in-vivo-two-photon-imaging-experience-dependent-molecular-changes

<em>In Vivo</em> Two-photon Imaging Of Experience-dependent Molecular Changes In Cortical Neurons

The brain's ability to change in response to experience is essential for healthy brain function, and abnormalities in this process contribute to a variety ...

multi-layer-cortical-ca2-imaging-freely-moving-mice-with-prism-probes

Multi-layer Cortical Ca<sup>2+</sup> Imaging in Freely Moving Mice with Prism Probes and Miniaturized Fluorescence Microscopy

In vivo circuit and cellular level functional imaging is a critical tool for understanding the brain in action. High resolution imaging of mouse cortical ...

National Institute of Mental Health

Brown University - National Institutes of Health Graduate Partnership Program

Inscopix Inc.

Un certain nombre d&#39;approches informatiques ont &eacute;t&eacute; d&eacute;velopp&eacute; pour remanier les prot&eacute;ines chim&eacute;riques prometteurs un &agrave; la fois par des mutations ponctuelles cibl&eacute;es. Dans cet article, nous pr&eacute;sentons la proc&eacute;dure de calcul IPRO (proc&eacute;dure it&eacute;rative de prot&eacute;ine de refonte et optimisation) pour la refonte d&#39;une biblioth&egrave;que de prot&eacute;ine combinatoire enti&egrave;re en une seule &eacute;tape, en utilisant les fonctions de notation bas&eacute;e sur l&#39;&eacute;nergie. IPRO s&#39;appuie sur l&#39;identification de mutations dans les s&eacute;quences parentales, qui, une fois transmises en aval dans la biblioth&egrave;que combinatoire, am&eacute;liorer la qualit&eacute; moyenne de la biblioth&egrave;que (p. ex., stabilit&eacute;, contraignant l&#39;affinit&eacute;, activit&eacute; sp&eacute;cifique, etc.). Choix de conception de r&eacute;sidus et rotam&egrave;re sont pilot&eacute;es par une formulation globalement convergente mixte de programmation lin&eacute;aire. Contrairement &agrave; la plupart des approches computationnelles disponibles, la proc&eacute;dure permet de mouvement de la colonne vert&eacute;brale ainsi qu&#39;arrimer des ligands associ&eacute;s apr&egrave;s plusieurs it&eacute;rations de conception pr&eacute;d&eacute;termin&eacute;e. IPRO peut &eacute;galement &ecirc;tre utilis&eacute;, comme un cas limite, pour la refonte d&#39;une poign&eacute;e de s&eacute;quences individuelles ou. L&#39;application de l&#39;IPRO est mis en &eacute;vidence par la refonte d&#39;une biblioth&egrave;que de 16 membres d&#39;Escherichia coli/Bacillus subtilis dihydrofolate r&eacute;ductase hybrides, tant individuellement que par le biais de refonte de s&eacute;quence parental en amont, pour am&eacute;liorer l&#39;&eacute;nergie de liaison moyenne. R&eacute;sultats des calculs montrent qu&#39;il est en effet possible d&#39;am&eacute;liorer la qualit&eacute; de la biblioth&egrave;que globale, comme en t&eacute;moigne les scores de l&#39;&eacute;nergie de liaison par le biais de mutations cibl&eacute;es dans les s&eacute;quences parentales.

IPRO : une prot&eacute;ine calcul it&eacute;ratif biblioth&egrave;que refonte et optimisation de proc&eacute;dure.

&#x5DF2;&#x5236;&#x5B9A;&#x82E5;&#x5E72;&#x8BA1;&#x7B97;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x4E00;&#x6B21;&#x901A;&#x8FC7;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684;&#x70B9;&#x7A81;&#x53D8;&#x91CD;&#x6784;&#x6709;&#x524D;&#x9014;&#x5D4C;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x4E00;&#x4E2A;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x6587;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x6574;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x5E93;&#x5728;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6B65;&#x9AA4;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x57FA;&#x4E8E;&#x80FD;&#x6E90;&#x7684;&#x8BC4;&#x5206;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x91CD;&#x65B0;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x7684;&#x8BA1;&#x7B97;&#x7A0B;&#x5E8F; IPRO &#xFF08;&#x8FED;&#x4EE3;&#x86CB;&#x767D;&#x91CD;&#x65B0;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x548C;&#x4F18;&#x5316;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#xFF09;&#x3002;IPRO &#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x67E5;&#x660E;&#x5728;&#x7236;&#x6BCD;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x7A81;&#x53D8;&#x65F6;&#x5728;&#x7EC4;&#x5408;&#x5E93;&#x4E0B;&#x6E38;&#x4F20;&#x64AD;&#xFF0C;&#x63D0;&#x9AD8;&#x5E73;&#x5747;&#x8D28;&#x91CF;&#x7684;&#x5E93; &#xFF08;&#x4F8B;&#x5982;&#xFF0C;&#x7A33;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x7EA6;&#x675F;&#x529B;&#x7684;&#x4EB2;&#x548C;&#x6027;&#xFF0C;&#x5177;&#x4F53;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7B49;&#x3002;&#xFF09;&#x3002;&#x6B8B;&#x7559;&#x548C; rotamer &#x7684;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x9009;&#x62E9;&#x662F;&#x7531;&#x5168;&#x5C40;&#x6536;&#x655B;&#x7684;&#x6DF7;&#x5408;&#x6574;&#x6570;&#x7EBF;&#x6027;&#x7F16;&#x7A0B;&#x5236;&#x5B9A;&#x63A8;&#x52A8;&#x7684;&#x3002;&#x4E0E;&#x8BB8;&#x591A;&#x53EF;&#x7528;&#x7684;&#x8BA1;&#x7B97;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x540C;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5141;&#x8BB8;&#x9AA8;&#x5E72;&#x8FD0;&#x52A8;&#x4EE5;&#x53CA;&#x76F8;&#x5173;&#x914D;&#x4F53;&#x7684;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x8FED;&#x4EE3;&#x7684;&#x9884;&#x5148;&#x6307;&#x5B9A;&#x6B21;&#x6570;&#x540E; redocking&#x3002;IPRO &#x53EF;&#x8FD8;&#x7528;&#x4E8E;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x9650;&#x5236;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5355;&#x4E2A;&#x6216;&#x5C11;&#x6570;&#x51E0;&#x4E2A;&#x4EBA;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x91CD;&#x65B0;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x3002;IPRO &#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x88AB;&#x5F3A;&#x8C03;&#x901A;&#x8FC7;&#x91CD;&#x65B0;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x7684; 16 &#x540D;&#x6210;&#x5458;&#x56FE;&#x4E66;&#x9986;&#x7684;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;/&#x67AF;&#x8349;&#x4E8C;&#x6C22;&#x53F6;&#x9178;&#x8FD8;&#x539F;&#x9176;&#x6742;&#x79CD;&#xFF0C;&#x5355;&#x72EC;&#x548C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E0A;&#x6E38;&#x7236;&#x6BCD;&#x5E8F;&#x5217;&#x91CD;&#x65B0;&#x8BBE;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x63D0;&#x9AD8;&#x5E73;&#x5747;&#x7ED3;&#x5408;&#x80FD;&#x3002;&#x8BA1;&#x7B97;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5B83;&#x7684;&#x786E;&#x662F;&#x53EF;&#x884C;&#xFF0C;&#x6539;&#x5584;&#x603B;&#x4F53;&#x5E93;&#x8D28;&#x91CF;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x80FD;&#x6E90;&#x5206;&#x6570;&#x901A;&#x8FC7;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7A81;&#x53D8;&#x7236;&#x6BCD;&#x5E8F;&#x5217;&#x4E2D;&#x53EF;&#x89C1;&#x4E00;&#x6591;&#x3002;

IPRO&#xFF1A; &#x8FED;&#x4EE3;&#x8BA1;&#x7B97;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5E93;&#x91CD;&#x65B0;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x548C;&#x4F18;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;

A number of computational approaches have been developed to reengineer promising chimeric proteins one at a time through targeted point mutations. In this article, we introduce the computational procedure IPRO (iterative protein redesign and optimization procedure) for the redesign of an entire combinatorial protein library in one step using energy-based scoring functions. IPRO relies on identifying mutations in the parental sequences, which when propagated downstream in the combinatorial library, improve the average quality of the library (e.g., stability, binding affinity, specific activity, etc.). Residue and rotamer design choices are driven by a globally convergent mixed-integer linear programming formulation. Unlike many of the available computational approaches, the procedure allows for backbone movement as well as redocking of the associated ligands after a prespecified number of design iterations. IPRO can also be used, as a limiting case, for the redesign of a single or handful of individual sequences. The application of IPRO is highlighted through the redesign of a 16-member library of Escherichia coli/Bacillus subtilis dihydrofolate reductase hybrids, both individually and through upstream parental sequence redesign, for improving the average binding energy. Computational results demonstrate that it is indeed feasible to improve the overall library quality as exemplified by binding energy scores through targeted mutations in the parental sequences.

IPRO: an iterative computational protein library redesign and optimization procedure.

Eine Reihe von computational Ans&auml;tze wurden entwickelt, um vielversprechende Chim&auml;re Proteinen eins zu einem Zeitpunkt durch gezielte Punktmutationen umprogrammiert. In diesem Artikel stellen wir das Rechenverfahren IPRO (iterative Protein-Redesign und Optimierung-Verfahren) f&uuml;r die Neugestaltung einer gesamten kombinatorische Protein-Bibliothek in einem Schritt mit Energie-basierte scoring-Funktionen. IPRO st&uuml;tzt sich auf die Identifizierung von Mutationen in den elterlichen Sequenzen, die bei stromabw&auml;rts in der kombinatorischen Bibliothek weitergegeben werden, verbessern die durchschnittliche Qualit&auml;t der Bibliothek (z.B. Stabilit&auml;t, verbindliche Affinit&auml;t, spezifische Aktivit&auml;t, etc.). R&uuml;ckstand und Rotamer Design-Entscheidungen werden durch eine Global konvergente gemischt-ganzzahlige Lineare Programmierung Formulierung angetrieben. Im Gegensatz zu vielen der verf&uuml;gbaren computational Ans&auml;tze erm&ouml;glicht das Verfahren R&uuml;ckgrat Bewegung als auch die redocking der zugeh&ouml;rigen Liganden nach einer vorgegebenen Anzahl von Design-Iterationen. IPRO kann auch, als einschr&auml;nkende Fall f&uuml;r die Neugestaltung eines Einzel-oder einer Handvoll einzelne Sequenzen verwendet werden. Die Anwendung von IPRO ist durch die Neugestaltung einer 16-k&ouml;pfigen-Bibliothek von Escherichia coli/Bacillus Subtilis Dihydrofolate Reduktase Hybriden, sowohl individuell als auch durch vorgeschaltete elterliche Sequenz Neugestaltung, zur Verbesserung der durchschnittlichen Bindungsenergie hervorgehoben. Computational Ergebnisse zeigen, dass es tats&auml;chlich zur Verbesserung der allgemeinen Bibliothek-Qualit&auml;t, wie von Bindungsenergie Resultate durch gezielte Mutationen in den elterlichen Sequenzen machbar ist.

IPRO: eine iterative computational Protein Redesign und Optimierung Bibliotheksprozedur.

Un certo numero di approcci computazionali &egrave; stato sviluppato per ripensare le proteine chimeric promettente uno alla volta attraverso mutazioni puntiformi mirate. In questo articolo, vi presentiamo la procedura di calcolo IPRO (procedura di ottimizzazione e riprogettazione del proteina iterativo) per la riprogettazione di una libreria intera proteina combinatoria in un unico passaggio utilizzando le funzioni di punteggio basato su energia. IPRO si basa sull&#39;identificazione di mutazioni nelle sequenze dei genitori, che, se propagato a valle nella biblioteca combinatoria, migliorare la qualit&agrave; media della biblioteca (ad es., stabilit&agrave;, associazione affinit&agrave;, attivit&agrave; specifiche, ecc.). Le scelte di progettazione residuo e rotamer sono guidate da una formulazione programmazione lineare misto-integer globalmente convergente. A differenza di molti degli approcci computazionali disponibili, la procedura permette movimento dorsale cos&igrave; come redocking dei ligandi associati dopo un addetto numero di iterazioni di design. IPRO pu&ograve; anche essere utilizzato, come un caso limite, per la riprogettazione di un singolo o una manciata di sequenze individuali. L&#39;applicazione di IPRO &egrave; evidenziata attraverso la riprogettazione di una libreria di 16 membri di ibridi di Escherichia coli/Bacillus subtilis diidrofolato reduttasi, sia individualmente che attraverso la riprogettazione di sequenza parentale a monte, per migliorare l&#39;energia di legame Media. Computational risultati dimostrano che &egrave; davvero fattibile per migliorare la qualit&agrave; complessiva della biblioteca come esemplificato dal gol di energia di legame attraverso mutazioni mirate nelle sequenze dei genitori.

IPRO: una proteina calcolo iterativo riprogettazione e ottimizzazione procedura di libreria.

&#x8A08;&#x7B97;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x6570;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x7D5E;&#x3063;&#x305F;&#x70B9;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6642;&#x6709;&#x671B;&#x306A;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; 1 &#x3092;&#x30EA;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B8;&#x30CB;&#x30A2; &#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC; &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30B9;&#x30B3;&#x30A2;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x95A2;&#x6570;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066; 1 &#x3064;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x3067;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x7D44;&#x5408;&#x305B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x306E;&#x518D;&#x8A2D;&#x8A08;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8A08;&#x7B97;&#x624B;&#x9806; IPRO (&#x53CD;&#x5FA9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x518D;&#x8A2D;&#x8A08;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E3;) &#x3092;&#x7D39;&#x4ECB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;IPRO &#x4F9D;&#x5B58;&#x3001;&#x89AA;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x3068;&#x304D;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3; &#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x4F1D;&#x9054;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D3;&#x30CA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB; &#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x3067;&#x3001;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA; &#xFF08;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3001;&#x7D50;&#x5408;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3001;&#x7B49;&#xFF09; &#x306E;&#x5E73;&#x5747;&#x54C1;&#x8CEA;&#x5411;&#x4E0A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3068; rotamer &#x306E;&#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x80A2;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x57DF;&#x7684;&#x6C42;&#x6DF7;&#x5408;&#x6574;&#x6570;&#x7DDA;&#x5F62;&#x8A08;&#x753B;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x99C6;&#x52D5;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5229;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x8A08;&#x7B97;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x3001;&#x624B;&#x9806;&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DC;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x4E8B;&#x524D;&#x6307;&#x5B9A;&#x306E;&#x8A2D;&#x8A08;&#x30A4;&#x30C6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x6570;&#x5F8C;&#x95A2;&#x9023;&#x914D;&#x4F4D;&#x5B50;&#x306E;&#x518D;&#x88C5;&#x7740;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;IPRO &#x3082;&#x3001;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x3001;1 &#x3064;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x4E00;&#x63E1;&#x308A;&#x306E;&#x518D;&#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;IPRO &#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x30FB;&#x67AF;&#x8349;&#x83CC;&#x30B8;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x8449;&#x9178;&#x9084;&#x5143;&#x9175;&#x7D20;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x8ECA;&#x3001;16 &#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC; &#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x306E;&#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x500B;&#x5225;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3068;&#x4E0A;&#x6D41;&#x306E;&#x89AA;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x518D;&#x8A2D;&#x8A08;&#x5E73;&#x5747;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x5F37;&#x8ABF;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8A08;&#x7B97;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x89AA;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D50;&#x5408;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC; &#x30B9;&#x30B3;&#x30A2;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F8B;&#x793A;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x306E;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306A;&#x54C1;&#x8CEA;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x78BA;&#x304B;&#x306B;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

IPRO: &#x306F;&#x53CD;&#x5FA9;&#x8A08;&#x7B97;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x518D;&#x8A2D;&#x8A08;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E3;&#x3002;

&#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC804;&#xC0B0; &#xC811;&#xADFC; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD1B5;&#xD574; &#xD55C; &#xBC88;&#xC5D0; &#xC720;&#xB9DD;&#xD55C; chimeric &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD55C; &#xC7AC;&#xAD6C;&#xC131;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBB38;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xAE30;&#xBC18; &#xC810;&#xC218; &#xB9E4;&#xAE30;&#xAE30; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD55C; &#xBC88;&#xC5D0; &#xC804;&#xCCB4; &#xC870;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xC758; &#xC7AC;&#xC124;&#xACC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACC4;&#xC0B0; &#xC808;&#xCC28; IPRO (&#xBC18;&#xBCF5; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC7AC;&#xC124;&#xACC4; &#xBC0F; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xC808;&#xCC28;) &#xC18C;&#xAC1C;. IPRO &#xBD80;&#xBAA8; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xB54C; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC; (&#xC608;: &#xC548;&#xC815;&#xC131;, &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4;, &#xD2B9;&#xC815; &#xD65C;&#xB3D9;, &#xB4F1;.)&#xC758; &#xD3C9;&#xADE0; &#xD488;&#xC9C8;&#xC744; &#xAC1C;&#xC120; &#xC870;&#xD569; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;, &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC;&#xC73C;&#xB85C; &#xC804;&#xD30C;. &#xCC0C; &#xAEBC; &#xAE30; &#xBC0F; rotamer &#xB514;&#xC790;&#xC778;&#xC774; &#xC138;&#xACC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC9D1;&#xC911; &#xD63C;&#xD569; &#xC815;&#xC218; &#xC120;&#xD615; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D; &#xBC30;&#xD569;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xB3D9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2EC;&#xB9AC; &#xB9CE;&#xC740; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC804;&#xC0B0; &#xC811;&#xADFC; &#xC808;&#xCC28; &#xBC31;&#xBCF8; &#xC6B4;&#xB3D9; prespecified &#xB514;&#xC790;&#xC778; &#xBC18;&#xBCF5; &#xD69F;&#xC218;&#xB97C; &#xD6C4; &#xC5F0;&#xACB0;&#xB41C; ligands&#xC758; redocking&#xC5D0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. IPRO&#xB3C4; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xC81C;&#xD55C; &#xACBD;&#xC6B0;&#xB85C; &#xC11C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xB610;&#xB294; &#xC18C;&#xC218;&#xC758; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xC7AC;&#xC124;&#xACC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;. IPRO &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xBAA8;&#xB450; &#xAC1C;&#xBCC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD3C9;&#xADE0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xD5A5;&#xC0C1;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xBD80;&#xBAA8;&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC7AC;&#xC124;&#xACC4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;/&#xC0C8; &#xADE0;&#xC758; subtilis dihydrofolate reductase &#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC; 16 &#xD68C;&#xC6D0; &#xB3C4;&#xC11C;&#xAD00;&#xC758; &#xC7AC;&#xC124;&#xACC4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xAC15;&#xC870; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACC4;&#xC0B0; &#xACB0;&#xACFC; &#xBD80;&#xBAA8;&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD1B5;&#xD574; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC810;&#xC218;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; exemplified &#xC804;&#xCCB4; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC; &#xD488;&#xC9C8;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C; &#xC2E4;&#xD604; &#xC784;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

IPRO: &#xD55C; &#xBC18;&#xBCF5;&#xC801;&#xC778; &#xACC4;&#xC0B0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC; &#xC7AC;&#xC124;&#xACC4; &#xBC0F; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xC808;&#xCC28;.

Una serie de enfoques computacionales se han desarrollado para la reingenier&iacute;a prote&iacute;nas quim&eacute;ricas prometedoras uno a la vez a trav&eacute;s de mutaciones de punto objetivo. En este art&iacute;culo, presentamos el procedimiento computacional IPRO (procedimiento de redise&ntilde;o y optimizaci&oacute;n de prote&iacute;na iterativo) para el redise&ntilde;o de una biblioteca de prote&iacute;na combinatoria todo en un solo paso usando funciones de puntuaci&oacute;n basadas en energ&iacute;a. IPRO se basa en la identificaci&oacute;n de mutaciones en las secuencias de los padres, que cuando propag&oacute; r&iacute;o abajo en la biblioteca combinatoria, mejorar la calidad media de la biblioteca (por ejemplo, estabilidad, vinculante afinidad, actividad espec&iacute;fica, etc..). Opciones de dise&ntilde;o de residuos y rotamer son conducidos por una formulaci&oacute;n de programaci&oacute;n lineal entera-mixta globalmente convergente. A diferencia de muchos de los enfoques computacionales disponibles, el procedimiento permite movimiento de la columna vertebral, as&iacute; como redocking de los ligandos asociados tras varias iteraciones de dise&ntilde;o especificados con anterioridad. IPRO puede tambi&eacute;n utilizarse, como un caso l&iacute;mite, para el redise&ntilde;o de un pu&ntilde;ado de secuencias individuales o. La aplicaci&oacute;n de IPRO destaca mediante el redise&ntilde;o de una biblioteca de 16 miembros de h&iacute;bridos de Escherichia coli/Bacillus subtilis dihidrofolato reductasa, tanto individualmente como a trav&eacute;s de redise&ntilde;o de la secuencia ascendente de los padres, para mejorar la energ&iacute;a de enlace promedio. Computacionales resultados demuestran que es de hecho factible para mejorar la calidad de la Biblioteca General, ejemplificado por las cuentas de la energ&iacute;a de enlace a trav&eacute;s de mutaciones espec&iacute;ficas en las secuencias de los padres.

Vania Y. Cao

Unit on Neural Circuits and Adaptive Behaviors,
Genes Cognition and Psychosis Program,
Unit on Neural Circuits and Adaptive Behaviors, Genes Cognition and Psychosis Program

National Institute of Mental Health

In Vivo Two-photon Imaging Of Experience-dependent Molecular Changes In Cortical Neurons

Multi-layer Cortical Ca²⁺ Imaging in Freely Moving Mice with Prism Probes and Miniaturized Fluorescence Microscopy

Vania Y. Cao

Unit on Neural Circuits and Adaptive Behaviors,Genes Cognition and Psychosis Program,Unit on Neural Circuits and Adaptive Behaviors, Genes Cognition and Psychosis Program

National Institute of Mental Health

In Vivo Two-photon Imaging Of Experience-dependent Molecular Changes In Cortical Neurons

Multi-layer Cortical Ca2+ Imaging in Freely Moving Mice with Prism Probes and Miniaturized Fluorescence Microscopy

Unit on Neural Circuits and Adaptive Behaviors,
Genes Cognition and Psychosis Program,
Unit on Neural Circuits and Adaptive Behaviors, Genes Cognition and Psychosis Program

Multi-layer Cortical Ca²⁺ Imaging in Freely Moving Mice with Prism Probes and Miniaturized Fluorescence Microscopy