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요약

샘플 준비, 스펙트럼 획득 및 데이터 분석의 최적화를 포함 하 여 합성 고분자의 질량 분석 (MS MALDI TOF) 특성을 설명 하는 비행의 매트릭스 보조 레이저 탈 착 이온화 시간에 대 한 프로토콜.

초록

합성 homopolymers의 특성에 사용할 수 있는 많은 기술이 있다 그러나 몇 가지 유용한 매트릭스 보조 레이저 탈 착 이온화 시간의 비행 질량 분석 (MS MALDI TOF) 끝 그룹 분석에 대 한 정보 제공. 이 자습서의 샘플 준비, 스펙트럼 수집, 최적화에 대 한 메서드를 보여 줍니다 및 견본 준비 동안 MALDI TOF 양 중요 한 매개 변수를 사용 하 여 합성 고분자의 데이터 분석, 매트릭스의 선택을 포함 적절 한 cationization 소금 및 행렬, 양이온, 및 분석의 상대적 비율 조정의 식별. 인수 매개 변수 모드 등 (선형 또는 반사), 편광 (양수 또는 음수), 가속 전압 및 지연 시간, 중요 한도 있습니다. 화학 합성 고분자 및 데이터 수집 매개 변수 및 예제 준비 조건 최적화 관련 된 지식이 주어진 스펙트럼 얻을 수 있어야 충분 한 해상도와 대량 정확도 명확한 수 있도록 반복 단위 뿐만 아니라 대부분 homopolymers (10000 아래 대 중)의 끝 그룹의 질량 및 전반적인 분자량 분포. 고분자의 제한 된 집합에 설명, 비록 끝 그룹 결정은 좁은 dispersity와 homopolymers에 대 한 가능 하지만 이러한 일반적인 기법을 질량 분포를 결정 하기 위한 합성 고분자의 훨씬 넓은 범위에 적용 됩니다.

서문

생활 개선 중 합 기술, 정밀 고분자 양적 기능성된 끝 그룹은 점점 더 사용할 수 있는1. 아 지 드 alkyne 및 thiolene 클릭 화학의 동시 개발 활성화 고분자 하이브리드 재료2,3,4의 범위에 대 한 액세스를 제공 하는 다른 moieties에의 약 양적 커플링 . 그러나, 정확한 분석 기법 모두 시작 자료와이 폴리머 활용 반응의 제품을 특성화 해야 합니다. 매트릭스 보조 레이저 탈 착/이온화 시간의 비행 질량 분석 (MS MALDI TOF)은 최소 하나의 충전 상태에서 폴리머 이온을 생성할 수 있기 때문에 고분자 특성화에 대 한 귀중 한 부드러운 이온화 분석 기술 조각화5,6. MALDI TOF MS 폴리머 대량 유통 내 개별 n mers의 해상도 가진 질량 스펙트럼을 제공할 수 있기 때문에 고분자 특성의 다른 기존의 방법에 비해 주요 이점이 있다. 결과적으로, 같은 질량 스펙트럼 평균 분자량에 대 한 정확한 정보를 제공할 수, 단위 질량, 및 분자량 dispersity7, 차례로 전송 체인8 등 경쟁 중 합 메커니즘을 명료 수 있는 반복 . 그러나, MALDI TOF MS는 특히 강력한 폴리머 끝 그룹9,10, 끝 그룹 수정10,11 를 확인 하는 데 사용할 수 있습니다에 대 한 정보를 제공 하 고 다른 변환12 폴리머 cyclizations11,13등. 똑같이 중요 한, 상대적으로 적은 양의 분석 (서브-마이크로 그램)에 필요한 대량 spectrometric 분석 하면이 기술을 특성화에 대 한 유용한 유일한 재료 양의 추적 사용할 수 있습니다.

고분자의 MALDI TOF MS 분석 4 명료한 단계로 분할 될 수 있다: 준비, 장비 교정, 스펙트럼 수집 및 데이터 분석. 샘플 준비 이며 생성 하기 위한 가장 중요 한 단계 MALDI TOF 질량 스펙트럼에 최적화 된 샘플은 악기14,15에 도입 되기 전에 발생 합니다. 고분자 분석으로 유사한 가용성 매개 변수를 적절 한 매트릭스의 선택은 고품질 MALDI TOF 질량 스펙트럼을 얻기 위해 중요 한 고 매트릭스 선택에 대 한 지침14,15, 다른 곳에서 보고 16,17. 폴리머 MALDI 시료 준비에 대 한 "조리법"의 데이터베이스 또한 출판된 온라인18있다. 새로운 폴리머 매트릭스 선택 첫 번째 고분자의 용 해도 이해 유사한 가용성 매개 변수14,19행렬을 선택 하 여 접근 수 있다. 높은 양성자 선호도 고분자 protonated 대부분 행렬14 (이 자주 carboxylic 산 그룹 포함), 수 있지만 다른 폴리머 cationization 에이전트는 필요한14. 알칼리 이온 포함 하는 산소와 잘 adduct 종 (예. 폴리에스터 및 polyethers), 불포화 탄화수소 (예. 폴리스 티 렌) 전이 금속은과 구리 이온14, 와 adduct 19. 등뼈에 산소 원자를 포함 하는이 실험에서 폴리머 샘플, 때문에 나트륨 또는 칼륨 trifluoroacetate (TFA) cationization 요원으로 사용 되었다. 일단 행렬 및 cationization 에이전트를 선택 분석, 양이온 에이전트, 그리고 매트릭스의 상대적 비율 높은 신호 잡음을 보장 하기 위해 신중 하 게 낙관 되어야 한다. 그러나이 절차에서는 샘플 준비에 대 한 매개 변수는 이미 최적화 된, 실험 샘플 최적화 절차 (단계 1.4.1., 그림 1)을 체계적으로 세 가지 구성 요소 (분석의 농도 변화 매트릭스와 양이온) 급속 하 게 그들의 최적 비율을 결정 하는 데 효과적 이다.

데이터 수집에는 매개 변수 수의 최적화를 필요합니다. 가장 중요 한 매개 변수는 분석기의 포지티브 또는 네거티브 이온 모드, 악기의 동작 모드 (선형 반사 체 대), 가속 전압 및 추출 지연 시간을 포함합니다. 해상도 증가 시킬 수 있다 또 다른 방법은 "reflectron" 모드20,21,,2223의 활용을 통해 이다. Reflectron 모드 본질적으로 다시 바꾸고 이온 다른 momentums와 함께 하는 동안 소스 근처 검출기 향해 비행 튜브의 끝에 이온을 반영 하 고 따라서 비록 해상도 증가 하 여 검출기에 이온의 비행 경로 두 배로 신호 강도 감소. 또한, 더 높은 해상도 스펙트럼 수와 충돌의 에너지를 감소 시키고 따라서 조각화 및 키네틱 이질성24신호 대 잡음 비율을 최소화 하는 레이저 파워를 감소 하 여 얻을 수 있습니다. 모든 이러한 매개 변수를 조정, 이온 초기 위치 또는 레이저 탈 착 과정에서 발생 하는 속도에 있는 이질성의 효과 최소화 하기 위해 집중 될 수 있습니다. 인수 매개 변수는 최적화 될 때 동위 해상도 자주 얻을 수 있습니다 10000 다 이상의 질량을 가진 이온에 대 한 비록 이것이 또한 악기 디자인과 비행 튜브의 길이 따라 다릅니다. 적어도 하나의 heteroatom 포함 하는 대부분의 유기 화합물 complexing 리튬, 나트륨, 칼륨 등 알칼리 양이온으로 하는 경향이 있다. 알칼리 금속 많은 monoisotopes 또는 제한 된 동위의 따라서 분포 확대 하지 않습니다.

악기 매개 변수 데이터 정밀도 최적화 하기 위해 조정 될 수 있다, 하는 동안 데이터 정확도 적절 한 교정11만 달성 된다. 단백질 및 펩 티 드 그들의 monodispersity 및 가용성, calibrants로 원래 이용 되었다 그러나 가변 안정성과 불순물25의 유행에서. 더 비용 효율적이 고 안정적인 대안 무기 클러스터와 polydisperse 고분자26,27,,2829를 포함 했다. 불행히도, 이러한 대안 기능 복잡 하 게 더 작은 질량으로 대량 할당, 전반적으로, 그들을 교정 10000 다 아래에 유용 하 중 분산. 이 대처 하기 위해, 그레이 외문제. 25 는 dendrimer 기반, 폴 리 에스테 MS 교정 시스템을 개발 단 분산, 그리고 둘 다 광범위 한 매트릭스 및 용 매 호환성, 선반 수명 안정성 (> 8 년), 그리고 낮은 생산 비용을 자랑. 이 시스템의 강점을 바탕으로, 그것은 이러한 실험에 대 한 calibrant로 선정 됐다.

교정의 두 가지 주요 유형이 있다: 내부와 외부30. 외부 보정, 대괄호는 분석의 질량을 가진 표준 교정 파일을 생성할 수 있는 별도 질량 스펙트럼을 생성 하는 분석 보다 다른 샘플 위치에 MALDI 표적 격판덮개에 배치 됩니다. 다른 한편으로, 높은 정확도를 calibrant 및 분석 신호 하이브리드 스펙트럼 분석으로는 calibrant 혼합을 포함 하는 내부 캘리브레이션 자주 얻을 수 있습니다. 아래 설명 된 절차에는 외부 교정 구현 되었습니다. 대량 규모의 적절 한 교정, 후 정확한 분석 대량 데이터 취득 될 수 있다. 가장 정확한 구경 측정을 위해 데이터 수집 보정 후 곧 발생 하는 것 중요 하다.

마지막으로, 일단 최적화, 보정 데이터 세트 인수 했다, 그리고 폴리머 샘플에 대 한 구조 정보를 제공 하는 데이터 분석 했다. 폴리머 분포 내에서 n-메 사이의 간격 반복 단위의 정확한 측정을 제공할 수 있다 질량. 수 평균 분자량 (Mn) 및 기타 대량 메일 계산 (예를 들어, Mw (중량 평균 분자량) 및 Đ (dispersity)) 또한 질량 스펙트럼 (에서 신호 분배에서 결정 될 수 있다 4.2 계산 단계). 아마도 가장 독특한, homopolymers, 경우 끝 그룹의 합계 확인할 수 있습니다 혼자 반복 단위의 질량에 관하여 폴리머 분포의 오프셋을 결정 하 여. 크기 배제 크로마토그래피, 푸리에 변환 적외선 분광학, 등 전통적인 폴리머 특성화 기법을 보완 하는 귀중 한 특성 데이터를 제공 하는 풍부한 정보 MALDI TOF 질량 스펙트럼 및 핵 자기 공명입니다.

프로토콜

주의: 모든 반응 증기 두건에서 실행 되었습니다. 모든 재료 안전 데이터 시트 (MSDS)를 어떤 화학 사용 및 적절 한 예방 조치를 참조 하십시오.

1. 샘플 준비

  1. 매트릭스 재고 솔루션의 준비
    1. Tetrahydrofuran-unstabilized (THF), 그리고 해산 때까지 소용돌이의 1 mL에 α-cyano-4-hydroxycinnamic 산 (HCCA)의 20 밀리 그램을 디졸브.
    2. THF, 그리고 해산 때까지 소용돌이의 1 mL에 2, 5-dihydroxybenzoic 산 (DHB)의 20 밀리 그램을 디졸브.
  2. 알칼리 양이온 재고 솔루션의 준비
    1. THF, 그리고 해산 때까지 소용돌이의 1 mL에 2 밀리 그램의 나트륨 trifluoroacetate (NaTFA)을 용 해.
    2. THF, 그리고 해산 때까지 소용돌이의 1 mL에 2 밀리 그램의 칼륨 trifluoroacetate (KTFA)을 분해.
  3. 분석 재고 솔루션의 준비
    1. 예제 1: 분해 폴 리 (에틸렌 글리콜) 2 aminoethyl 에테르 아세트산의 2 밀리 그램 (Mn = 5000) THF, 그리고 해산 때까지 소용돌이의 0.5 ml.
    2. 샘플 2: 2 mg polyoxyethylene bis(azide)의 분해 (Mn = 2000) THF, 그리고 해산 때까지 소용돌이의 0.5 ml.
    3. 샘플 3: 2 mg poly(L-lactide), 종료 thiol의 분해 (Mn = 2500) THF, 그리고 해산 때까지 소용돌이의 0.5 ml.
  4. 분석을 위해 샘플 혼합물의 준비
    1. 9 독특한 샘플 혼합물 만들어집니다 그런 구성의 상대적 비율을 변화 하는 동안 행렬, 분석 및 양이온 솔루션을 혼합 하 여 일련의 해결책을 준비 합니다. 예를 들어, 추가 된 매트릭스 재고 솔루션 일정 금액 유지 (예., 10 µ L), 3의 요인에 의해 분석 솔루션의 양을 다 (예., 45, 15, 및 5 µ L), 또한 3의 요인에 의해 양이온 솔루션의 양을 변화 하는 동안 (예: ., 9, 3, 고 1 µ L). 이 샘플은 효과적으로 다른 농도 두 변수 x와 y와 3 x 3 격자 항복 축 (그림 1).
    2. 대표적인 예 DHB 솔루션의 15 µ L 함께 poly(L-lactide) 솔루션의 15 µ L NaTFA 솔루션의 1 µ L을 결합.
    3. MALDI 표적 격판덮개 (그림 2)에 개별 샘플에 각 솔루션 혼합물의 1 μ 플라스틱 증분 추가 샘플을 추가 하기 전에 건조를 증발을 각 약 수 있도록 샘플 잘 밖으로 흐르는에서 샘플을 방지 하기 위해 작은 부분에 샘플을 추가 합니다.
      주: 더 높은 비등 점 용 제에 대 한 공기 총 필요할 수 있습니다 용 매 증발, 신속 하 게 주의 워프 수 접시를 발생할 수 있습니다 샘플 접시가 열 방지에 사용 한다.
  5. 보정을 위한 표준 시료의 준비
    1. 교정 표준 제안된 공급 업체 프로토콜을 사용 하 여 준비 합니다.
      참고: Dendrimer calibrants이이 연구에 대 한 선정 됐다 고 순수한 dendrimers로 사용할 수 있습니다 또는 매트릭스, calibrant, 최적화 된 비율에서 양이온과 혼합.

2. 데이터 수집 최적화

  1. 데이터 수집을 시작
    1. 데이터 수집 소프트웨어 "FlexControl"를 엽니다.
    2. 꺼내기 눌러 대상 플레이트의 로드를 사용할 수 있는 플랫폼은 "figure-protocol-2060" 버튼.
    3. 부드럽게 적절 한 방향에 플랫폼에 로드 calibrant 및 분석 샘플 대상 접시를 놓습니다.
    4. 수집 소프트웨어를 사용 하 여 눌러 플랫폼 대상 플레이트를 삽입 하는 "figure-protocol-2248" 버튼을 다시.
    5. 파일을 눌러 적절 한 데이터 수집 방법 (긍정적인 모드 수집 방법)를 선택 합니다. | 선택 하는 방법.
      참고: 우리의 대표 analytes를 포함 하 여 대부분의 폴리머 샘플에 대 한 이온화는 양이온으로 complexation를 통해와, 그러므로, 긍정적인 모드 인수 메서드는 가장 적합 한. 낮은 질량 범위 (500-10000 다) 또는 더 높은 해상도, 원하는 때에 대 한 악기에 따라 반사 모드 방법 파일을 선택 합니다. 높은 분자량에 대 한 샘플 또는 때 높은 신호 감도 필요, 및 낮은 해상도 허용, 선형 모드 방법 파일을 선택 합니다.
    6. 데이터를 취득 하기 전에 있는지 확인 데이터 수집에 대 한 적절 한 질량 범위 선택-이상적으로 대량 범위 예상된 분포 예상된 분포에서 두 배 높은 질량에 있는 낮은 질량의 절반을 포함 됩니다. 검색 탭을 클릭 하 고 질량 범위보기 이것을 확인 합니다.
      참고: 이렇게 하면 낮은 분자량 저하 조각에서 그 신호 또는 더 높은 분자량 집계 (dimer) 샘플에 있을 수 있는 데이터 집합에 포함 됩니다. 또한, note 매트릭스 올리고 대부분 MALDI TOF 질량 스펙트럼에 대 중 1000 다,이 질량 아래 복잡 한 분석으로 높은 강도 높은 잡음을 제공 하 고 신호 강도를 자주 발견 됩니다. 보정은 최종 데이터 세트를 얻기 전에 요구 될 것 이다, 비록 동일한 인수 매개 변수는 특정 분석에 최적화 된 그 사용 하는 경우는 정확한 교정 파일 취득만 수 있습니다. 따라서, 분석 질량 스펙트럼의 예비 최적화 보정된 실정이 질량 스펙트럼의 획득 뒤 교정 하기 전에 필요 합니다.
  2. 예비 데이터 수집
    1. 수집 소프트웨어에서 해당 원하는 분석 하는 대상에 위치를 선택 합니다.
    2. 레이저 표적 신호를 최대화 하기 위해 샘플 주위를 이동 하는 동안 데이터 수집을 시작 합니다. 데이터 수집을 시작 하려면 시작을 누릅니다.
      참고: 레이저 반복된 샘플링 후 특정 위치에 매트릭스를 배출 수 있습니다.
    3. 동위 원소 해상도 달성 하는 데 필요한 최소 전력 달성 되도록 카메라 창의 왼쪽에 슬라이드 막대를 사용 하 여, 레이저 파워를 조정 합니다.
      참고: 확인 분석, 양이온, 그리고 매트릭스의 최적 비율에 여러 샘플을 분석할 때 사용 하 여 동일한 레이저 전원 분석 샘플의 각각에 샘플 전시 그 인수 매개 변수에 대 한 최상의 신호/잡음 비율을 결정 하. 최상의 신호 대 잡음 비를 전시에 표시 되는 샘플 함께 미래의 수집 최적화를 계속 합니다.
  3. 데이터 수집 최적화
    1. 가속 전압에 차이 조정 하 여 해상도 최적화 하는 관심의 대량 범위 가운데 개별 피크에 확대 (이 연구에서 악기에 대 한이 포함 "IS2" 값 조정), 분석기에에서 있다는 탭.
      참고: 이것은 가장 빠르게 최적화 된 큰 단계, 노트는 값 생성 최고의 해상도 IS2 값을 변화 하 여 (즉,., 작은 피크 폭 절반 최대 신호 강도 전체), 및 다음 더 작은 단계에서 최적화 IS2 값입니다. 일반적으로, 최적의 IS2 값 높은 (가까이 IS1) 낮은 대량 폴리머, 그리고 낮은 높은 대량 폴리머입니다.
    2. 원하는 경우 reflectron 모드를 사용 하 여 해상도 증가.
      참고: Reflectron 모드는 검출기에 더 긴 경로에 같은 m/z 값의 더 높은 속도 이온을 강요 하 여 동일한 m/z 의 이온의 초기 속도에 불일치의 보상에 대 한 수 있습니다. 검출기에 경로 있는이 증가 수 있습니다 같은 m/z 값의 느린 이온 동시에 검출기에 도착을 증가 해상도 대 한 이온을 효과적으로 집중. 비록 reflectron 모드는 일반적으로 약한 신호 강도, 샘플에 대 한 신호 해상도 향상 선형 모드 데이터를 시각화 하기 위해 필요할.
    3. 마지막으로, 아직도 적당 한 신호 대 잡음 비를 생성 하는 동안 가능한 한 낮은 레이저 파워를 감소 시켜 레이저 파워를 최적화 (예., 신호 대 잡음 비율 약 10의).
      참고: 높은 레이저 능력 일반적으로 해상도 조각화를 일으킬 수 있기 때문에 최고의 품질을 가진 질량 스펙트럼은 인수 감소 레이저 파워 하지만 검사의 높은 번호를 사용 하 여.
    4. 일단 인수 매개 변수 최적화 된 파일 을 다음 파일 이름으로 저장 스펙트럼을 선택 하 여 보정 되지 않은 질량 스펙트럼을 저장 합니다. 새로운 인수는 분석의 보정된 질량 스펙트럼을 생성을 시작 하기 전에 외부 교정에 대 한 이러한 동일한, 최적화 된 매개 변수에서 calibrant의 새로운 수집 실행 한다.

3. MALDI 교정

  1. 보정 질량 스펙트럼의 취득
    1. 이미는 분석에 최적화 된 인수 매개 변수를 사용 하 여 대량 표준 샘플의 최적화 된 질량 스펙트럼 획득.
      참고: 이상적으로, 교정 세트 포함 해야 합니다, 아래의 관심과 관심의 범위에서 하나 이상의 범위 위에 한 표준. 교정의 정확도 모든 인수 매개 변수는 모두 샘플에 대 한 동일한 경우에 최상 이다.
  2. 교정 파일 만들기
    1. 모든 기존 교정은 무효 또는 무효화 교정 분석기 아래를 누르면 덮어쓸 수 있는 위치에 탭을 확인 하십시오.
    2. 동일한 수집 매개 변수를 사용 하 여 (예., 레이저 출력, IS2 전압), 포함 하는 calibrant 샘플 잘 레이저 이동 (예., dendrimer 표준, 펩 티 드) 해당 선택 하 여 커서를 잘 하 고 취득 한 시작을 누르면 스펙트럼입니다.
  3. 충분 한 신호를 획득 하는 일단 데이터 획득 완료 시작 을 누릅니다.
  4. calibrant의 질량 스펙트럼 획득 되 면 그 보정 표준에 해당 하는 보정 탭에서 질량 제어 목록 드롭다운 메뉴를 선택 합니다. 적절 한 질량 제어 목록 참조 대 중 calibrant 선택/적절 한 양이온의 있을 것 이다.
    참고: 이러한 한다 calibrant 공급 업체에서 사용할 수와 동위 원소 해상도 달성 monoisotopic 질량 값을 사용할 수 있는지 확인 (예., m/z 아래 반사 모드 = 5000), 그리고 평균 질량 값 때 동위 해상도 얻을 수 없습니다 (예를 들어, m/z 위에 선형 모드 = 5000),
  5. 일치 하기 전에 각 선택한 calibrant 피크를 해당 참조 피크 프로토콜을 선택 하는 적절 한 피크 처리 탭을 선택 하 여 사용 되 고 있는지 확인 합니다.
    참고: 최대 따기 프로토콜 스펙트럼 분해능에 따라 달라질 수 있습니다. 평균 질량 계산에 대 한 소프트웨어 동위 원소 봉우리의 전체 시리즈에 걸쳐 대량 평균을 소요 됩니다. Monoisotopic 질량 계산에 대 한 첫 번째 동위 피크의 정확한 질량을 계산 하는 소프트웨어를 설정 해야 합니다.
  6. 관심의 피크의 왼쪽 영역을 선택 하 고 적용할 컨트롤 목록에 해당 질량에 클릭 하 여 대량 제어 목록에서 calibrant 질량 스펙트럼에 대 한 해당 신호 참조 질량을 적용 됩니다. 나머지 calibrant 피크에 대 한 프로세스를 계속 합니다.
    참고: 가장 정확 하 고 정밀한 교정 장소 분석 및 calibrant 샘플 가깝게 가능한 대상 접시에 대상 플레이트 높이에 미묘한 변화는 교정의 정확성에 영향을 미칠 수 있기 때문에.
  7. 최적화 된 인수 매개 변수에 대 한 대량 규모 조정 되었습니다 일단 분석 스펙트럼을 다시.

4. 데이터 분석 및 해석

  1. 따기 피크
    1. 데이터 분석 소프트웨어 (FlexAnalysis)에서 분석 스펙트럼을 엽니다.
    2. X 범위 확대 버튼을 선택 하 여 동위 원소 해상도 달성 하는 경우를 식별 하는 피크에 확대.
    3. 대량 목록을 눌러 | 찾을 봉우리를 선택. Monoisotopic 피크 해결 되 면 monoisotopic 피크 따기 프로토콜을 사용 하 여 질량을 결정 하기 위해 동위 원소 배급에이 첫 번째 피크를 선택 합니다. Monoisotopic 최대 해결 되지 않은 경우 평균 질량 피크 따기 프로토콜을 사용 하 고 전체 동위 원소 분포의 평균 질량을 결정.
    4. 계속이 피크 폴리머 분포에서 각 n-메 르에 대 한 프로세스를 선택 합니다.
  2. 고분자 특성화 및 끝 그룹 분석 계산
    참고: 정확 하 게 사용 하는 경우 MALDI TOF MS 제공할 수 있습니다 귀중 한, 정확한 데이터 고분자의 질량 분포 계산을 위한. 대량 유통 데이터입니다만 정확한 폴리머 샘플의 dispersity은 상대적으로 낮은 때 주목 해야 한다 (예., 약 Đ= 1.3 또는 아래).
    1. 수 평균 분자량, 수식을 사용 하 여 각 대량 분수의 두더지의 수에 관하여 대량 평균 계산:
      figure-protocol-7219
      여기서 N나 특정 분자량 및 Mi 의 분자의 수 = 그 분자의 특정 분자량 =.
    2. 무게 평균 분자량, 수식을 사용 하 여 각 질량 분 율의 무게에 관하여 대량 평균 계산:
      figure-protocol-7457
      여기서 N 나 특정 분자량 및 M i 의 분자의 수 = 그 분자의 특정 분자량 =.
    3. 일단 Mw 와 Mn 계산 되는 비율 Mw/Mn dispersity, Đ라는 사용 하 여 분자량 분포의 폭 계량.
    4. MALDI TOF MS 데이터 분석의 가장 유일 하 고 강력한 기능 확인 또는 homopolymers의 끝 그룹을 확인 하는 기능입니다. 질량 스펙트럼 (Mn-메 르)에 n-메 르의 관찰 된 질량에 대 한 다음 수식을 다시 배열 하 여 끝 그룹을 확인 합니다.
      Mn-메 르 = n (MRU ) + MEG1 + MEG2 + M이온
      여기서 n = 중 합도
      MEG1 = α 끝 그룹의 질량
      MEG2 = ω-끝 그룹의 질량
      MRU 는 고분자의 반복 단위의 질량 =
      그리고 M이온 폴리머와 그 단지 이온의 질량 =.

결과

예제 1: 폴 리 (에틸렌 글리콜) 2 aminoethyl 에테르 아세트산의 샘플 (Mn = 5000) (그림 3)를 매트릭스로 HCCA cationization 에이전트 칼륨 trifluoroacetate를 사용 하 여 분석 했다. 스펙트럼 전시 예상 K+ adducts 잔류 나+에서 관찰 된 그들 뿐만 아니라.

MALDI TOF MS 폴 리 (에틸렌 글리콜) 2 aminoethyl 에테르 아세트산의 좁은 분포 (그림 3) 확인 (Mn = 5000). 받아 피킹 프로토콜 사용 (독점적으로 가장 풍부한 원소 동위 원소, 즉 12C, 1H 16O, 그리고 14N 함유) monoisotopic 피크의 식별 수 있도록 충분히 해결 되지 않으면, 때문에 그 각 n-메 르 피크에 대 한 전체 동위 원소 분포에서 평균 질량을 결정합니다. 마찬가지로, 모든 이론적 계산 각 요소에 대 한 평균, 보다는 오히려 monoisotopic, 대 중을 사용 하 여 결정 됩니다. 4 단계에서 수식에 사용 하 여, 분석 소프트웨어가 폴리머 대량 유통의 다음과 같은 특성을 계산 하는 데 사용 되었다: Mn: 4700, Mw: 4710, Đ: 1.00.

끝 그룹의 id를 확인 한 개별 n-메 르 (104) 추가 분석 (그림 4)에 선정 됐다. 으로 대량 유통 계산 monoisotopic 피크를 확인할 수 없습니다, 때문에 평균 질량 값 사용 되었다 후속 계산. 폴 리 (에틸렌 글리콜) 2 aminoethyl 에테르 아세트산의 104 메 르의 이론적인 질량 값은 이루어져 반복 단위 (44.0530 × 104)의 질량 (+ 16.02300) α-아민 끝 그룹 및 ω-carboxyl 끝 그룹 (+ 59.0440)의 질량의 질량 플러스 플러스는 4695.67675의 총 104 메 르 질량 이며 칼륨 양이온 (+ 39.09775)의 질량. 104-메 르 ++ K에 대 한 관찰된 질량 값은 이론적인 값, 평균 질량 계산의 정밀도 일치 하는 4695.5입니다. 플러스 (+ 16.02300) α-아민 끝 그룹의 질량 104 메 르의 이론적인 질량 값 (44.0530 × 104) 반복 단위의 질량의 구성 되어 나트륨을 이온화 하는 중합체에 해당 하는 스펙트럼에서 작은, 오프셋 봉우리의 시리즈 플러스는 ω-carboxyl 끝 그룹 (+ 59.0440) 및 4679.56822의 총 104 메 르 질량을 주는 나트륨 양이온 (+ 22.98922)의 질량의 질량. 104-메 르 + 나+ 에 대 한 관찰 된 질량 값만 0.2 다 다른 이론적인 값은 4679.4입니다. 끝의 더 정확한 결정 그룹 질량 여러 봉우리에 걸쳐 평균을 측정 하 여 결정 될 수 있다 그리고11다른 논의.

폴 리 (에틸렌 글리콜) 2 aminoethyl 에테르 아세트산 (Mn = 5000) 예제 2, 4-dinitrofluorobenzene (DNFB) (그림 6)의 좁은 분포 때 반응 (그림 5)에 의해 선택적으로 기능성 유지. 스펙트럼 전시 나트륨 adducts HCCA를 매트릭스로 사용 하 고.

MALDI TOF MS 폴 리 (에틸렌 글리콜) 2 aminoethyl 에테르 아세트산의 좁은 분포 (그림 6) 확인 (Mn = 5000) DNFB로 변경 하는 경우. 4 단계에서 수식에 사용 하 여, 분석 소프트웨어가 폴리머 대량 유통의 다음과 같은 특성을 계산 하는 데 사용 되었다: Mn: 4940, Mw: 4950 Đ: 1.00.

완전 한 있는지 확인 하기 위해 폴 리 (에틸렌 글리콜) 2 aminoethyl 에테르 아세트산의 기능화 (Mn = 5000)는 개별 n-메 르 분포의 분석 (그림 7)에 대 한 선정 되었다 DNFB, 발생 했다. 폴 리 (에틸렌 글리콜) 2 aminoethyl 에테르 아세트산의 기능성된 104 메 르의 이론적인 질량 반응으로 2, 4-dinitrofluorobenzene 44.0530 × 104 (반복 단위의 질량) + 182.115의 구성 (2, 4-α-아민 그룹의 반응 dinitrofluorobenzene) + 59.044 (carboxyl 그룹의 질량) + 22.98922 (나트륨 양이온의 질량) = 4845.66022. N에 대 한 대량 관찰된 값 = 104 4845.8는-0.1는 이론적인 값에서 다른 다. 이론 및 관찰 값이 가까운 계약은 제품, 시작 물자의 완전 한 수정 하지만 더 크게, 신호의 부족은 시작 물자, 4811.72722 및 4855.78022이 연관 대량 범위, 또는 어떤 추가적인 부산물 아민의 양적 선택적 기능화를 확인 합니다. 두 번째 피크는 기능성된 폴리머의 103-메 르 4823.8에서 관찰 하지만 carboxylic 산에 양성자의 손실 끝-0.2의 차이 4823.58899의 이론 질량을 가진 다른 나트륨 이온을 그 단지 그룹 다.

샘플 2: polyoxyethylene bis(azide)의 샘플 (Mn = 2000) (그림 8)를 매트릭스로 cationization 에이전트와 HCCA 나트륨 trifluoroacetate를 사용 하 여 분석 하 고 예상 전시만 나+ adducts.

이 낮은 질량 범위에서 달성 하는 해상도, n-메의 각 monoisotopic 봉우리는 쉽게 해결 될 수, 및 그래서 프로토콜을 따기 monoisotopic 피크 (평균만 동위 원소 분포에서 첫 번째 피크의 대량 신호 선택 했다 )와 모든 해당 계산 활용 각 요소의 monoisotopic 질량. MALDI TOF MS polyoxyethylene bis(azide)의 좁은 분포 (그림 8) 확인 (Mn = 2000). 4 단계에서 수식에 사용 하 여, 분석 소프트웨어가 폴리머 대량 유통의 다음과 같은 특성을 계산 하는 데 사용 되었다: Mn: 1940 년, Mw: 1950, Đ: 1.01.

확인 끝 그룹 기능화, n-메 (42)는 개별 선정 되었습니다 (그림 9). 위에 결정 하는 대량 배포판과 마찬가지로 monoisotopic 질량 monoisotopic 봉우리 각 n-메 르의 동위 원소 분포에서 잘 해결 때문에 사용 되었다. Polyoxyethylene bis(azide)의 42-메 르의 이론적인 대량 값 해당 44.02621 × 42 (반복 단위의 질량) + 42.00922 (azido 끝 그룹의 질량) + 70.04052 (azidoethyl 끝 그룹의 질량) + 22.98922 (나트륨 양이온의 질량) = 1984.13978. N에 대 한 대량 관찰된 값 = 42 0.19 다 다른 이론적인 값은 1983.95입니다. 그것은 특히 높은 레이저 능력에 아 지 드 기능 한다 조각; 전시 수 있습니다 주목 해야한다 그러나,이31이 특정 케이스 관찰 되었다.

Polyoxyethylene bis(azide) (Mn = 2000) 샘플의 좁은 분포 때 1-ethynyl-4-fluorobenzene(EFB) 와 구리 촉매 아 지 드 alkyne cycloaddition 반응 (그림 10)에 의해 선택적으로 기능성 유지 (그림 11)를 4-fluorophenyltriazolyl (FPT) 그룹. 스펙트럼 전시는 예상 나+ adducts 행렬으로 cationization 에이전트와 HCCA 나트륨 trifluoroacetate를 사용 하 여.

MALDI TOF MS (그림 11) polyoxyethylene bis(azide)의 좁은 분포 확인 (Mn = 2000) EFB와 기능화 후. 4 단계에서 수식에 사용 하 여, 분석 소프트웨어가 다음 폴리머 특성을 계산 하는 데 사용 되었다: Mn: 2240, Mw: 2250, Đ: 1.00.

확인 하려면 샘플의 완전 한 기능화, monoisotopic 질량 분석을 선택한 개별 n-메 르 (42) (그림 12) 사용 되었다. Polyoxyethylene bis(azide)의 42-메 르의 이론적인 질량 값과 반응 1-ethynyl-4-fluorobenzene 44.02621 × 42 (반복 단위의 질량) + 162.04675 (FPT 끝 그룹의 질량) + 190.07805에 해당 (의 질량은 FPT 에틸 끝 그룹 1-ethynyl-4-fluorobenzene)와 + 22.98922 (나트륨 양이온의 질량) = 2224.21484. N에 대 한 대량 관찰된 값 = 42 0.05 다 다른 이론적인 값은 2224.16입니다.

샘플 3: poly(L-lactide), 종료 thiol의 샘플 (Mn = 2500) (그림 13) cationization 대리인으로 나트륨 trifluoroacetate를 사용 하 여 분석 하 고 예상 전시만 나+ adducts DHB는 매트릭스로 하 고.

MALDI TOF MS poly(L-lactide), 종료 thiol의 좁은 분포 확인 (Mn = 2500) (그림 13). 4 단계에서 수식에 사용 하 여, 프로그램 분석이 다음 폴리머 특성을 계산 하는 데 사용 되었다: Mn: 2310, Mw: 2360, Đ: 1.02.

확인 하려면 샘플의 완전 한 기능화, monoisotopic 질량 분석을 선택한 개별 n-메 르 (26) (그림 14) 사용 되었다. 26-poly(L-lactide), 종료 thiol의 이론적인 질량 값 (Mn = 2500) 72.02113 × 26 (반복 단위의 질량) + 17.00274 (수 산 기 그룹의 질량) + 61.0112 (ω thiol 끝 그룹의 질량) + 22.98922 (나트륨의 질량에 해당 양이온) = 1973.55254. N에 대 한 대량 관찰된 값 = 26 인-0.07 1973.62는 이론적인 값에서 다른 다. 작은 신호는 해당 72.02113 × 27 (반복 단위의 질량) + 17.00274 (수 산 기 끝 그룹의 질량) + 61.0112 (ω thiol 끝 그룹의 질량) + 22.98922 (나트륨 양이온의 질량) 하는 2045.74에서 관찰 된다. 이론적인 질량은 관측 된 질량에서 0.17 차이 2045.57367. 이 작은 강도, 홀수 단위는 에스테 르 교환 젖 산의 중 합 열 반지 도중 반복 합니다. 세 번째, 매우 작은 피크 2057.73에서 관찰 된다. 이것은-0.14를 carboxylic 산 끝 그룹 (thiol 끝 그룹) 72.02113 × 27 (반복 단위의 질량) + 17.00274 (수 산 기 끝 그룹의 질량) + 73.02895 (질량의 이론적인 질량 poly(L-lactide)의 이론 질량 보다 다른 다 carboxylic 산) + 22.98922 (나트륨 양이온의 질량) = 2057.59142. 이 추가 작은 불순물 가능성이 lactide 단위체의 중 합 열 반지 도중 물에서 개시의 결과 이다.

Poly(L-lactide), thiol 종료 (Mn = 2500) 샘플의 좁은 분포 때 thiol ene 반응 (그림 15) maleimide (그림 16)와 의해 선택적으로 기능성 유지. 스펙트럼 전시는 예상 나+ adducts 행렬으로 cationization 에이전트와 DHB 나트륨 trifluoroacetate를 사용 하 여.

MALDI TOF MS poly(L-lactide), 종료 thiol의 좁은 분포 확인 (Mn = 2500) maleimide (그림 16). 와 thiol ene 반응 후 4 단계에서 수식에 사용 하 여, 분석 소프트웨어가 다음 폴리머 특성을 계산 하는 데 사용 되었다: Mn: 2310, Mw: 2340, Đ: 1.01. Mn 와 Mw 시작 물자에 비해 감소 때문에 이온화 바이어스 (MALDI TOF MS의 단점 중 하나)은 주목 한다. 시작 자료 수정이 상대적으로 작은 (~ 97 다가 특정 수정에)와 dispersity 감소 후 수정, MALDI TOF MS 계산 평균 분자량의 보다 적게 정확한 될 수 있습니다.

확인 하 고는 poly(L-lactide)의 완전 한 기능화, thiol 종료 (Mn = 2500) thiol ene 반응을 통해 maleimide, monoisotopic 질량을 선택한 개별 n-메 르 (26) (그림 17)을 분석 하 이용 되었다. Poly(L-lactide) thiol 종료의 26 메 르의 이론적인 대량 값 해당 72.02113 × 26 (반복 단위의 질량) + 17.00274 (수 산 기 끝 그룹의 질량) + 158.02757 (ω thiol 끝 그룹 maleimide에 연결 된의 질량) + 22.98922 (의 질량은 나트륨 양이온) = 2070.56891. N에 대 한 대량 관찰된 값 = 26 0.03 다 다른 이론적인 값은 2070.54입니다. 칼륨과 이온화 같은 종족은 또한 이론 질량 0.05 다 차이 양식에 해당 2086.49에서 관찰. 매우 작은 피크 2167.58 72.02113 × 28 (반복 단위의 질량) + 17.00274 (수 산 기 끝 그룹의 질량) + 72.02168 (카복실산 음이온의 질량) + 22.98922 (나트륨 양이온의 질량), 38.96371 (칼륨 양이온의 질량)에 해당 하는에서 관찰 된다. 이론적인 질량은 2167.56844는-0.01은 관찰 된 질량에서 차이 고 시작 자료에서 관찰 되었다 물 개시에서 같은 추적 불순물의 지표입니다. 이 폴리머는 나트륨, 칼륨, 중 고 양성자의 손실에의 한 동일 이온화를 전시 한다. Carboxylic 산 양성자와 두 개의 양이온과 complexation의 손실 monocarboxylic 산 기능성된 고분자에 대 한 이온화의 공통 모드입니다. 그것은 thiol ene 반응 제품에 대 한 관찰은 질량에 동일한 전환 thiol 끝 그룹을 기능화 반응 부족을 더 나타내는이 carboxylic 산 종료 화합물에 대 한 발생 하지 않습니다 유의 해야 합니다.

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그림 1: 3 3 그리드 샘플 비율 결정에 대 한 x. 샘플의 3 x 3 격자를 사용 하 여, cationization 에이전트-분석-매트릭스의 상대 농도 경험적으로 최적화 된 샘플 준비를 결정 하 체계적으로 변화 될 수 있습니다. 이것은 일반적으로 (cationization 에이전트 (y 축)와 매트릭스 (x 축)) 다른 두 양을 증가 하는 동안 세 가지 변수 (분석 솔루션의 15 µ L) 중 하나를 눌러 이루어집니다 설정 여러 구성 요소 (3 그려져 예제에서). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

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그림 2: TOF MALDI MS 대상 판. MALDI TOF MS 대상 격판덮개는 분석에 대 한 개별 스 MALD TOF MS 샘플을 보유 하는 금속판이 이다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

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그림 3: 샘플 1의 MALDI TOF 질량 스펙트럼. 이 전체 스펙트럼 폴 리 (에틸렌 글리콜) 2 aminoethyl 에테르 아세트산의 전반적인 분포를 보여주는 (Mn= 5000)+ Na와 K+이온화. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

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그림 4: 샘플 1의 개별 반복 단위의 MALDI TOF 질량 스펙트럼. 이 스펙트럼 보여줍니다 폴 리 (에틸렌 글리콜) 2 aminoethyl 에테르 아세트산의 개별 반복 단위 (Mn = 5000) 끝 그룹 분석. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

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그림 5: 예제 1 수정에 대 한 반응 방식. 확인 하려면 시작 물자의 끝 그룹, poly(ethylene glycol) 2 aminoethyl 에테르 아세트산 2, 4-dinitrofluorobenzene (일컬어 생어 시 약)과 반응 했다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

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그림 6: 샘플 1 수정 MALDI TOF 질량 스펙트럼. 이 전체 스펙트럼 폴 리 (에틸렌 글리콜) 2 aminoethyl 에테르 아세트산의 전반적인 분포를 보여주는 (Mn = 5000) 2, 4-dinitrofluorobenzene와 기능성. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

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그림 7: 샘플 1modification의 개별 반복 단위의 MALDI TOF 질량 스펙트럼. 최종 그룹 기능화를 확인,이 스펙트럼 보여줍니다 폴 리 (에틸렌 글리콜) 2 aminoethyl 에테르 아세트산의 개별 반복 단위 (Mn = 5000) 2, 4-dinitrofluorobenzene와 반응 후. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

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그림 8: 샘플 2의 MALDI TOF 질량 스펙트럼. 이 전체 스펙트럼 polyoxyethylene bis(azide)의 전반적인 분포를 보여주는 (Mn = 2000) 나+ 와 이온화 adducts. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

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그림 9: 샘플 2의 개별 반복 단위의 MALDI TOF 질량 스펙트럼. 이 스펙트럼 표시 polyoxyethylene 두번째-아 지 드의 반복 단위 (Mn = 2000) 끝 그룹을 확인 하기 위해 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

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그림 10: 샘플 2 수정에 대 한 반응 방식. 시작 물자, polyoxyethylene 두번째-아 지 드의 끝 그룹을 확인 하려면 (Mn = 2000) 1-ethynyl-4-fluorobenzene 구리 촉매 아 지 드 alkyne cycloaddition (CuAAC)를 통해로 반응 했다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

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그림 11: MALDI TOF 질량 스펙트럼의 샘플 2 수정. 이 전체 스펙트럼 polyoxyethylene bis(azide)의 전반적인 분포를 보여주는 (Mn = 2000) 1-ethynyl-4-fluorobenzene와 기능성. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

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그림 12: 샘플 2 수정의 개별 반복 단위의 MALDI TOF 질량 스펙트럼. 이 스펙트럼 표시 polyoxyethylene bis(azide)의 개별 반복 단위 (Mn = 2000) 1-ethynyl-4-fluorobenzene 구리 촉매 아 지 드 alkyne cycloaddition 확인 끝 그룹 기능화를 통해 함께 반응. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

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그림 13: 샘플 3의 MALDI TOF 질량 스펙트럼. 이 전체 스펙트럼 poly(L-lactide)의 전반적인 분포를 보여주는 thiol 종료 (Mn = 2500). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

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그림 14: 샘플 3의 개별 반복 단위의 MALDI TOF 질량 스펙트럼. 스펙트럼 표시 poly(L-lactide), 종료 thiol의 개별 반복 단위 (Mn = 2500) 끝 그룹을 확인 하. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

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그림 15: 샘플 3 수정에 대 한 반응 방식. 시작 물자, poly(L-lactide), thiol의 끝 그룹을 확인 하려면 종료 (Mn = 2500) thiol ene 커플링을 통해 maleimide로 반응 했다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

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그림 16: MALDI TOF 질량 스펙트럼의 샘플 3 수정. 이 전체 스펙트럼 poly(L-lactide), 사이 반응의 제품의 전반적인 분포를 보여주는 thiol 종료 (Mn = 2500) 및 maleimide. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

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그림 17: 샘플 3 수정의 개별 반복 단위의 MALDI TOF 질량 스펙트럼. 최종 그룹 기능화를 확인,이 스펙트럼 표시 poly(L-lactide), 종료 thiol의 개별 반복 단위 (Mn = 2500) maleimide와 thiol ene 반응 후. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

토론

TOF MALDI 질량 분석은 최소한의 조각화와 단독으로 충전된 상태에서 폴리머 이온을 생성 하는 기능 고분자 특성에 대 한 귀중 한 분석 도구. 이 부드러운 이온화 기술을 복합 가스 단계에서 폴리머 이온을 생성 하는 매트릭스에 포함 된 고분자 분석의 고체 샘플을 desorb를 짧은 레이저 펄스를 사용 합니다. 고분자는 질량 분석에 의해 그들의 분석 매트릭스에 추가 된 양이온과 complexation에 의해 일반적으로 이온화 된다. 이 고분자 이온은 다음 그들의 시간--비행의 이온 소스 및 탐지기5 사이 따라 결정 됩니다 그들의 m/z 를 사용할 수 있는 비행 관의 분야 자유로운 지역으로 그들을가지고 추출 전압에 의해 가속 , 32.

다른 폴리머 특성화 기법에 비해, MALDI TOF MS 스펙트럼 품질이 데이터 수집 매개 변수 및 예제 준비에 크게 의존 합니다. 샘플 준비를 위한 설정 공식은 없습니다, 비록 샘플 준비의 각 부품의 기능을 이해 더 빠른 경험적 최적화 할 수 있습니다. MALDI 시료 준비의 가장 중요 한 요소 이므로 매트릭스의 선택을 호환성 매트릭스의 폴리머 분석을 흥분된 매트릭스 이온된 상태5, 싱글, desorbed 고분자를 생성 하는 허용을 위한 중요 한 15,,1719. 일단 적절 한 매트릭스 및 cationization 에이전트를 선택 분석, 매트릭스, 그리고 cationization 에이전트의 올바른 비율을 결정 합니다. 이것은 경험적으로 한 축에 매트릭스 농도 증가에 cationization 에이전트 농도 증가와 MALDI TOF MS 대상 접시 (그림 2)에 (그림 1) 샘플의 2 차원 격자를 생성 하 여 얻을 수 있는 다른.

MALDI 시료 준비와 마찬가지로, 공식은 설정 데이터 수집 지정 매개 변수를 결정 하기 위한 그러나, 특정 동향 스펙트럼 최적화를 신속 하 게 고려해 야 합니다. Reflectron 모드, 해상도 증가 하지만 전반적인 신호 감소, 일반적으로 동위 해상도 얻을 수 있습니다 (이 예제에서 4000 다 아래)에 낮은 질량 범위에 대 한 선택 됩니다. 이러한 경우 monoisotopic 질량 계산 및 피크 따기 방법 사용 되었다. 4000 다 위에 질량을 가진 폴리머 샘플에 대 한 선형 모드 평균 질량 계산 및 피킹 따기 방법 사용 되었다. 신호 해상도 개선, 더 큰 전압 차동 데 큰 대량 고분자의 일반적인 추세와 작은 단위로 이온 소스 전압을 조정 (IS1 IS2 대).

샘플 준비 및 수집을 최적화 하는 동안 매개 변수는 정밀도 제공할 수 있습니다, 대량 정확도 효과적인 교정을 통해 달성 될 수 있다. 주어진된 질량에 대 한 비행의 시간 가변 인수 매개 변수 및 심지어 접시 위치 미묘 하 게 다를 수 있습니다, 그리고 따라서는 보정을 수행 각 최적화 된 인수 매개 변수 집합에 대 한 정확한 질량을 산출 하기 위해 결정5,30. 일단 인수 매개 변수 및 예제 준비 최적화 되어, 스펙트럼이 정확한 동일한 조건을 사용 하 여 보정 한다.

뛰어난 해상도 고분자의 최적화 된 MALDI TOF 질량 스펙트럼에서 관찰 하는 대량 정확도 때문에이 기술은 폴리머 대량 유통 데이터를 결정 하기 위한 유용한 무료 도구 되고있다. 그러나, 폴리머 대량 유통 내 개별 반복 단위를 해결 하는 능력 특정 이점 분석을 위한 제공 끝 그룹 다른 폴리머를 기준으로 젤 투과 크로마토그래피 (GPC) 등 특성화 기법 및 핵 자기 공명 (NMR) 이것은 특히 끝 그룹 기능화 반응의 충실도 및 끝 그룹 활용형 반응의 양적 성격을 결정 하기 위한 중요 합니다. 이 원고는 대량 정확도, 신뢰의 높은 수준의 끝 그룹 수정 확인 가능 최대 두 개의 소수 포인트로 개별 고분자 반복 단위의 질량을 해결 하는 능력을 보여 주었다. 정밀 고분자 합성 분야에서 최근 수행 된 실질적인 진보 MALDI TOF MS는 점점 더 중요 한 도구가 되고있다 결정 고분자 구조와 기능.

공개

저자는이 연구에 사용 된 구형 calibrants 관련 금융 관심을가지고.

감사의 말

저자는 스마트 재료 설계, 분석 및 처리 컨소시엄 (SMATDAP)에 의해 자금 국립 과학 재단 협력 계약 IIA-1430280와 라 보드 Regents의 대학원 친교 (MEP)에 대 한 인정 합니다. 이러한 실험에 대 한 폴리머 샘플 MilliporeSigma (시그마-올드 리치)에 의해 제공 되었다.  오픈 엑세스 출판이 문서는 MilliporeSigma에 의해 후원 됩니다.

자료

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poly(ethylene glycol) 2-amino-ethyl ether acetic acid (Mn= 5000)MilliporeSigma (Aldrich)757918http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/757918?lang=en&region=US
poly(L-lactide), thiol terminated (Mn=2500)MilliporeSigma (Aldrich)747386http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/747386?lang=en&region=US
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triethylamineMilliporeSigma (Sigma-Aldrich)471283http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/471283?lang=en&region=US
N,N,N',N",N"-pentamethyldiethylenetriamineMilliporeSigma (Aldrich)369497http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/369497?lang=en&region=US
Copper(I)BromideMilliporeSigma (Aldrich)254185http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/254185?lang=en&region=US
glacial acetic acidFisher ScientificA38212
sodium metabisulfiteMilliporeSigma (Sigma-Aldrich)13459http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigald/13459?lang=en&region=US
potassium trifluoroacetateMilliporeSigma (Aldrich)281883http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/281883?lang=en&region=US
trans-2-[3-(tert-butylphenyl)-2-methyl-2-properylidene]malononitrileMilliporeSigma (Aldrich)727881http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/727881?lang=en&region=US
a-cyano-4-hydroxycinnamic acidMilliporeSigma (Sigma)C8982http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/c8982?lang=en&region=US
tetrahydrofuranFisher ScientificT425-1
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