この方法の全体的な目的は、心エコー検査を用いたラットにおける左前前方の冠動脈機能の可視化による冠流量の計算です。この方法は、罹患した心臓における微小血管機能障害の診断と、研究全体を通じて潜在的な治療法を評価するための重要な評価ツールを提供する。再灌流療法は、危険にさらされた心筋を救い、左心室機能を改善することが示されているが、冠状動脈の再集水化後に小さな冠状血管の機能異常が起こることがある。
この方法は、ラットの冠状動脈微小循環に関する洞察を提供し、また、心筋梗塞、および左心室の圧力体積過負荷を含む他のモデルに関する洞察を提供することができる。前虚血再灌流手術超音波画像診断の前に、麻酔フィッシャー344ラットのつま先ピンチに対する応答の欠如を確認する。胸から髪を剃ります。
動物の目に軟膏を塗布し、37〜38度の摂氏加温プラットフォーム上のサピーヌ位置に動物を配置します。13~24メガヘルツのリニアプローブを超音波装置に接続します。アプリケーションプリセットを心臓画像設定に設定し、レールシステムを使用してプローブを配置し、パラスターン短軸ビューを取得します。
XY軸マイクロマニピュレータを使用して、プローブを鼻方向に移動して肺動脈を見つけます。プローブを動かし、左心室をより容易に見えるようにします。Bモード画像をキャプチャしてCine Storedしたら、カラードップラーをクリックして短軸で冠状動脈を視覚化します。
赤色は、リアルタイムで観察されるとおり、流れの方向を示す。色ドップラーモードで下側の下降冠動脈を可視化した後、モードを脈波に変更し、冠状動脈に黄色のインジケータ線が存在することを探します。黄色の脈波線を冠動脈の中央に配置し、角度が流れの方向に平行であることを注意し、Cine Storeを使用して、休止中の左前前下降冠流および波のピーク側の脈拍の速度を捉える。
休憩左前部下降流速を得た後、尾部の基部の周りにガーゼの小さなストリップを置き、止血帯をつかんでねじって圧力をかけ、静脈が拡大する原因となる。慎重に拡張された尾静脈にドブタミンを装った10ミリリットルの注射器に取り付けられた25ゲージの注入蝶の針を置き、接着剤と外科テープで針を安定させる。注入ラインが確保されたら、止血帯と止血帯を取り除いて流れを回復し、注射器を1キログラムあたり20マイクログラム/キログラムを注入するように設定した注入ポンプに入れます。
注入の間、左前前下降動脈のピークおよび心拍数を注意深く監視し、ドブタミン誘発ストレス状態下のドップラーモードにおける左前下降動脈脈波ピークを定期的に記録する。前下降冠状動脈ピークと心拍数が挑戦の間に高くなってから、注入を止め、尾静脈注入セットを取り除き、プラットホームから動物を取り除く。次に、ピーク速度ツールを使用して画像からピーク拡張速度を取得し、左前下降動脈応力ピーク拡張期流速と安静左前動脈降下期の拡張期流速速度の比率として冠状流量予備指数を算出する。
光ファイバー光源を使用して、18ゲージのIVカテーテルでラットを挿管し、カテーテルに人工呼吸器を接続します。次に、8-0を使用します。モノフィラメント縫合糸は、5番目の肋間空間で15ミリメートルの開口部を通して左前下降動脈を30分間無地結び目でリゲートする。虚血期の終わりに、心表面の変色を介して虚血を視覚的に確認し、合字を放出する。
再灌流は、心筋の以前に変色した領域の赤線によって検証することができる。手術後72時間、示されているように冠流量と冠状流量リザーブを測定し、損傷前に得られたものと測定値を比較した。本代表的な実験では、虚血再灌流手術の前に、休止した左前方の冠状動脈速度を、ドブタミン注入後の速度の2倍以上に毎秒約423ミリメートルと測定した。
虚血再灌流から72時間後、手術前の休息左前前下降冠動脈速度に比べて安静左前動脈の降り方速度が有意に高かった。外傷後のドブタミン検査に対するストレス応答は、手術前の応答と比較して有意に低下した。冠動脈流量リザーブは、ストレス時のピーク流速と安静流速度の比として計算され、手術前の若いラットでは約2.1であったが、傷害後72時間で有意に減少した。
また、負傷後72時間経過しても左心室の収縮期機能に有意な変化はなかった。その開発後、この技術は、研究者が正確に人間の病気の状態を模倣する小さな動物モデルで冠状動脈の超音波画像診断を探求し、使用することを可能にする。このビデオを見た後、あなたは冠状動脈血流を測定し、小動物心疾患モデルで冠状動脈微小循環を評価する方法を非常によく理解している必要があります。
