Этот метод проверки и оценки точности инъекций обеспечивает важный шаг контроля качества и решающий этап в исследованиях на животных для облегчения последовательных и воспроизводимых инъекций хвостовых вен. Оценка инъекции с помощью флуоресценции изображения сразу после его ведения предлагает преимущество определения того, ваш агент вошел в кровообращение в его предполагаемое количество. Инъекция хвостовых вен является практической манипуляцией, которая выигрывает от визуальной демонстрации и которая может быть усилена путем наблюдения за зазором инъекционного агента из места инъекции.
Демонстрация процедуры с Музамил Салим будет Брук сделки, аспирант из моей лаборатории. Перед инъекцией хвостовой вены, положение анестезированной животных боковой в ближнем инфракрасном флуоресценции imager с местом инъекции на хвосте подвергаются установить флуоресценцию базового уровня. После того, как изображение было получено, перенесите животное на хирургическую скамью в подверженном положении и расширяй сосуды хвоста, погружая его в теплую воду.
Примерно через минуту, сориентировать хвост так боковой стороны в поле зрения. Боковой хвостовой вены должны выглядеть темного цвета. Стерилизовать длину вены с помощью алкогольных прокладок.
Распоистите хвост боковой и вставьте 25 до 27-го калибра иглы скошенной стороны вверх и параллельно поднятый хвост в выбранной боковой вены хвоста, начиная с дистальной копхигеальной области позвонков хвоста и движущихся более проксимальным, если надлежащее размещение иглы не удается по мере необходимости. В успешной вставке иглы, кровопомищение должно наблюдаться в ободе иглы. Если нет воспоминания очевидно, медленно двигаться кончик иглы, не снимая его с хвоста, чтобы найти вены вставки.
Когда игла была правильно помещена, вставьте шприц с инъекционным материалом в край иглы и угнетает поршень, чтобы доставить содержимое в вену. Кроме того, можно использовать катетер с индикатором кровотока. Сразу же воспоминания в сегменте индикатора катетера будут наблюдаться после правильного размещения.
Небольшое давление спины может быть использовано, чтобы вытащить кровь в шприц, чтобы подтвердить правильное размещение в сосуде перед инъекцией. Опять же, никакого сопротивления не будет ощущаться. После того, как весь материал был доставлен, удалить иглу и применять давление стерильной марлей, по крайней мере одну минуту, чтобы обеспечить свертывание.
Отметте место инъекции ручкой, чтобы убедиться, что место инъекции будет видно на белом световом канале приобретенного изображения. Чтобы оценить сигнал после инъекции флуоресценции в месте инъекции, верните животное на ближней инфракрасной стадии изображения и сориентировать животное на боковую сторону, чтобы разоблачить место инъекции на боковом хвосте для визуализации, как попродемонстрировано. Для анализа базовой и после инъекционной инъекции месте флуоресценции, области, представляющие интерес могут быть обращены в ближнем инфракрасном программного обеспечения изображения на хвосте вблизи места инъекции до и вокруг области флуоресценции после инъекции хвостовой вены.
Успешно поставленные инъекции продемонстрируют почти одинаково низкий уровень флуоресцентного сигнала до и после инъекции. Изображения, на которых флуоресценция видна по всей длине хвоста, неприемлемы и должны быть удалены из анализа. Любые поведенческие, хирургические или ex vivo молекулярные методы могут быть выполнены как обычно после этой процедуры.
Этот метод обеспечивает контроль качества для инъекции хвостовой вены, выявление быстрого зазора венозного кровотока должным образом вводили агента, или объединения в месте инъекции, если вена пропущена. Реагент, используемый в этом методе, не является опасным, однако, соответствующие меры предосторожности должны быть приняты, если флуоресценция основе агента включены с опасным материалом.
