食物摂取のタイミングを制限することは、食事誘発性代謝性疾患を弱めるための有望な介入として浮上しています。このプロトコルは、マウスのリズミカルな食物摂取量を測定および操作するための、社内で構築された効率的なシステムの構築と使用について詳しく説明します。このシステムの主な利点は、手頃な価格の材料を使用して構築できる低コストで効率的なシステムであると同時に、ユーザーフレンドリーであることです。
このシステムは、自由摂取、時間制限、不整脈スケジュールなどのさまざまな給餌レジメンでマウスに給餌するために使用でき、高脂肪食を組み込んで生理機能への影響を研究することができます。まず、0.25インチのPVCシートを4枚調達します。4枚のPVCをカットして接着し、ベースを取得します。
次にタイマーを開いてプラグを抜き、標準の延長または電気コードを使用して接続します。タイマーをPVCベースに配置して、ドリルで開けた穴に合わせ、1.5インチのネジを使用して固定します。タイマーの上部に4つの穴を開け、0.75インチのネジを固定して8コンパートメントの食品容器を保持します。
幅が4.5インチを超えるマウスケージを使用し、ホールソーを使用してケージの下部に4.5インチの穴を開けます。次に、4インチ、8コンパートメントのジュエリーオーガナイザーを使用してフードディスペンサーを作成します。パイプにうまく収まるように、容器の縁を切ります。
4インチのPVCパイプキャップを使用し、1つのディスペンサーコンパートメントのサイズに対応する穴を開けて、一度に8つのコンパートメントのうちの1つだけを露出させる開口部を作成します。すべてのケージが設定されたら、最終セットアップの準備が整います。輸送を容易にするために、0.25インチのPVCパイプを3本取り、2本の部品の中央に0.625インチの穴を開けて接着します。
次に、0.625インチのPVCパイプをそれらに通します。その後、フードカップをこのアセンブリに積み重ねることができます。セットアップを電源コンセントに接続して、マウスを導入する前にタイマーを評価します。
記録された時間に1つのコンパートメントにネスレットを置き、6時間後にネスレットの位置を監視して、タイマーがすぐに回転することを確認します。マウスを実験室に移し、原稿に記載されているように、明暗サイクルセットに順応させます。マウスをフィーダーケージに個別に収容する前にマウスの体重を記録し、マウスが水、寝具、および小巣に自由にアクセスできることを確認します。
フィーダーカップの8つのコンパートメントすべてに1.5グラムの食品を追加し、フィーダーカップをタイマーに置きます。次に、1つのコンパートメントだけが露出するように、フィーダーカップに蓋をします。4 つのコンパートメントは昼間のポイントを表し、他の 4 つのコンパートメントは夜間のポイントを表します。
毎日同時に食べ物を交換し、各コンパートメントに残っているペレットの数を数えて、消費された食べ物の量を計算します。1週間の摂食プロファイルを監視して、自由摂取と夜間制限食を与えられたマウスのベースライン摂食プロファイルを取得します。3〜7日間の自由食の後、デイコンパートメント内のペレットの数を徐々に減らすことにより、マウスを移行食にします。
マウスが夜間制限レジメンに適応した後、2週間食物摂取量を監視します。.この期間中、各マウスに与える食物の量を調整して、総食物消費量に合わせます。2週間の終わりにマウスの体重を測定し、摂食レジメンによる体重変化を監視します。
一週間の自由食の後、原稿に記載されているように、毎日の平均食物消費量と各区画で提供される食物の量を計算します。マウスが一日を通して8つのコンパートメントすべてで同じ量の食物を確実に得ることによって、不整脈摂食を達成します。次に、コンパートメントごとに与えられる食物の量を3〜5日間にわたって徐々に減らして、マウスを移行食に置き、食物摂取のリズムを廃止します。
不整脈食中は、マウスが数個のペレットだけを残し、適切な量の食物を得るように、毎日食物を調整してください。原稿に記載されているように調整します。摂食計画による体重変化を監視するには、2週間の終わりにマウスの体重を測定します。
摂食プロファイルは、通常の固形飼料を自由に与えられた野生型マウスが夜間に食物の約75%を食べることを示しています。高脂肪食を自由に与えられたマウスは、おそらく高脂肪食の目新しさのために、曝露の最初の2日間により多くの食物を食べました。3時間ごとの毎日の平均食物摂取量。
通常の固形飼料または高脂肪食を与えられたマウスの昼夜間の食物摂取量の平均および割合は同等であった。雄マウスは、通常の固形飼料および高脂肪食を自由摂取して1週間後に有意な体重増加を示した。夜間制限食に移行したマウスは、最初の3〜5週間はカロリー摂取量を大幅に減らすことなく、夜間のみ1日の総カロリーを食べました。.
不整脈食に移行したマウスは、一日を通して毎日の総カロリーを同じ量で消費し、毎日の食物摂取リズムを劇的に弱めました。マウスは、夜間制限および不整脈摂食レジームの後に体重増加を示した。この給餌システムを使用する際に覚えておくべき最も重要なことは、タイマーが実験を通して適切に機能することを確認することです。
この給餌システムを使用すると、研究者は要件に応じて食品の配達をカスタマイズでき、最終的にはさまざまな食事のタイミングが健康や病気に与える影響についての質問に答えるのに役立ちます。
