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Digital Microfluidics for Automated Proteomic Processing

Clinical proteomics has emerged as an important new discipline, promising the discovery of biomarkers that will be useful for early diagnosis and ...

University of Toronto

Donnelly Centre for Cellular and Biomolecular Research

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Pluronic &#x6DFB;&#x52A0;&#x5242;&#xFF1A; &#x6570;&#x5B57;&#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53;&#x7684;&#x7C98;&#x6EDE;&#x95EE;&#x9898;&#x7684;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x3002;

Digital microfluidics (DMF) is a promising technique for carrying out miniaturized, automated biochemical assays in which discrete droplets of reagents are actuated on the surface of an array of electrodes. A limitation for DMF is nonspecific protein adsorption to device surfaces, which interferes with assay fidelity and can cause droplets to become unmovable. Here, we report the results of a quantitative analysis of protein adsorption on DMF devices by means of confocal microscopy and secondary ion mass spectrometry. This study led us to a simple and effective method for limiting the extent of protein adsorption: the use of low concentrations of Pluronic F127 as a solution additive. This strategy has a transformative effect on digital microfluidics, facilitating the actuation of droplets containing greater than 1000-fold higher protein concentrations than is possible without the additive. To illustrate the benefits of this new method, we implemented a DMF-driven protein digest assay using large concentrations (1 mg/mL) of protein-substrate. The use of Pluronic additives solves a sticky problem in DMF, which greatly expands the range of applications that are compatible with this promising technology.

Pluronic additives: a solution to sticky problems in digital microfluidics.

Num&#xE9;rique microfluidique (DMF) est une technique prometteuse pour effectuer miniaturis&#xE9;s automatis&#xE9;s tests biochimiques dans lequel des gouttelettes discr&#xE8;tes de r&#xE9;actifs sont actionn&#xE9;s sur la surface d&#x26;#39;un r&#xE9;seau d&#x26;#39;&#xE9;lectrodes. Une limitation du DMF est une prot&#xE9;ine non sp&#xE9;cifique d&#x26;#39;adsorption sur les surfaces p&#xE9;riph&#xE9;riques, ce qui interf&#xE8;re avec la fid&#xE9;lit&#xE9; test et peut causer des gouttelettes de devenir inamovible. Ici, nous rapportons les r&#xE9;sultats d&#x26;#39;une analyse quantitative de l&#x26;#39;adsorption des prot&#xE9;ines sur des appareils DMF au moyen de la microscopie confocale et la spectrom&#xE9;trie de masse d&#x26;#39;ions secondaires. Cette &#xE9;tude nous a conduit &#xE0; une m&#xE9;thode simple et efficace pour limiter l&#x26;#39;&#xE9;tendue de l&#x26;#39;adsorption des prot&#xE9;ines: l&#x26;#39;utilisation de faibles concentrations de Pluronic F127 comme un additif de solution. Cette strat&#xE9;gie a un effet transformateur sur la microfluidique num&#xE9;riques, facilitant l&#x26;#39;actionnement de gouttelettes contenant plus de 1000 fois la concentration de prot&#xE9;ines plus &#xE9;lev&#xE9;s que ce qui est possible sans l&#x26;#39;additif. Pour illustrer les avantages de cette nouvelle m&#xE9;thode, nous avons mis en place un DMF ax&#xE9;e digestion prot&#xE9;ique dosage en utilisant de fortes concentrations (1 mg / ml) de prot&#xE9;ines-substrat. L&#x26;#39;utilisation d&#x26;#39;additifs Pluronic r&#xE9;sout un probl&#xE8;me collant dans le DMF, ce qui &#xE9;largit consid&#xE9;rablement la gamme des applications qui sont compatibles avec cette technologie prometteuse.

Additifs Pluronic: une solution aux probl&#xE8;mes collants en microfluidique digitale

Digitale Biochips (DMF) ist eine vielversprechende Technik f&uuml;r die Durchf&uuml;hrung von miniaturisierten, automatisierte biochemische Proben, die in denen diskrete Tr&ouml;pfchen von Reagenzien auf der Oberfl&auml;che eines Arrays von Elektroden bet&auml;tigt werden. Eine Einschr&auml;nkung f&uuml;r DMF ist unspezifische Proteinadsorption Ger&auml;t Oberfl&auml;chen, die Probe Treue beeintr&auml;chtigt und kann dazu f&uuml;hren, dass Tr&ouml;pfchen, unbeweglich zu werden. Hier berichten wir die Ergebnisse einer quantitativen Analyse der Proteinadsorption DMF-Ger&auml;te durch konfokale Mikroskopie und Sekund&auml;rionen-Massenspektrometrie. Diese Untersuchung f&uuml;hrte uns auf eine einfache und effektive Methode zur Begrenzung des Umfangs der Proteinadsorption: die Verwendung von niedrigen Konzentrationen von Pluronic F127 als additive L&ouml;sung. Diese Strategie hat eine transformative Wirkung auf digitale Microfluidics, erleichtern die Bet&auml;tigung der Tr&ouml;pfchen mit 1000-fold h&ouml;herer Protein-Konzentration als m&ouml;glich ohne das Additiv ist gr&ouml;&szlig;er. Um die Vorteile dieser neuen Methode zu veranschaulichen, haben wir ein DMF-gesteuerte Digest Proteinprobe mit gro&szlig;e Konzentrationen (1 mg/mL) von Protein-Substrat umgesetzt. Pluronic Additive l&ouml;st eine klebrige Problem in DMF, die stark das Einsatzspektrum erweitert, die mit dieser vielversprechenden Technologie kompatibel sind.

Pluronic Zusatzstoffe: eine L&ouml;sung f&uuml;r klebrige Probleme in digitalen Mikrofluidik.

Microfluidics digitale (DMF) &egrave; una tecnica promettente per effettuare dosaggi biochimici miniaturizzati, automatizzati in cui vengono azionate in goccioline discrete dei reagenti sulla superficie di una matrice di elettrodi. Una limitazione per DMF &egrave; adsorbimento di proteine aspecifiche alle superfici del dispositivo, che interferisce con la fedelt&agrave; di dosaggio e pu&ograve; causare le goccioline diventare inamovibile. Qui, segnaliamo i risultati di un&#39;analisi quantitativa di adsorbimento di proteine su dispositivi DMF mediante microscopia confocale e spettrometria di massa di ioni secondari. Questo studio ci ha portato ad un metodo semplice ed efficace per limitare l&#39;entit&agrave; dell&#39;adsorbimento di proteine: l&#39;uso di basse concentrazioni di Pluronic F127 come una soluzione additiva. Questa strategia ha un effetto trasformativo su microfluidics digitale, facilitando l&#39;attuazione di goccioline contenenti maggiore di alte concentrazioni di proteina che &egrave; possibile senza l&#39;additivo. Per illustrare i vantaggi di questo nuovo metodo, abbiamo implementato un dosaggio di digerire proteine DMF-driven utilizzando grandi concentrazioni (1 mg/mL) della proteina substrato. L&#39;uso di additivi Pluronic risolve un problema appiccicoso in DMF, che espande notevolmente la gamma di applicazioni che sono compatibili con questa tecnologia promettente.

Pluronic additivi: una soluzione ai problemi appiccicosi in digitale microfluidica.

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&#x30D7;&#x30EB;&#x30ED;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x6DFB;&#x52A0;&#x7269;&#xFF1A;&#x30C7;&#x30B8;&#x30BF;&#x30EB;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AD;&#x554F;&#x984C;&#x306E;&#x89E3;&#x6CD5;

&#xB514;&#xC9C0;&#xD138; microfluidics (DMF) &#xC18C;&#xD615;&#xD654;, &#xC790;&#xB3D9;&#xD654; &#xB41C; &#xC0DD; &#xD654; &#xD655; &#xC801;&#xC778; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC2DC; &#xC57D;&#xC758; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xBC29;&#xC6B8; &#xC804;&#xADF9;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC791;&#xB3D9;&#xC740; &#xC218;&#xD589;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xB9DD; &#xAE30;&#xC220; &#xC774;&#xB2E4;. DMF&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD55C;&#xACC4;&#xB294; &#xC77C;&#xBC18; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD761;&#xCC29; &#xC7A5;&#xCE58; &#xD45C;&#xBA74; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4; &#xBC29;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xB3D9;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xB418;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC791;&#xC740; &#xBB3C;&#xBC29;&#xC6B8;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; confocal &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; &#xBC0F; 2 &#xCC28; &#xC774;&#xC628; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; DMF &#xC7A5;&#xCE58;&#xC5D0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD761;&#xCC29;&#xC758; &#xC815;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xBCF4;&#xACE0;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD761;&#xCC29;&#xC758; &#xBC94;&#xC704;&#xB97C; &#xC81C;&#xD55C; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC04;&#xB2E8; &#xD558; &#xACE0; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC8FC;&#xB3C4;: &#xCCA8;&#xAC00;&#xC81C; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC73C;&#xB85C; Pluronic f127&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. &#xC774; &#xC804;&#xB7B5;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xCCA8;&#xAC00;&#xC81C; &#xC5C6;&#xC774; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xAC83; &#xBCF4;&#xB2E4; 1000-fold &#xB192;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB18D;&#xB3C4; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD070; &#xBC29;&#xC6B8;&#xC758; &#xAC1C;&#xD3D0;&#xB97C; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xB514;&#xC9C0;&#xD138; microfluidics transformative &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; &#xC788;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;-&#xAE30;&#xD310;&#xC758; &#xD070; &#xB18D;&#xB3C4; (1 mg/mL)&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; DMF &#xAE30;&#xBC18; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB2E4;&#xC774;&#xC81C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xAD6C;&#xD604; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.&#xC774; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xD61C;&#xD0DD;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Pluronic &#xCCA8;&#xAC00;&#xC81C;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC774; &#xC720;&#xB9DD;&#xD55C; &#xAE30;&#xC220;&#xC5D0; &#xD638;&#xD658; &#xB418;&#xB294; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC758; &#xBC94;&#xC704;&#xB97C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD655;&#xC7A5; DMF&#xC5D0; &#xB048; &#xC801; &#xBB38;&#xC81C;&#xB97C; &#xD574;&#xACB0; &#xD55C;&#xB2E4;.

Pluronic &#xCCA8;&#xAC00;&#xC81C;: &#xB514;&#xC9C0;&#xD138; microfluidics &#xB048; &#xC801; &#xBB38;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD574;&#xACB0;&#xCC45;.

Digital microflu&#xED;dica (DMF) es una t&#xE9;cnica prometedora para llevar a cabo miniaturizados, ensayos bioqu&#xED;micos automatizados en los que las gotas discretas de los reactivos son accionados en la superficie de una matriz de electrodos. Una limitaci&#xF3;n de DMF es inespec&#xED;fica adsorci&#xF3;n de prote&#xED;nas a las superficies del dispositivo, lo cual interfiere con la fidelidad de ensayo y pueden causar gotitas para convertirse en inamovible. En este caso, se reportan los resultados de un an&#xE1;lisis cuantitativo de la adsorci&#xF3;n de prote&#xED;nas en los dispositivos de DMF por medio de microscop&#xED;a confocal y la espectrometr&#xED;a de masas de iones secundarios. Este estudio nos llev&#xF3; a un m&#xE9;todo sencillo y eficaz para limitar el alcance de la adsorci&#xF3;n de prote&#xED;nas: el uso de bajas concentraciones de Pluronic F127 como una soluci&#xF3;n aditiva. Esta estrategia tiene un efecto transformador en la microflu&#xED;dica digitales, facilitando la actuaci&#xF3;n de las gotas que contienen m&#xE1;s de 1000 veces superiores a las concentraciones de prote&#xED;nas es posible sin el aditivo. Para ilustrar los beneficios de este nuevo m&#xE9;todo, hemos implementado un &#xED;ndice CPO-impulsada por ensayo de prote&#xED;nas resumen con grandes concentraciones (1 mg / ml) de prote&#xED;na-sustrato. El uso de aditivos Pluronic resuelve un problema pegajosa en DMF, lo que ampl&#xED;a considerablemente la gama de aplicaciones que son compatibles con esta prometedora tecnolog&#xED;a.

Aditivos Pluronic: una soluci&#xF3;n a los problemas de Sticky en microflu&#xED;dica digital

&#x6570;&#x5B57;&#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53; (DMF) &#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x6D41;&#x4F53;&#x5904;&#x7406;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4F7F;&#x79BB;&#x6563;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x7684;&#x7535;&#x6781;&#x9635;&#x5217;&#x4E0A;&#x7684;&#x64CD;&#x7EB5;&#x3002;&#x6709;&#x76F8;&#x5F53;&#x5927;&#x7684;&#x70ED;&#x60C5;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x57FA;&#x4E8E;&#x9635;&#x5217;&#x7684;&#x7B5B;&#x9009;&#x5E94;&#x7528;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;&#x4E3A; DMF &#x9650;&#x5236;&#x662F;&#x975E;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x5438;&#x9644;&#x7684;&#x8BD5;&#x5242;&#x5BF9;&#x8BBE;&#x5907;&#x8868;&#x9762;&#x3002;&#x5982;&#x679C;&#x7ED9;&#x5B9A;&#x7684;&#x8BBE;&#x5907;&#x7528;&#x6765;&#x9A71;&#x52A8;&#x591A;&#x4E2A;&#x8BD5;&#x5242;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x73B0;&#x8C61;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E0D;&#x826F;&#x7684;&#x4EA4;&#x53C9;&#x6C61;&#x67D3;&#x3002;&#x4E8C;&#x7532;&#x57FA;&#x7532;&#x9170;&#x80FA; &#xFF08;&#x4EE5;&#x53CA;&#x6240;&#x6709;&#x5176;&#x4ED6;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF09; &#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x9650;&#x5236;&#x662F;&quot;&#x4E16;&#x754C;&#x82AF;&#x7247;&quot;&#x754C;&#x9762; &#xFF1B;&#x5B83;&#x662F;&#x4F17;&#x6240;&#x5468;&#x77E5;&#x7684;&#x96BE;&#x4EE5;&#x65E0;&#x635F;&#x5FEB;&#x901F;&#x5206;&#x6790;&#x7ECF;&#x5E38;&#x7092;&#x4F5C;&#x4F18;&#x52BF;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x6B64;&#x7C7B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x8BD5;&#x5242;&#x548C;&#x6837;&#x54C1;&#x548C;&#x8BD5;&#x5242;&#x6D88;&#x8D39;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F15;&#x5165;&#x6570;&#x5B57;&#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x53EF;&#x79FB;&#x52A8;&#x7684;&#x5851;&#x80F6;&quot;&#x76AE;&#x80A4;&quot;&#xFF0C;(a) &#x6D88;&#x9664;&#x4EA4;&#x53C9;&#x6C61;&#x67D3;&#xFF0C;(b) &#x7F29;&#x5C0F;&#x4E16;&#x754C;&#x5230;&#x82AF;&#x7247;&#x63A5;&#x53E3;&#x7684;&#x65B0;&#x6218;&#x7565;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x5BF9;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x7684;&#x9176;&#x4ED3;&#x5E93;&#x5B9E;&#x73B0;&#x7247;&#x4E0A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x6D88;&#x5316;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x4E86;&#x8FD9;&#x79CD;&#x683C;&#x5F0F;&#x7684;&#x5B9E;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B0;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D8;&#x6362; DMF &#x4ECE;&#x6B63;&#x5728;&#x597D;&#x5947;&#x7684;&#x7231;&#x597D;&#x8005;&#x5230;&#x4E00;&#x79CD;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x5E7F;&#x5927;&#x751F;&#x5316;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x975E;&#x5E38;&#x6709;&#x7528;&#x3002;

&#x6570;&#x5B57;&#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53;&#x4E00;&#x4E16;&#x754C;&#x5230;&#x82AF;&#x7247;&#x63A5;&#x53E3;&#x3002;

Digital microfluidics (DMF) is a fluid handling technique that enables manipulation of discrete droplets on an array of electrodes. There is considerable enthusiasm for this method because of the potential for array-based screening applications. A limitation for DMF is nonspecific adsorption of reagents to device surfaces. If a given device is used to actuate multiple reagents, this phenomenon can cause undesirable cross-contamination. A second limitation for DMF (and all other microfluidic systems) is the "world-to-chip" interface; it is notoriously difficult to deliver reagents and samples to such systems without compromising the oft-hyped advantages of rapid analyses and reduced reagent consumption. We introduce a new strategy for digital microfluidics, in which a removable plastic "skin" is used to (a) eliminate cross-contamination and (b) bridge the world-to-chip interface. We demonstrated the utility of this format by implementing on-chip protein digestion on immobilized enzyme depots. This new method has the potential to transform DMF from being a curiosity for aficionados into a technology that is useful for biochemical applications at large.

A world-to-chip interface for digital microfluidics.

Num&#xE9;rique microfluidique (DMF) est une technique de traitement de fluide qui permet la manipulation de gouttelettes discr&#xE8;tes sur un r&#xE9;seau d&#x26;#39;&#xE9;lectrodes. Il ya beaucoup d&#x26;#39;enthousiasme pour cette m&#xE9;thode en raison du potentiel pour des applications de d&#xE9;pistage bas&#xE9;s sur r&#xE9;seau. Une limitation du DMF est l&#x26;#39;adsorption non sp&#xE9;cifique des r&#xE9;actifs aux surfaces p&#xE9;riph&#xE9;riques. Si un p&#xE9;riph&#xE9;rique donn&#xE9; est utilis&#xE9; pour actionner de multiples r&#xE9;actifs, ce ph&#xE9;nom&#xE8;ne peut causer la contamination crois&#xE9;e ind&#xE9;sirable. Une deuxi&#xE8;me limite pour le DMF (et tous les autres syst&#xE8;mes microfluidiques) est le &#xAB;monde-&#xE0;-puce&#x26;quot; interface, il est notoirement difficile &#xE0; administrer les r&#xE9;actifs et &#xE9;chantillons &#xE0; de tels syst&#xE8;mes sans compromettre les avantages souvent hyped des analyses rapides et de la consommation de r&#xE9;actif r&#xE9;duite. Nous introduisons une nouvelle strat&#xE9;gie pour la microfluidique num&#xE9;riques, dans lequel une mati&#xE8;re plastique amovible &#x26;quot;peau&#x26;quot; est utilis&#xE9; pour (a) d&#x26;#39;&#xE9;liminer la contamination crois&#xE9;e et (b) du pont de l&#x26;#39;interface dans le monde &#xE0; puce. Nous avons d&#xE9;montr&#xE9; l&#x26;#39;utilit&#xE9; de ce format en mettant en &#x153;uvre la digestion des prot&#xE9;ines sur la puce sur les d&#xE9;p&#xF4;ts enzyme immobilis&#xE9;e. Cette nouvelle m&#xE9;thode a le potentiel pour transformer DMF d&#x26;#39;&#xEA;tre une curiosit&#xE9; pour les amateurs dans une technologie qui est utile pour des applications biochimiques dans son ensemble.

Une interface mondiale-&#xE0;-puce pour la microfluidique digitale

Digitale Biochips (DMF) ist eine Fl&uuml;ssigkeit, die Umgang mit Technik, die Manipulation von diskreten Tr&ouml;pfchen auf ein Array von Elektroden erm&ouml;glicht. Es gibt gro&szlig;e Begeisterung f&uuml;r diese Methode aufgrund m&ouml;glicher Screening Array-basierte Anwendungen. Eine Einschr&auml;nkung f&uuml;r DMF ist unspezifische Adsorption von Reagenzien zum Ger&auml;t Oberfl&auml;chen. Wenn ein bestimmtes Ger&auml;t verwendet wird, mehrere Reagenzien zu bet&auml;tigen, kann dieses Ph&auml;nomen unerw&uuml;nschten Kontamination f&uuml;hren. Eine zweite Einschr&auml;nkung f&uuml;r DMF (und alle anderen mikrofluidische Systeme) ist die &quot;Welt-to-Chip&quot;-Schnittstelle; Es ist notorisch schwierig zu Reagenzien und Proben an solche Systeme zu liefern, ohne dabei die h&auml;ufig-gehypten Vorteile schnelle Analysen und Reagenzienverbrauch reduziert. Wir f&uuml;hren eine neue Strategie f&uuml;r digitale Microfluidics, in denen ein herausnehmbare Kunststoff &quot;Haut&quot; (a) eliminieren Kreuzkontamination und (b) Br&uuml;cke der Welt-zu-Span-Schnittstelle verwendet wird. Wir bewiesen die N&uuml;tzlichkeit dieses Format durch die Umsetzung auf dem Chip Proteinverdauung auf stillgestellte Enzym-Depots. Diese neue Methode hat das Potenzial, DMF vom sein ein Kuriosum f&uuml;r Aficionados in eine Technologie, die n&uuml;tzlich f&uuml;r biochemische Anwendungen bei gro&szlig;en zu verwandeln.

Eine Welt-zu-Span-Schnittstelle f&uuml;r digitale Mikrofluidik.

Microfluidics digitale (DMF) &egrave; un fluido gestione tecnica che consente la manipolazione di goccioline discrete su una matrice di elettrodi. C&#39;&egrave; una notevole entusiasmo per questo metodo a causa del potenziale per le applicazioni basate su array screening. Una limitazione per DMF &egrave; adsorbimento non specifico dei reagenti alle superfici del dispositivo. Se un determinato dispositivo &egrave; utilizzato per azionare pi&ugrave; reattivi, questo fenomeno pu&ograve; causare contaminazioni indesiderate. Una seconda limitazione per DMF (e tutti gli altri sistemi microfluidici) &egrave; l&#39;interfaccia di &quot;mondo-a-chip&quot;; &egrave; notoriamente difficile da fornire reagenti e campioni di tali sistemi senza compromettere i vantaggi della rapide analisi oft-hyped e ridotto consumo di reagente. Introduciamo una nuova strategia per la microfluidica digitale, in cui viene utilizzata una &quot;pelle&quot; di plastica rimovibile (un) eliminare la contaminazione incrociata e (b) ponte dell&#39;interfaccia del mondo-a-chip. Abbiamo dimostrato l&#39;utilit&agrave; di questo formato implementando on-chip proteina digestione su depositi di enzimi immobilizzati. Questo nuovo metodo ha il potenziale per trasformare DMF da essere una curiosit&agrave; per gli appassionati in una tecnologia che &egrave; utile per le applicazioni di biochimiche al grande.

Un&#39;interfaccia mondo-a-chip per la microfluidica digitale.

&#x30C7;&#x30B8;&#x30BF;&#x30EB;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF08;DMF&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x96FB;&#x6975;&#x306E;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x4E0A;&#x306B;&#x96E2;&#x6563;&#x7684;&#x306A;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x306E;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x6D41;&#x4F53;&#x51E6;&#x7406;&#x6280;&#x8853;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#xB7;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#xB7;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x71B1;&#x610F;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002; DMF&#x306E;&#x5236;&#x9650;&#x306F;&#x3001;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x8868;&#x9762;&#x3078;&#x306E;&#x8A66;&#x85AC;&#x306E;&#x975E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x5438;&#x7740;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x4E0E;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x304C;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x8A66;&#x85AC;&#x3092;&#x4F5C;&#x52D5;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x73FE;&#x8C61;&#x306F;&#x671B;&#x307E;&#x3057;&#x304F;&#x306A;&#x3044;&#x4EA4;&#x5DEE;&#x6C5A;&#x67D3;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002; DMF&#xFF08;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4ED6;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#xFF09;&#x306E;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x306E;&#x5236;&#x9650;&#x306F;&#x3001; &#x26;quot;&#x4E16;&#x754C;&#xB7;&#x30C4;&#x30FC;&#xB7;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x26;quot;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30B9;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x5206;&#x6790;&#x3068;&#x524A;&#x6E1B;&#x8A66;&#x85AC;&#x306E;&#x6D88;&#x8CBB;&#x91CF;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x5BA3;&#x4F1D;&#x306E;&#x5229;&#x70B9;&#x3092;&#x640D;&#x306A;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x8A66;&#x85AC;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x60AA;&#x540D;&#x9AD8;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x56F0;&#x96E3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x53D6;&#x308A;&#x5916;&#x3057;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30C3;&#x30AF;&#x88FD;&#x306E; &#x26;quot;&#x30B9;&#x30AD;&#x30F3;&#x26;quot;&#x306F;&#xFF08;&#xFF09;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30B3;&#x30F3;&#x30BF;&#x30DF;&#x30CD;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#xFF08;b&#xFF09;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30B8;&#x4E16;&#x754C;&#xB7;&#x30C4;&#x30FC;&#xB7;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x6392;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30C7;&#x30B8;&#x30BF;&#x30EB;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x3054;&#x7D39;&#x4ECB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x30C7;&#x30DD;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x6D88;&#x5316;&#x3092;&#x5B9F;&#x88C5;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5F62;&#x5F0F;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x6027;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x3067;&#x3001;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x7528;&#x9014;&#x306B;&#x6709;&#x7528;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x6280;&#x8853;&#x3078;&#x306E;&#x71B1;&#x72C2;&#x7684;&#x306A;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#x306E;&#x597D;&#x5947;&#x5FC3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304B;&#x3089;DMF&#x3092;&#x5909;&#x63DB;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x79D8;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xB514;&#xC9C0;&#xD138; microfluidics (DMF) &#xC804;&#xADF9;&#xC758; &#xBC30;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xC774;&#xC0B0; &#xBB3C;&#xBC29;&#xC6B8;&#xC744; &#xC870;&#xC791;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xAE30;&#xC220;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC; &#xC561;&#xCCB4; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC2EC;&#xC0AC; &#xBC30;&#xC5F4; &#xAE30;&#xBC18; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC73C;&#xBBC0;&#xB85C;&#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC5F4;&#xC815;&#xC774; &#xC774;&#xB2E4;. DMF&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD55C;&#xACC4;&#xB294; &#xC7A5;&#xCE58; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC2DC; &#xC57D;&#xC758; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xD761;&#xCC29;. &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC2DC; &#xC57D;&#xC744; &#xC791;&#xC6A9; &#xC9C0;&#xC815;&#xB41C; &#xB41C; &#xC7A5;&#xCE58;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC774; &#xD604;&#xC0C1;&#xC774; &#xBC14;&#xB78C;&#xC9C1;&#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xAD50;&#xCC28; &#xC624;&#xC5FC;&#xC744; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. DMF (&#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB2E4;&#xB978; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xBBF8;&#xC138; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xD55C;&#xACC4;&#xB294; &quot;&#xC138;&#xACC4; &#xCE69;&quot; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;; &#xC545;&#xBA85; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6B4; &#xBE60;&#xB978; &#xBD84;&#xC11D;&#xC758; &#xC790;&#xC8FC; &#xD765; &#xC7A5;&#xC810;&#xC744; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC2DC; &#xC57D;, &#xC0D8;&#xD50C;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xC2DC; &#xC57D; &#xC18C;&#xBE44; &#xAC10;&#xC18C;. &#xC774;&#xB3D9;&#xC2DD; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xD2F1; &quot;&#xC2A4;&#xD0A8;&quot; () &#xAD50;&#xCC28; &#xC624;&#xC5FC;&#xC744; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558; &#xACE0;, (b) &#xB2E4;&#xB9AC; &#xC138;&#xACC4; &#xCE69; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xB514;&#xC9C0;&#xD138; microfluidics&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xC18C;&#xAC1C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC774;&#xC9C0; &#xD6A8;&#xC18C; &#xCC3D; &#xACE0;&#xC5D0; &#xCE69;&#xC5D0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC18C;&#xD654;&#xB97C; &#xAD6C;&#xD604; &#xD558; &#xC5EC;&#xC774; &#xD615;&#xC2DD; &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0;&#xB97C; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xC0DD; &#xD654; &#xD559;&#xC801; &#xC751;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC720;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xC220;&#xC5D0; &#xC560;&#xD638;&#xAC00; &#xB300; &#xD55C; &#xD638;&#xAE30;&#xC2EC;&#xC5D0;&#xC11C; DMF &#xBCC0;&#xD658;&#xD560; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;.

&#xB514;&#xC9C0;&#xD138; microfluidics &#xC138;&#xACC4; &#xCE69; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;

Digital microflu&#xED;dica (DMF) es una t&#xE9;cnica de manipulaci&#xF3;n de fluidos que permite la manipulaci&#xF3;n de gotitas discretas sobre una matriz de electrodos. Hay entusiasmo por este m&#xE9;todo debido a su potencial para aplicaciones de detecci&#xF3;n basadas en matrices. Una limitaci&#xF3;n de DMF es adsorci&#xF3;n no espec&#xED;fica de los reactivos a superficies de los dispositivos. Si un dispositivo dado se usa para accionar los reactivos m&#xFA;ltiples, este fen&#xF3;meno puede causar la contaminaci&#xF3;n cruzada indeseable. Una segunda limitaci&#xF3;n de DMF (y todos los sistemas de microfluidos otros) es el &#x26;quot;mundo-a-chip&#x26;quot; de interfaz, es muy dif&#xED;cil para entregar los reactivos y muestras a estos sistemas sin comprometer las ventajas tantas veces publicitado de an&#xE1;lisis r&#xE1;pidos y de consumo de reactivo reducido. Se introduce una nueva estrategia para la microflu&#xED;dica digitales, en el que se utiliza un pl&#xE1;stico extra&#xED;ble &#x26;quot;piel&#x26;quot; de (a) eliminar la contaminaci&#xF3;n cruzada y (b) la interfaz de puente mundo a chip. Hemos demostrado la utilidad de este formato mediante la aplicaci&#xF3;n on-chip digesti&#xF3;n de las prote&#xED;nas en los dep&#xF3;sitos de las enzimas inmovilizadas. Este nuevo m&#xE9;todo tiene el potencial para transformar la DMF de ser una curiosidad para los aficionados en una tecnolog&#xED;a que es &#xFA;til para aplicaciones bioqu&#xED;micas en general.

Una interfaz Mundial-a-chip para la microflu&#xED;dica digital

&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5171;&#x540C;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x751F;&#x5316;&#x5904;&#x7406;&#x7684;&#x9700;&#x6C42;&#x3002;&#x6570;&#x5B57;&#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53; (DMF) &#x64CD;&#x7EB5;&#x7535;&#x6781;&#xFF0C;&#x6253;&#x5F00;&#x9635;&#x5217;&#x4E0A;&#x7684;&#x79BB;&#x6563; microdroplets (100 nL 10 microL) &#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x6280;&#x672F;&#x642D;&#x914D;&#x7684;&#x5F88;&#x597D;&#x8FDB;&#x884C;&#x5FEB;&#x901F;&#x3001; &#x81EA;&#x52A8;&#x7684;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x9636;&#x6BB5;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x6574;&#x5408;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5171;&#x540C;&#x5904;&#x7406;&#x6B65;&#x9AA4;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x51CF;&#x5C11;&#x3001; &#x70F7;&#x57FA;&#x5316;&#x548C;&#x9176;&#x6D88;&#x5316;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x4E2D;&#x7684;&#x57FA;&#x4E8E; DMF &#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x8367;&#x5149;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x91CF;&#x5316;&#x8BC4;&#x4F30;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x548C;&#x53EF;&#x91CD;&#x590D;&#x6027;&#x7684;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x53CD;&#x5E94;&#x6B65;&#x9AA4;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8FDB;&#x884C;&#x8D28;&#x8C31; MS &#x7528;&#x4E8E;&#x5B9A;&#x6027;&#x786E;&#x8BA4;&#x3002;&#x8BE5;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#x5FEB;&#x901F;&#x3001; &#x7B80;&#x6613;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E14;&#x53EF;&#x91CD;&#x73B0;&#xFF0C;&#x5E76;&#x56E0;&#x6B64;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x6210;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x65B0;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x5728;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x3002;

&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x6837;&#x52A0;&#x5DE5;&#x6570;&#x5B57;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

A common characteristic for proteomic analyses is the need for extensive biochemical processing. Digital microfluidics (DMF), a technique characterized by the manipulation of discrete microdroplets (100 nL-10 microL) on an open array of electrodes, is a good match for carrying out rapid, automated solution-phase reactions. Here, we report a DMF-based method integrating several common processing steps in proteomics, including reduction, alkylation, and enzymatic digestion. Fluorogenic assays were used to quantitatively evaluate the kinetics and reproducibility of each reaction step, and MALDI-MS was used for qualitative confirmation. The method is fast, facile, and reproducible, and thus has the potential to be a useful new tool in proteomics.

A digital microfluidic approach to proteomic sample processing.

Une caract&#xE9;ristique commune pour les analyses prot&#xE9;omiques est la n&#xE9;cessit&#xE9; d&#x26;#39;un traitement biochimique vaste. Num&#xE9;rique microfluidique (DMF), caract&#xE9;ris&#xE9; par une technique de manipulation de microgouttelettes discr&#xE8;tes (100 nL-10 microL) sur une matrice ouverte d&#x26;#39;&#xE9;lectrodes, une bonne correspondance pour mettre en oeuvre rapides, automatis&#xE9;s des r&#xE9;actions en phase solution. Nous rapportons ici une m&#xE9;thode bas&#xE9;e sur l&#x26;#39;int&#xE9;gration de DMF-plusieurs &#xE9;tapes de traitement communs en prot&#xE9;omique, y compris la r&#xE9;duction, d&#x26;#39;alkylation, et la digestion enzymatique. Dosages fluorog&#xE9;niques ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s pour &#xE9;valuer quantitativement la cin&#xE9;tique et la reproductibilit&#xE9; de chaque &#xE9;tape de la r&#xE9;action, et MALDI-MS a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;e pour la confirmation qualitative. La m&#xE9;thode est rapide, facile et reproductible, et a donc le potentiel d&#x26;#39;&#xEA;tre un nouvel outil utile en prot&#xE9;omique.

Une approche num&#xE9;rique microfluidique pour traitement des &#xE9;chantillons prot&#xE9;omiques

Ein gemeinsames Merkmal f&uuml;r Proteomic Analysen ist die Notwendigkeit einer umfangreichen biochemischen Verarbeitung. Digitale Biochips (DMF), eine Technik zeichnet sich durch die Manipulation von diskreten Microdroplets (100 nL-10-MicroL) zu einem offenen Elektroden, ist eine gute Partie f&uuml;r die Durchf&uuml;hrung von schnellen, automatisierten L&ouml;sung-Phase-Reaktionen. Hier berichten wir &uuml;ber eine DMF-basierte Methode mehrere gemeinsame Verarbeitungsschritte in Proteomics, Reduktion, Alkylierung und enzymatische Verdauung zu integrieren. Fluorogenic Proben wurden verwendet, um quantitativ die Kinetik und Reproduzierbarkeit von jedem Reaktionsschritt zu bewerten und MALDI-MS f&uuml;r qualitative Best&auml;tigung verwendet wurde. Die Methode ist schnell, einfach und reproduzierbar, und hat somit das Potenzial, ein n&uuml;tzliches neues Hilfsmittel f&uuml;r Proteomics.

Eine digitale mikrofluidische Proteomic Probenbearbeitung Vorgehensweise.

Una caratteristica comune per Analisi proteomic &egrave; la necessit&agrave; per l&#39;ampia elaborazione biochimica. Microfluidics digitale (DMF), una tecnica caratterizzata dalla manipolazione dei discreti microgocce (100 nL-10 microL) su un open array di elettrodi, &egrave; una buona partita per lo svolgimento di reazioni automatizzata, rapida soluzione-fase. Riportiamo un metodo basato su DMF integrando diverse fasi di lavorazione comuni in proteomica, compresa la riduzione, alchilazione e digestione enzimatica. Fluorogenic dosaggi sono stati utilizzati per valutare quantitativamente la cinetica e la riproducibilit&agrave; di ogni step di reazione, e MALDI-MS &egrave; stato utilizzato per la conferma qualitativa. Il metodo &egrave; veloce, facile e riproducibile e quindi ha il potenziale per essere un nuovo strumento utile in proteomics.

Un approccio digitale microfluidica proteomic trattamento campione.

&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30E0;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5171;&#x901A;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x306F;&#x3001;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x51E6;&#x7406;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x6027;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30C7;&#x30B8;&#x30BF;&#x30EB;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF08;DMF&#xFF09;&#x3001;&#x96FB;&#x6975;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x914D;&#x5217;&#x4E0A;&#x306E;&#x96E2;&#x6563;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x6DB2;&#x6EF4;&#xFF08;100 NL-10 microL&#xFF09;&#x306E;&#x64CD;&#x4F5C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x6280;&#x8853;&#x306F;&#x3001;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x3001;&#x81EA;&#x52D5;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6DB2;&#x76F8;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x884C;&#x3046;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x826F;&#x3044;&#x30DE;&#x30C3;&#x30C1;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x9084;&#x5143;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AD;&#x30EB;&#x5316;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9175;&#x7D20;&#x6D88;&#x5316;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x51E6;&#x7406;&#x624B;&#x9806;&#x3092;&#x3001;&#x7D71;&#x5408;DMF&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x86CD;&#x5149;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306B;&#x5404;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6BB5;&#x968E;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x901F;&#x5EA6;&#x3068;&#x518D;&#x73FE;&#x6027;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3001;MALDI-MS&#x306F;&#x5B9A;&#x6027;&#x78BA;&#x8A8D;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x901F;&#x3067;&#x5BB9;&#x6613;&#x306A;&#x3001;&#x305D;&#x3057;&#x3066;&#x518D;&#x73FE;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306B;&#x6709;&#x7528;&#x306A;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x79D8;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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Proteomic &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC740; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC0DD; &#xD654; &#xD559;&#xC801; &#xCC98;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694;. &#xB514;&#xC9C0;&#xD138; microfluidics (DMF), &#xC804;&#xADF9;, &#xC624;&#xD508; &#xBC30;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xAC1C;&#xBCC4; microdroplets (100 nL-10 microL)&#xC758; &#xC870;&#xC791;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xAE30;&#xC220; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xC790;&#xB3D9;&#xD654; &#xB41C; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158; &#xC704;&#xC0C1; &#xBC18;&#xC751; &#xC218;&#xD589;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC88B;&#xC740; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294;. &#xC5EC;&#xAE30;, proteomics, &#xAC10;&#xC18C;, &#xC54C;&#xD0AC;&#xD654;&#xC81C;, &#xC18C;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; &#xB4F1;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xCC98;&#xB9AC; &#xB2E8;&#xACC4; &#xD1B5;&#xD569; DMF &#xAE30;&#xBC18; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC54C;&#xB824;&#xB4DC;&#xB9BD;&#xB2C8;&#xB2E4;. Fluorogenic &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC591;&#xC801; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xBC0F; &#xC7AC;&#xD604;&#xC131;&#xC758; &#xAC01; &#xBC18;&#xC751; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD55C; &#xACE0; MALDI MS &#xC9C8;&#xC801; &#xD655;&#xC778;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xC640; &#xBE60;&#xB974;&#xACE0; &#xC190;&#xC26C;&#xC6B4;, &#xC7AC;&#xD604;&#xC131;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; proteomics&#xC5D0; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xAC00; &#xB420; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;.

Proteomic &#xC0D8;&#xD50C; &#xCC98;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB514;&#xC9C0;&#xD138; &#xBBF8;&#xC138; &#xC811;&#xADFC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Una caracter&#xED;stica com&#xFA;n para los an&#xE1;lisis prote&#xF3;micos es la necesidad de un procesamiento bioqu&#xED;mico extensa. Digital microflu&#xED;dica (DMF), una t&#xE9;cnica caracterizada por la manipulaci&#xF3;n de microgotitas discretas (100 nL-10 microlitros) en una matriz de electrodos abierto, es un buen candidato para llevar a cabo r&#xE1;pidos y automatizados en fase soluci&#xF3;n, reacciones. Aqu&#xED;, se presenta un m&#xE9;todo a base de DMF la integraci&#xF3;n de varios pasos de procesamiento comunes en la prote&#xF3;mica, incluida la reducci&#xF3;n, alquilaci&#xF3;n y digesti&#xF3;n enzim&#xE1;tica. Los ensayos fluorog&#xE9;nicos se utilizaron para evaluar cuantitativamente la cin&#xE9;tica y reproducibilidad de cada etapa de reacci&#xF3;n, y MALDI-MS se utiliza para la confirmaci&#xF3;n cualitativa. El m&#xE9;todo es r&#xE1;pido, f&#xE1;cil y reproducible, y por lo tanto tiene el potencial de ser una nueva herramienta &#xFA;til en la prote&#xF3;mica.

Vivienne N. Luk

Department of Chemistry

University of Toronto

Digital Microfluidics for Automated Proteomic Processing

Vivienne N. Luk

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Chemistry

University of Toronto

Digital Microfluidics for Automated Proteomic Processing

Department of Chemistry