現在の研究は、糖尿病性創傷の加速治癒のためのドキシサイクリン装填されたコラーゲンキトサン複合足場である。糖尿病は、血糖のレベルの上昇を特徴とする慢性代謝疾患である。糖尿病を持つ時間が長ければ長いほど、心血管疾患、腎症、神経障害、網膜症、足の損傷などの合併症のリスクが高くなります。
足の神経損傷と足への血流の悪さは、様々な足の合併症のリスクを高めます。放置すると、これらの傷は最終的に足の先、足、または脚の切断を必要とします。およそ、糖尿病患者25%は、生涯に糖尿病性創傷を蓄積する機会を有する。
糖尿病性創傷の治療管理は、最終的に交差する必要があるこれまでのハードルのままです。糖尿病性創傷の病態生理は多因子性であるが、抗炎症薬による局所治療はMMP-9の上昇レベルを低下させ、皮恒常性フレームワークの配置を再確立し、糖尿病性創傷の治癒を促す可能性があると考えられている。MMP-9阻害剤であるドキシサイクリンは、糖尿病創傷の炎症を続ける主要な炎症性分子であるMMP-9のこれらの上昇レベルを抑制するために、この研究で選ばれました。
一方、生体材料は数十年にわたり人間を魅了し、効率的な薬物および高分子送達とオーダーメイドの生物医学装置の開発のための多くのゲームを変える医療ブレークスルーの中核をなしてきました。そこで、この簡単な導入により、糖尿病性創傷の治癒遅延を加速させるために、ドキシサイクリンを装填したコラーゲンキトサン足場を調製しました。インドのウーティにあるJSS薬学部薬剤学科の研究学者、バラト・クマール・レディです。
今日、私たちは、糖尿病性創傷の加速治癒のためのドキシサイクリンロードコラーゲンキトサン足場を準備する方法、手順を調べたい。手順、準備方法を垣間見てみましょう。ラットの尾由来の1.2gのタイプIコラーゲンを摂取するコラーゲン溶液を1.2%用意します。
これに、100mlのミリポア水を加え、コラーゲンが水に膨らませることができるように30分間脇に置いています。次のステップでは、0.8%のキトサン溶液を調製し、そこで0.8グラムの中分子量キトサンを摂取し、これを100mlの1%酢酸と混合した。このソリューションも、30分間は脇に置いています。
30分後、両溶液は2000年のRPMで一晩機械的撹拌を行った。一晩攪拌コラーゲン溶液に、我々はゆっくりとドキシサイクリンの1グラムを追加しています。そして、このコラーゲンとドキシサイクリンを含む溶液を、2000年のRPMで30分間撹拌した。
この溶液に我々はゆっくりと一晩攪拌キトサン溶液を加えている。そして、これは、ドキシサイクリン、コラーゲン、キトサンを含む物理的な混合物としてラベル付けされていることを確認してください。この物理的な混合物は、我々は2000年のRPMで攪拌の別の30分のために行った。
30分後、これらの物理的混合物は、2センチメートルに2の寸法と0.5センチメートルの厚さを有するそれぞれのアルミニウム型に移された。その後、これらの金型を金属容器に移した。これらの金属容器はアルミニウムモールドを含有し、深い凍結を行った。
24時間後、ドキシサイクリン、コラーゲン、キトサンを含む固化した物理的混合物をはっきりと見ることができます。これらの固化した物理的混合物は、さらに凍結乾燥のために行った。凍結乾燥は72時間マイナス85度プラスマイナス4度で行った。
72時間後、凍結乾燥物質を凍結乾燥剤から取り出した。そして、ここでは、ドキシサイクリンを装填したコラーゲンキトサン足場として知られている完全に乾燥した物理的な混合物を明確に見ることができます。これらの足場は架橋を行うために架橋するために施され、最初は、MESバッファーを0.488グラムのMESと15mlの水を摂取して調製し、そこから20mlのMESバッファーを取り出し、ビーカーに別々に移す。
これら20mlのビーカーに、50mgのドキシサイクリンを装填したコラーゲンキトサンを加えた。そして、この足場の浸漬は30分間行われました。30分後、ドキシサイクリンを装填したコラーゲンキトサン足場を20mlMES緩衝液から取り出した。
また、19.5 mlのMESバッファー、0.1264グラムのEDC、および0.014グラムのNHSを含む溶液に浸漬した。この浸漬は、架橋の完了のために4時間の時間間隔で行った。架橋後、架橋したドキシサイクリンを溶液から取り出したコラーゲンキトサン足場を取り出し、容器に移し、前の手順で詳述し、別に乾燥させた。
ここでは、同じ画像と一緒に、非架橋および架橋された足場をはっきりと見ることができます。画像からは、足場の架橋が強い分子内結合の形成による孔サイズの減少をもたらしたことが明らかである。雄のウィスターラットを採取し、2匹を2センチメートルのマークに引き込んだ。
切除創傷はマークの周りに作成され、創傷の追跡はOHPシート上に取られた。創傷の痕跡は、グラフィカルな方法の助けを借りて測定した。動物に作成された創傷は約176ミリメートルでした。
その後、作成された創傷を、一次ドレッシングで架橋ドキシサイクリンを装填したコラーゲンキトサン足場で治療し、21日間監視した。動物が麻酔から回収されると、各動物は個別にケージに入れられた。そして、これらの動物は、通常の食事と水を与えられました。
すべての動物は、創傷を作成した後、各群に6匹の動物を含む3つのグループに分けられた。ここでは、ドキシサイクリンが架橋された足場の創傷減少率が約48%であったゼロ日と7日の違いをはっきりと見ることができ、この画像では、ドキシサイクリンを装填したコラーゲン架橋足場が99%前後で治癒したすべてのグループの14日目と21日目の違いをはっきりと見ることができます。ここでは、21日目に、ドキシサイクリンにロードされたコラーゲンキトサン足場で、再エピゼン化された表皮をはっきりと見ることができます。
対照および架橋足場では、プラセボ以外の何物でもなく、表皮を形成しなければならなかった。私たち自身の研究と同様に、調製されたドキシサイクリン架橋足場は、抗菌および抗炎症特性と共に、良好な機械的強度、生体適合性、持続的な放出吸水性、などの多くの理想的な特性を示しています。これらの足場は、糖尿病性創傷の治療に理想的なドシス形態であり得る。
