ラットモデルにおける尿道狭窄誘導とそれに続く頬粘膜移植尿道形成術

このプロトコルでは、頬粘膜移植片を使用した尿道再建術が、疾患を模倣するために重要な局所病態生理学的環境で初めて開発されます。この技術により、革新的な治療法を開発し、その分子メカニズムと臨床的利点をトランスレーショナルな方法で研究することができます。まず、麻酔をかけたラットの両眼に保護眼球ゲルを塗布します。

動物をヒートパッドの背側褥瘡の位置に置き、外科的処置のためにラットの上に解剖顕微鏡を配置します。陰茎の包皮を引っ込めた後、陰茎腺に表面的な7-0縫合糸を背側に配置します。ペニスを引っ込めたままにするために、ニードルホルダーを所定の位置に置いておきます。

22ゲージの静脈カテーテルを尿道に挿入し、潤滑剤ゲルを使用してカテーテル挿入します。外科用メスの刃で陰茎の皮膚を長さ1センチメートルの腹側切開します。尿道がシャフトの中央レベルに露出するまで、鉗子とスプリングハサミで陰茎組織層を解剖します。

尿道の片側と腹側に電気焼灼装置で電流を流し、陰茎の中央軸に電流を流します。切開部を6ゼロ吸収性ランニング縫合糸で閉じます。尿道カテーテルと陰茎牽引縫合糸を取り外します。

ラットを腹側褥瘡の位置に置き、鎮静剤溶液の皮下注射を投与します。.麻酔をかけたラットの下唇、頬粘膜、陰茎、腹部の皮膚をポビドンヨードで洗浄します。下唇の両側と中央に3本の7-0縫合糸を置きます。

それぞれに蚊を入れて唇を引っ込め、内側の粘膜を露出させます。スプリングハサミと先のとがった鉗子を使用して、下唇の内側の頬粘膜から4ミリメートルの移植片を採取します。無菌の0.9%生理食塩水を入れた小さなレシピエントに移植片を入れます。

ドナー領域をスポンジで圧縮します。下唇の以前に配置したステー縫合糸を取り除き、陰茎を露出させます。22ゲージの静脈カテーテルを尿道に挿入し、潤滑剤ゲルを使用して焼灼します。

スプリングハサミを使用して、円周状に冠状下切開を行い、陰茎を根元まで外します。残りの層を解剖して尿道を露出させます。冠状溝から約3ミリメートル離れたところに4ミリメートルの縦方向の腹側切開を行い、狭窄のレベルで尿道をへら状にします。

へらの両側に2つの7-zeroステイ縫合糸を配置します。それぞれに蚊を残して尿道を引っ込めます。へらの両端に2本の非吸収性7オー縫合糸を置きます。

頬粘膜移植片を腹側オンレー方式で配置し、粘膜側を尿道内腔に向けます。縫合糸の1つを移植片に通し、ランニング縫合糸で半楕円を実行します。尿道カテーテルを抜去し、陰茎の皮膚の位置を変えます。

円周方向の冠状下切開部を6ゼロ吸収性断続縫合糸で閉じます。陰茎牽引縫合糸を取り除き、前に示したように鎮静剤溶液を投与します。狭窄誘導を受けたラットは、尿管径0.92mmを示し、移植尿道形成術の2週間後には1.59mmに改善した。

尿道形成術後の平均血流は、尿道形成術前の動物と比較して有意に減少した。電流が多すぎると、尿道閉鎖のリスクにつながる可能性があります。移植片は、瘻孔を避けるために、粘膜が尿道内腔に面するように、水密の流水縫合糸で配置する必要があります。

移植片によるあらゆる種類の尿道形成術を行うことができ、異なる種類の移植片を評価することができる。この実験モデルにより、移植片の使用を最適化し、臨床ニーズに合わせてトランスレーショナルリサーチに影響を与える組織工学材料などの新しい治療戦略を探求することができます。