虚血再灌流損傷は、再建的な微小手術におけるフラップ障害の主な原因である。このビデオでは、この病態生理学の研究のための前臨床動物モデルについて説明します。ラットの表面的な尾頭上皮血管に基づくこの自由な皮膚フラップモデルは、虚血再灌流傷害関連の損傷に対抗するために異なる治療法および化合物の評価を可能にし得る。
微小外科的再建は、さまざまな欠陥に最適です。しかし、これらの手順は、虚血の必須期間を確保し、その後に再灌流を行う。この期間は通常十分に許容され、微小外科的処置の成功率は90%を超えるが、外科的改訂を必要とするフラップの73.7%だけが完全に安全である。
また、指の排便傷害の再植え付けの場合、成功率は約60%であり、複合組織再移植の場合、傷害が自然免疫を活性化するので、虚血再灌流傷害予測率が増加する。したがって、この病態生理学的現象の研究は興味深い。この手順を開始するには、外科用マーカーを使用して6センチメートルのフラップで3センチメートルを描き、6センチメートルの側面の1つが腹部の正中線と一致することを確認します。
次に、腹部の正中線で6センチメートルの皮膚切開、2つの垂直3センチメートルの切開、ならびに最初の切開に平行な6センチメートルのうちの1つを作る。指定された皮膚フラップの解剖を開始するには、はさみとAdson鉗子を使用してフラップを上げます。頭蓋領域から帯の領域に向かってフラップをそっと引っ張ります。
フラップペディクルに触れることなく、または容器の壁に損傷を与えないように、できるだけ少ないアドベンティアをつかんで、フラップペディクルを解剖します。使用 8-0合字によって閉塞するナイロン縫合糸は、伏線血管、横回角大腿骨血管、および近位尾口大腿骨血管を表します。血管ペディクルをクランプし、8時間の虚血期間を開始するためにそれをカットします。
ヘパリン化した生理液を使用してフラップを透過し、微小循環から停滞した血液を取り除きます。10-0ナイロン縫合糸を使用して、微小外科的なアナストモーセを行います。8時間の虚血の後、微小血管クランプを取り外してフラップを再浸透させ、血管の脈痛を確認する。
まず、通過時間超音波流量計と微小外科プローブを用いて血流を評価する。流量を定量化するために、フロープローブの超音波検知窓にターゲット容器を置きます。良好なカップリングが達成され、容器が緊張せずに音響窓に置かれたら、データを保存するためにディスプレイの記録ボタンをクリックしてください。
この後、4-0吸収性縫合糸を使用して皮膚を閉じます。フラップの微小循環を評価するには、レーザースペックルコントラスト分析を使用します。ファイル、新しい記録をクリックして、各サンプルと各フォローアップスタディのための新しい記録を行います。
新しいウィンドウが開き、セットアップパネルが表示されます。ここでは、プロジェクト名、件名、オペレータ、およびレコーディング名の情報を編集します。組織に対してレーザーを動かして作業距離を調整します。
レーザーヘッドを対象の組織に向かってズームインまたはズームアウトします。画像設定で、希望の幅と高さを入力して測定領域を標準化します。点密度を高に設定します。
イメージ キャプチャの設定で、フレーム レートと記録の継続時間を選択します。次に、録音ボタンをクリックして録音を開始します。設定パネルは記録パネルに置き換えられ、データは自動的に保存されます。
手順の間にスナップショットを作成して、さらに比較を有効にします。この後、最初にフラップの部位に定規を配置し、巨視的測定のための制御写真を撮ることによって、生存および壊死領域を測定するためにImageJソフトウェアを使用する。[ImageJ] ツールボックスで、直線を選択し、定規の 1 センチに線を引きます。
[解析]をクリックしてスケールを設定し、既知の距離のテキストボックスに1センチメートルの値を入力します。ポリゴン選択ツールをクリックし、フラップの上にポリゴン ラインを描画して、有効な領域を計算します。分析をクリックし、面積の値を取得するために測定します。
その後、自己突然変異を防ぐために、ハウジングの前に動物に術後ドレッシングを置きます。手術の7日後、手術領域を撮影して、フラップ生存領域と壊死領域の巨視的測定を可能にする。前述のレーザースペックルコントラスト解析技術を用いて、拡散の違いを可視化して定量化し、フラップの微小循環を評価します。
巨視的分析の後、4-0縫合糸を取り除き、フラップを上げ、通過時間超音波を使用して血管ペディクル血流を再評価する。1.5センチメートルを6センチメートル測定する2つの部分に長手方向に分割することによって組織サンプリングを行います。微小手術用のアナストモーゼの作成直後に、文献で推奨される最小流量よりも高い血流値を得た。
したがって、すべての微小外科的アナストモーゼは、手術の1週間後に特許であった。虚血性侮辱時の微小循環血流の観察は、レーザースペックルコントラスト解析技術で可能であった。これには、フラップ再灌流中および周術的に即時の過灌流が含まれ、灌流が少ない異なる領域は、研究終了の7日後に実際に壊死した術後フラップ壊死のリスクが高かった。
8時間の虚血後のフラップ生存領域とその後の再灌流は約40%以前に公表された結果は、このモデルが虚血性侮辱が与えられるフラップと比較すると統計的に有意な差を示す。フラップペディクルに触れることなく、または血管壁に損傷を与えることを避けるためにできるだけ少ないアドベンチアをつかむだけでなく、外科技術による合併症を避けるために適切な微小外科的解剖を行うことを忘れないでください。術中、トランジット時間超音波技術は、微小外科用アナストモーゼの血流を定量化し、したがってフラップ灌流を予測することを可能にする。
術後、レーザースペックルコントラスト解析により、フリーフラップ内の流量のリアルタイムマッピングの半連続性が可能になります。それは有望な技術ですが、さらなる研究が必要です。このビデオは、再建マイクロサージャリーの分野における虚血再灌流傷害に対抗する治療薬を評価するための適切なモデルのプロトコルを説明した。
