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Method Article
Intraganglionic 주입에 대 한 요 추 느 루트 신경 절 (DRG)에 대 한 액세스를 제공 하는 돼지에서 laminotomy 하는 방법을 설명 합니다. 사출 진행 intraoperatively 그리고 조직학 수술 후 21 일까지 확인 모니터링 합니다. 이 프로토콜 DRG 주입 관련 된 미래의 전 임상 연구 사용 될 수 있습니다.
지 루트 신경 절 (DRG)는 머리 아래 모든 기본 감각 신경 세포를 포함 하는 해부학 잘 정의 된 구조. 이 사실은 만성 통증을 치료 하기 위한 새로운 치료제의 주입을 위해 DRG 매력적인 목표 합니다. 작은 동물 모델에서 laminectomy 각 DRG를 둘러싼 척추 뼈의 외과 제거를 포함 하기 때문에 DRG 주입을 용이 하 게 사용 되었습니다. 큰 동물 종, 즉, 돼지에에서 요 추 DRG의 intraganglionic 주입에 대 한 기술을 설명합니다. Laminotomy는 DRG 표준 신경외과, 악기, 기술과 재료를 사용 하 여 직접 액세스할 수 있도록 수행 됩니다. Laminectomy 통해 더 광범위 한 뼈 제거와 비교, 우리가 충분 한 DRG 액세스를 달성 하는 동안 척추 해부학을 보존 하기 위해 laminotomy를 구현 합니다. DRG 주입의 자가 진행 비 독성 염료를 사용 하 여 모니터링 됩니다. 수술 당일 21 안락사, 다음 주입의 성공 조직학의 4', 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) intraganglionic 배포에 대 한에 의해 결정 됩니다. 우리는 프로토콜을 설명 하는 생물학으로 비활성 솔루션을 주입. 이 방법 적용된 미래에 전 임상 연구 대상 DRG 치료 솔루션을 수 있습니다. 우리의 방법론은 큰 동물성 종에 intraganglionic 작은 동물 패러다임의 translatability를 테스트 용이 해야. 또한,이 프로토콜은 그 돼지에서 DRG 주입의 전 임상 연구를 계획에 대 한 핵심 자원으로 봉사 할지도 모른다.
지 루트 신경 절 (DRG)은 척추 칼럼을 따라 위치한, 신경 해부학 개별 컬렉션. 각 DRG 특정 신체 영역에서 인코딩 및 주변 자극 중앙 신경 시스템 (CNS)를 릴레이 하는 기본 감각 뉴런을 포함 합니다. 예를 들어, 관절염의 통증에는 통증 수용 체는 관절에 대 한 위치 인식 유해 자극 때 시작 됩니다. 이 과정은 불린다 nociception. 유해 자극의 장기 인식 만성 통증 1이끌어 낸다.
만성 통증 한 목표 intraganglionic 주입 3등 DRG, 진통제의 대상된 배달에 대 한 유용한 방법을 개발 하는 전 임상 연구 2 의 빈번한 주제 이다. 그러나, DRG는 범위 내에서 보 니 척추 foramina 4의 거주 때문에 접근 하기 어려운. 몇몇 그룹은 성공적으로 설치류 5,6,7,8,,910에서 척추 수술을 통해이 장애물을 극복 했다.
클리닉, laminectomy 일반적인 척추 작업이 며 그로 인하여 척추 운하 11unroofing 척추 lamina의 외과 제거를 가리킵니다. 그러나 DRG에 대 한 직접 액세스를 감당할 수술 기법의 설치류 5,12에 성공 했다,, 번역 관련 구조의 크기에 비현실적인 고려 차이 그 영향을 어떻게 있을 수 있습니다. 약 동학 또는 기술적 타당성 13,14. 예를 들어 한 연구 T10 3.0, 7.0, 그리고 쥐, 돼지, 및 인간, 각각 158.2 m m에 가로 척수 직경 결정. 따라서, 큰 동물 신경 구조의 더 나은 대략 인간의 차원 모델.
돼지, Raore 그 외 여러 intraspinal 주사 16자 궁 경부 척수에 대 한 액세스를 다단계 laminectomy를 사용. 절차 잘 용납 되었다 고 단계 나 임상 실험 대 등 수술 결과 문서화 17을 했다. 이 결과 기술적 타당성 및 인간에서 안전의 예측으로 큰 전 임상 동물 모델의 지속적인된 사용을 권장합니다.
날짜 하려면, 아무 상세한 방법론 외과 접근 및 큰 동물 종에서 DRG의 주입에 대 한 존재 합니다. 이 변환 간격을 좁히는, 우리 보고 DRG 노출 및 돼지에 laminotomy 통해 주입에 대 한 프로토콜. 표준 신경외과, 악기, 기술과 재료를 사용 했다 하 고 메서드가 현대 외과 연습을 모방 하도록 설계 되었습니다. 우리 intraganglionic 주입 허리 DRG에 대 한 용액을 사용 하 여 설명 하 고 수술 하루 21 조직학 통해 배달 확인.
여기에서 설명한 모든 방법을 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC)의 메이 요 클리닉에 의해 승인.
1. 경직의 필수 구성 요소 및 재현성
2. 수술 동물 관리
3. 신 제품군에 위치
4. 살 균 준비의 요원에 대 한 필드 왼쪽 양면 사출
참고:이 시점에서 엄격한 살 균 방식 진행.
5. 피부 절 개 및 Subperiosteal 해 부
6. 단일 레벨 Laminotomy
7. DRG의 해 부
8. DRG의 주입
9. 폐쇄
10. 수술 동물 관리
Injectate의 더 평가
DRG injectate의 성공적인 납품 DAPI 확산의 조직학 평가 의해 결정 됩니다. 기법 바늘 팁은 DRG의 3 차원 중심에 위치 한다. 따라서, 배달 DAPI 바늘 끝에 조직학 단면도에서 둘 다 (중앙 DRG 섹션) 근처 고 먼 (주변 DRG 섹션) 얼룩의 정도 평가 하 여 결정 됩니다. 그림 1A 및 그림 1B 한 DRG의 성공적인 주입을 나타냅니다. DAPI 얼룩 모...
우리는 DRG 통해 laminotomy 및 건강 한 큰 동물성 종에 있는 intraganglionic 주입 수술 노출 하는 방법을 설명 하고자 특히, 돼지. 설치류, 유사한 방법 자세한 12 되어 있으며 기존의 pharmacologic 요원 8,10 및 바이러스 성 벡터 6,7,,912 DRG를 제?...
없음; 저자는이 연구에 관련 된 충돌의 관심 있다.
연구 지원 Schulze 가족 재단 (A.S.B.)에 의해 수행 되었다.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Large humane animal sling | Britz & Company | 002539 | Modified to include abdominal aperture |
Adhesive patient return electrode - 9 inch | Medtronic | E7506 | - |
Ranger blood & fluid warming system | 3M | 24500 | - |
Lactated Ringer's fluid | Hospira | 0409-7953-09 | - |
Force air warming device | 3M | 77500 | - |
Duraprep solution with applicator, 26 mL (0.7% iodine povacrylex, 74% isopropyl alcohol) | 3M | 8630 | - |
Sterile disposable surgical towels | Medline | MDT2168286 | - |
Ioban 2 incise drape | 3M | 6651EZSB | - |
Disposable suction canister and tubing | Medline | DYND44703H | - |
Button switch electrosurgical monopolar pencil | Medtronic | E2450H | - |
Fine smooth straight bipolar electrosurgical forceps, 4 1/2 inch | Bovie | A826 | - |
#15 blade | Miltex | 4-315 | - |
#11 blade | Miltex | 4-311 | - |
4 x 4 surgical gauze | Dynarex | 3262 | - |
Weitlaner self-retaining retractor, 8 inch | Miltex | 11-618 | - |
Meyerding self-retaining retractor, 1 x 2 3/8 inch | Sklar | 42-2078 | - |
Gelpi self-retaining retractor, 7 inch | Sklar | 60-6570 | - |
Freer elevator, 5 mm | Medline | MDS4641518F | - |
Bone wax | Ethicon | W31G | - |
Spurling intervertebral disc rongeur, 3 mm | Sklar | 42-2852 | - |
Spurling 45-degree, up-biting Kerrison rongeur, 2 mm | Medline | MDS4052802 | - |
Leksell angled rongeur, 2 mm | Sklar | 40-4097 | - |
Gelfoam, size 50 | Pfizer | AZL32301 | - |
Cottonoid patty | Medtronic | 8004007 | - |
Frazier suction tip, 6 Fr | Sklar | 50-2006 | - |
Frazier suction tip, 10 Fr | Sklar | 50-2010 | - |
Dandy blunt right angle nerve hook | Medline | MDS4005220 | - |
Nylon suture, 6-0 | Ethicon | 697G | - |
Castroviejo smooth micro needle holder | Medline | MDG2428614 | - |
22 gauge Quinke point spinal needle | Halyard Health | 18397 | - |
32 gauge CED needle with locking Luer hub | See comments | n/a | As in: Pleticha, J., Maus, T.P., Christner, J.A., Marsh, M.P., Lee, K.H., Hooten, W.M., Beutler, A.S. Minimally invasive convection-enhanced delivery of biologics into dorsal root ganglia: validation in the pig model and prospective modeling in humans. Technical note. J Neurosurg. 121(4), 851-8 (2014). |
Polyethylene tubing, 5 feet | Scientific Commodities | BB31695-PE/05 | - |
Monoject syringe, 3 mL | Kendall | SY15352 | - |
NanoJet syringe pump | Chemyx | 10050 | - |
DAPI | Sigma-Aldrich | D9542 | - |
Fast Green FCF | Sigma-Aldrich | F7252 | - |
Bulb irrigation syringe | Medline | DYND20125 | - |
Fine-toothed Adson forceps | Medline | MDS1000212 | - |
Vicryl suture, 0 | Ethicon | J603H | - |
Vicryl suture, 2-0 | Ethicon | J317H | - |
Needle counter | Medline | NC20FBRGS | - |
Steri-strip skin closure, 1/2x4 inch | 3M | R1547 | - |
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