リンパ浮腫は治療法のない慢性的な状態です。これは、乳癌の治療に腋窩リンパ節手術と放射線を受けた患者の3分の1に影響を与える。有効な動物モデルを持つことは、新しい治療戦略のメカニズムと開発を理解するのに役立ちます。
リンパ浮腫のマウス尾モデルは、急速な発症で信頼性が高く、再現性があります。ヒトリンパ浮腫と一致する組織学的変化を示す。この手順のデモンストレーションは、私の研究室の博士号を取得したガネーシュ・モハン博士です。
まず、8週齢の鎮静マウスを厳格に置き、尾に70%イソプロピルアルコールを準備します。キャリパーを使用して、尾の底部から20ミリメートルから始まる5ミリメートル単位で尾径を測定します。ベースから 20 ミリメートルの尾部に 3 ミリメートルの周回切除をマークします。
外科的な顕微鏡的拡大の下で、細心の3ミリメートルの完全な厚さの皮膚切除を行い、基礎となるすべての血管構造をそのまま残す。真皮を通って最初に上周縁マークを切開し、その後に最初の切開まで3ミリメートル遠位の周周の完全な厚さの切開を続ける。2つの切開を接続するために垂直な完全な厚さの垂直切開を行い、歯付きの細かいピックアップを使用して先端をつかみ、真皮に血管面内の深部を解剖し、マイクロハサミで静脈の冒険に表面化します。
尾の先端に1%イソスルファンブルー皮下近位の0.1ミリリットルを注入する。横尾静脈に隣接する注射により青色に見える2つのリンパ管を特定します。リンパ管を慎重にトランステークトし、まっすぐなマイクロ外科用ハサミで横静脈とリンパ管の間の平面を解剖する。
リンパ管と側面静脈の間に1つのはさみ刃の先端を渡し、刃を閉じてリンパ管を移す。終了したら、無菌付着クリアアドレッシングで尾の傷をドレスアップします。インドシアニングリーン0.1ミリリットルを先端付近の遠位マウス尾部に皮下に投与する。
部屋のライトを暗くし、近赤外線レーザー血管造影をバッファリング設定に入れて、ライブイメージングを行います。イソスルファンブルーを尾端に投与した後、リンパ球は青色を呈した。隣接する横静脈が保存されている間、リンパ管は破壊された。
リンパ浮腫誘導後のマウス尾の進行性の腫脹および持続性の持続性リンパ浮腫をここに示す。切り捨てられたコーン方程式で計算されたマウステール体積は、第4週でピークに達し、第6週に高まり、その後第15週まで徐々に改善された。高分解能レーザースペックルコントラストイメージングは、尾脈管の開血管の評価のために負傷した側面静脈および無傷の側面静脈を示すリンパ浮腫テールモデルにおけるマウス尾灌流を確認するために行われた。
近赤外レーザーリンパ組織検査は、術前の無傷のリンパ球および手術後の手術後の手術部位を越えてICGトランジットを示さなかったことを示し、それによって腫脹がリンパ不全によって引き起こされたことを確認した。組織ナノトランスフェクション技術を用いた遺伝貨物送達の効率は、マウスの尾部に標識されたDNAをフルオレセインを送達することによって実証された。マウス尾リンパ浮腫モデルとICG近赤外線レーザー血管造影の適応を使用することは、治療に影響を及ぼす臨床的に翻訳可能でエキサイティングな動物モデルです。
