복 부 복 부 헤 르 니 아 수리 공부 쥐 모델의 사용

요약

이 원고 작성 및 복 부 복 부 벽의 결함 (탈 장)의 수리와 관련 된 방법을 설명 합니다. 이 모델은 이식된 재료를 사용 하는 복구 전략을 공부를 사용할 수 있습니다. 이 원고에 돼지 작은 창 자 submucosa와 실험 탈의 복구 예로 제공 됩니다.

초록

복 부 복 부 헤 르 니 아 가끔 필요한 herniorraphy (외과 수리) 상대적으로 일반적인 임상 상태 이다. 복 부 복 부 헤 르 니 아 수리는 일반적으로 복 부 벽의 결함에 걸쳐 기계 다리 역할을 물자의 주입을 요구 한다. 또한 돼지 작은 창 자 submucosa (SIS) 등 생체 이식으로 세포 성장에 대 한 격자 역할 하 고 호스트 조직으로 자연스럽 게 통합할 수 있습니다. 이러한 수리 자료의 개발 동물 모델 실험 복 벽 결점 쉽게 만들 수 있습니다 및 받을 재현 방식에서 복구의 사용에서 혜택. 여기 제공 하는 메서드 외과 생성 및 쥐 모델에서 복 부 복 부 헤 르 니 아의 복구에 설명 합니다. SIS는이 모델에는 실험 복 부 복 부 탈 장 복구 하는 데 사용 됩니다 때 그것 빠르게 주입의 28 일 안에 호스트 조직에 통합 됩니다. 조직학, 강력한 fibrovascular 응답 호스트 조직으로 그들의 이식된 재료의 설립 특징 이다. 미래 수정 및 쥐 복 부 헤 르 니 아 모델의 응용 가능성이 남자의 더 긴밀 하 게 모방 일반적인 공동 morbidities 수단으로 당뇨병 또는 비만 동물 포함할 수 있습니다.

서문

복 벽 탈 장 선 천 성 결함, 외상 성 부상, 또는 복 벽을 포함 하는 수술 상처의 실패 한 폐쇄의 결과로 발생할 수 있는 일반적으로 부닥친된 임상 문제입니다. 수리는 일반적으로 환자 누구에 복 벽은 봉합으로 단순히 폐쇄 한다 그에 비해는 임 플 란 트 치료에 재발의 감소 속도와 복 벽을 강화 하는 임 플 란 트를 사용 하 여 포함 한다. ¹

외과 탈 장 복구는 종종 기계 다리 이식 소재 결함의 필요 합니다. 이와 관련, 합성 및 천연 재료 탈 장 복구에 대 한 사용 되었습니다. 많은 합성 물질은 일반적으로 비 흡수 및 다른 합성 임 플 란 트 결합 비 흡수 재료 중 하나는 흡수 하는 동안 폴 리 프로필 렌, 폴 리 에틸렌 테 레프 탈 산 폴 리 에스테 르, 그리고 확장 된 소계를 포함 polygalactine와 같은 중합체. ¹ 반면, 자연 소재 임 플 란 트 일반적으로에서 파생 된다 동물 또는 인간 시체 소스. 헤 르 니 아 수리를 위해 사용 하는 천연 재료는 일반적으로 콜라겐 풍부 그리고 ingrowth와 호스트 조직 통합에 대 한 비 계 행동.

개발 하 고 복 부 복 부 탈 장 복구에 대 한 새로운 자료 최적화 욕망 후보 재료의 평가 대 한 적절 한 동물 모델을 필요 합니다. 연구 종, 양, 돼지² ,³ 토끼,⁴ 쥐,^5,6,,78 개 등의 다양 한에서 실시 되었습니다. ⁹ 는 쥐를 사용 하 여 이러한 연구의 장점은 그들은 쉽게 처리 모델 유전 가변성의 제어를 위한 수 있도록 타고 난된 종자의 다양 한에서 사용할 수 있는 제공. 더 작은 전반적인 바디 표면 영역 위에 나열 된 다른 종에 비해 쥐의 자연 속에서 실험 될 수 있는 자료의 평가 허용 하는 또한, 그리고, 그러므로, 풍부 하지.  다른 종 대 쥐와 관련 된 추가, 감소 비용 상대적으로 증가 수의 복 부 복 부 탈 장 복구에 사용 하기 위해 화면 후보 물질에 대 한 수 있습니다.  자료에 대 한 고려 사항 일반적으로 외과 의사, 강도, 호스트 조직, 생체 적합성, 그리고 감염에 저항으로 통합 하는 능력으로 취급의 용이성을 포함 합니다.

예를 들어, 돼지 작은 창 자 submucosa (SIS)는 자연 소재 복 부 사 타 구니, 복 부, 횡 격 막 탈 장 복구를 포함 하 여 조직의 복구 표시의 다양 한 사용 되었습니다. ^{10 , 11 , 12} SIS 호스트 조직으로 급속 하 게 통합 됩니다 및 일반적으로 감염에 저항력이 발견 되었습니다 고 그래서 재료 오염된 분야에서 특정 유틸리티를 있다. ^{13 , 14} 쥐 모델에서 SIS 단축 인장 오류 테스트, 콜라겐 증 착 및 neovascularization 조직 ingrowth의 승진에 의해 결정으로 좋은 인장 강도 취급의 용이성을 시연 하고있다. ^{6 , 7}

결함의 정확한 수술 브리징 후보 복구 자료를 평가할 때 생산적인 모델링의 필수적인 기능입니다. 동물 충분히 마 취 및 무 균 기술은 엄격 하 게 따라 해야 합니다. 또한, 표준 크기의 복 벽 결점 신중 하 게 작성 하 고 다리를 충분히 보호 하는 결함의 여백에 소재 하는 방식으로 될 해야 합니다. ⁸ 이 프로토콜 예를 들어 쥐에서 브리징 SIS를 사용 하 여 복 부 복 부 탈 장 수술 생성 및 복구, 따라야 하는 표준 방법을 제공 합니다.

프로토콜

이 프로토콜에는 동물의 사용 노 틀 담 기관 동물 관리 및 사용 위원회의 대학에 의해 승인 되었다, 모든 규정 및 지침, 그리고 공인 시설에서 실시 된 평가 및 실험실 동물 배려 (AAALAC), 국제 인증 협회.

1. 동물의 선택

1. 평판 공급 업체 또는 서식 지에서 취득 병원 체 무료 Sprague Dawley 쥐.
   참고: 종종, 시설 수 의사 또는 관리자 수 직접 해당 소스를 조사 합니다. 약 250 g 몸 무게의 쥐가이 절차에 대 한 적합.
2. 수술 전에 1 일 임상 건강 다는 것을 확인 하는 데 사용 될 동물을 검사 합니다. 이와 관련, 동물의 무게와 몸 상태; 호흡, 열려 있는 상처 나 대 중, 그리고 동물의 일반적인 활동 수준에에서 어떤 이상이 note 수술 기록에 어떤 이상이 고 잠재적인 제외 기준으로 같은 관측을 고려 하십시오.

2. 마 취 및 무 균 수술에 대 한 동물의 준비

1. 진통, 쥐 전에 수술. 양쪽 눈을 적용 안과 연 고 2 h에 지속적인된 출시 buprenorphine의 1.1-1.2 mg/kg을 피하 관리 및 관리 2 mL의 멸 균 생리 식 염 수를 피하 따뜻하게.
2. Anesthetize 케 타 민 염 산 염 (90mg/kg) 및 xylazine (10 mg/kg)의 복 복용량 쥐. 각 막 dessication를 방지 하기 위해 각 눈에 눈 윤활제의 작은 금액을 적용. 일단 동물 ’ s 호흡은 꾸준한 및 회사 발가락 핀치에 어떤 응답은 더 이상, 쥐에는 마 취 수술에 대 한 충분 한 수준에 도달 했습니다. 마 취의 수락 가능한 수준을 더 깊은의 존재에 의해 확인 될 수 있다 일반 호흡과 눈 (대 창백, 부적당 한 심장 혈관 관류를 제안할 수 있는)의 정상적인 색상.
3. 상업용 클리퍼 스는 ventrum에 측면 여백 및 흉 골을 치 골에서 함께 복 부 복 부를 면도. 축축한 종이 수건 지역에 적용 하 여 잘린된 머리를 제거.
4. 스크럽 70% 에탄올으로 닦아 뒤를 iodophor 살 균으로 면도 지역. 창 절 개에 대 한 잠재적인 오염 으로부터 격리 될 수 있도록 수술 커튼 적용.
5. 돈 메 마른 외과 용 가운, 얼굴 마스크, 머리 보 닛. 철저 하 게 세척 하 고 스크럽 비누와 돈 메 마른 외과 장갑 손을.

3. 생성 및 복 부 복 부 헤 르 니 아 수리

1. 수술 전에 압력솥으로 수술 기구를 소독.
2. 게 메스를 사용 하는 약 3-4 cm 세로 절 개 복 부 중간 복 부 근육의 수준에 따라. 복 부 벽 부드럽게는 집게와 고는 교육을 통해 작은 여 만듭니다 알바. 기본 내장을 보호 하기 위해 삽입 구멍을 통해 그리고 근육 벽 만드는 베로 보호 가이드 역할을 복 부 구멍으로 집게를 약 2 cm x 2 cm 전체 두께 결함, 양쪽에서 대략 1 cm 옆 절단 교육의 양쪽 끝에 중간의 알바 절 개.
3. 결함을 놓고 소재의 기계적 브리징,이 경우 (그림 1), 4 층 SIS 미리 잘라 2 cm x 2 cm 섹션.
   참고: 또는, 언더레이 접근 방식을 사용할 수 있습니다 재료의 단면 배치 됩니다 복 부 구멍으로 인테리어 측면에서 결함을 커버.
4. 봉합 간단한 중단된 봉합 패턴에 4-0 실크 또는 나일론을 사용 하 여 복 벽 근육에 소재는 브리지의 네 모퉁이.
   참고: 비 흡수 봉합 사를 사용 하 여 허용 흡수 되기 쉬운 봉합 사 물자 대 수확 시 이식된 재료의 쉽게 식별.
5. 동등 하 게 간격을 둔 3 개의 추가 봉합 재료의 각 가장자리를 보안 합니다. 복 벽을 통해 내장의 통과 수 있도록 상당한 간격이 존재 하지 않습니다 보장 하기 위해 전체 원주 지 검사 그리고, 이러한 간격이 존재 하는 경우 배치 더 마진을 확보 하 여 추가 봉합.
6. 간단한 중단된 패턴에 4-0 흡수 봉합과 피하 조직을 닫습니다. 간단한 중단된 패턴에 적용 하는 봉합도 사용할 수 있습니다 하지만 수술 스테이플, 피부를 닫습니다.
7. 방치 하지 마십시오 동물 sternal recumbency;을 회복 하기 위해 충분 한 의식 회복 될 때까지 겪은 다른 동물의 회사를 수술 마 취에서 완전히 복구 되었습니다 때까지 동물을 반환 하지 않는. 이 시간 동안 저체온증을 방지 하기 위해 따뜻한 지역에 동물 유지.
8. 검사 동물 매일이 절차를 전체 복구 및 정상적인 치유 받은 그. 수술 후 7-10 일 스테이플 리무버로 피부 스테이플을 제거.

4. 이식 재료의 수확

1. 일관성 연구의 요구를 안락사, 이산화탄소 과다 한 챔버에 관리와 채우기 비율 10 ~ 30%, 자주 21-미리 정해진된 시간에 동물의 수술 후 28 일.
2. 표준 검 시 도구를 사용 하 여, 피부와 복 부 벽 열고 플 영역을 노출.
   참고: 비 흡수 봉합은이 식을 확보 하는 데 사용 했다, 하는 경우 자료로 확인할 수 있습니다 원래 봉합 (그림 2).
3. 어떤 불리 한 반응 (예를 들어, 상처 dehiscence, 농 양, seroma, 혈 종)와 접착 범위와 기본 내장 끈기를 포함 하 여 어떤 심한 병 적인 관찰 관찰.
4. 는 임 플 란 트를 포함 하는 조직의 다양 한 부분을 절단 하 여 임 플 란 트 사이트를 제거 합니다. 10% 중립 버퍼링 된 포 르 말린, 조직학 검사 및 특성화에 대 한 처리에 대 한 준비 등 정착 액에 샘플 배치.

결과

이식 후 28 일 SIS는 일반적으로 호스트 조직 (그림 2)으로 좋은 법인을 보여 줍니다. 대부분의 경우, 잔여 SIS 명백한, 비록은 조직 이식된 재료를 식별 하 탐험 자주 해야 합니다. 조직학 분석 주로 fibrovascular 조직 및 아주 작은 잔여 SIS 지적 했다 (그림 3) 좋은 조직 설립을 보여주는 총 병 적인 관측을 확인 했다. 이러한 결과 쥐 복 부 복 부 헤 르 니 ?...

토론

특히 그는 초기 기계 다리를 제공 하 고 호스트 조직으로 통합 하는 큰 관심 복 부 복 부 탈 장 복구에 대 한 자료입니다. 이와 관련, 재료의 다양 한 있다 조사, SIS, 돼지 심장, 돼지 acellular 피부 매트릭스, 등. ^{6 , 7} 이러한 자료의 그 조직 세포 외 매트릭스 나타내고 건설 기계는 세포 마이그레이션할 수 및 증식, 조직 설립을 촉진 역할.

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
Isoflurane (Isoflo)	Henry Schine Animal Health	17579	gas anesthetic
Optixcare Eye Lubricant	Henry Schine Animal Health	OPX4240	Ocular lubricant
Oster clippers	Henry Schine Animal Health	6092	hair clippers
Betadine surgical scrub	Henry Schine Animal Health	1618	antiseptic iodophor
Sterile scalpel	Henry Schine Animal Health	329	#10 scalpel
9" x 12" disposable surgical drape	Braintree Scientific, Inc.	SP-RPS	Surgical drape
4-0 nylon suture	Braintree Scientific, Inc.	SUT 812	Suture material
4-0 Absorbable Suture	Henry Schine Animal Health	29242	Synthetic absorbable suture
9 mm Autoclips and applier	Braintree Scientific, Inc.	ACS KIT	Surgical staples for closure of skin incision
Torbugesic/analgesic	Henry Schine Animal Health	12084	Butorphanol tartarate for post-operative analgesia
Small intestinal submucosa (SIS)	Cook Biotech, Inc.		Implant material for bridging experimental abdominal wall defect
Rats	Harlan, Inc.	Sprague Dawley	Animal for hernia modeling