BKM国立衛生研究所（NIH）/国立心臓肺血液研究所（NHLBI）の助成金（R01 - HL085487）によってサポートされています。 MHは、米国心臓協会ナショナル（AHA）科学開発グラント（SDG）及び老年循環器学会でサポートされています。

1。営業エリアの準備<ol><li>操作面は、最初に70％エタノールでエリアを消毒することによって調製される。 </li><li>すべての手術器具は、手術前にホットビーズ滅菌器（および個々のラットの手術との間で）で滅菌することがあります。これらの楽器が含まれます：外科はさみ（2）、ピンセット（1）、湾曲鉗子（1）、ニードルホルダー（2）、および胸のrectractorを。 </li><li>綿のガーゼとアプリケーターが出血を管理するために利用できるようになります。 </li><li> ° C、体温の劇的な低下を防ぐために37℃で± 1の動物の体温を維持するために使用される恒温ブランケットシステム（加熱パッド）の温度を調整し、梗塞の大きさは、依存していますよく体温などの閉塞の持続期間（Tarnavski ら ）。 </li><li>手術の前日、前の麻酔に、各動物はブプレノルフィン（0.1〜2.5 mg / kgのSQ）とカルプロフェン経口錠剤（1錠Rimadyl、Bioserv錠剤）の投与量を受け取ります。手術直前に一度、各動物は再びブプレノルフィン（0.1〜2.5 mg / kgをSQ）の投与量を受け取ります。 </li><li>注：一定期間の心機能と心臓リモデリングの評価対象とした研究では（7 - 28日以降に）、ブプレノルフィン（0.1〜2.5 mg / kgをSQ）の用量を投与される、すべての6時間24〜48時間後に手術とカルプロフェン経口錠剤のための手術後に（&quot;手術後の回復&quot;を参照してください）​​1日1回提供されます。 </li></ol> 2。ラットの作製と挿管<ol><li>前の麻酔導入まで、動物は手術成績を複雑にする可能性のある既存の条件を識別するために検討され、身体検査は目視検査と心拍数、呼吸数、及び体温と体重の測定が含まれます。 </li><li>動物が健康であると判断されれば、250〜300グラムの雄ラット（例えば、スプラーグドーリー）を検討する予定との識別特性が記録されます。 </li><li>ラットは、ペントバルビタール80 mg / kg体重で麻酔、麻酔の適切なレベルは、ラットの爪床の圧力（つま先ピンチ反射）と定期的手続きを通してを適用することにより、四肢の撤退の応答によって確認されます。 </li><li>ブプレノルフィン（0.1〜2.5 mg / kg体重; SQ）は手術時に投与される。 </li><li>電気シェーバーは、毛皮のフォーム首と胸の部分を剃るのに使用されます。注：一定の期間（7 - 28日以降に）上の心機能と心臓リモデリングの評価を対象とした研究では、毛皮は完全に無菌状態を維持するために外科領域から離れて剃毛する必要があります。 </li><li>剃毛の分野では、スクラブと70％アルコールでエリアを拭いて、続いbetadine液で消毒するか、このbetadineとアルコールのスクラブと消毒の手順が3回繰り返されることです。 </li><li>麻酔動物は、体温を維持するために、恒温毛布のシステム上で仰臥位（加熱パッド）に配置されます。 </li><li>気管内挿管は、それから気管の上に5 mmの半ばに首を切開し、筋肉組織の退縮することで、挿管の可視化を強化するためには、まず慎重に気管を露出することによって行われます。 </li><li>チューブが喉頭を介して入口を容易にするためにエッジに面取りされ、これは、気管内チューブ（PE 90ポリエチレンサイズ90）の挿入のためのよりよい視覚化することができます。 </li><li>気管内チューブは、手術用実体顕微鏡を用いて支援可視化と、気管や気管内チューブの入り口を見ながら慎重に舌を操作することによって、気管に挿入されます。 </li><li>機械換気は、ケント科学人工呼吸器（TOPOデュアルモード）80分あたりの呼吸と100グラムの体重当たり1.2 mlの一回換気量でのサイクリングに気管内チューブを接続することによって実現されます。 </li><li>滅菌ドレープは、したがって、動作中に潜在的な汚染を最小限に抑え、露出だけ外科領域を残して、ラットの上に配置されている。 </li><li>動物の外科医とアシスタントは、マスク、ガウン、手袋を着用すること。手袋は、個々のラットの手術の間で変更されていると。 </li></ol> 3。一時的な左前下行（LAD）動脈結紮<ol><li>いったん安定した呼吸が確立されると、胸がスペースを開くには、止血やラウンド終了のはさみを使用して、左第四肋間スペースで開かれているが、組織を切断することなく、出血のリスクを低減することができる。 </li><li>胸のリトラクタは、4番目の肋間スペース内に配置され、左心室（LV）が露出するようにリブを広めるために、肺を傷つけないように最大限の注意を取る。 </li><li>心膜は、その後開いたが、可能であれば場所に残されている。 </li><li>近左前下行（LAD）動脈は、の使用と、（図A - 1）識別されます。urgicalステレオ顕微鏡、およびLADは、一過的に30分間の虚血性周期（図A - 1）については6から0 proleneの縫合糸を使用して（またはスリップノットで接続することができます）ライゲーションが、心の具象化なしている。 </li><li>心臓の再灌流を可能にするために、顕微はさみは、LADの結紮は、次の6から0 prolene縫合、30分で作られた合字（またはスリップノットを解放することによって）、に結び目を切断するために使用されます。 </li><li>シャム対照ラットでは、手順はLADが一時的に結紮されていない場合を除き、同一です。 </li><li>流出は、肺の再膨張を可能にするために人工呼吸器でピンチオフ（1-2秒）簡単にしています。 </li><li>胸のリトラクタが除去され、肋骨を結節縫合パターンを2から0 proleneの縫合糸を使用して一緒に描画されます。 </li><li>リブがクローズされると、人工呼吸器の流出は、適切な呼吸を確保するために、もう一度簡単に（1-2秒）ピンチオフです​​。 </li><li>皮膚は連続縫合パターンを6から0 proleneの縫合糸を使用して閉じられます。 </li></ol> 4。 LADの動脈の成功ライゲーションの確認<ol><li> LADの適切なライゲーションは縫合だけでなく、前壁の機能不全への遠位心筋組織の白化を観察することにより確認される;のような一時的LAD結紮の間に観察。 </li><li>再灌流は心筋組織および前壁の運動のいくつかの回復のデモに赤い色のリターンによって検証されます。のような一時的なLAD結紮直後に観察。 </li><li>注：一定期間の心機能と心臓リモデリングの評価対象とした研究では（7 - 28日以降にして）、心エコー図は、誘導の程度を決定するために、24時間後のLAD結紮を実行されます心筋梗塞。左室内径短縮率（LV FS）&lt;20％、などの心エコー図から決定だけでなく、梗塞と一致して前壁の運動機能障害を持つすべての動物は、心機能およびリモデリングの研究をフォローアップのために特定され、使用されます。シャム対照ラットを40-45％の間で通常のLV FS（デルモンテらを）持つことが期待されています。 </li></ol> 5。手術後の回復<ol><li>手術が完了すると、動物の上に滅菌ドレープが削除されます。体温（直腸温度計による）、呼吸数（目視検査で）、心拍数（動悸によって）、そして痛みの異常な兆候は、動物が歩行可能になるまで監視する必要があります。 </li><li>ラットは、人工呼吸器から削除されますし、動物のケージに入れ、麻酔から回復するために許可される。このケージで、ケージの一端は、ラットが暖かさを追求できるように、加温パッドによって暖められます。また、水は、この観測期間中のラットに利用できるようになります。 </li><li>脱水の兆候が手術後に観察されている場合、滅菌生理食塩水0.5mlを腹腔​​内（IP）に注射されます。 </li><li>ブプレノルフィン（0.1〜2.5 mg / kg体重; SQ）は、その後、手術直後、および手術後の回復中に投与されるであろう。 </li><li>注：一定期間の心機能と心臓リモデリングの評価対象とした研究では（7 - 28日以降に）、ブプレノルフィン（0.1〜2.5 mg / kgをSQ）の用量を投与される、すべての6時間24〜48時間後に手術の手術後。カルプロフェン経口錠剤（Rimadyl、Bioservタブレット）も、少なくとも48時間後の手術のために（1錠毎日）提供されます。 </li></ol> 6。虚血再灌流の組織学的評価<ol><li> 4時間の再灌流期間終了後、ラットをペントバルビタールとLADの80 mg / kgので再び麻酔される（Huangらとカイザーら）（またはスリップノットがretiedすることができます）再び連結されている。 </li><li> 1ミリリットルの5％エバンスブルーは（リン酸緩衝生理食塩水で）、右心室に注入し、2分間灌流することが許可されます。 </li><li> 2分後、飽和塩化カリウム溶液1mlは、拍動から心臓を停止させるために右心室に注入される。 </li><li>心臓はその後、急速に、切り出したアガロースはリン酸緩衝生理食塩水2％に埋め込まれており、1〜2ミリメートルのスライスにして区画されている。 </li><li>生存心筋は、キャプチャされた20分、各スライスの画像を2％トリフェニルテトラゾリウムクロライド（TTC）で染色される。画像は心筋の領域の量を識別するために定量化されています：（1）それはないアットリスク（ブルーセクション）、（2）エリア - アットリスク（AAR、赤と白のセクション）であり、及び（3梗塞された）領域（白&quot;染色&quot;の項）（図-2）。 </li></ol> 7。代表的な結果梗塞サイズと領域アットリスク（AAR）の評価を含む研究については、エバンスブルー色素、トリフェニルテトラゾリウムクロライド（TTC）で、再灌流の4時間以下、LADの適切なライゲーションを確認することができます。として一時的なLADを結紮中に観察された。縫合だけでなく、前壁の機能不全への遠位心筋組織の白化を観察すること。再灌流は心筋組織および前壁の運動のいくつかの回復のデモに赤い色のリターンによって検証することができる、一時的なLAD結紮直後に観察。 （ - 28〜 - 7日以降）、時間の期間にわたって心機能と心臓リモデリングの評価を含む研究の場合は、再灌流に続いて虚血の適切なライゲーションは、前壁の組織、機能不全のブランチングすることにより確認することができる再灌流は、次の壁運動のいくつかの回復と赤の色のとリターン。さらに、心臓機能障害が誘発される心筋梗塞の程度を決定するために、24時間後のLAD結紮を実行される心エコー図によって決定することができる。左室内径短縮率（LV FS）&lt;20％、などの心エコー図から決定だけでなく、梗塞と一致して前壁の運動機能障害を持つすべての動物は、心機能およびリモデリングの研究をフォローアップのために特定され、使用されます。シャム対照ラットを40-45％の間で通常のLV FS（デルモンテ）を持つことが期待されています。 <img src="/files/ftp_upload/2464/2464fig1.jpg" alt="図1" /> 図1。心筋梗塞とLADの結紮の模式図。 （1）心筋梗塞と疫病の形成によって引き起こされる心筋梗塞を模倣するために使用される縫合糸を用いて左心室の左前下（LAD）動脈、（2）ライゲーションの模式図。 <img src="/files/ftp_upload/2464/2464fig2.jpg" alt="図2" /> 図2。AMIに続いてラット心臓の代表的なイメージ。代表的な青（非閉塞冠状動脈灌流領域）で領域を示すラットの心臓の画像、梗​​塞の領域アットリスク（AAR）を示す赤色（閉塞冠動脈灌流領域の面積、および黄色/白（梗塞ゾーンのエリアAAR以内）。

<ol>
	<li>Hunt, S. A., Baker, D. W., Chin, M. H., Cinquegrani, M. P., Feldmanmd, A. M., Francis, G. S., Ganiats, T. G., Goldstein, S., Gregoratos, G., Jessup, M. L., Noble, R. J., Packer, M., Silver, M. A., Stevenson, L. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SC.ACC/AHA+Guidelines+for+the+Evaluation+and+Management+of+Chronic+Heart+Failure+in+the+Adult:+Executive+Summary+A+Report+of+the+American+College+of+Cardiology/American+Heart+Association+Task+Force+on+Practice+Guidelines+(Committee+to+Revise+the+1995+Guidelines+for+the+Evaluation+and+Management+of+Heart+Failure).">SC.ACC/AHA Guidelines for the Evaluation and Management of Chronic Heart Failure in the Adult: Executive Summary A Report of the American College of Cardiology/American Heart Association Task Force on Practice Guidelines (Committee to Revise the 1995 Guidelines for the Evaluation and Management of Heart Failure).</a> Circulation. 104, 2996-3007 (2001).</li><li>Goldman, S., Raya, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+infarct+model+of+myocardial+infarction+and+heart+failure.">Rat infarct model of myocardial infarction and heart failure.</a> J Card Fail. 1, 169-177 (1995).</li><li>Tarnavski, O., McMullen, J. R., Schinke, M., Nie, Q., Kong, S., &amp;amp, I. z. u. m. o., S, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+cardiac+surgery:+comprehensive+techniques+for+the+generation+of+mouse+models+of+human+diseases+and+their+application+for+genomic+studies.">Mouse cardiac surgery: comprehensive techniques for the generation of mouse models of human diseases and their application for genomic studies.</a> Physiol Genomics. 16, 349-360 (2004).</li><li>Thygesen, K., Alpert, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Universal+Definition+of+Myocardial+Infarction.">Universal Definition of Myocardial Infarction.</a> Circulation. 116, 2634-2653 (2007).</li><li>Vasilyev, N., Williams, T., Brennan, M. L., Unzek, S., Zhou, X., Heinecke, J. W., Spitz, D. R., Topol, E. J., Hazen, S. L., Penn, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myeloperoxidase-generated+oxidants+modulate+left+ventricular+remodeling+but+not+infarct+size+after+myocardial+infarction.">Myeloperoxidase-generated oxidants modulate left ventricular remodeling but not infarct size after myocardial infarction.</a> Circulation. 112, 2812-2820 (2005).</li><li>McConnell, B. K., Popovic, Z., Mal, N., Lee, K., Bautista, J., Forudi, F., Schwartzman, R., Jin, J. P., Penn, M., Bond, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+protein+kinase+A+interaction+with+A-kinase-anchoring+proteins+in+the+heart+in+vivo:+effects+on+cardiac+contractility,+protein+kinase+A+phosphorylation,+and+troponin+I+proteolysis.">Disruption of protein kinase A interaction with A-kinase-anchoring proteins in the heart in vivo: effects on cardiac contractility, protein kinase A phosphorylation, and troponin I proteolysis.</a> J Biol Chem. 284, 1583-1592 (2009).</li><li>Monte, D. e. l., Butler, F., Boecker, K., Gwathmey, W., K, J., Hajjar, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+technique+of+aortic+banding+followed+by+gene+transfer+during+hypertrophy+and+heart+failure.">Novel technique of aortic banding followed by gene transfer during hypertrophy and heart failure.</a> Physiol. Genomics. 9, 49-56 (2002).</li><li>Huang, M. H., Nguyen, V., Wu, Y., Rastogi, S., McConnell, B. K., Wijaya, C., Uretsky, B. F., Poh, K. K., Tan, H. C., Cheng, J., Perin, E., Fujise, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergistic+Infarct+Size+Reduction+by+Combination+Therapy+with+Milrinone+and+Esmolol+at+Early+Reperfusion+during+Acute+Myocardial+Infarction.">Synergistic Infarct Size Reduction by Combination Therapy with Milrinone and Esmolol at Early Reperfusion during Acute Myocardial Infarction.</a> American Journal of Physiology. , .</li><li>Kaiser, R. A., Bueno, O. F., Lips, D. J., Doevendans, P. A., Jones, F., Kimball, T. F., Molkentin, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+inhibition+of+p38+mitogen-activated+protein+kinase+antagonizes+cardiac+injury+and+cell+death+following+ischemia-reperfusion+in+vivo.">Targeted inhibition of p38 mitogen-activated protein kinase antagonizes cardiac injury and cell death following ischemia-reperfusion in vivo.</a> J Biol Chem. 279, 15524-15530 (2004).</li></ol>

利害の衝突は宣言されません。

また、虚血再灌流（IR）と呼ばれるラットの急性心筋梗塞（AMI）は、、一般的に心不全につながる人間の心室リモデリングを模倣するために使用されます。動物モデル（ラット及びマウス）における左室機能不全および心不全の進行は、MIを維持存続し、その後心不全（ゴールド）を開発し、ヒトで観察されたのと似ています。このプロシージャは、このテクニックのあるバージョンを紹介し...

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<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Ventilator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Kent Scientific</td>
<td>TOPO</td>
<td>TOPO Dual Mode</td>
</tr>
<tr>
<td>Thermostatic Circulator E103</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Harvard Apparatus</td>
<td>732802</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Homeothermic Blanket System</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Harvard Apparatus</td>
<td>55-7222F</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Stereo Microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Nikon Instruments</td>
<td>MMA36300</td>
<td>SMZ-645 Zoom Stereo Microscope</td>
</tr>
<tr>
<td>Hot Bead Sterilizer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Harvard Apparatus</td>
<td>610183</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Electric Shaver</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>General Electric</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Blades and Handles</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>WelchAllyn</td>
<td>690047-1</td>
<td>Standard (Lamp) Laryngoscope Blades</td>
</tr>
<tr>
<td>Surgical Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>14014-17</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Surgical Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>14072-10</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>11028-15</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Curved Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>11001-12</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Needle Holder</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>12004-18</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Needle Holder</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>91201-13</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Chest Retractor</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>17008-07</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Masks</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR </td>
<td>47730-640</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Gauze Sponges</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dermacea</td>
<td>441205</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sterile Gloves</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cardinal Health</td>
<td>2D7203I</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PE 90 tubing</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD</td>
<td>427420</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>20 ml Syringe</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD</td>
<td>301625</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>6-0 Prolene Suture</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>ETHICON</td>
<td>8706H</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>2-0 Silk Suture</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>ETHICON</td>
<td>K873H</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pentobarbital Sodium Injection</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>OVATION</td>
<td>NDC 67386-501-55</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Povidone-Iodine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>NOVAPLUS</td>
<td>V10-8204</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Buprenorphine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Pharmaceuticals Inc.</td>
<td>NDC 12496-0757-1</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

acute myocardial infarction in rats

米国（ハント）の死因をリードする心不全で、生物医学研究は、心血管疾患の治療を進めるための基本です。このような心不全と同様に（ゴールドマンとTarnavski）心肥大や心不全を誘発する圧力負荷（横大動脈狭窄）を、誘導心筋梗塞（MI）および虚血再灌流（IR）のような人間の心疾患を模倣する動物モデル、心血管疾患を研究するために有用なモデルがあります。特に、心筋虚血（MI）は、動脈硬化や外科的介入（Thygesen）を経由してのトリートメントなどを制御する特定のリスク要因にもかかわらず、心血管疾患の罹患率および死亡の主要原因である。さらに、心筋の急性損失は梗塞境界領域と、リモートの非梗塞心筋の心室リモデリングを誘導増加荷重条件下で心筋虚血（MI）の結果を以下。筋細胞アポトーシス、ネクローシス及び結果の増加血行動態負荷がLVの拡張、肥大、心室形状の歪み、およびコラーゲンの瘢痕形成を開始する複数の生化学的細胞内シグナル伝達を活性化する。この病理学的リモデリングと増加した壁を正規化するために障害が進行性の拡張、瘢痕にボーダーゾーン心筋の採用、および心筋の収縮機能（すなわち、心不全）で最終的には劣化の結果を強調している。ラットの左室機能不全と心不全の進行は、大規模な心筋梗塞を維持存続し、その後心不全（ゴールド）を開発して患者に観察されたものと似ています。ラットにおける急性心筋梗塞（AMI）モデルは、ヒトの心血管疾患を模倣するために使用されている;特に心不全の治療のための治療戦略の貢献度を評価するために心不全と同様に関連付けられている心臓のシグナル伝達機構を研究するために使用。このレポートに記載されている方法は、急性心筋梗塞（AMI）のラットモデルです。このモデルはまた、再灌流（IR）に続いて急性虚血性心筋症や虚血と呼ばれています。によって組織の再灌流に続いて左前下行枝（LAD）の結紮による虚血の急性、30分間によって誘導されるLADの結紮（Vasilyevとマコーネル）をリリース。変更することにより、心機能およびリモデリングの評価に向けて追加のコメント、このプロトコルは、再灌流の4時間以下のエバンスブルー色素、トリフェニルテトラゾリウムクロライド（TTC）による梗塞サイズと領域アットリスク（AAR）の評価に焦点を当てる再灌流の持続時間は、また表示されます。全体的に、このAMIのラットの動物モデルは、心臓の病態生理学的および生理学的機能に関する心筋梗塞の結果を研究するために有用です。

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Acute Myocardial Infarction in Rats

急性心筋梗塞（AMI）のラットモデルでは、心臓の病態生理学的および生理学的機能に関するMIの結果を研究するのに便利です。

ラットにおける急性心筋梗塞

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

Research

JoVE Journal

Medicine

52.5K ビュー.  University of Texas Medical Branch. 急性心筋梗塞（AMI）のラットモデルでは、心臓の病態生理学的および生理学的機能に関するMIの結果を研究するのに便利です。

ビデオ: Acute Myocardial Infarction in Rats

Induction of Myocardial Infarction in Adult Zebrafish Using Cryoinjury

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and teleost fish retain a remarkable capacity for cardiac regeneration with little or no scarring throughout life2,3. It is not known why only some non-mammalian vertebrates can recreate a complete organ from remnant tissues4,5. To understand the molecular and cellular differences between regenerative responses in different species, we need to use similar approaches for inducing acute injuries.
In mammals, the most frequently used model to study cardiac repair has been acute ischemia after a ligation of the coronary artery or tissue destruction after cryoinjury6,7. The cardiac regeneration in newts and zebrafish has been predominantly studied after a partial resection of the ventricular apex2,3. Recently, several groups have established the cryoinjury technique in adult zebrafish8-10. This method has a great potential because it allows a comparative discussion of the results obtained from the mammalian and non-mammalian species.
Here, we present a method to induce a reproducible disc-shaped infarct of the zebrafish ventricle by cryoinjury. This injury model is based on rapid freezing-thawing tissue, which results in massive cell death of about 20% of cardiomyocytes of the ventricular wall. First, a small incision was made through the chest with iridectomy scissors to access the heart. The ventricular wall was directly frozen by applying for 23-25 seconds a stainless steel cryoprobe precooled in liquid nitrogen. To stop the freezing of the heart, fish water at room temperature was dropped on the tip of the cryoprobe. The procedure is well tolerated by animals, with a survival rate of 95%.
To characterize the regenerative process, the hearts were collected and fixed at different days after cryoinjury. Subsequently, the specimen were embedded for cryosectioning. The slides with sections were processed for histological analysis, in situ hybridization and immunofluorescence. This undertaking enhances our understanding of the factors that are required for the regenerative plasticity in the zebrafish, and provide new insights into the machinery of cardiac regeneration. A conceptual and molecular understanding of heart regeneration in zebrafish will impact both developmental biology and regenerative medicine.

Zebrafish represents a valuable model to study the mechanisms of heart regeneration in vertebrates. Here, we present a protocol for induction of a heart infarct in adult zebrafish using cryoinjury. This method results in massive cell death within 20% of the ventricular wall, similar to that observed in mammalian infarcts.

Cryoinjuryを使用した大人のゼブラフィッシュにおける心筋梗塞の誘発

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and ...

医学

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ideal model for testing novel therapeutic strategies.
In vivo magnetic resonance imaging (MRI) gives excellent views of the heart noninvasively with clear anatomical detail, which can be used for accurate functional assessment. Contrast agents can provide basic measures of tissue viability but these are nonspecific. Positron emission tomography (PET) is a complementary technique that is highly specific for molecular imaging, but lacks the anatomical detail of MRI. Used together, these techniques offer a sensitive, specific and quantitative tool for the assessment of the heart in disease and recovery following treatment.
In this paper we explain how these methods are carried out in mouse models of acute myocardial infarction. The procedures described here were designed for the assessment of putative protective drug treatments. We used MRI to measure systolic function and infarct size with late gadolinium enhancement, and PET with fluorodeoxyglucose (FDG) to assess metabolic function in the infarcted region. The paper focuses on practical aspects such as slice planning, accurate gating, drug delivery, segmentation of images, and multimodal coregistration. The methods presented here achieve good repeatability and accuracy maintaining a high throughput.

We describe how to perform MRI and PET imaging of the mouse heart. The protocol is tailored to assess treatment efficacy in models of myocardial infarction and heart failure.

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One important prerequisite is a good understanding of all safety and efficacy aspects obtained in a large animal model that validly reflect the human scenario of myocardial infarction (MI). Pigs are widely used in this regard since their cardiac size, hemodynamics, and coronary anatomy are close to that of humans. Here, we present an effective protocol for using the porcine MI model using a closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. This approach is based on 90 min of myocardial ischemia, inducing large left ventricle infarction of the anterior, septal and inferoseptal walls. Furthermore, we present protocols for various measures of outcome that provide a wide range of information on the heart, such as cardiac systolic and diastolic function, hemodynamics, coronary flow velocity, microvascular resistance, and infarct size. This protocol can be easily tailored to meet study specific requirements for the validation of novel cardioregenerative biologics at different stages (i.e. directly after the acute ischemic insult, in the subacute setting or even in the chronic MI once scar formation has been completed). This model therefore provides a useful translational tool to study MI, subsequent adverse remodeling, and the potential of novel cardioregenerative agents.

This protocol describes the porcine myocardial infarction (MI) model using a 90 min closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. Furthermore, the protocol for several outcome parameters, such as cardiac function, hemodynamics, microvascular resistance, and infarct size, are also presented.

豚における心筋梗塞および機能的結果の評価

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last decades. For clarification of the underlying mechanisms and the development of new therapeutic strategies, the availability of valid animal models are mandatory. Since we need new insights into pathomechanisms of cardiovascular diseases under in vivo conditions to combat myocardial infarction, the validity of the animal model is a crucial aspect. However, protection of animals are highly relevant in this context. Therefore, we establish a minimally invasive and simple model of myocardial infarction in mice, which assures a high reproducibility and survival rate of animals. Thus, this models fulfils the requirements of the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction) for animal experiments and assure the scientific information needed for further developing of therapeutical strategies for cardiovascular diseases.

A highly reproducible model for myocardial infarction in mice with minimal invasive manipulations is described. The model can be easily performed, resulting in a high reproducibility and survival rate. Thus, the described model will reduce the number of required animals as requested by the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction).

マウスにおける心筋梗塞を誘発する低侵襲手術手順

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

Primary Outcome Assessment in a Pig Model of Acute Myocardial Infarction

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are therefore required to confine cardiac damage, promote survival and reduce the disease burden of heart failure. Large animal experiments are an essential part in the translational process from experimental to clinical therapies. To optimize clinical translation, robust and representative outcome measures are mandatory. The present manuscript aims to address this need by describing the assessment of three clinically relevant outcome modalities in a pig acute myocardial infarction (AMI) model: infarct size in relation to area at risk (IS/AAR) staining, 3-dimensional transesophageal echocardiography (TEE) and admittance-based pressure-volume (PV) loops. Infarct size is the main determinant driving the transition from AMI to heart failure and can be quantified by IS/AAR staining. Echocardiography is a reliable and robust tool in the assessment of global and regional cardiac function in clinical cardiology. Here, a method for three-dimensional transesophageal echocardiography (3D-TEE) in pigs is provided. Extensive insight into cardiac performance can be obtained by admittance-based pressure-volume (PV) loops, including intrinsic parameters of myocardial function that are pre- and afterload independent. Combined with a clinically feasible experimental study protocol, these outcome measures provide researchers with essential information to determine whether novel therapeutic strategies could yield promising targets for future testing in clinical studies.

Reliable and accurate outcome assessment is the key for translation of preclinical therapies into clinical treatment. The current paper describes how to assess three clinically relevant primary outcome parameters of cardiac performance and damage in a pig acute myocardial infarction model.

急性心筋梗塞の豚モデルにおける主要アウトカム評価

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and regeneration, and to define new targets for therapeutics. For decades, models of complete heart regeneration existed in amphibians and fish, but a mammalian counterpart was not available. The recent discovery of a postnatal window during which mice possess regenerative capabilities has led to the establishment of a mammalian model of cardiac regeneration. A surgical model of mammalian cardiac regeneration in the neonatal mouse is presented herein. Briefly, postnatal day 1 (P1) mice are anesthetized by isoflurane and placed on an ice pad to induce hypothermia. After the chest is opened, and the left anterior descending coronary artery (LAD) is visualized, a suture is placed around the LAD to inflict myocardial ischemia in the left ventricle. The surgical procedure takes 10-15 min. Visualizing the coronary artery is crucial for accurate suture placement and reproducibility. Myocardial infarction and cardiac dysfunction are confirmed by triphenyl-tetrazolium chloride (TTC) staining and echocardiography, respectively. Complete regeneration 21 days post myocardial infarction is verified by histology. This protocol can be used to as a tool to elucidate mechanisms of mammalian cardiac regeneration after myocardial infarction.

This protocol describes a highly reproducible model of cardiac regeneration by surgical induction of myocardial infarction in the left ventricle of postnatal day 1 mice. The method involves induction of hypothermic anesthesia and ligation of the left anterior descending coronary artery.

新生児マウスの心筋梗塞、心臓再生のモデル

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any potential therapeutic approach directed against acute left ventricular (LV) dysfunction. Current imaging modalities (e.g., echocardiography and magnetic resonance imaging) have several limitations since data on LV pressure cannot directly be measured. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion could serve as a novel method for a real-time evaluation of LV function.
At the beginning of the procedure, mice were anesthetized followed by endotracheal intubation. For LV catheterization, the right carotid artery was exposed via middle-neck incision. The catheter was introduced and placed into the LV cavity. Left thoracotomy was conducted and the left main coronary artery (LCA) was ligated. To induce reperfusion, the suture was released after 45 min. Pressure-volume data was recorded at all times.
Ligation of the LCA caused a decrease in LV systolic function as evidenced by a 30% reduction in stroke volume, LV ejection fraction (EF), and cardiac output. Maximum dP/dt as a parameter for LV contractility was also significantly reduced and diastolic function was severely impaired (minimum dP/dt -40%). Reperfusion over a period of 20 min did not lead to a complete recovery of LV function.
Real-time pressure-volume analysis served as a valid procedure for monitoring cardiac function during acute myocardial infarction in mice. Maintaining stable anesthesia and a standardized surgical approach was crucial to ensure valid results. As the early phase of acute myocardial infarction is critical for morbidity and mortality, the delineated method could be beneficial for preclinical evaluation of new strategies for cardioprotection.

Acute myocardial infarction in mice induces acute but incompletely characterized changes in left ventricular (LV) function. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion serves as a novel method for a real-time evaluation of LV function.

マウスにおける急性心筋梗塞のリアルタイム圧解析

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...

Digital PCR for Quantifying Circulating MicroRNAs in Acute Myocardial Infarction and Cardiovascular Disease

Circulating serum microRNAs (miRNAs) have shown promise as biomarkers for the cardiovascular disease and acute myocardial infarction (AMI), being released from the cardiovascular cells into the circulation. Circulating miRNAs are highly stable and can be quantified. The quantitative expression of specific miRNAs can be linked to the pathology, and some miRNAs show high tissue and disease specificity. Finding novel biomarkers for cardiovascular diseases is of importance for medical research. Quite recently, digital polymerase chain reaction (dPCR) has been invented. dPCR, combined with fluorescent hydrolysis probes, enables specific direct absolute quantification. dPCR exhibits superior technical qualities, including a low variability, high linearity, and high sensitivity compared to the quantitative polymerase chain reaction (qPCR). Thus, dPCR is a more accurate and reproducible method for directly quantifying miRNAs, particularly for the use in large multi-center cardiovascular clinical trials. In this publication, we describe how to effectively perform digital PCR in order to assess the absolute copy number in serum samples.

Circulating microRNAs have shown promise as biomarkers for cardiovascular diseases and acute myocardial infarctions. In this study, we describe a protocol for miRNA extraction, reverse transcription, and digital PCR for the absolute quantification of miRNAs in the serum of patients with cardiovascular disease.

急性心筋梗塞と心血管疾患のマイクロ Rna を循環の定量化デジタル PCR

Circulating serum microRNAs (miRNAs) have shown promise as biomarkers for the cardiovascular disease and acute myocardial infarction (AMI), being released ...

A Cryoinjury Model to Study Myocardial Infarction in the Mouse

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we demonstrate a murine cryoinjury infarct model that generates precise infarct sizes with high reproducibility and replicability. In brief, after intubation and sternotomy of the animal, the heart is lifted from the thorax. The probe of a handheld liquid nitrogen delivery system is applied onto the myocardial wall to induce cryoinjury. Impaired ventricular function and electrical conduction can be monitored with echocardiography or optical mapping. Transmural myocardial remodeling of the infarcted area is characterized by collagen deposition and loss of cardiomyocytes. Compared to other models (e.g., LAD-ligation), this model utilizes a handheld liquid nitrogen delivery system to generate more uniform infarct sizes.

This article demonstrates a model to study cardiac remodeling after myocardial cryoinjury in mice.

マウスの心筋梗塞を研究する凍結傷害モデル

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we ...

Semi-Minimal Invasive Method to Induce Myocardial Infarction in Rats and the Assessment of Cardiac Function by an Isolated Working Heart System

Myocardial infarction (MI) remains the main contributor to morbidity and mortality worldwide. Therefore, research on this topic is mandatory. An easily and highly reproducible MI induction procedure is required to obtain further insight and better understanding of the underlying pathological changes. This procedure can also be used to evaluate the effects or potency of new and promising treatments (as drugs or interventions) in acute MI, subsequent remodeling and heart failure (HF). After intubation and pre-operative preparation of the animal, an anesthetic protocol with isoflurane was performed, and the surgical procedure was conducted&#160;quickly. Using a minimally invasive approach, the left anterior descending artery (LAD) was located and occluded by a ligature. The occlusion can be performed acutely for subsequent reperfusion (ischemia/reperfusion injury). Alternatively, the vessel can be ligated permanently to investigate the development of chronic MI, remodeling or HF. Despite common pitfalls, the drop-out rates are minimal. Various treatments such as remote ischemic conditioning can be examined for their cardioprotective potential pre-, peri- and post-operatively. The post-operative recovery was quick as the anesthesia was precisely controlled and the duration of the operation was short. Post-operative analgesia was administered for three days. The minimally invasive procedure reduces the risk of infection and inflammation. Furthermore, it facilitates rapid recovery. The &#8220;working heart&#8221; measurements were performed ex vivo and enabled precise control of preload, afterload and flow. This procedure requires specific equipment and training for adequate performance. This manuscript provides a detailed step-by-step introduction for conducting these measurements.

This article presents an efficient method to perform myocardial ischemia and subsequent chronic reperfusion in rats using a minimally invasive approach. In addition, left ventricular hemodynamic function of rats is assessed by echocardiography and isolated working heart methods.&#160;

ラットの心筋梗塞を誘導する半最小侵襲法と、単離した働く心臓システムによる心機能の評価

Myocardial infarction (MI) remains the main contributor to morbidity and mortality worldwide. Therefore, research on this topic is mandatory. An easily ...