクション システム二重先の尖った針 [22 G (0.7 mm × 25 mm)] のプラスチック製のホルダーとゴム栓 (図 1) と真空管 (2 mL) のシリーズで構成されます。
<ol><li>プラスチック製の拘束ホルダーでラットを置き、目に見える汚れや糞便を除去する (20-30 ° C) ぬるま湯で尻尾を洗います。アシスタントは、拡張の位置に尻尾を保持している、70% エタノール、尾を拭き、オフに静脈にガーゼで拭き取ります。</li>
	<li>22 G 蝶針の先端を挿入位置外側尾静脈 (5 mm 程度) のいずれか (図 2) 約 20 ° の角度で尾の先端から約 2-3 cm。真空の血のコレクションの管 (図 3) に蝶針のゴムの端を挿入することによって真空のコレクションの管に血液を収集します。 注: 最大コレクション血液量は 1.2 mL7です。</li>
	<li>血のコレクションの後針を除去し、血液の流れを停止する 15 30 s のガーゼで穿刺部位を軽く押さえます。プラスチック製の拘束ホルダーからラットをリリースし、そのケージにラットを返します。</li>
	<li>血血しょうを収集するために抗凝固剤として EDTA を含むチューブを使用します。優しく血液抗凝固剤を混合し、氷の上、サンプルに縦置きに数回チューブを反転します。</li>
	<li>血漿または血清を分離する 10 分間 2,000 x g で冷却遠心分離機の血液サンプル コレクション チューブを遠心します。</li>
	<li>血漿/血清、赤と白の血液細胞層を邪魔しないように世話を抽出します。血清を収集するには、抗凝固剤なしのチューブを使用します。サンプルの両方のタイプは、すぐに使用または 1 年間-80 ° C で保存できます。 注: 成功した血のコレクションは、毎回 1.2 mL の血液を得ることとして定義されました。最大穿刺時間が設定された 3 つの試験に第 3 穿刺後総血液量は 1.2 mL より低いそれを定義した場合失敗した血のコレクションとして。サンプリング期間は、尾静脈穿刺から採血後蝶針の除去を開始します。</li>
	<li>
72 週間以内に 2 回血を収集します。
	<ol>
<li>テストし、この手法の有効性を確認この血液コレクション プロトコルを実行する前に 2 h の 2 つの医学生 (初心者) を訓練します。20 ラットを使用し、10 ラット 2 経験豊富な仲間 (実験群) と 2 の医学生 (初心者グループ) によって 10 のラットから採血します。</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. 統計解析
<ol><li>平均値 ± 標準偏差としてデータを表現し、SPSS 統計 17 で分析します。Α 値 0.05 選ばれた、したがって p < 0.05 は、統計的に有意と考えられていた。</li>
</ol>

<ol>
	<li>Brown, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+collection+from+the+tail+of+a+rat.">Blood collection from the tail of a rat.</a> Lab Anim (NY). 35 (8), 24-25 (2006).</li><li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Staszyk, C., Bohnet, W., Gasse, H., Hackbarth, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+vessels+of+the+rat+tail:+a+histological+re-examination+with+respect+to+blood+vessel+puncture+methods.">Blood vessels of the rat tail: a histological re-examination with respect to blood vessel puncture methods.</a> Lab Anim. 37 (2), 121-125 (2003).</li><li>Lee, G., Goosens, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sampling+blood+from+the+lateral+tail+vein+of+the+rat.">Sampling blood from the lateral tail vein of the rat.</a> J. Vis. Exp. (99), (2015).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> WHO Guidelines on Drawing Blood: Best Practices in Phlebotomy WHO Guidelines Approved by the Guidelines Review Committee. , (2010).</li><li>Kilkenny, C., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+bioscience+research+reporting:+ARRIVE-ing+at+a+solution.">Improving bioscience research reporting: ARRIVE-ing at a solution.</a> Lab Anim. 44 (4), 377-378 (2010).</li><li>Diehl, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+good+practice+guide+to+the+administration+of+substances+and+removal+of+blood,+including+routes+and+volumes.">A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes.</a> J Appl Toxicol. 21 (1), 15-23 (2001).</li><li>Eder, J. M., Cutter, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+device+for+collecting+cord+blood.">A new device for collecting cord blood.</a> Obstet Gynecol. 86 (5), 850-852 (1995).</li><li>Reynolds, B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+a+new+device+for+blood+sampling+in+cats+with+a+vacuum+tube+collection+system+-+plasma+biochemistry,+haematology+and+practical+usage+assessment.">Comparison of a new device for blood sampling in cats with a vacuum tube collection system - plasma biochemistry, haematology and practical usage assessment.</a> J Feline Med Surg. 9 (5), 382-386 (2007).</li><li>Wiwanitkit, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+blood+specimens+from+plain+and+gel+vacuum+blood+collection+tubes.">Comparison of blood specimens from plain and gel vacuum blood collection tubes.</a> J Med Assoc Thai. 84 (5), 723-726 (2001).</li><li>Wollowitz, A., Bijur, P. E., Esses, D., John Gallagher, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+butterfly+needles+to+draw+blood+is+independently+associated+with+marked+reduction+in+hemolysis+compared+to+intravenous+catheter.">Use of butterfly needles to draw blood is independently associated with marked reduction in hemolysis compared to intravenous catheter.</a> Acad Emerg Med. 20 (11), 1151-1155 (2013).</li></ol>

著者がある何も開示するには

本報告では、ラットに学ぶ簡単血液収集方法について説明します。私たちの結果は、このメソッドが繰り返しラットから大量の血液を収集するために可能であります。また、短期的な学習曲線を持つこのメソッドを容易に習得できます。この手順は、非麻酔のラットにおいて実行することができます、だけ動物に最小限のストレスの原因します。
血液は、ラットのさまざまな場所から収集できます。尾静脈血サンプリング4の真向かいにあります。しかし、それは常にラットの薄いと低血流尾静脈から十分な血液量を得ることは容易。真空の血のコレクションのシステムは、日常臨床で患者から血液サンプルを収集するため通常用いられます。この真空の血のコレクション システムは長い時間8,9,10の患者および研究の動物の使用されています。このシステムは、シリコン コーティングされたインナー チューブ壁と蝶針、真空採血管で構成されます。真空負圧の原理に基づいていたでき、血液汚染と溶血11のチャンスを減らす効果もある血を収集、リスクなしの連続的に描画できます。カテーテル内の血液サンプルの体積は約 0.3 mL です。尾静脈から針を撤回した後真空による収集の真空管にカテーテルでブロックされて血液が流れます。このメソッドも小さい穿刺針の使用で 100 g 以下の重量を量るラットから採血のため可能です。
この血の収集方法には、いくつかの利点があります。この手順だけのラットに最小限の損傷の原因、血のコレクションには、麻酔薬を使用せず実行できる従って血液サンプルに及ぼすストレス応答と麻酔薬の影響を避けることができます。我々 の観察はラットはプロシージャの間にプラスチック製の拘束ホルダーで静かだったこれらの実験中に死亡がなかったことを示した。第二に、繰り返し採血ごとに 1 つまたは 2 日間は、様々 な研究目的のため適切なボリュームとは、血液の頻繁にサンプリングができます。最後に、このメソッドは、簡単に学ぶことは、簡単に習得された初心者によるショート (2 h) 学習期間の後と同様の成功率と本報告では実験と初心者のためのグループ間の穿刺時間によって示されるように。以前のレポートは、李らはラット4の外側尾静脈からの血液をサンプリングする同様の方法を示した。本手法は、李らによって報告されたより簡単4我々 は直接尾静脈とチューブのもう一方の端に穿刺針を挿入に直結真空管採血、余分な注射器の使用と血の手動の吸引との必要なしの ' ミルクing' 静脈血流を促進します。このクローズド システム採血血液汚染の可能性が減ります。プラスチック拘束ホルダーの使用はまたラットにストレスを軽減、尾の固定が容易になります。
次の 2 つの手順は、このメソッドの成功のアプリケーションのため重要です。1) 延長尾と尾輪の動きを避けるため2) ゆっくり静脈穿刺を避けるために、穿刺針を静脈において 20 ° の角度で静脈を穿刺します。
結論としては、ラットで採用された真空採血コレクション メソッドは、実行可能な安全で簡単に実践です。このメソッドは、非麻酔のラットから得られた十分な血液量と血の頻繁なサンプリングをできます。

ラットから採血は、さまざまな実験的研究に必要です。ラットから採血の技術、心、レトロ軌道神経叢、頚静脈、伏在静脈、尻尾の血管、頚動脈、腹部大動脈と上大静脈の穿刺があります。麻酔1,2(大伏在静脈と尻尾の血管穿刺) を除くほとんどのテクニックが必要です。ラットの尾の静脈は定期的に採血、血管注射の穴を開けます。暖かい水でテールを治療後血管は拡張そして操作に適したラットが麻酔3時でさえ。
実験小動物2の血液サンプルを取得する新しい、改良された技術の開発、にもかかわらず常に小動物からサンプリングするときに十分な血液を得やすくないです。ラットの尾静脈血サンプリング4の真向かいにあります。ただし、尾静脈が薄く、従ってそれを穴をあけることは難しい、その低血流による十分な血液を得るため長い時間がかかるでしょう。採血吸引チューブ システムを介して、日常臨床で典型的な方法です。このクローズド システムにより採血の血への直接暴露のリスクを低減し、単一の穿刺5から複数のサンプルを容易にしました。本報告では、吸引チューブを用いた非麻酔下ラットにおける単純な尾静脈採血法について説明します。この方法は簡単にマスターし、大量のラットにおける繰り返し血液を取得する使用できます。

<table><tbody><tr><td>a double-pointed needle</td><td>Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China</td><td>22G&amp;nbsp;</td><td>(0.7&amp;times;25mm)</td></tr><tr><td>vacuum tubes</td><td>Wuhan Zhi Yuan, medical science and technology co., LTD, China</td><td>2 ml</td><td></td></tr><tr><td>rat restraining holder&amp;nbsp;</td><td>Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China</td><td>250g rat hoder model</td><td></td></tr><tr><td>normal salt diet for rats</td><td></td><td></td><td>Rats received a normal salt diet (0.3% NaCl) throughout the study</td></tr><tr><td>SPSS software for statistical analysis</td><td>SPSS Inc,&amp;nbsp; Chicago; USA&amp;nbsp;</td><td>Version 17.0.&amp;nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

repeated blood collection from tail vein of non-anesthetized rats with a vacuum blood collection system

血液は、サンプリング場所の数のラットから収集できます。例えば、尾静脈採血の真向かいにあります。ただし、尾静脈薄いは穿刺するは難しいことがあります。さらに、尾静脈低血流には、十分な血液を取得するサンプリング間隔の長い時間が必要です。本報告では、単純な血液サンプリング法、真空採血の収集方法、通常非麻酔のラットに使用ここで、患者から血液サンプルを取得するために使用について説明します。22 G 蝶針の先端が約 20 °、および血の角度で尻尾の先端から約 2-3 cm は va に蝶針のゴムの端を挿入して真空チューブで収集された外側尾静脈のいずれかに挿入されました。cuum 採血管。現在の実験では、実験群は 95% と 90% 初心者グループの成功率であったことを示します。成功率穿刺時間が 2 つのグループ間で類似し。サンプリング期間であった初心者グループと比較実験群で有意に短かった。結論としては、この真空採血方法非麻酔下ラットの尾静脈からの連続採血が可能かつ簡単に学ぶこと、他の信頼性の高い代替従来使用血液サンプリング技術となる可能性があります。ラット。

サンプリング期間、体の質量、および 2 つのグループの採血量 血は、各グループで 2 週間以内に 2 回 10 ラット (男性 5) から採取しました。両方のグループの平均体重が似ていた (272.00 ±9.66 g と 273.70 ±8.87 g)。サンプリング時間は初心者グループと比較実験群で有意に短かった (3.28 ±0.83 分、p 対 2.77 ±0.53 分 < 0.05) (表 1)。
成功率し、2 つのグループの回の穿刺 成功率は 95% (19/20) 実験群と 90% (18/20) 初心者のためのグループ (p > 0.05)。穿刺時間は大幅に異なる 2 つのグループの間なかった (1.85 ± 0.75 分、p 対 1.50 ±0.61 分 > 0.05) (表 2)。この方法は簡単に学ぶこと、そしてトレーニング 2 時間後技術を習得できることが示唆されました。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig1.jpg"> 図 1:2 mL 真空採血管 (左); 22 G 蝶針 (センター) プラスチック製の拘束ホルダー (右).<a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig2.jpg"> 図 2:位置に外側尾静脈 (5 mm 程度) に針の先端が挿入されたおおよそ 20 ° の角度で尾の先端から約 2-3 cm 。<a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig3.jpg"> 図 3:成功した穿刺します。<a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig3large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td colspan="5">実験群</td>
			<td></td>
			<td colspan="5">初心者のためのグループ</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>性別</td>
			<td>体重 (g)</td>
			<td>収集した血液量 (mL)</td>
			<td>サンプリング時間 (分)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>性別</td>
			<td>体重 (g)</td>
			<td>収集した血液量 (mL)</td>
			<td>サンプリング時間 (分)</td>
		</tr>
<tr>
<td>E1 1</td>
			<td>男性</td>
			<td>291</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.12</td>
			<td></td>
			<td>B1 1</td>
			<td>男性</td>
			<td>282</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.18</td>
		</tr>
<tr>
<td>E1 2</td>
			<td>男性</td>
			<td>291</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.73</td>
			<td></td>
			<td>B1 2</td>
			<td>男性</td>
			<td>282</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.18</td>
		</tr>
<tr>
<td>E2-1</td>
			<td>男性</td>
			<td>276</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.3</td>
			<td></td>
			<td>B2 1</td>
			<td>男性</td>
			<td>264</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.73</td>
		</tr>
<tr>
<td>E2 2</td>
			<td>男性</td>
			<td>276</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.37</td>
			<td></td>
			<td>B2 2</td>
			<td>男性</td>
			<td>264</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.47</td>
		</tr>
<tr>
<td>E3-1</td>
			<td>男性</td>
			<td>267</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.73</td>
			<td></td>
			<td>B3 1</td>
			<td>男性</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.52</td>
		</tr>
<tr>
<td>E3 2</td>
			<td>男性</td>
			<td>267</td>
			<td>1.0</td>
			<td>3.88</td>
			<td></td>
			<td>B3 2</td>
			<td>男性</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.53</td>
		</tr>
<tr>
<td>E4-1</td>
			<td>男性</td>
			<td>263</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.41</td>
			<td></td>
			<td>B4 1</td>
			<td>男性</td>
			<td>289</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.32</td>
		</tr>
<tr>
<td>E4 2</td>
			<td>男性</td>
			<td>263</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.52</td>
			<td></td>
			<td>B4 2</td>
			<td>男性</td>
			<td>289</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.62</td>
		</tr>
<tr>
<td>E5-1</td>
			<td>男性</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.61</td>
			<td></td>
			<td>B5 1</td>
			<td>男性</td>
			<td>277</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.48</td>
		</tr>
<tr>
<td>E5 2</td>
			<td>男性</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.42</td>
			<td></td>
			<td>B5 2</td>
			<td>男性</td>
			<td>277</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.12</td>
		</tr>
<tr>
<td>E6-1</td>
			<td>女性</td>
			<td>285</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.33</td>
			<td></td>
			<td>B6 1</td>
			<td>女性</td>
			<td>274</td>
			<td>0.9</td>
			<td>4.87</td>
		</tr>
<tr>
<td>E6-2</td>
			<td>女性</td>
			<td>285</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.03</td>
			<td></td>
			<td>B6 2</td>
			<td>女性</td>
			<td>274</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.37</td>
		</tr>
<tr>
<td>E7-1</td>
			<td>女性</td>
			<td>271</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.82</td>
			<td></td>
			<td>B7 1</td>
			<td>女性</td>
			<td>268</td>
			<td>1.0</td>
			<td>3.93</td>
		</tr>
<tr>
<td>E7-2</td>
			<td>女性</td>
			<td>271</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.42</td>
			<td></td>
			<td>B7 2</td>
			<td>女性</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.82</td>
		</tr>
<tr>
<td>E8-1</td>
			<td>女性</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>1.93</td>
			<td></td>
			<td>B8-1</td>
			<td>女性</td>
			<td>262</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.07</td>
		</tr>
<tr>
<td>E8-2</td>
			<td>女性</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.05</td>
			<td></td>
			<td>B8 2</td>
			<td>女性</td>
			<td>262</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.67</td>
		</tr>
<tr>
<td>E9-1</td>
			<td>女性</td>
			<td>273</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.52</td>
			<td></td>
			<td>B9 1</td>
			<td>女性</td>
			<td>281</td>
			<td>1.2</td>
			<td>4.38</td>
		</tr>
<tr>
<td>E9-2</td>
			<td>女性</td>
			<td>273</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.17</td>
			<td></td>
			<td>B9-2</td>
			<td>女性</td>
			<td>281</td>
			<td>1.2</td>
			<td>4.57</td>
		</tr>
<tr>
<td>E10 1</td>
			<td>女性</td>
			<td>261</td>
			<td>1.2</td>
			<td>1.82</td>
			<td></td>
			<td>B10 1</td>
			<td>女性</td>
			<td>275</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.53</td>
		</tr>
<tr>
<td>E10 2</td>
			<td>女性</td>
			<td>261</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.25</td>
			<td></td>
			<td>B10 2</td>
			<td>女性</td>
			<td>275</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.28</td>
		</tr>
<tr>
<td>平均</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>2.77</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>3.28</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">最初の血のコレクションの実験群ラットの en-1: シリアル番号。</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">2 回目の採血の実験群ラットの en-2: シリアル番号。</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">最初の血のコレクションの初心者グループのラットの Bn-1: シリアル番号。</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">2 回目の採血の初心者グループのラットの Bn-2: シリアル番号。</td>
		</tr>
</tbody></table>表 1: 血の結果は実験グループと初心者グループに収集されます。
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td>血のコレクションの時間</td>
			<td>平均穿刺回</td>
			<td>時間あける</td>
			<td>2 回を穿刺します。</td>
			<td>3 回を穿刺します。</td>
			<td>失敗しました</td>
			<td>成功率</td>
		</tr>
<tr>
<td>実験群</td>
			<td>20</td>
			<td>1.50 ±0.61</td>
			<td>11</td>
			<td>8</td>
			<td>0</td>
			<td>1</td>
			<td>95%</td>
		</tr>
<tr>
<td>初心者のためのグループ</td>
			<td>20</td>
			<td>1.85 ± 0.75</td>
			<td>7</td>
			<td>9</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
			<td>90%</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">1 つの時間穿刺: ラット最初の穿刺後の成功の血のコレクションの数</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">穿刺: 成功した血のコレクションに 2 番目の穿刺後ラットの数の 2 倍します。</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">3 回穿刺: ラット 3 穿刺後の成功の血のコレクションの数</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="5">失敗しました: ラットの数 3 穿刺後採血に失敗しました</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
</tbody></table>表 2 穿刺時間と実験群・初心者グループの成功率の比較。

Watch this Scientific Journal Video about Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System at JoVE.com

Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

ここでは、吸引チューブを用いた非麻酔下ラットの単純な尾静脈採血法について述べる。このメソッドは、血液への直接暴露のリスクを低減し、簡単に単一の穿刺から複数のサンプルを取ってします。

真空の血のコレクション システムと非麻酔下ラットの尾静脈からの採血を繰り返す

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

repeated-blood-collection-from-tail-vein-non-anesthetized-rats-with

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

35.6K ビュー.  Jianghan University. ここでは、吸引チューブを用いた非麻酔下ラットの単純な尾静脈採血法について述べる。このメソッドは、血液への直接暴露のリスクを低減し、簡単に単一の穿刺から複数のサンプルを取ってします。

ビデオ: Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

Collection Protocol for Human Pancreas

This dissection and sampling procedure was developed for the Network for Pancreatic Organ Donors with Diabetes (nPOD) program to standardize preparation of pancreas recovered from cadaveric organ donors. The pancreas is divided into 3 main regions (head, body, tail) followed by serial transverse sections throughout the medial to lateral axis. Alternating sections are used for fixed paraffin and fresh frozen blocks and remnant samples are minced for snap frozen sample preparations, either with or without RNAse inhibitors, for DNA, RNA, or protein isolation. The overall goal of the pancreas dissection procedure is to sample the entire pancreas while maintaining anatomical orientation.
Endocrine cell heterogeneity in terms of islet composition, size, and numbers is reported for human islets compared to rodent islets 1. The majority of human islets from the pancreas head, body and tail regions are composed of insulin-containing &beta;-cells followed by lower proportions of glucagon-containing &alpha;-cells and somatostatin-containing &delta;-cells. Pancreatic polypeptide-containing PP cells and ghrelin-containing epsilon cells are also present but in small numbers. In contrast, the uncinate region contains islets that are primarily composed of pancreatic polypeptide-containing PP cells 2. These regional islet variations arise from developmental differences. The pancreas develops from the ventral and dorsal pancreatic buds in the foregut and after rotation of the stomach and duodenum, the ventral lobe moves and fuses with the dorsal 3. The ventral lobe forms the posterior portion of the head including the uncinate process while the dorsal lobe gives rise to the rest of the organ. Regional pancreatic variation is also reported with the tail region having higher islet density compared to other regions and the dorsal lobe-derived components undergoing selective atrophy in type 1 diabetes4,5.
Additional organs and tissues are often recovered from the organ donors and include pancreatic lymph nodes, spleen and non-pancreatic lymph nodes. These samples are recovered with similar formats as for the pancreas with the addition of isolation of cryopreserved cells. When the proximal duodenum is included with the pancreas, duodenal mucosa may be collected for paraffin and frozen blocks and minced snap frozen preparations.

This video demonstrates a dissection procedure for processing human pancreas into multiple storage formats. Anatomical orientation is maintained throughout the pancreatic regions to allow definition of regional islet composition and density.

ヒト膵臓の収集プロトコル

This dissection and sampling procedure was developed for the Network for Pancreatic Organ Donors with Diabetes (nPOD) program to standardize preparation ...

医学

Modified Blood Collection from Tail Veins of Non-anesthetized Mice with a Vacuum Blood Collection System and Eyeglass Magnifier

Blood sample collection is the basis of experimental animal research. It is of importance to obtain adequate blood samples for various research purposes. The tail veins of mice are small, and it is sometimes difficult to obtain the required blood volume by conventional puncture methods. This study investigates the superiority of repeated blood sample collection from tail veins of mice through use of a vacuum blood collection system and eyeglass magnifier (experimental group) compared to conventional blood sampling methods (conventional group), performed by beginners and experts, respectively. With the help of an eyeglass magnifier, a butterfly needle tip is inserted into the tail vein of each mouse in the experimental group. When the vein is penetrated successfully, a blood sample is collected in the vacuum collection tube by insertion of the rubber end of a butterfly needle into the vacuum blood collection tube. The plunger is then used to collect blood without the help of the eyeglass magnifier in the conventional group. Success rates of blood sample collection by the beginners and experts were shown to be 70% vs. 100% (p &#60; 0.01) in the experimental group and 35% vs. 85% (p &#60; 0.01) in the conventional group. For both beginners and experts, puncture times required for obtaining required blood sample were significantly lower in the experimental group compared to the conventional group (2.40 &#177; 0.75 vs. 2.90 &#177; 0.31, p &#60; 0.05; 1.15 &#177; 0.37 vs. 1.55 &#177; 0.76, p &#60; 0.05). In conclusion, the presented blood sampling technique is feasible and easy to practice and enables frequent sampling of adequate blood volumes from non-anesthetized mice.&#160;

This study reports blood sampling from tail vein in mice using a vacuum extraction tube system with eyeglass magnifier. Our method is easy to practice and could be used for repeat blood sampling in mice.

真空の血のコレクションのシステムと眼鏡拡大鏡非麻酔下マウスの尾静脈から変更された血のコレクション

Blood sample collection is the basis of experimental animal research. It is of importance to obtain adequate blood samples for various research purposes. ...

行動学

Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful compared to other more aggressive methods such as retro-orbital plexus sample collection. However, this blood collection method is sometimes limited by an unsatisfactory success rate. Here, we introduce a method for blood collection through the subclavian vein puncture. The subclavian vein is located just under the clavicle and this vein is large enough to fulfill the volume requirements of blood collection. Our results show that this method is safe and applicable for blood collection sampling with the required blood volume. Blood collection through the subclavian vein puncture could serve as an alternative blood collection method in case of failed tail vein blood sampling in rats.

Here, we present a protocol to collect blood samples from the rat subclavian vein.

ラットの血液サンプル コレクションの代替方法として鎖骨下静脈穿刺

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful ...

Sampling Blood from the Lateral Tail Vein of the Rat

Blood samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure targets of interest, including hormones, immune factors, growth factors, proteins, and glucose, yet the composition of the blood is dynamically regulated and easily perturbed. One factor that can change the blood composition is the stress response triggered by the sampling procedure, which can contribute to variability in the measures of interest. Here we describe a procedure for blood sampling from the lateral tail vein in the rat. This procedure offers significant advantages over other more commonly used techniques. It permits rapid sampling with minimal pain or invasiveness, without anesthesia or analgesia. Additionally, it can be used to obtain large volume samples (upwards of 1 ml in some rats), and it may be used repeatedly across experimental days. By minimizing the stress response and pain resulting from blood sampling, measures can more accurately reflect the true basal state of the animal, with minimal influence from the sampling procedure itself.

Blood samples are useful for assessing biomarkers of physiological states or disease in vivo. Here we describe the methodology to sample blood from the lateral tail vein in the rat. This method provides rapid samples with minimal pain and invasiveness.

ラットの外側尾静脈から血液をサンプリング

Blood samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure targets of interest, including hormones, immune factors, growth factors, ...

生物学

脳波記録の同時実施によるラットからの脳脊髄液および血液の回収

Sampling Cerebrospinal Fluid and Blood from Lateral Tail Vein in Rats During EEG Recordings

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure molecules of interest, such as hormones, growth factors, proteins, or small non-coding RNAs. A specific example is the sampling of biological liquids in the research of biomarkers for epilepsy. In these studies, it is desirable to compare the levels of molecules in cerebrospinal fluid (CSF) and in plasma, by withdrawing CSF and plasma in parallel and considering the time distance of the sampling from and to seizures. The combined CSF and plasma sampling, coupled with video-EEG monitoring in epileptic animals, is a promising approach for the validation of putative diagnostic and prognostic biomarkers. Here, a procedure of combined CSF withdrawal from cisterna magna and blood sampling from the lateral tail vein in epileptic rats that are continuously video-EEG monitored is described. This procedure offers significant advantages over other commonly used techniques. It permits rapid sampling with minimal pain or invasiveness, and reduced time of anesthesia. Additionally, it can be used to obtain CSF and plasma samples in both tethered and telemetry EEG recorded rats, and it may be used repeatedly across multiple days of experiment. By minimizing the stress due to sampling by shortening isoflurane anesthesia, measures are expected to reflect more accurately the true levels of investigated molecules in biofluids. Depending on the availability of an appropriate analytical assay, this technique may be used to measure the levels of multiple, different molecules while performing EEG recording at the same time.

著者スポットライト:てんかんバイオマーカー探索のための高品質なCSFおよび血液サンプルの取得 

The protocol shows repeated cerebrospinal fluid and blood collections from epileptic rats performed in parallel with continuous video-electroencephalogram (EEG) monitoring. These are instrumental for exploring possible links between changes in various body fluid molecules and seizure activity.

脳波記録中のラットの側尾静脈からの脳脊髄液および血液のサンプリング

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many ...

神経科学

Repetitive Blood Sampling from the Subclavian Vein of Conscious Rat

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to detect drug exposure. The rat blood sampling method determines the quality of the plasma and further affects the precision of the test results. The subclavian vein blood collection method described in this protocol collects blood samples repeatedly in the conscious state of animals to meet the needs of PK and TK tests. The skills of restraint handling and appropriate procedure of needle incision ensure the success rate of blood collection. It is easy to operate while ensuring the quality of plasma and at the same time catering to animal welfare. However, this method requires skilled operation, and an improper one may cause animal weakness, pain, lameness, and even mortality. The current method has been used in the testing facility for a 4-week oral toxicity study in Sprague Dawley (SD) rats with TK. The maximum amount of blood collected within 24 h did not exceed 20% of the animal's total blood. The animals' body weight was more than 200 g for males and females. The data showed that the animals' bodyweight increased steadily every week, and the clinical observation was normal after repetitive sample collection.

The present protocol describes a simple and efficient method for collecting blood from the subclavian vein in rats. It enables rapid, timely, and easily identifiable sampling without anesthesia and obtains high-quality blood through repetitive sample collection.

意識性ラットの鎖骨下静脈からの反復採血

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to ...

ラットの採血技術の比較研究

Modified Tail Vein and Penile Vein Puncture for Blood Sampling in the Rat Model

Blood samples are required in most experimental animal designs to assess various hematological parameters. This paper presents two procedures for blood collection in rats: the lateral tail vein puncture and the dorsal penile vein puncture, which offer significant advantages over other previously described techniques. This study shows that these two procedures allow for fast sampling (under 10 min) and yield sufficient blood volumes for most assays (202 &#956;L &#177; 67.7 &#956;L). The dorsal penile vein puncture must be done under anesthesia, whereas the lateral tail vein puncture can be done on a conscious, restrained animal.
Alternating these two techniques, therefore, enables blood draw in any situation. While it is always recommended for an operator to be assisted during a procedure to ensure animal welfare, these techniques require only a single operator, unlike most blood sampling methods that require two. Moreover, whereas these previously described methods (e.g., jugular stick, subclavian vein blood draw) require extensive prior training to avoid harm to or death of the animal, tail vein and dorsal penile vein puncture are rarely fatal. For all these reasons, and according to the context (e.g., for studies including male rats, during the perioperative or immediate postoperative period, for animals with thin tail veins), both techniques can be used alternately to enable repeated blood draws.

著者スポットライト:ラットにおける状況依存性の採血方法 

Here, we present a protocol to offer rapid, easy, and reliable blood collection alternatives for the rat model. We describe three different blood sampling methods according to the context: tail vein puncture under anesthesia or on a conscious animal, and dorsal penile vein puncture under anesthesia.

ラットモデルにおける採血のための修正尾静脈および陰茎静脈穿刺

Blood samples are required in most experimental animal designs to assess various hematological parameters. This paper presents two procedures for blood ...

真空の血のコレクションシステムと非麻酔下ラットの尾静脈からの採血を繰り返す

要約

さらに動画を探す

この動画の章

ヒト膵臓の収集プロトコル

真空の血のコレクションのシステムと眼鏡拡大鏡非麻酔下マウスの尾静脈から変更された血のコレクション

ラットの血液サンプルコレクションの代替方法として鎖骨下静脈穿刺

ラットの外側尾静脈から血液をサンプリング

脳波記録中のラットの側尾静脈からの脳脊髄液および血液のサンプリング

脳波記録中のラットの側尾静脈からの脳脊髄液および血液のサンプリング

脳波記録中のラットの側尾静脈からの脳脊髄液および血液のサンプリング

意識性ラットの鎖骨下静脈からの反復採血

ラットモデルにおける採血のための修正尾静脈および陰茎静脈穿刺

ラットモデルにおける採血のための修正尾静脈および陰茎静脈穿刺

真空の血のコレクション システムと非麻酔下ラットの尾静脈からの採血を繰り返す

要約

さらに動画を探す

この動画の章

ヒト膵臓の収集プロトコル

真空の血のコレクションのシステムと眼鏡拡大鏡非麻酔下マウスの尾静脈から変更された血のコレクション

ラットの血液サンプル コレクションの代替方法として鎖骨下静脈穿刺

ラットの外側尾静脈から血液をサンプリング

脳波記録中のラットの側尾静脈からの脳脊髄液および血液のサンプリング

脳波記録中のラットの側尾静脈からの脳脊髄液および血液のサンプリング

脳波記録中のラットの側尾静脈からの脳脊髄液および血液のサンプリング

意識性ラットの鎖骨下静脈からの反復採血

ラットモデルにおける採血のための修正尾静脈および陰茎静脈穿刺

ラットモデルにおける採血のための修正尾静脈および陰茎静脈穿刺

真空の血のコレクションシステムと非麻酔下ラットの尾静脈からの採血を繰り返す

ラットの血液サンプルコレクションの代替方法として鎖骨下静脈穿刺