El trabajo de investigación actual es andamios compuestos de colágeno-quitosano cargados de doxiciclina para la curación acelerada de heridas diabéticas. La diabetes es una enfermedad metabólica crónica caracterizada por niveles elevados de glucosa en sangre. Cuanto más largo sea el tiempo que el individuo tenga diabetes, mayor será el riesgo de complicaciones, como enfermedad cardiovascular, nefropatía, neuropatía, retinopatía y daño en los pies, etcétera.
El daño a los nervios en los pies y también el flujo sanguíneo deficiente a los pies aumentan el riesgo de varias complicaciones en los pies. Si no se tratan, estas heridas pueden requerir amputaciones en última instancia de los dedos de los pies, los pies o las piernas. Aproximadamente, el 25% de los pacientes con diabetes mellitus tienen la oportunidad de acumular una herida diabética en su vida.
La gerencia terapéutica de heridas diabéticas sigue siendo un cañizo hasta la fecha que necesita ser cruzado eventual. Aunque la patofisiología de la herida diabética es multifactorial, se cree que el tratamiento local con las drogas antiinflamatorias podría disminuir los niveles elevados de MMP-9 y restablece el arreglo cutáneo del marco de la homeostasis y los prompts que curan en heridas diabéticas. Doxycycline, el inhibidor MMP-9, fue elegido en este estudio para suprimir estos niveles elevados de MMP-9, una molécula inflamatoria importante responsable de la inflamación continua de heridas diabéticas.
Por otro lado, los biomateriales han fascinado a los humanos durante varias décadas y han estado en el centro de muchos avances médicos que cambian las reglas del juego para la administración eficiente de medicamentos y macromoleculares y el desarrollo de dispositivos biomédicos hechos a medida. Por lo tanto, con esta breve introducción, hemos preparado un andamio de colágeno-quitosano cargado de doxiciclina para atenuar, para acelerar la cicatrización retrasada en heridas diabéticas. Se trata de Bharat Kumar Reddy, investigador del Departamento de Farmacología, JSS College of Pharmacy, Ooty, India.
Hoy estamos aquí para ver en el procedimiento, cómo preparar doxiciclina cargado colágeno-quitosano andamio para la curación acelerada de heridas diabéticas. Echemos un vistazo al procedimiento, cómo prepararse. Vamos a preparar un 1,2% de solución de colágeno, para lo cual estamos tomando 1,2 gramos de colágeno tipo I, que es de origen cola de rata.
A esto, estamos agregando 100 ml de agua millipore y lo mantuvimos a un lado durante media hora para permitir que el colágeno se abulte en agua. En el siguiente paso, se preparó un 0,8% de solución de quitosano, para lo cual estamos tomando 0,8 gramos de quitosano de peso molecular medio, y este se mezcló con 100 ml de ácido acético al 1%. Esta solución también, la hemos mantenido a un lado durante media hora.
Después de media hora, ambas soluciones fueron sometidas a agitación mecánica durante la noche a una RPM de 2000. A la solución de colágeno agitado durante la noche estamos agregando lentamente un gramo de doxiciclina. Y la solución que contenía este colágeno y doxiciclina fue sometida durante media hora de agitación a una RPM de 2000.
A esta solución estamos añadiendo lentamente la solución de quitosano agitado durante la noche. Y esto, asegúrese de que está etiquetado como mezcla física que contiene doxiciclina, colágeno, quitosano. Esta mezcla física la hemos sometido durante otra media hora de agitación a una RPM de 2000.
Después de media hora, estas mezclas físicas se transfirieron a los respectivos moldes de aluminio, que tienen unas dimensiones de dos en dos centímetros y un espesor de 0,5 centímetros. Más tarde, estos moldes fueron transferidos a un contenedor de metal. Estos contenedores metálicos contenían los moldes de aluminio, fueron sometidos a congelación profunda.
Después de 24 horas, podemos ver claramente la mezcla física solidificada que contiene doxiciclina, colágeno y quitosano. Esta mezcla física solidificada fue sujetada más a fondo para la liofilización. La liofilización se realizó a menos 85 grados más/menos cuatro grados centígrados durante 72 horas.
Después de 72 horas, el material liofilizado fue sacado del liofilizador. Y aquí podemos ver claramente la mezcla física completamente seca, que no es más que conocida como andamio de colágeno-quitosano cargado de doxiciclina. Estos andamios fueron sometidos a reticulado Con el fin de realizar el reticulado, inicialmente, el tampón MES se preparó tomando 0,488 gramos de MES y 15 ml de agua, de los que estamos sacando 20 ml de tampón MES y transfiriéndolos por separado a su casto.
A estos 20 ml de casto se añadieron 50 mg de doxiciclina cargado de colágeno-quitosano. Y el remojo de este andamio se realizó durante media hora. Después de media hora, el andamio de colágeno-quitosano cargado de doxiciclina fue sacado del tampón MES de 20 ml.
Además, se empapó en una solución que contenía 19,5 ml de tampón MES, 0,1264 gramos de EDC y 0,014 gramos de NHS. El remojo se realizó durante un intervalo de tiempo de cuatro horas para la finalización de la reticulación. Después de la reticulación, el andamio de colágeno-quitosano cargado de doxiciclina reticulado se sacó de la solución y se transfirió a un contenedor, que se detalló en el procedimiento anterior, y se secó por separado.
Aquí podemos ver claramente el andamio no reticulado y reticulado, junto con las mismas imágenes. De las imágenes se desprende claramente que la reticulación del andamio dio lugar a una disminución del tamaño de los poros debido a la formación de fuertes enlaces intramoleculares. La rata masculina de Wistar fue tomada y los dos en la marca de dos centímetros fueron dibujados en la región torácica dorsal.
La herida de la supresión fue creada alrededor de la marca y el trazo de la herida fue tomado en una hoja de OHP. El rastro de la herida fue medido con la ayuda del método gráfico. La herida creada en el animal fue de unos 176 mm.
Más adelante, la herida creada fue tratada con el andamio cargado doxycycline reticulado del colágeno-quitosano con la preparación primaria y supervisada por 21 días. Una vez que el animal fue recuperado de la anestesia, cada animal fue enjaulado individualmente. Y estos animales fueron alimentados con dieta normal y agua.
Todos los animales, después de crear la herida, fueron divididos en tres grupos en los cuales cada grupo contenía seis animales. Aquí podemos ver claramente la diferencia entre el día cero y el día siete en el que la reducción de la herida de andamios reticulados cargados de doxiciclina fue de alrededor del 48% Y en esta imagen podemos ver claramente la diferencia entre el día 14 y el día 21 de todos los grupos en los que el andamio reticulado de colágeno cargado de doxiciclina se curó alrededor del 99% El área curada se aisló y procesó para estudios histopatológicos con la ayuda de la tinción de HMB. Aquí podemos ver claramente la epidermis reepithelized, el día 21, en el andamio de quitosano de colágeno cargado de doxiciclina.
Mientras que en el andamio de control y reticulado, nada más que placebo, todavía la epidermis tuvo que ser formada. Al igual que nuestro propio estudio, los andamios reticulados de doxiciclina preparados han exhibido muchas propiedades ideales, como buena resistencia mecánica, biocompatibilidad, absorción de agua de liberación sostenida, junto con propiedades antibacterianas y antiinflamatorias. Estos andamios pueden ser una forma de dosis ideal para el tratamiento de heridas diabéticas.
